gg動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)

動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)復(fù)習(xí)：植物細(xì)胞工程中常用的技術(shù)？植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)如果一個(gè)大面積燒傷的病人，自體皮膚有限，其他渠道的皮膚來源不足。如何才能獲得大量的自體健康皮膚？人耳鼠“人耳鼠”再出風(fēng)頭

2001年，一只特別的活老鼠在北京引起轟動(dòng)——這是有著一對(duì)紅眼睛的、尾巴長長的、渾身沒毛的小白鼠。值得一提的是，這只小白鼠的背上，竟長著一只幾乎與身子一般大小的“人耳”。這只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民醫(yī)院副院長、整復(fù)外科主任曹誼林教授利用組織工程技術(shù)復(fù)制出來的。

在京展出的數(shù)天，盡管門票高達(dá)20元，但還是有將近20萬人，心甘情愿地掏錢一睹“人耳鼠”的風(fēng)采。

人耳鼠的出現(xiàn)，透露了怎樣的信息？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖.細(xì)胞增殖2、原理1、概念3、過程：復(fù)習(xí)：植物組織培養(yǎng)

在無菌和人工控制的條件下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工控制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。過程

幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)3、過程：剪碎的動(dòng)物組織塊細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。（分裝前的細(xì)胞培養(yǎng)）（水解彈性纖維）4、動(dòng)物細(xì)胞生長特性懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞貼壁：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。要求：接觸抑制：細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個(gè)單層，此時(shí)細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變剪碎的動(dòng)物組織塊 傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。細(xì)胞株：細(xì)胞系：

細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織或器官分裂旺盛，分化程度低，易培養(yǎng)P44思考1、用胰蛋白酶分散細(xì)胞，由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？2、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎？那將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí)要注意什么問題呢？3、能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？主要是蛋白質(zhì)(膠原蛋白等)。能，應(yīng)注意時(shí)間的控制不能，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的PH為7.2—7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶（2.0）沒有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性較高。多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，討論以下問題：1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？

5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件P46【討論】充足的營養(yǎng)供給、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境。無菌、無毒的環(huán)境。1、無菌、無毒的環(huán)境2、營養(yǎng)（與體內(nèi)基本相同）3、溫度和PH

4、氣體環(huán)境：

保證細(xì)胞順利的生長增殖無菌處理、添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素、維生素、動(dòng)物血清、血漿等。36.5+（-）0.5度,7.2~7.4O2:細(xì)胞代謝所必須CO2：主要維持培養(yǎng)液的PH（95%空氣和5%CO2）5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基成分已知，便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。最普遍的作法是加入小牛血清。天然培養(yǎng)基直接采用取自動(dòng)物體液或從組織中提取的成分作培養(yǎng)液，主要有血清、組織提取液、雞胚汁等。使用最普遍的天然培養(yǎng)基是血清，基本以小牛血清最普遍。血清由于含有多種細(xì)胞生長因子、促貼附因子及其多活性物質(zhì)。與合成培養(yǎng)基合用，能使細(xì)胞順利增殖生長。無血清培養(yǎng)基動(dòng)物血清成分復(fù)雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長很有效，但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來源有限，成本高，限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子，激素等。P46

為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加血清？血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種，是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成（稱為必需氨基酸），必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子；血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì)，能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附。因此，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞能夠順利生長和增殖，一般需添加10%～20%的血清。

超凈工作臺(tái)CO2培養(yǎng)箱冰箱6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用生產(chǎn)蛋白生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等健康細(xì)胞培養(yǎng)：如獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。用于檢測有毒物質(zhì)用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動(dòng)物血清植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白1、動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同受精卵>胚胎干細(xì)胞>多能干細(xì)胞>單能干細(xì)胞>體細(xì)胞 是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。 用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。3、分類：胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性困難2、動(dòng)物核移植4、過程： 將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。

用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物核移植（難度高）受體細(xì)胞：MⅡ期的卵母細(xì)胞胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

1、概念：2、分類：動(dòng)物細(xì)胞的全能性特點(diǎn)

動(dòng)物細(xì)胞特點(diǎn)：分化潛能變窄：隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能變窄，這是指整體細(xì)胞而言。細(xì)胞核仍具有全能性：細(xì)胞核，它含有保持物種遺傳性所需的全套基因，而且并沒有因細(xì)胞分化而丟失基因，因此高度分化細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性復(fù)習(xí)1、我們能否用植物組織培養(yǎng)的方法使動(dòng)物細(xì)發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體？2、根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞核仍具有全能性的特點(diǎn),怎樣將動(dòng)物細(xì)胞的全能表達(dá)?把兩種動(dòng)物的優(yōu)良性狀集合在一塊兒?思考不能利用:動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合3、過程供體細(xì)胞（供核）細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞卵母細(xì)胞（MⅡ中期：供質(zhì)）去核無核卵母細(xì)胞注入細(xì)胞融合雜種細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎胚胎移植代孕母體新個(gè)體(與母體基本相同的個(gè)體)雜種細(xì)胞核移植胚胎移植動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程：P49【討論2】

1.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？為使核移植動(dòng)物的主要遺傳物質(zhì)全部來自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞。2.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？

10代以內(nèi)的細(xì)胞一般保持正常二倍體的核型，未發(fā)生突變3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細(xì)胞。此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，還與所處環(huán)境有很大關(guān)系.卵細(xì)胞Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠4、多莉羊的培育過程融合后的卵細(xì)胞克隆羊的成功證明了什么？1、動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性；2、細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。（1）對(duì)比多莉羊和高產(chǎn)奶牛的克隆過程，找出操作過程的不同點(diǎn)？多莉克隆過程的受體細(xì)胞是去核卵細(xì)胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程的受體細(xì)胞是去核卵母細(xì)胞；多莉克隆過程是將供體細(xì)胞核注入受體細(xì)胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程是將供體細(xì)胞注入受體細(xì)胞。思考題（2）討論分析上述哪一種措施更科學(xué)？并說明理由？卵母細(xì)胞當(dāng)中的細(xì)胞周期蛋白含量、活性比卵細(xì)胞高，用它作受體更容易成功將供體細(xì)胞注入受體細(xì)胞，使克隆動(dòng)物更像供體動(dòng)物，操作也方便高產(chǎn)奶牛的克隆過程更科學(xué)5、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景

1、在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程2、保護(hù)瀕危物種3、利用轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)4、用于器官移植的的供體。5、使人類深入了解胚胎發(fā)育及衰老過程6、追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病6、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題

1、成功率低2、存在健康問題（如異常肥胖、發(fā)育困難、臟器缺陷、免疫失調(diào)等）3、克隆動(dòng)物食品的安全性也存在爭議4、克隆動(dòng)物的各個(gè)環(huán)節(jié)也有待改進(jìn)

據(jù)統(tǒng)計(jì),按照出生健康后代和總操作卵之間的比值計(jì)算,各種動(dòng)物的克隆總效率分別為牛0~5％,綿羊0.4％~4.3％,山羊0.7％~7.2％,小鼠0.2％~5.8％,貓0.3％,兔0.3％,大鼠0.2％,豬0.1％~0.9％,騾子0.9％,馬0.2％。經(jīng)過10年的發(fā)展,體細(xì)胞核移植效率有所提高,尤其是牛,但其最高效率也僅為10％。資料一

日本東京國立傳染病研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物開發(fā)室小倉淳室長在著名生物科學(xué)雜志《NatureGenetics》上發(fā)表了對(duì)克隆動(dòng)物的研究結(jié)果：克隆小鼠的壽命要比自然交配出生的小鼠壽命明顯縮短。小倉室長對(duì)死亡的克隆小鼠進(jìn)行病理檢查發(fā)現(xiàn)：死亡小鼠均患有肺炎，一部分小鼠合并有肝臟異常病狀。小倉室長以同種方法另外制作了20只克隆小鼠。并委托日本東北大學(xué)農(nóng)學(xué)部的西田朗教授對(duì)其進(jìn)行免疫系統(tǒng)機(jī)能的檢查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：這些克隆小鼠的抗體生成能力比自然交配出生的小鼠明顯降低。

資料二可以利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來自該奶牛。3、（1）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說明理由。思考題首先從盧辛達(dá)耳朵上剪取一小塊組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織的細(xì)胞。從屠宰場取廢棄的牛卵巢，抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核，再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。2）如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何對(duì)它進(jìn)行克?。吭谘芯糠矫?，克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問題。這些問題尚在研究中。在應(yīng)用上，生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。4.體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問題？請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。D例題解析1、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（）

A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.單克隆抗體

C.胚胎移植D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)解析：動(dòng)物細(xì)胞工程中技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、胚胎移植和單克隆抗體，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是其他技術(shù)的基礎(chǔ)

2、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是

A．細(xì)胞系B．細(xì)胞株

C．原代細(xì)胞D．傳代細(xì)胞A解析：細(xì)胞株傳代至50代后出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系3、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞（）

A.容易產(chǎn)生各種變異

B.具有更強(qiáng)的全能性

C.取材十分方便

D.分裂增殖的能力強(qiáng)D4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于A.培養(yǎng)基不同；B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行；C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能；D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株。A5.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中正確的是A.細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、生長素和動(dòng)物血清等C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理D6.利用下列細(xì)胞工程技術(shù)培育出的新個(gè)體中，只具有一個(gè)親本遺傳性狀的是（）①細(xì)胞和組織培養(yǎng)②細(xì)胞融合③動(dòng)物胚胎移植④克隆技術(shù)

A.①②B.②③C.①④D.②④C1.用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是A.都需用培養(yǎng)箱B.都須用液體培養(yǎng)基C.都要在無菌條件下進(jìn)行D.都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性鏈接高考C解析：動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都要在無菌條件下進(jìn)行，動(dòng)物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)不一定用液體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。故C正確。2.下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞工程應(yīng)用的是

A.大規(guī)模生產(chǎn)干擾素．用于抵抗病毒引起的感染

B.為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細(xì)胞

C.大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等

D.利用胚胎移植技術(shù)，加快優(yōu)良種畜的繁殖C解析：大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等是植物細(xì)胞工程的應(yīng)用，動(dòng)物細(xì)胞工程無此應(yīng)用3．“試管嬰兒”技術(shù)屬于 A．胚胎移植 B．組織培養(yǎng) C．克隆技術(shù) D．基因工程A解析：試管嬰兒是獲得精子和卵細(xì)胞后，在體外受精，之后把早期的胚胎移植到體內(nèi)，屬于胚胎移植技術(shù)，繁殖方式為有性生殖。而克隆是無性繁殖的意思，比如體細(xì)胞核移植技術(shù)得到的動(dòng)物為克隆動(dòng)物。4．胚胎移植技術(shù)目前主要應(yīng)用于

A解決某些不孕癥者的生育問題

B治療某些遺傳病

C提高良種家畜的繁殖力

D提高動(dòng)物的抗病力AC5、回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：⑴在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面

時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的

。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是

。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是

。⑵隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)

現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成

細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性

，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量

。相互接觸接觸抑制一層胰蛋白酶衰老甚至死亡不死性降低減少(3)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到

期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。(4)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在

條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中

的活性降低，細(xì)胞

的速率降低。(5)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作

進(jìn)行攻擊。中低溫酶新陳代謝