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實驗11植物的組織培養(yǎng)【學(xué)習(xí)目標】1.說明植物組織培養(yǎng)的基本原理。2.學(xué)習(xí)植物組織培養(yǎng)的基本技術(shù)。3.進行菊花的組織培養(yǎng),嘗試植物激素的應(yīng)用?!窘虒W(xué)重點】1.植物組織培養(yǎng)的相關(guān)概念和過程2.影響植物組織培養(yǎng)的因素3.植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)?!窘虒W(xué)難點】1.影響植物組織培養(yǎng)的因素。2.植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)?!菊T學(xué)導(dǎo)思】一、植物組織培養(yǎng)的相關(guān)概念和基本過程1.植物組織培養(yǎng)的相關(guān)概念(1)細胞分化:植物的個體發(fā)育過程中,細胞在__________、__________和__________上都會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異,形成這些差異的過程就叫做細胞分化。細胞分化是基因__________的結(jié)果。(2)細胞的全能性:__________的植物細胞仍然具有發(fā)育成為__________的潛能。細胞全能性是組織培養(yǎng)的基本原理。(3)愈傷組織:由離體的植物器官、組織或細胞在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)過__________過程形成的組織,就叫愈傷組織,愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種__________的呈無定形狀態(tài)的__________。(4)脫分化:由__________的植物組織或細胞產(chǎn)生__________的過程,稱為脫分化,又叫去分化。(5)再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng),又可以重新分化成__________,這個過程叫做再分化。(6)外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。二、影響植物組織培養(yǎng)的因素1.內(nèi)部因素:不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大。同種植物材料,__________,__________等也會影響實驗結(jié)果。菊花的組織培養(yǎng),一般選擇__________的莖上部新萌生的側(cè)枝。2.外部因素:(1)營養(yǎng)條件常用的是__________培養(yǎng)基,其主要成分包括:__________,如_____________________________;__________,如___________;__________等。(2)植物激素中__________和__________是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性因素。____________________、____________________以及__________等,都會影響實驗結(jié)果。(3)環(huán)境因素__________、__________、__________等條件也能影響植物組織培養(yǎng)。菊花組織培養(yǎng),一般PH控制在__________;溫度控制在__________;每天用日光燈照射__________小時?!舅伎肌浚?)MS培養(yǎng)基中,各種營養(yǎng)成分各有什么作用?與微生物培養(yǎng)基的配方相比,有什么不同?(2)生長素使用的先后順序、用量比例不同分別會造成哪些影響?三、實驗操作過程1.制備MS固體培養(yǎng)基實驗室一般使用4℃(1)配制各種母液。配制母液時,大量元素濃縮__________,微量元素濃縮__________。常溫保存。激素類、維生素類以及用量比較小的有機物可以按照1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨配制母液。用母液配制培養(yǎng)基時,需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計算用量。(2)配制培養(yǎng)基。(3)滅菌。高壓蒸汽滅菌2.接種接種前,用體積分數(shù)70%的酒精將工作臺擦拭,然后點燃酒精燈。所有的接種操作必須在酒精燈旁進行,并且每次使用器械后,都要用火焰灼燒滅菌3.培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在__________中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期消毒,溫度控制在18-25℃,并且每天用日光燈光照h4.移栽5.栽培附:一般來說,容易進行__________的植物,也容易進行組織培養(yǎng)?!舅伎肌浚海?)實驗操作過程中為什么要進行一系列的消毒、滅菌,實驗中是如何做到無菌操作的?(2)你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對照實驗嗎?【練習(xí)題】1.下面有關(guān)細胞分化的敘述不正確的是()A.細胞分化發(fā)生在生物體的整個生命過程中B.細胞分化僅發(fā)生在胚胎時期C.經(jīng)過細胞分化會形成各種不同的細胞和組織D.細胞分化是一種持久的變化。2.關(guān)于細胞分化的敘述,下列哪一項是錯誤的()A.細胞分化是一種持久的變化,它發(fā)生在生物體的整個生命過程B.細胞分化在胚胎時期達到最大限度C.隨著分化的進行,細胞中的遺傳物質(zhì)的種類會發(fā)生變化D.高度分化的動物細胞的細胞核保持著全能性3.在外植體脫分化形成愈傷組織的過程中,下列哪個條件是不需要的()A.消毒滅菌B.適宜的溫度C.充足的光照D.適宜的養(yǎng)料和激素4.在植物組織培養(yǎng)過程中,愈傷組織的形成和形態(tài)發(fā)生是十分關(guān)鍵的一步。而這除需要必備的營養(yǎng)和一些刺激因素外,還需要起誘導(dǎo)作用的物質(zhì),其中包括()A.銅、鋅等微量元素B.細胞分裂素和生長素C.蔗糖和葡萄糖D.維生素和氨基酸培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基相比,不同的是()培養(yǎng)基不含有機物B.微生物培養(yǎng)基以有機物為主培養(yǎng)基不含微量元素培養(yǎng)基需提供大量無機營養(yǎng)6.當先使用細胞分裂素,后使用生長素時,實驗結(jié)果:()A.有利于細胞分裂,但細胞不分化B.細胞既分裂又分化C.分化頻率高D.有利分化,但不分裂7.下列那組符合菊花組織培養(yǎng)的基本步驟()A.制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培B.制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→栽培→移栽C.制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→栽培→培養(yǎng)→移栽D.制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→移栽→培養(yǎng)→栽培8.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)之一是()A.植物細胞的完整性B.植物細胞的多樣性C.植物細胞的全能性D.植物細胞雜交9.某園藝場經(jīng)過長期精心選育,培養(yǎng)出一株形態(tài)優(yōu)美的蘭花,如果要保持母本的優(yōu)良性狀,并盡快大規(guī)模繁殖,最適合的繁殖方式是()A.分裂生殖 B.有性生殖 C.孢子生殖 D.組織培養(yǎng)10.某株名貴花卉用種
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