版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定

植物組織逆境傷害程度的測(cè)定

——電導(dǎo)法（實(shí)驗(yàn)37)教師處理材料（-20oC,20min冷凍材料）學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室先洗試管教師將水浴鍋及電導(dǎo)率儀打開農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!逆境傷害程度的測(cè)定方法：

1紫外法：根據(jù)滲出物質(zhì)對(duì)紫外的吸收2電導(dǎo)法:測(cè)定受損質(zhì)膜外滲電解質(zhì)的電導(dǎo)農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!實(shí)驗(yàn)原理

植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常的代謝起著重要的作用。在正常情況下，細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)具有選擇透性能力。逆境：高溫、干旱、凍害、冷害、污染、酸雨當(dāng)植物受到逆境影響時(shí)，細(xì)胞膜遭到破壞，膜透性增大，從而使細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)外滲，以致植物組織浸入去離子水中，水的電導(dǎo)將因電解質(zhì)的外滲而加大。用電導(dǎo)儀測(cè)定外液的電導(dǎo)度增加值，求得傷害程度。農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!大葉扶芳藤葉片實(shí)驗(yàn)材料：農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!

正常、凍害各取3個(gè)葉片，用去離子水洗凈每葉片打取葉圓片9個(gè)，放到小燒杯中用去離子水沖洗；每支試管放入9個(gè)葉圓片；加入15ml去離子水；放入塑料紗網(wǎng)（距液面1-2cm），用去離子水漂洗；

2.步驟農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!4.電導(dǎo)儀測(cè)定初電導(dǎo)值S15.沸水浴15min（殺死植物組織），自來水冷卻，用力搖1-2min后即可測(cè)定終電導(dǎo)S2（注意：沸水浴時(shí)需將塞子松動(dòng)一下，以防加熱后打不開）3.抽氣后取出紗網(wǎng)，室溫?fù)u動(dòng)20min

（時(shí)間可以更長(zhǎng)）農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!實(shí)驗(yàn)材料空白電導(dǎo)值處理初電導(dǎo)值(μS)終電導(dǎo)值(μS)相對(duì)電導(dǎo)度(L)傷害度(%)重復(fù)平均重復(fù)平均室溫-20℃植物組織逆境傷害程度的測(cè)定記載表農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!DDS-307型電導(dǎo)率儀操作規(guī)程1、打開電源開關(guān)，預(yù)熱30分鐘。2、儀器校準(zhǔn)：將“選擇”旋鈕指向“檢查”檔，調(diào)節(jié)常數(shù)補(bǔ)償旋鈕到“1”刻度線，調(diào)節(jié)溫度補(bǔ)償旋鈕到“25”刻度線，然后調(diào)節(jié)“校準(zhǔn)”旋鈕，使儀器顯示100.0μS/cm，校正完畢。按照電極上標(biāo)明的電極常數(shù)，調(diào)節(jié)常數(shù)補(bǔ)償旋鈕，使儀器顯示值與電極所標(biāo)常數(shù)一致。農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!問題與注意事項(xiàng)1.葉片大小一致，防止打出不圓片使誤差增大，并保證各重復(fù)來自同三個(gè)葉片。2.材料不可混放。3.抽氣前，切記將紗網(wǎng)放入試管。紗網(wǎng)距離液面1-2cm，可以防止抽氣時(shí)葉圓片翻出試管。4.抽氣的目的。5.平衡時(shí)振蕩的作用。6.溫度對(duì)電導(dǎo)影響較大，故S1和S2應(yīng)在相同溫度下測(cè)定。7.CO2在水中溶解度較高，測(cè)定電導(dǎo)時(shí)要防止高CO2氣源和口中呼出的CO2進(jìn)入試管。8.測(cè)定時(shí)，電極要完全插入待測(cè)液中。且不可甩電極，防止碰破電極。測(cè)定一個(gè)樣品后用去離子水沖洗后，再用濾紙將電極表面的水份吸干后測(cè)定下一個(gè)樣品。9.蒸餾水中加吐溫，洗儀器時(shí)出現(xiàn)泡沫。吐溫作用：陰離子表面活性劑，促進(jìn)水分與葉片表面接觸。吐溫20－聚氧乙烯（20）山梨醇酐單月桂酸酯

農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!膜透性增大的程度與逆境脅迫強(qiáng)度有關(guān)，也與植物抗逆性的強(qiáng)弱有關(guān)。因此，電導(dǎo)法目前已成為作物抗性栽培、育種上鑒定植物抗逆性強(qiáng)弱的一個(gè)精確而實(shí)用的方法。農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!操作方法實(shí)驗(yàn)處理：

正常植物葉片冷凍脅迫處理（-20℃），處理20min。洗刷試管，去離子水中含有吐溫20農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!放置到塑料燒杯中（不蓋塞子），統(tǒng)一抽氣15min。（設(shè)置空白1只試管）農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!結(jié)果計(jì)算:（參照課本）相對(duì)電導(dǎo)度（L）=(S1-空白）/(S2-空白）

凍害的傷害度（％）=Lt－凍害處理的相對(duì)電導(dǎo)度Lck－室溫對(duì)照的相對(duì)電導(dǎo)度農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)圖取材（各3片葉）打取葉圓片9片/管15ml蒸餾水/管集中抽氣15min平衡20min測(cè)量S1煮沸15min冷卻冷卻搖勻測(cè)量S2農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!

3、樣品測(cè)定：將“選擇”旋鈕置于適合的量程位置。當(dāng)測(cè)定過程中顯示值熄滅時(shí)，說明測(cè)量值超出量程范圍，此時(shí)應(yīng)將選擇旋鈕置于高一擋量程。

測(cè)定時(shí)電極完全浸沒到溶液中。

（如果試管口小，電極不能全部浸沒時(shí)，可以全部加去離子水至20ml。）

測(cè)定一個(gè)樣品后用去離子水沖洗后，再用濾紙將電極表面的水份吸干后測(cè)定下一個(gè)樣品。

農(nóng)業(yè)生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心版張海森2植物組織逆境傷害程度測(cè)定共16頁(yè)，您現(xiàn)在瀏