2019三維設(shè)計(jì)高中生物人教版一輪復(fù)習(xí) 選修1 生物技術(shù)實(shí)踐 教師用書word版

選修1\生物技樺宙SHENGWUJISHUSHIJIAN第一講嚴(yán)第一講嚴(yán)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用卓貢雙基落實(shí)系絞化-問國化［基礎(chǔ)知識(shí)?系統(tǒng)化］知識(shí)點(diǎn)一果酒和果醋的制作1.制作原理桃選怖菌亠即撫亠榨計(jì)亠型樣愜-酵議發(fā)酵像融屋果酒制作18-25TC溫度桃選怖菌亠即撫亠榨計(jì)亠型樣愜-酵議發(fā)酵像融屋果酒制作18-25TC溫度30—35r先通氣，后翹空咒全?&通代L0—12d時(shí)間Hd果酷制作菌種反應(yīng)果酒酵母菌有氧條件，大量繁殖：qH12O6+6O2—酶亠6CO2+6H2O無氧條件，產(chǎn)生酒精：C6H12O6-酶~2C2H5OH+2CO2果醋醋酸菌氧氣、糖源都充足時(shí)：糖f醋酸缺少糖源時(shí)：乙醇f乙醛f醋酸C2H5OH+O2――fCH3COOH+H2O252??3■■■■■■——22?實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作知識(shí)點(diǎn)二腐乳的制作1制作原理

取弋中的空彰,來締麗V起主要作用的是蘭祖CW原蠻)蛋門戍幣小分子的耽+的圖用幣'”囁睹怦擁“脂肪輟2.實(shí)驗(yàn)流程及影響因素知識(shí)點(diǎn)三iifiw'r-SuTiS''「用鮎S知識(shí)點(diǎn)三iifiw'r-SuTiS''「用鮎S」二亦藕襄廟二融春雜審廠泡菜的制作操柞H選擇吒幣件好的肚菜圧，口保證無氧殺托L軽甬腌制時(shí)叭皚度刑世￡i的用雖■■■■■■■■■nnnn■■nmnnnnnainnB■■■r菌種［反應(yīng)一C6l山5f蚊si耶如乳覩)流程:原料加匚一制迪集鹽水一加人調(diào)味料1—;製壇f發(fā)酵?成品泡菜的制作［基本技能?問題化］1.據(jù)圖完成下列有關(guān)問題⑴完善果酒、果醋的制作流程:挑選葡萄挑選葡萄據(jù)制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置填空:①裝置中a為充氣口，用于向裝置內(nèi)通氣；b為排氣口，用于排出CO2；c為出料口,用于取樣檢測(cè)。b長(zhǎng)而彎曲，目的是防止空氣中微生物的污染。葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留出約1/3空間，目的是：先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖，耗盡O2后再進(jìn)行酒精發(fā)酵；防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的企造成發(fā)酵液溢出。使用該裝置制作果酒時(shí)，應(yīng)關(guān)閉充氣口a,制果醋時(shí)，應(yīng)將充氣口a連接氣泵，輸入

氧氣。2.據(jù)幾種發(fā)酵食品制作方法填空表中甲?丁為腐乳、泡菜、果醋、果酒等發(fā)酵食品制作裝置圖，回答下列問題:食品①②③④主要微生物⑤⑥⑦⑧制作裝置溫腹州『匚??????J甲開爻口股乙加鹽腌制后按種曲種⑴請(qǐng)?zhí)畛觫?④食品名稱：①果酒，②果醋，③腐乳，④泡菜。（2）請(qǐng)?zhí)畛觫?⑧菌種名稱：⑤酵母菌，⑥醋酸菌，⑦毛霉，⑧乳酸菌，其中酵母菌、毛霉為真核生物，醋酸菌、乳酸菌為原核生物。⑶甲?丁裝置是否存在缺陷，試具體分析指出，并說明丁裝置中“放水”的作用。提示：甲、丙裝置有缺陷：甲裝置中排氣管下端不應(yīng)插入到發(fā)酵液內(nèi)，丙裝置接種菌種應(yīng)在“加鹽”之前；丁裝置中“放水”的作用是為泡菜壇營造“厭氧”環(huán)境。/他世考點(diǎn)突破——題點(diǎn)化*重點(diǎn)化考點(diǎn)一果酒和果醋的制作命題點(diǎn)（一）果酒、果醋制作的發(fā)酵裝置1.（2017?江蘇高考）一如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（多選）（）A.改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對(duì)發(fā)酵的影響果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)?，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸果醋的發(fā)酵周期與實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度密切相關(guān)氣體入口與氣體出口可以交換使用解析：選ABC改變通入氣體的種類，例如分別通入氮?dú)夂脱鯕?，可研究無氧呼吸和有氧呼吸對(duì)發(fā)酵的影響；果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)?，更利于?chuàng)造無氧條件，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸；果醋發(fā)酵的菌種是醋酸桿菌，其生長(zhǎng)的適宜溫度是30?35°C，溫度能影響醋酸桿菌的代謝，從而影響果醋的發(fā)酵周期；氣體的入口必須伸入培養(yǎng)液中，氣體出口不能伸入培養(yǎng)液中，如果氣體的入口和出口交換，會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵液噴出。［重難點(diǎn)撥］

制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置分析刁充pl星嚴(yán)滾耳品產(chǎn)珥■排引％■?.i解出酒精栄森時(shí)壬生的品;；i

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巫魂［豐I趕豎竺彎豎」該裝置的使用方法：使用該裝置制作果酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口，制作果醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接充氣泵，輸入空氣命題點(diǎn)（二）果酒、果醋制作的原理和過程2.（2016?全國卷U）蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}:（1）酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過程③在酵母菌細(xì)胞的中進(jìn)行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度。⑵第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在件下才能完成。⑶在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度（填“低于”或“高于”）第二階段的。（4）醋酸桿菌屬于核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中（填“含有”或“不含有”）線粒體。解析：（1）圖中過程①和②是酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇的過程，無氧呼吸的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。乙醇可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)，顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。過程③為有氧呼吸的第二和第三階段，場(chǎng)所為線粒體。在有氧條件下酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，產(chǎn)生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧條件下酵母菌的繁殖速度更快。（2）醋酸桿菌是好氧型細(xì)菌，在有氧條件下才能將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?。?）在生產(chǎn)過程中，第一階段酵母菌產(chǎn)生乙醇的適宜溫度為18?25°C,第二階段醋酸桿菌產(chǎn)生醋酸的適宜溫度為30?35°C,第一階段的溫度低于第二階段的。（4）醋酸桿菌屬于原核生物，原核細(xì)胞中的細(xì)胞器只有核糖體一種，不含線粒體。答案：（1）細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)酸性重鉻酸鉀線粒體快⑵有氧（3）低于（4）原不含有［重難點(diǎn)撥］果酒和果醋制作成功的關(guān)鍵點(diǎn)項(xiàng)目說明材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，再除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染防止發(fā)酵液被污染榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要進(jìn)行消毒清洗葡萄時(shí)要先清洗后除枝梗發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管不用直管2．果酒、果醋發(fā)酵條件的控制葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留約1/3空間，目的是先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖耗盡o2后再進(jìn)行酒精發(fā)酵，防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液溢出。嚴(yán)格控制溫度：18?25°C利于酵母菌的繁殖和酒精發(fā)酵，30?35°C利于醋酸菌的繁殖和醋酸發(fā)酵。充氣：酒精發(fā)酵為無氧發(fā)酵，需封閉充氣口；醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，需適時(shí)通過充氣口充氣。OO考點(diǎn)二腐乳的制作命題點(diǎn)（一）腐乳制作的原理（2012?海南高考）回答下列關(guān)于腐乳制作的問題：（1）腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過程，其中起主TOC\o"1-5"\h\z要作用的微生物是，其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為和；其產(chǎn)生的能將豆腐中的脂肪水解為和。（2）發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制長(zhǎng)。（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯。鹵湯除具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨(dú)特的。解析：⑴腐乳制作發(fā)酵過程中起作用的微生物有多種，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉，毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解成（多）肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶能夠?qū)⒍垢械闹舅鉃楦视秃椭舅帷＃?）發(fā)酵過程中加鹽腌制，不僅可以調(diào)制風(fēng)味，而且能夠抑制雜菌等其他微生物的生長(zhǎng)。（3）腐乳制作后期加入鹵湯，鹵湯不僅可以防腐，還可以使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)味（或香味）。答案：（1）毛霉（多）肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（2）微生物（3）風(fēng)味命題點(diǎn)（二）發(fā)酵條件的控制及影響因素（2017?鄭州模擬）腐乳是我國獨(dú)特的傳統(tǒng)發(fā)酵食品，是用豆腐發(fā)酵制成的，民間傳統(tǒng)方法生產(chǎn)腐乳均為自然發(fā)酵，現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)多采用優(yōu)良的毛霉菌種進(jìn)行發(fā)酵?，F(xiàn)代化生產(chǎn)流程如下:毛霉料—擴(kuò)大面接種”培養(yǎng)-鞄子懸浮液毛霉料—擴(kuò)大面接種”培養(yǎng)-鞄子懸浮液豆腐f豆腐坯?接種—培養(yǎng)f裝瓶—后熟f成品（1）毛霉的生長(zhǎng)需要豆腐提供水、無機(jī)鹽、和等四大類基本營養(yǎng)物質(zhì)。此外，還需要一定的溫度、濕度等環(huán)境條件。⑵傳統(tǒng)方法制作腐乳時(shí)（填“需要”或“不需要”）滅菌,發(fā)酵好的豆腐上布滿了菌落，這些菌落（填"屬于”或"不屬于”）同一物種。（3）流程中擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)使用的培養(yǎng)基與毛霉菌種分離時(shí)使用的培養(yǎng)基最大的區(qū)別是后者培養(yǎng)基中加入了。（4）當(dāng)豆腐上長(zhǎng)出毛霉后，對(duì)豆腐要進(jìn)行。腐乳制作的后期要加入酒精和多種香辛料配制的鹵湯，酒精的濃度要控制在12%左右，原因是答案：(1)碳源氮源(2)不需要不屬于(3)瓊脂(凝固劑)(4)加鹽腌制酒精濃度過高，則腐乳的成熟時(shí)間將會(huì)延長(zhǎng)；酒精濃度過低，不足以抑制微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐?。壑仉y點(diǎn)撥］影響腐乳品質(zhì)的因素項(xiàng)目說明水的控制含水量約70%,用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形鹽的控制鹽濃度過高會(huì)影響腐乳的口味；鹽濃度過低，腐乳易腐敗變質(zhì)酒的控制酒的含量一般控制在12%左右。酒精含量過咼，使腐乳成熟期延長(zhǎng)。酒精含量過低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗溫度控制溫度為15?18°C，適合毛霉生長(zhǎng)香辛料具有調(diào)味和殺菌的作用，也會(huì)影響腐乳的風(fēng)味或質(zhì)量考點(diǎn)三泡菜的制作命題點(diǎn)(一)泡菜制作的原理和過程1.(2013?全國卷U)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題：TOC\o"1-5"\h\z制作泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是。為了縮短制作時(shí)間，有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是。泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進(jìn)行的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的中。泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有、和從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長(zhǎng)規(guī)律是，原因是。解析：(1)細(xì)菌分布廣泛，制作泡菜時(shí)，需要乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵，為防止雜菌污染，所需鹽水需要煮沸；加入陳泡菜液，可以增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸產(chǎn)生。(2)乳酸菌為原核生物，可進(jìn)行無氧呼吸將葡萄糖分解為乳酸，其無氧呼吸的過程發(fā)生在乳酸菌的細(xì)胞質(zhì)中。(3)在泡菜制作過程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量等。(4)由于乳酸菌比雜菌更為耐酸，所以在酸性環(huán)境中，乳酸菌能夠正常地增殖，而其他雜菌繁殖將受到抑制，所以在此過程中，乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少。答案：(1)殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量(2)無氧呼吸細(xì)胞質(zhì)(3)溫度腌制時(shí)間食鹽用量(4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少乳酸菌比雜菌更為耐酸［重難點(diǎn)撥］泡菜制作的注意事項(xiàng)材料的選擇及用量：蔬菜應(yīng)新鮮，若放置時(shí)間過長(zhǎng)，蔬菜中的硝酸鹽易被還原成亞硝酸鹽。清水和鹽的質(zhì)量比為4：1,鹽水要煮沸后冷卻。煮沸有兩大作用，一是除去水中的氧氣，二是殺滅鹽水中的細(xì)菌。防止雜菌污染：每次取樣用具要洗凈，要迅速封口。氧氣需求：泡菜壇要選擇透氣性差的容器，以創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。泡菜壇壇蓋邊沿的水槽內(nèi)注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境，并注意在發(fā)酵過程中經(jīng)常補(bǔ)水?？刂七m宜的溫度：以18?20°C為宜，溫度偏高有害菌活動(dòng)能力強(qiáng)，溫度偏低不利于乳酸發(fā)酵。命題點(diǎn)(二)亞硝酸鹽含量的測(cè)定2.(2014?海南高考)已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)間有關(guān)。為了測(cè)定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。回答相關(guān)問題：請(qǐng)完善下列實(shí)驗(yàn)步驟。標(biāo)準(zhǔn)管的制備：用和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管。將每個(gè)分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸廠、鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。/右圖表示的是泡菜中勢(shì)。I'IL泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是(填“醋酸菌”或“乳酸菌”)。解析：(1)①在亞硝酸鹽的含量測(cè)定中，用不同濃度亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管；②用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管；③將每個(gè)樣品管分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺相近的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管中的亞硝酸鹽含量。（2）據(jù)圖可知，該圖表示亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時(shí)間的變化曲線。（3）制作泡菜時(shí)產(chǎn)酸的微生物主要是乳酸菌。答案：（1）①不同濃度亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液②不同泡制天數(shù)的泡菜濾液③樣品管相同（相近）（2）亞硝酸鹽含量的變化（3）乳酸菌［重難點(diǎn)撥］泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化發(fā)酵時(shí)期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵初期少（有o2,乳酸菌活動(dòng)受抑制）少增加（硝酸鹽還原菌的作用）發(fā)酵中期最多（乳酸抑制其他菌活動(dòng)）積累、增多、pH下降下降（硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解）發(fā)酵后期減少（乳酸繼續(xù)積累，pH繼續(xù)下降，抑制其活動(dòng)）繼續(xù)增多，pH繼續(xù)下降下降至相對(duì)穩(wěn)定（硝酸鹽還原菌被完全抑制）變化曲線IIakx.乳］0發(fā)酵時(shí)初°發(fā)酵時(shí)間。境酵時(shí)向注意亞硝酸鹽是硝酸鹽還原菌促進(jìn)硝酸鹽還原形成的，而不是硝化細(xì)菌氧化氨形成的瑩窪輕?……/血如演練提能精準(zhǔn)化?高效化［真題集訓(xùn)一驗(yàn)?zāi)芰Γ?.（2017?江蘇高考）下列關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是（）控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生解析：選B控制發(fā)酵溫度的主要目的是利于菌種繁殖和代謝；腐乳制作后期加入香OO辛料和料酒有防腐作用；毛霉的作用主要是分解蛋白質(zhì)和脂肪；成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的菌絲。（2014?廣東高考）下列敘述錯(cuò)誤的是（）醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產(chǎn)生酒精泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶解析：選A醋酸菌是好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能利用乙醇發(fā)酵產(chǎn)生醋酸；酵母菌是兼性厭氧微生物，在無氧條件下能進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精；泡菜制作利用的原理是乳酸菌在無氧條件下可將葡萄糖分解成乳酸；毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。（2012?北京高考）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是（）將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上解析：選C將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中進(jìn)行釀酒時(shí)，在缺氧、酸性環(huán)境下其他雜菌不能生長(zhǎng)，故不嚴(yán)格滅菌對(duì)其影響不大；腐乳制作中將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上，毛霉生長(zhǎng)繁殖快且抗雜菌能力強(qiáng)，故不嚴(yán)格滅菌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不大；進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，植物材料體積小、抗性差，而微生物繁殖快、生長(zhǎng)迅速、會(huì)爭(zhēng)奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)，產(chǎn)生的代謝廢物還會(huì)毒害培養(yǎng)材料，故培養(yǎng)材料一旦被微生物（如細(xì)菌）污染，將嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；選擇培養(yǎng)基中已經(jīng)加入了某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長(zhǎng)促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，另外土壤浸出液本身也含多種微生物，因此將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不大。（2017?全國卷U）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并在32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果。回答下列問題：（1）該實(shí)驗(yàn)的自變量是、。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是。（3）如果在實(shí)驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間；若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是

（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變,脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)椤＝馕觯海?）實(shí)驗(yàn)使用甲、乙兩種菌種，并在32h內(nèi)定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果，所以該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種和發(fā)酵時(shí)間。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧型微生物。（3）因“32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系”，說明發(fā)酵的最佳時(shí)間可能超過32h，故需繼續(xù)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間，定期取樣觀測(cè)發(fā)酵效果，以確定最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間，此時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間。（4）從大豆到豆豉，在相關(guān)微生物的作用下，大豆中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)殡暮桶被幔巨D(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅?。答案：?）菌種發(fā)酵時(shí)間（2）好氧菌（3）延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間，觀測(cè)發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間（4）氨基酸和肽脂肪酸和甘油（2016?天津高考）天津獨(dú)流老醋歷史悠久、獨(dú)具風(fēng)味，其生產(chǎn)工藝流程如下圖。（1）在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度，這是因?yàn)槊?。⑵在酒精發(fā)酵階段，需添加酵母菌。在操作過程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高的數(shù)量，有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）在醋酸發(fā)酵階段，獨(dú)流老醋采用獨(dú)特的分層固體發(fā)酵法，發(fā)酵30天。工藝如下：備丄迤」沁空丄遞」空LJI醫(yī)］翻動(dòng)日層匸匝］應(yīng)裁姑酩圖酩冊(cè)酣成慕酔酷1015202530^Afc;-發(fā)酵過程中，定期取樣測(cè)定醋酸桿菌密度變化，趨勢(shì)如右圖。1015202530^Afc;-據(jù)圖分析，與顛倒前相比，B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點(diǎn)是，由此推測(cè)，影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是。乳酸含量高是獨(dú)流老醋風(fēng)味獨(dú)特的重要成因。發(fā)酵過程中，發(fā)酵缸中的醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變，加劇了不同種類乳酸菌的，淘汰了部分乳酸菌種類。解析：（1）酶的活性受溫度的影響，在最適溫度下酶的催化能力最強(qiáng)。⑵發(fā)酵過程中先通氣的目的是讓酵母菌大量繁殖，使發(fā)酵液中的酵母菌總數(shù)達(dá)到一定程度，有利于發(fā)酵的進(jìn)行。（3）①醋酸桿菌是好氧菌，據(jù)圖分析，第15天將A、B層顛倒，顛倒后使原來處于下層缺氧狀態(tài)的醋酸桿菌分布在上層有氧的環(huán)境，醋酸桿菌大量繁殖，其數(shù)量上升，后來因?yàn)榕囵B(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)被逐漸消耗以及呼吸產(chǎn)物對(duì)pH的影響，導(dǎo)致其數(shù)量不再增長(zhǎng)而趨于穩(wěn)定。由此推測(cè)影響醋酸桿菌密度變化的主要因素是氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH。②因?yàn)槿樗峋菂捬蹙?，故下層（未顛倒前B層處于下層，顛倒后A層處于下層）有利于乳酸菌繁殖。③由題目信息可知，由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗、發(fā)酵環(huán)境發(fā)生改變等，生物個(gè)體之間的斗爭(zhēng)、不同種類之間的競(jìng)爭(zhēng)會(huì)加劇。答案：（1）在最適溫度條件下催化能力最強(qiáng)（2）酵母菌（3）①先快速增長(zhǎng)后趨于穩(wěn)定氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH②顛倒前的B層和顛倒后的A（或不翻動(dòng)，或下）③種間競(jìng)爭(zhēng)（或競(jìng)爭(zhēng)）（2015?廣東高考）泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一，但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對(duì)人體健康有潛在危害。某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”，查閱資料得到下圖。30跡胡30跡胡15WH0876543210TOC\o"1-5"\h\z（1）制作泡菜時(shí)，泡菜壇一般用水密封，目的是。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有。（2）據(jù)圖，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因?yàn)楹笳撸籶H呈下降趨勢(shì)，原因。（3）該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌（亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍）,擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度（4%?10%）,探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定其最適條件。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表，并推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論。解析：（1）制作泡菜時(shí)，泡菜壇要選擇密封性好的容器，一般用水密封，以創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有丙酮酸、［H］和少量ATP。⑵第3天時(shí)，泡菜中亞硝酸鹽含量達(dá)到最高，在第8天后的泡菜中亞硝酸鹽含量降到最低，故第8天后的泡菜更適于食用。乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生的乳酸會(huì)導(dǎo)致pH下降。（3）設(shè)計(jì)的記錄表中要包含乳酸菌類型、食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間等自變量，因變量為亞硝酸鹽的含量。通過相互對(duì)照確定用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定最適發(fā)酵條件。答案：⑴創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵丙酮酸、［H］（少量ATP）（2）亞硝酸鹽含量低乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生了乳酸（3）兩種乳酸菌在泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化表普通乳酸菌“優(yōu)選”乳酸菌4%5%6%??????9%10%4%5%6%??????9%10%12310注：①乳酸菌類型及食鹽濃度；②亞硝酸鹽含量(mg/kg);③發(fā)酵時(shí)間(d)。推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論：與普通乳酸菌相比，“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜時(shí)，相同條件下產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量低。［課下檢測(cè)一一■缺漏］一、基礎(chǔ)題點(diǎn)練1如圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化過程，下列敘述正確的是()過程①和②都只能發(fā)生在缺氧條件下過程①和③都發(fā)生在酵母細(xì)胞的線粒體中過程③和④都需要氧氣的參與過程①?④所需的最適溫度基本相同解析：選C據(jù)圖分析可知：①是細(xì)胞呼吸的第一階段；②是無氧呼吸的第二階段；③是有氧呼吸的第二、三階段；④是果醋制作中乙醇氧化為醋酸的階段。①過程在有氧或無氧的條件下都可以進(jìn)行；①過程是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行的；③和④都必須在有氧的條件下才可以進(jìn)行；①②(③)是果酒制作的階段，其適宜的溫度為18?25°C,④是果醋制作的

階段，其適宜的溫度為30?35°C。2.下列關(guān)于制作果酒、果醋和腐乳的敘述，錯(cuò)誤的是（）在果酒發(fā)酵后期擰松瓶蓋的間隔時(shí)間可延長(zhǎng)B?條件適宜時(shí)醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會(huì)逐漸減小將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時(shí)，底層和近瓶口處需加大用鹽量解析：選D果酒發(fā)酵的后期，營養(yǎng)物質(zhì)減少，酵母菌代謝減慢，產(chǎn)生的CO2量減少，可以間隔較長(zhǎng)的時(shí)間再擰松瓶蓋；糖源和氧氣充足時(shí)，醋酸菌可以將葡萄糖分解成醋酸，糖源不足時(shí)，則將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔还瓢l(fā)酵過程中，葡萄糖分解會(huì)產(chǎn)生水，因此發(fā)酵液的密度逐漸減??；制作腐乳時(shí)，在擺放豆腐的同時(shí)，應(yīng)逐層加鹽，隨層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。3?若利用如圖所示的裝置直接制作果醋，將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置后，下列做法不合理的是（）加入適量的醋酸菌B?一直打開閥a和閥b進(jìn)行通氣嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作把發(fā)酵裝置放到15°C的恒溫箱中進(jìn)行發(fā)酵解析：選D醋酸菌產(chǎn)生醋酸時(shí)，最適宜的發(fā)酵溫度是30?35Co下列關(guān)于腐乳制作的敘述，錯(cuò)誤的是（）毛霉可利用其體內(nèi)的酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸鹵湯中酒的含量越高，雜菌繁殖越快，豆腐越易腐敗用鹽腌制腐乳的過程中，要控制鹽的用量，鹽的濃度過高會(huì)影響口味，過低則不足以抑制雜菌的生長(zhǎng)，導(dǎo)致豆腐腐敗其制作過程可以表示為：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉?加鹽腌制?加鹵湯裝瓶?密封腌制解析：選B豆類中含量最多的有機(jī)物是蛋白質(zhì)，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸。鹵湯中酒的含量過高，腐乳成熟的時(shí)間將會(huì)延長(zhǎng)；鹵湯中酒的含量過低，雜菌繁殖快，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。家庭制作果酒、果醋和腐乳三種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的共同點(diǎn)是（）菌種均可來自自然環(huán)境均需在相同溫度下進(jìn)行發(fā)酵均需在無氧環(huán)境下發(fā)酵發(fā)酵過程中微生物的種群密度不斷增大解析：選A參與果酒制作的微生物是酵母菌，參與果醋制作的微生物是醋酸菌，參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，家庭制作果酒、果醋和腐乳的菌種均可來自自然環(huán)境；

果酒制作的適宜溫度是18?25°C,果醋制作的適宜溫度是30?35°C,腐乳制作的適宜溫度是15?18°C;參與果醋制作的醋酸菌是好氧菌，因此果醋發(fā)酵過程是有氧條件；發(fā)酵過程中，微生物的種群密度先增大，后保持相對(duì)穩(wěn)定，最后減小。將少量的酵母提取液加入到足量的葡萄汁中進(jìn)行果酒制作，15°C條件下密封保溫一段時(shí)間之后，檢測(cè)到反應(yīng)體系含有少量的酒精。如對(duì)上述實(shí)驗(yàn)的某個(gè)因子進(jìn)行改動(dòng)，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化。以下分析正確的是()A.A.增加酵母提取液的量，則產(chǎn)生相同酒精所需的時(shí)間延長(zhǎng)B.CB.C.保溫溫度提高到23C,則相同時(shí)間內(nèi)酒精濃度升高D.D.解析：選C葡萄汁足量，增加酵母提取液的量，則產(chǎn)生相同酒精所需的時(shí)間縮短；由于葡萄汁已經(jīng)足量，而酵母提取液的量一定，故增加葡萄汁的量，酒精濃度不會(huì)升高；酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，連續(xù)通入無菌空氣不會(huì)產(chǎn)生酒精；制葡萄酒時(shí)，酒精發(fā)酵控制的溫度為18?25°C，升高溫度到23°C，相同時(shí)間內(nèi)酒精濃度升高。二、高考題型練(2018?柳州質(zhì)檢)下面是果酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程和發(fā)酵裝置。根據(jù)圖示回答下列問題：圏I躍酒、果酷制作流程圖2杲酒、果酹制作裝宜(1)完成圖1中的實(shí)驗(yàn)流程_過程中要關(guān)閉，否則可能發(fā)生使發(fā)酵液變酸的反應(yīng)⑵圖2裝置中的充氣口在.過程中要關(guān)閉，否則可能發(fā)生使發(fā)酵液變酸的反應(yīng)■（寫出該反應(yīng)式)，而排氣口在該過程中應(yīng)開放，排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，目的是葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是，重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應(yīng)呈色。果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和兩種微生物的發(fā)酵原理，后者在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是解析：在酒精發(fā)酵階段，充氣口應(yīng)關(guān)閉，否則醋酸菌會(huì)將乙醇氧化為醋酸，從而使發(fā)酵液變酸。酵母菌為真菌，屬于真核生物，醋酸菌為細(xì)菌，屬于原核生物，兩者在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是有無以核膜為界限的細(xì)胞核。答案：(1)醋酸發(fā)酵酒精發(fā)酵C2H5OH+O2—CH3COOH+H2O避免空氣中其他微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置(防止空氣中的微生物污染)紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中灰綠醋酸菌無以核膜為界限的細(xì)胞核(2018?泉州一模)請(qǐng)回答下列有關(guān)發(fā)酵食品制作的問題：在泡菜腌制的過程中，要注意控制腌制的時(shí)間、和食鹽的用量；最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，這一操作的目的是。在制作腐乳過程中，所需的微生物來源于；而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在條件下，將優(yōu)良的菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免其他菌種的污染。某同學(xué)制作藍(lán)莓果醋時(shí)，定時(shí)通過充氣口充氣，原因是。另一位同學(xué)在藍(lán)莓果汁中直接加入某品牌活性酵母，之后先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無菌空氣，通入無菌空氣的目的是。在藍(lán)莓果酒制作過程中，在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源時(shí)將乙醇變?yōu)椋缓笞優(yōu)榇姿?。解析?1)在泡菜腌制的過程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量；最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，其目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。(2)在制作腐乳過程中，所需的微生物來源于空氣中的毛霉孢子；現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在無菌條件下進(jìn)行的。(3)果醋的制作，使用的微生物是醋酸菌；醋酸菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng)，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將果汁中的糖分解成醋酸，當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，醋酸菌可以先將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。由此可知：制作藍(lán)莓果醋時(shí)，定時(shí)通過充氣口充氣的原因是醋酸菌是好氧細(xì)菌，將乙醇變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧氣參與。在藍(lán)莓果汁中直接加入某品牌活性酵母后，向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無菌空氣，其目的是在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，數(shù)量增加。(4)在藍(lán)莓果酒制作過程中，在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源時(shí)將乙醇變?yōu)橐胰?。答案?1)溫度保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境空氣中的毛霉孢子無菌醋酸菌是好氧細(xì)菌，將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧氣參與在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，數(shù)量增加醋酸菌乙醛(2018?武昌模擬)鴨梨醋飲屬于綠色健康飲品，既保存了鴨梨中的多種氨基酸、維生

素、礦物質(zhì)、有機(jī)酸等營養(yǎng)成分，又兼具果醋醒酒護(hù)肝、助消化、降低血脂、軟化血管等的養(yǎng)生保健功能，深受廣大消費(fèi)者的青睞。下面為鴨梨醋飲的制作流程圖，請(qǐng)據(jù)圖回答問題：新鮮的鴨梨汁――-新鮮的鴨梨汁――-果酒――-果醋鴨梨醋飲果酒的釀造原理是先使酵母菌進(jìn)行，以增加酵母菌的數(shù)量，然后再通過獲得果酒。在果酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在上的野生型酵母菌。酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18?25°C,溫度過高時(shí)，酵母菌代謝減慢甚至死亡,TOC\o"1-5"\h\z原因是。果醋發(fā)酵過程中,適宜的溫度為,較高的酒精度通常不適宜進(jìn)行醋酸發(fā)酵,原因是。酒精發(fā)酵后轉(zhuǎn)入醋酸發(fā)酵前,除改變溫度外,還需調(diào)整的發(fā)酵條件是。解析：(1)果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌在氧氣充足時(shí)進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精。(2)在果酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在鴨梨皮上的野生型酵母菌。(3)溫度主要影響酶的活性。(4)醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30?35°C。酒精濃度過高會(huì)抑制醋酸菌的生長(zhǎng)和代謝，影響產(chǎn)酸量。(5)醋酸菌是需氧型細(xì)菌，發(fā)酵時(shí)需要通入無菌空氣。答案：(1)有氧呼吸無氧呼吸(2)鴨梨皮(3)溫度過高,酶的活性降低或失活(4)30?35C較高濃度的酒精會(huì)抑制醋酸菌的生長(zhǎng)和代謝,使產(chǎn)酸量下降(5)通入無菌空氣10．以下是有關(guān)泡菜發(fā)酵過程中的相關(guān)問題,請(qǐng)回答：蔬菜剛?cè)雺瘯r(shí),其表面帶有不抗酸的大腸桿菌和酵母菌等微生物。其中的酵母菌最初的呼吸作用方式是,請(qǐng)寫出相關(guān)反應(yīng)式：到發(fā)酵中期,無氧環(huán)境形成,乳酸菌開始活躍,并產(chǎn)生大量乳酸,使乳酸積累量達(dá)到0.6%?0.8%,pH為3.5?3.8,試分析此時(shí)壇內(nèi)其他微生物的活動(dòng)情況及原因：發(fā)酵后期,乳酸含量繼續(xù)增加,當(dāng)達(dá)到1.2%以上時(shí),發(fā)酵速度逐漸變緩甚至停止主要原因是。請(qǐng)?jiān)谙铝凶鴺?biāo)圖中畫出該過程中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽含量的變化趨勢(shì)。

解析：蔬菜入壇的初期，壇內(nèi)氧氣充足，酵母菌主要進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生co2和h2o。發(fā)酵后期發(fā)酵速度變緩甚至停止的主要原因是過多的乳酸使pH過低，抑制了乳酸菌的生長(zhǎng)。答案:⑴有氧呼吸C6H12O6+6O2+6H2O—―—6CO2+12H2O+能量（2）其他微生物活動(dòng)減慢甚至停止，因?yàn)閜H不適宜（3）pH過低抑制了乳酸菌的生長(zhǎng)（4）如圖所示：發(fā)醉時(shí)岡°a皚*謝床牛發(fā)醉時(shí)岡°a皚*謝床?！辏?018?泰安模擬）利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久、惠及民生。請(qǐng)分析回答下列問題：（1）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長(zhǎng)出-加鹽腌制?加鹵湯裝瓶?密封腌制。用鹽腌制時(shí)，應(yīng)注意控制;配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在%左右。（2）制作泡菜的原理是。（3）蔬菜在腌制過程中，會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。在條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較，估算出的亞硝酸鹽含量如下圖曲線所示，據(jù)圖可以得出的結(jié)論是解析：（1）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉—加鹽腌制—加鹵湯裝瓶—密封腌制。腐乳制作過程中有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。用鹽腌制時(shí)，應(yīng)注意控制鹽的用量；配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右。（2）泡菜的制作離不開乳酸菌，乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸。（3）蔬菜在腌制過程中，會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。測(cè)定亞硝酸鹽含

量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。由繪制出的亞硝酸鹽含量曲線圖分析可知，泡菜封壇后亞硝酸鹽含量不斷增加，至第4d含量最高，以后逐漸減少。答案：（1）毛霉鹽的用量12（2）乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸（3）鹽酸酸化重氮化玫瑰紅泡菜封壇一段時(shí)間后亞硝酸鹽含量不斷增加，至第4d含量最高，以后逐漸減少藍(lán)莓果實(shí)中富含花青素等營養(yǎng)成分，具有保護(hù)視力、防止腦神經(jīng)老化、強(qiáng)心、抗癌、軟化血管、增強(qiáng)機(jī)體免疫等功能。下面是獲取藍(lán)莓花青素、藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋的流程。結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列問題：灑精發(fā)酵f醋酸.發(fā)酵藍(lán)每花青素灑精發(fā)酵f醋酸.發(fā)酵藍(lán)每花青素果I酒果醋（1）獲取藍(lán)莓果汁時(shí)加入果膠酶能將果膠分解成可溶性的，使渾濁的果汁變得澄清。藍(lán)莓花青素（在中性或堿性溶液中不穩(wěn)定，在60°C以下熱穩(wěn)定性較好）的提取可用溶劑萃取法，考慮到色素提取液作為食品添加劑的安全性問題，在下述方案中，你認(rèn)為較好的方案是（填字母）。A.清水+甲醇B.鹽酸+乙醇C.檸檬酸+丙酮D.檸檬酸+乙醇含花青素的粗品經(jīng)真空干燥（可使水的沸點(diǎn)降至40C）制成成品，采用該方法的主要原因是。（2）釀制藍(lán)莓酒時(shí)，一般要先通氣的目的是。通常不需要對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，是因?yàn)樵谌毖?、呈酸性的發(fā)酵液中。醋酸菌將乙醇變?yōu)榇姿岬沫h(huán)境條件是糖源（填''充足”或''缺少”）。釀制成功的藍(lán)莓果酒如果暴露在空氣中會(huì)逐漸出現(xiàn)醋酸味，氣溫高的夏天更易如此，其原因是（3）若藍(lán)莓果汁中已含有醋酸菌，在藍(lán)莓果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？，說明原因：。為鑒定藍(lán)莓果醋是否釀制成功，除可以通過觀察菌膜、嘗、嗅之外，還可以通過檢測(cè)作進(jìn)一步的鑒定。解析：（1）果膠酶可將藍(lán)莓果汁中的果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，使渾濁的果汁變得澄清。根據(jù)題干信息，藍(lán)莓花青素在中性或堿性溶液中不穩(wěn)定，故應(yīng)用酸性溶液提取，考慮到食品添加劑的安全性問題，適宜選用檸檬酸+乙醇作為提取劑；花青素在609以下熱穩(wěn)定性較好，真空干燥可使水的沸點(diǎn)降低，從而避免溫度過高導(dǎo)致花青素分解。⑵釀

制藍(lán)莓酒時(shí)先通氣有利于酵母菌大量繁殖。通常不需對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，是因?yàn)榻^大多數(shù)微生物在缺氧、酸性環(huán)境中生長(zhǎng)受抑制。在糖源不足的情況下，醋酸菌在有氧條件下可以將果酒發(fā)酵成果醋。醋酸菌是好氧細(xì)菌，最適生長(zhǎng)溫度為30?35°C,所以釀制成功的藍(lán)莓果酒如果暴露在空氣中會(huì)導(dǎo)致醋酸菌大量生長(zhǎng)而逐漸出現(xiàn)醋酸味。（3）如果果汁中已含有醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸，因?yàn)楣瓢l(fā)酵是在缺氧環(huán)境中進(jìn)行的，而醋酸菌是好氧菌，果酒發(fā)酵時(shí)的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長(zhǎng)。果醋是否釀制成功可以通過觀察菌膜、嘗、嗅，以及檢測(cè)發(fā)酵前后的pH進(jìn)行判斷。答案：（1）半乳糖醛酸D避免干燥時(shí)溫度過高導(dǎo)致花青素分解（2）讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖絕大多數(shù)微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受抑制缺少醋酸菌是好氧細(xì)菌，最適生長(zhǎng)溫度為30?35°C（夏天溫度較高），導(dǎo)致醋酸菌大量生長(zhǎng)產(chǎn)生醋酸（3）不能果酒發(fā)酵時(shí)的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長(zhǎng)發(fā)酵前后的pH第二講第二講臺(tái)鑒義鑒:閩雙基落實(shí)——系統(tǒng)化-問題化［基礎(chǔ)知識(shí)?系統(tǒng)化］知識(shí)點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基碳源、蛆即、水，無機(jī)圮、生長(zhǎng)因子同悴培養(yǎng)基選釋培莽基“*質(zhì)令培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基pH.豺殊營養(yǎng)物質(zhì)及空1尊無菌技術(shù)匡?。耗芊駳⑺揽飫。耗芊駳⑺来竽c桿菌的純化培養(yǎng)計(jì)算f空f瘠化"空f倒平扳I制缶周體*愿靑野知識(shí)點(diǎn)二土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離r…匸尿如勇確二貳源事培一養(yǎng)基中力認(rèn)酚社指一奈劑知識(shí)點(diǎn)三分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理纖維素卡莘纖堆一軸非蘇嗨葡萄糖柞用亠」閃抿虹計(jì)算f空f瘠化"空f倒平扳I制缶周體*愿靑野知識(shí)點(diǎn)二土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離r…匸尿如勇確二貳源事培一養(yǎng)基中力認(rèn)酚社指一奈劑知識(shí)點(diǎn)三分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理纖維素卡莘纖堆一軸非蘇嗨葡萄糖柞用亠」閃抿虹亠紅色歸侖物幷第童酶.紅色泊失「出現(xiàn)透明團(tuán)【實(shí)驗(yàn)流程土壤耽樣富含纖維索的環(huán)境選擇培養(yǎng)［用以纖維盍為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基培i養(yǎng)，以增加纖維索分解菌的數(shù)量If梯度稀釋涂布平板?！■!?I將樣品涂布到鑒別纖維索分解菌的固體培I養(yǎng)基上I挑選挑選出產(chǎn)主透明圈的菌落［基本技能?問題化］據(jù)某微生物培養(yǎng)基的配方表回答下列問題編號(hào)①②③④⑤成分(NHJ2SO4KH2PO4FeSO44Cad?含量0.4g4.0g0.5g0.5g100mL此培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分屬于液體培養(yǎng)基，因?yàn)闆]有凝固劑(如瓊脂)；按功能劃分屬于選擇培養(yǎng)基，因?yàn)闆]有碳源，只有自養(yǎng)型微生物才能生長(zhǎng)(利用空氣中的CO2)。此培養(yǎng)基含有的微生物的營養(yǎng)成分包括水、無機(jī)鹽和氮源三類，若加入氨基酸，則它可充當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)成分包括碳源、氮源和生長(zhǎng)因子。若要觀察微生物的菌落特征，培養(yǎng)基中應(yīng)添加的成分是凝固劑(瓊脂)。若用該培養(yǎng)基來分離尿素分解菌，應(yīng)除去表中①成分(填表中序號(hào))，加入尿素和不含氮元素的有機(jī)物。下圖是倒平板的操作，請(qǐng)據(jù)圖填空叩乙丙「請(qǐng)用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程：丙f乙f甲f丁。甲、乙、丙中的滅菌方法是灼燒滅菌。⑶丁中的操作需要等待平板冷卻凝固后才能進(jìn)行。據(jù)兩種接種方法產(chǎn)生的培養(yǎng)效果圖完成下列問題VA獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是稀釋涂布平板法、平板劃線法。某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象。提示：最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)滅菌。采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)滅菌。連線以下幾種選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基及其應(yīng)用

①如入青辟承\(zhòng)倉亦①如入青辟承\(zhòng)倉亦I入髙徹度倉鹽弋以尿累為唯-包滋I"以纖堆藥為唯一碳族不津加氟源、如入常紅芙蠱加入剛黑虹丿J加入酚紅指示劑/風(fēng)用孔分離金?黃色帝喘球曲仏分廐麻索分解諧「.分離纖堆濮分斛歯d曲高構(gòu)対窗和賽菌匕鑒別纖鮭爲(wèi)分斛苗f.鑒別標(biāo)索分解曲廟分離固爼微生物h,整別天腸桿菌懿潼豔纂■他考點(diǎn)突破——題點(diǎn)化*重點(diǎn)化考點(diǎn)一培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)命題點(diǎn)（一）培養(yǎng)基的成分、功能和制備（2016?全國卷I）空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：配制培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；制作無菌平板；設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；將各組平板置于37°C恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}：（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是。（2）步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是。（3）若在某次調(diào)査中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30（即36—6）個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法（填“正確”或“不正確”）。解析：（1）牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟②，需要進(jìn)行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。（2）該實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照組為不進(jìn)行處理的無菌平板，實(shí)驗(yàn)組的操作為將各無菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露相同時(shí)間。（3）若空白對(duì)照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說明實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象。空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)變量不唯一，不能確定實(shí)驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成因此不能求出實(shí)驗(yàn)組的菌落平均值。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間污染不正確(2016?全國卷III)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀TOC\o"1-5"\h\z釋的理由是。推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出的菌落作為候選菌。乳酸菌在一20°C長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。解析：(1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，這樣既可避免雜菌污染，又可將乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。(2)乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，加入碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝(無氧呼吸)過程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致碳酸鈣分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和分離對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20°C的冷凍箱中保存。答案：(1)無菌水泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)具有透明圈(3)甘油［重難點(diǎn)撥］常用選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基實(shí)例歸納類型實(shí)例選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽用于分離得到金黃色葡萄球菌以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素的細(xì)菌不添加氮源的培養(yǎng)基用于分離固氮微生物石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物

鑒別培養(yǎng)基伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌（菌落呈黑色）命題點(diǎn)（二）無菌技術(shù)的操作3.（2014?江蘇高考節(jié)選）為了獲得卩胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)卩胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題：（1）實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是;為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該。⑵為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的。（3）右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是。（填序號(hào)）鶴￥訂1耳：安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表（4）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長(zhǎng)，最可能的原因是。解析：（1）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌），在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用牛皮紙或干凈的報(bào)紙包扎器皿。（2）酵母菌是真菌，對(duì)青霉素具有抵抗能力，青霉素主要抑制細(xì)菌、放線菌的生長(zhǎng)。（3）圖中甲為安全閥，乙為放氣閥，丙為壓力表。（4）接種的平板上未見菌落生長(zhǎng)，說明接種不成功，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻，使菌株因溫度過高而被殺死。答案：（1）干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）用牛皮紙（報(bào)紙）包扎器皿（2）抑制細(xì)菌（放線菌）的生長(zhǎng)（3）①（4）接種環(huán)溫度過高，菌種被殺死［重難點(diǎn)撥］全面比較消毒和滅菌條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物煮沸消毒法日常用品消毒巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源滅菌強(qiáng)烈的理殺死物體內(nèi)外灼燒滅菌法接種工具化因素所有的微生物，干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具

包括芽抱和抱高壓蒸汽滅菌法包括芽抱和抱高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器命題點(diǎn)（三）微生物的培養(yǎng)與純化（2017?江蘇高考）苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)如圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)回答活性污泥富集培界L0活性污泥富集培界L0'L0210^10410TOC\o"1-5"\h\z⑴酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有。（2）將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)一步，以便于菌落計(jì)數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加<（3）右圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中（填圖中序號(hào)）區(qū)域更易獲得單菌落。，（4）采用比色測(cè)定法（使用苯酚顯色劑）檢測(cè)降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng)，下表中1?5號(hào)比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為。管號(hào)123456苯酚濃度（mg/L）1如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋（填序號(hào)：①5②10③20）倍后，再進(jìn)行比色。解析：⑴富集培養(yǎng)基中蛋白胨、苯酚都是含碳的有機(jī)物，可作為碳源。（2）欲富集酚降解菌，隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，應(yīng)逐漸增加培養(yǎng)基中苯酚的含量；若接種培養(yǎng)后平板上菌落過于密集，則應(yīng)進(jìn)一步稀釋后再進(jìn)行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計(jì)數(shù)與分離；平板培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，除含有水、營養(yǎng)物質(zhì)（碳源、氮源、無機(jī)鹽等）外，還需添加瓊脂作為凝固劑。⑶利用連續(xù)劃線法接種時(shí)，最后的劃線區(qū)域（③）中，菌體的密度較小，容易獲得單菌落。（4）因系列濃度梯度中6號(hào)比色管中苯酚濃度為1mg/L,故1?5號(hào)比色管中的苯酚濃度應(yīng)分別為0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L;根據(jù)題意，廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于0?1mg/L，需將殘留液稀釋20倍左右。答案：⑴蛋白胨、苯酚（2）增加稀釋涂布凝固劑（3）③（4）0、0?2、0?4、0?6、0?8(2014?全國卷U)為了調(diào)査某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為個(gè)。該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是示意圖A和B中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高的利用率。解析：(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1mL稀釋液中平均有38個(gè)活菌，可推測(cè)每升水樣中的活菌數(shù)=38X10X100X1000=3.8X107(個(gè))。(2)接種環(huán)、接種針或其他金屬用具直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較兩圖可以看出，A是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，B是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)由于振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8X107灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)［重難點(diǎn)撥］平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線一系列的梯度稀釋涂布平板法操作注意事項(xiàng)每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高，為確保實(shí)驗(yàn)成功可以增加稀釋度的范圍菌體獲取在具有顯著的菌落特征的區(qū)域菌落中挑取菌體從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體適用范圍適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌優(yōu)點(diǎn)可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落既可以獲得單細(xì)胞菌落，又能對(duì)微生物計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個(gè)平板考點(diǎn)二微生物的篩選與計(jì)數(shù)命題點(diǎn)（一）土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1.（2017?全國卷I）某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：（1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是。但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是（答出兩點(diǎn)即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是（3）用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有（答出兩點(diǎn)即可）。解析：（1）土壤中的某些細(xì)菌之所以能夠分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物，必須利用現(xiàn)成的有機(jī)物（如葡萄糖）作為碳源；葡萄糖通過呼吸作用被分解時(shí)，能為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，同時(shí)，葡萄糖還可以轉(zhuǎn)化成脂肪、某些氨基酸等物質(zhì)，所以進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖能為其他有機(jī)物的合成提供原料。（2）選擇培養(yǎng)基只是允許特定種類的微生物（目的微生物）生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。本實(shí)驗(yàn)的目的菌是可分解尿素的細(xì)菌，因此配制的培養(yǎng)基應(yīng)只允許尿素分解菌生長(zhǎng)，nh4no3可以作為所有細(xì)菌的氮源，培養(yǎng)基中如含有nh4no3，將不能起到篩選作用。（3）KH2PO4和Na2HPO4能為細(xì)菌生長(zhǎng)提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO//HPO2-可作為緩沖劑，使培養(yǎng)基中pH保持相對(duì)穩(wěn)定。答案：（1）脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料（2）尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用（3）為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無機(jī)營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過程中pH穩(wěn)定（2016?四川高考）圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。1叫選擇鑒別日匕壤樣品培養(yǎng)基培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基鑿種-CIft'；陽引即1（農(nóng)示從屈始察円開始屈制醸赫序號(hào)）乙（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑,產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變色。（2）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程釆取的接種方法是，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為X108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)。（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAG、UGA和UAA）。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為，突變基因表達(dá)的蛋白含個(gè)氨基酸。解析：⑴脲酶能夠催化尿素分解釋放出氨和二氧化碳，因此選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源。挑取單菌落接種到加有酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，菌落周圍的氨增加，pH升高，酚紅指示劑將變紅。⑵該過程采取的接種方法為稀釋涂布平板法。利用稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇菌落數(shù)在30?300的平板，因此平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落平均數(shù)為（156+178+191）^3=175個(gè)。每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為1752.1X105=1.75X108個(gè)。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法能將死細(xì)胞計(jì)算在內(nèi)，而稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法只能計(jì)數(shù)活細(xì)胞（只有活細(xì)胞才能在平板上生長(zhǎng)），故一般血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法要比稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法的結(jié)果大。（3）箭頭處插入70個(gè)核苷酸，箭頭后密碼子的解讀方式％*AG,UGA，GAA……對(duì)比3種終止密碼可發(fā)現(xiàn)，此處的終止密碼為UGA。從起始密碼到終止密碼之前共有273+72個(gè)堿基，因此突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含115個(gè)氨基酸。答案：⑴尿素酚紅紅⑵稀釋涂布平板法1?75少（3）UGA115［重難點(diǎn)撥］

統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的兩種方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：原理利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量方法用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能區(qū)分死菌與活菌(2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)：原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌計(jì)算公式每克樣品中的菌株數(shù)=(UV)XM,其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù)操作設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)命題點(diǎn)(二)分解纖維素的微生物的分離(2014?全國卷I)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將分解成。在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++—++培養(yǎng)基乙+++—+++注：“＋”表示有，“－”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是；培養(yǎng)基乙(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是解析：(1)纖維素酶至少包括3種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，C1酶、CX酶催化纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)CR能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，CR-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌的菌落為中心的透明圈。（3）培養(yǎng)基甲中未添加瓊脂，為液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基上不能形成單菌落，故不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。培養(yǎng)基乙中未添加纖維素，不能和CR形成紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定為纖維素分解菌。答案：（1）纖維二糖葡萄糖（2）紅透明圈（3）不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌［重難點(diǎn)撥］微生物的篩選與鑒別方法（1）微生物的篩選方法:單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培養(yǎng)法利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物鑒定培養(yǎng)法利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物（2）微生物的鑒別方法:菌落特征鑒別法根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅說明該種微生物能夠分解尿素染色鑒別法如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來篩選分解纖維素的微生物f輒處演練提能一精準(zhǔn)化?商效化［真題集訓(xùn)一驗(yàn)?zāi)芰Γ?.（2015?全國卷I）已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題：（1）顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通?？捎蒙Ｎ⑸顰產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用（填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提取。（2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（3）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用接計(jì)數(shù);若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用法進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（4）為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在35°C、40C、45C下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg,則上述三個(gè)溫度中，C條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍C設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。解析：（1）油脂可被蘇丹皿染液染成橘黃色，被蘇丹W染液染成紅色，因此油脂通常用蘇丹皿或蘇丹W染色。不易揮發(fā)的物質(zhì)大多采用萃取法進(jìn)行提取，水蒸氣蒸餾法一般用來提取易揮發(fā)的物質(zhì)。（2）能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B能利用脂肪（油脂）作為碳源，所以在制備選擇微生物B的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)將油脂作為唯一的碳源。⑶用顯微鏡直接對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，需要用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。如果對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，則要用稀釋涂布平板法涂布平板，培養(yǎng)后統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，然后計(jì)算出活菌數(shù)量。（4）降解等量的油脂，需要的酶量越多，說明此溫度下的酶的活力越小。所以三種溫度中45C下酶的活力最小。從三種溫度下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，40C下酶的活力最大，所以要想測(cè)定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞該溫度設(shè)計(jì)不同溫度梯度,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。答案：⑴蘇丹皿（或蘇丹W）萃取法⑵油脂（3）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板稀釋涂布平板（4）45402.（2015?江蘇高考）人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問題：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的（填序號(hào)）。①酒精燈②培養(yǎng)皿③顯微鏡④無菌水⑵在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是（3）向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是（4）剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見圖）。圖中降解圈大小與纖維素酶的（4）剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見圖）。圖中降解圈大小與纖維素酶的■齢①曲蔣②有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株（填圖中序號(hào)）。（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株山和J4,在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵,測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖，推測(cè)菌株適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是（2）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是（2）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上a-*眄<「￡.a-*眄<「￡.2.邑KJoooooo■54321解析：⑴在樣品稀釋和涂布平板過程中，需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行操作，培養(yǎng)皿用于盛放培養(yǎng)基并培養(yǎng)細(xì)菌，無菌水做稀釋的溶劑，此處唯一用不到的是顯微鏡。（2）在涂布平板時(shí)，要取少量菌懸液滴加到培養(yǎng)基表面，因?yàn)槿绻渭泳鷳乙毫窟^多，菌懸液就會(huì)堆積在培養(yǎng)基表面，影響分離效果。（3）在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)，如果試管口粘附有培養(yǎng)基，就很容易使棉塞受到污染，因此，需要用無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛?。?）因?yàn)閯偣t可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，且不與纖維素降解產(chǎn)物反應(yīng)。所以在剛果紅培養(yǎng)基平板上，菌落周圍有透明降解圈是纖維素被降解的結(jié)果，降解圈大小由纖維素酶的活性和量決定。圖中菌落①周圍的降解圏最大，因此其降解纖維素的能力最強(qiáng)。（5）考慮到人工瘤胃的發(fā)酵過程會(huì)使發(fā)酵液酸性增加，溫度升高，在這個(gè)前提下，觀察不同溫度和pH條件下測(cè)得的發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果圖，從圖中可以看出，在高溫和低pH條件下都是J4菌株中的纖維素酶的活性較高，因而該菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。答案：（1）③（2）培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果（3）避免培養(yǎng)基污染棉塞（4）量與活性①（5）J4發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高3.（2014?四川高考節(jié)選）有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲、乙所示。I：壤樣呂選擇培恭劃線純化菌種I：壤樣呂選擇培恭劃線純化菌種甲隧障箱率乙蛋白酶常液隧障箱率乙蛋白酶常液匕睛液（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？。解析：(1)微生物生長(zhǎng)繁殖需要的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽四類。根據(jù)題意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，該實(shí)驗(yàn)的目的是探索其降解機(jī)制，因此，需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故選擇培養(yǎng)時(shí)為了排除其他碳源的干擾，培養(yǎng)基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是無菌接種環(huán)。據(jù)題意分析知，造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個(gè)：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域的第一條線時(shí)未從第一區(qū)域末端開始。根據(jù)圖乙所示實(shí)驗(yàn)中的上清液加入蛋白酶溶液推測(cè)，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄磕康木晔欠衲芊置诮到獗交锹〉牡鞍踪|(zhì)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對(duì)照。答案：(1)氮源和無機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖(2)接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始(3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理，缺少空白對(duì)照(2013?全國卷II)臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。回答下列問題：為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用法或法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。取該單菌落適當(dāng)稀釋，用法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素A；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素B；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好選用抗生素。解析：(1)微生物的常用接種方法為平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)能夠使菌落均勻生長(zhǎng)、布滿平板的接種方法為稀釋涂布平板法。(3)含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素B不敏感；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱；含D的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落(排除雜菌污染)，說明該致病菌可能對(duì)抗生素D產(chǎn)生了抗藥性。答案：(1)平板劃線稀釋涂布平板(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱耐藥菌(4)A［課下檢測(cè)——查缺漏］一、基礎(chǔ)題點(diǎn)練1．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是()測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)在對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)前，需要對(duì)微生物和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌酵母菌發(fā)酵過程產(chǎn)生的酒精，對(duì)其他微生物生長(zhǎng)有一定的抑制作用分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：選B在對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)前，需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，不能對(duì)所培養(yǎng)的微生物進(jìn)行滅菌。做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是()高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析：選D在高壓滅菌的操作過程中，加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待壓力表的指針指到零時(shí)，打開放氣閥，旋松螺栓，打開蓋子。倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后，再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目方法的敘述，錯(cuò)誤的是()采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的菌落數(shù)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般采用密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)在某一濃度下涂布三個(gè)平板，若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大，則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果解析：選C當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)活菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。一般選擇菌落數(shù)在30?300的平板計(jì)數(shù)，密度過大

會(huì)使計(jì)數(shù)結(jié)果偏小，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。至少涂布3個(gè)平板，作為重復(fù)組，取其平均值計(jì)數(shù)能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力和準(zhǔn)確性。4?在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，在a、b、c處分別貼■:浸有不同抗生素（濃度相同）的無菌濾紙片，d處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)一后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯(cuò)誤的是（）a處抑菌效果小于b處b處的濾紙片沒有瀝干c處抗生素?zé)o效d為對(duì)照解析：選A培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同，透明圈越大，說明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈大于b處；b處不是圓形的透明圈，可能是濾紙片沒有瀝干，抗生素流出濾紙片；c處無透明圈，說明c處抗生素對(duì)大腸桿菌無效；d為空白對(duì)照。（2016?江蘇高考）漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述正確的是（多選）（）生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過劃線進(jìn)一步純化斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株解析：選BC生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對(duì)較少，產(chǎn)漆酶菌株也較少，不宜作為分離產(chǎn)漆酶菌株的樣品；產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素，在篩選培養(yǎng)基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株，篩選時(shí)可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落；在涂布平板上生長(zhǎng)的菌落可能還有其他雜菌，可再通過平板劃線法進(jìn)一步純化；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法，即在一20°C的冷凍箱中保存。二、高考題型練6?回答與微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)有關(guān)的問題：（1）在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的常用凝固劑是。若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH,則應(yīng)在滅菌之（填“前”或“后