人教生物選修一專題2-課題2課件

生物必修①·人教版新課標(biāo)導(dǎo)學(xué)生物必修①·人教版新課標(biāo)導(dǎo)學(xué)專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與學(xué)習(xí)目標(biāo)課程標(biāo)準(zhǔn)1．研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。2．利用選擇培養(yǎng)基從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌。(重點)3．利用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌數(shù)目的測定。(難點)1．用土壤浸出液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。2．以尿素為氮源，測定能生長細(xì)菌的數(shù)量。學(xué)習(xí)目標(biāo)課程標(biāo)準(zhǔn)1．研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用1自主學(xué)習(xí)2新知解讀3指點迷津4核心素養(yǎng)5問題釋疑6知識構(gòu)建7訓(xùn)練鞏固8課時作業(yè)1自主學(xué)習(xí)2新知解讀3指點迷津4核心素養(yǎng)5問題釋疑6知識構(gòu)建自主學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)一、篩選菌株1．自然界中目的菌株篩選的依據(jù)：根據(jù)它對____________的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。2．實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有利于____________生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時________或________其他微生物生長。3．篩選分解尿素的細(xì)菌：在選擇培養(yǎng)基的配方中，把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一________，原則上只有能夠利用________的微生物才能夠生長。生存環(huán)境目的菌株抑制阻止氮源尿素生存環(huán)境目的菌株抑制阻止氮源尿素二、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法1．常用方法：________________________法。2．統(tǒng)計依據(jù)：當(dāng)樣品的__________足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個________。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。3．操作：(1)設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性。(2)為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌株數(shù)在___________的平板進(jìn)行計數(shù)。4．計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的______________，V代表涂布平板時所用的________________，M代表____________。間接計數(shù)(活菌計數(shù))稀釋度活菌30～300平均菌落數(shù)稀釋液的體積稀釋倍數(shù)二、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法間接計數(shù)(活菌計數(shù))稀釋度活菌3三、設(shè)置對照1．對照實驗：是指除了______________以外，其他條件都相同的實驗。2．主要目的：排除實驗組中______________對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。例如，為了確認(rèn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染，需以不進(jìn)行接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)作為空白對照。被測試條件非測試因素被測試條件非測試因素四、實驗設(shè)計1．土壤取樣：(1)取樣原因：土壤有“微生物的______________”之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量________，種類________。(2)土壤要求：富含__________，pH接近________且潮濕。(3)取樣部位：距地表約______________的土壤層。2．樣品稀釋：(1)稀釋原因：樣品的____________直接影響平板上生長的____________。(2)稀釋標(biāo)準(zhǔn)：選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，保證獲得菌落數(shù)在___________，便于計數(shù)。天然培養(yǎng)基最大最多有機(jī)質(zhì)中性3～8cm稀釋程度菌落數(shù)目30～300四、實驗設(shè)計天然培養(yǎng)基最大最多有機(jī)質(zhì)中性3～8c3．微生物的培養(yǎng)與觀察：(1)培養(yǎng)：根據(jù)不同微生物的需要，控制適宜的培養(yǎng)________和培養(yǎng)時間。(2)觀察。①觀察方法：每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。②菌落的特征：包括菌落的________、________、隆起程度和________等。溫度形狀大小顏色溫度形狀大小顏色五、操作提示1．無菌操作：(1)取土樣的用具在使用前都需要__________。(2)實驗操作均應(yīng)在__________進(jìn)行。2．做好標(biāo)記：本實驗使用的平板和試管比較多，為避免混淆，使用前應(yīng)標(biāo)明培養(yǎng)基的________、____________以及平板上培養(yǎng)樣品的__________等。3．制定計劃：對于耗時較長的生物實驗，要事先制定計劃，以便提高_(dá)___________。4．菌種鑒定：細(xì)菌合成的________將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的________增強(qiáng)。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，若指示劑變______，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。滅菌火焰旁種類培養(yǎng)日期稀釋度工作效率脲酶堿性酚紅紅五、操作提示滅菌火焰旁種類培養(yǎng)日期稀釋度工作效率？思考土壤微生物種類最多、數(shù)量最大的原因是什么？提示：土壤中營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，環(huán)境條件適宜等。？思考1．選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。 ()分析：選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基具有分離、鑒定作用。2．統(tǒng)計菌落數(shù)目時為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)目最多的平板進(jìn)行統(tǒng)計。 ()分析：統(tǒng)計菌落數(shù)目時為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行統(tǒng)計。判斷題××1．選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。 ()判斷題3．統(tǒng)計菌落數(shù)目時，統(tǒng)計的菌落數(shù)就是活菌的實際數(shù)目。 ()分析：由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。4．設(shè)置對照的目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。 ()5．統(tǒng)計菌落數(shù)目的理論依據(jù)是一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。 ()6．統(tǒng)計菌落數(shù)目時應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。 ()×√√√3．統(tǒng)計菌落數(shù)目時，統(tǒng)計的菌落數(shù)就是活菌的實際數(shù)目。 (新知解讀新知解讀1．原理人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物生長。2．實例從熱泉中篩選出Taq細(xì)菌。熱泉70～80℃的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物，而使耐熱的Taq細(xì)菌脫穎而出。知識點1篩選菌株的原理與方法知識貼士科學(xué)家從該細(xì)菌中分離到的TaqDNA聚合酶能夠忍受93℃左右的高溫。1．原理知識點1篩選菌株的原理與方法知識貼士3．選擇培養(yǎng)基(1)概念：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。(2)原理：根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基。例如：用培養(yǎng)基選擇能分解尿素的微生物的原理培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源，而不能生長、繁殖，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出能分解尿素的微生物。3．選擇培養(yǎng)基(3)方法①在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的“加入”是在培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入。②改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如，缺乏氮源時可以分離固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分離出能消除石油污染的微生物。③改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物。人教生物選修一專題2-課題2課件用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是 ()A．未接種的選擇培養(yǎng)基 B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D．接種了的選擇培養(yǎng)基[解析]

將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量原則。C典例1用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照〔變式訓(xùn)練1〕下面是某一課題將用到的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)下表回答下面的問題：編號成分含量①KH2PO41.4g②Na2HPO42.1g③MgSO4·7H2O0.2g④葡萄糖10.g⑤尿素1.0g⑥瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL〔變式訓(xùn)練1〕下面是某一課題將用到的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)下(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源的是__________，提供氮源的是________。(2)絕大多數(shù)微生物能利用__________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解________。(3)分析該培養(yǎng)基的配方，該培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，又是如何進(jìn)行選擇的？__________________________________________________________________________________葡萄糖尿素葡萄糖尿素具有。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以分離到產(chǎn)生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。葡萄糖尿素葡萄糖尿素具有。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可[解析]

碳源是提供碳元素的物質(zhì)，氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的原則是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。人教生物選修一專題2-課題2課件1．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法微生物生長量的測定有計數(shù)法、重量法、生理指標(biāo)法等方法，一般使用計數(shù)法。計數(shù)法可分為直接計數(shù)法和間接計數(shù)法，兩者的比較如下表所示。知識點2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法及設(shè)置對照項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法原理利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌1．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法知識點2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法及設(shè)置對照項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法主要用具顯微鏡、細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板培養(yǎng)基計數(shù)依據(jù)菌體本身培養(yǎng)基上的菌落數(shù)優(yōu)點計數(shù)方便、操作簡單計數(shù)的活菌缺點死菌、活菌都計算在內(nèi)操作較復(fù)雜，且有一定誤差計算公式每毫升原液含菌數(shù)＝(每格平均菌體數(shù)×400)÷計數(shù)室容積×稀釋倍數(shù)①注：①400是常數(shù)。每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M。其中，C表示某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法主要用具顯微鏡、細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計知識貼士(1)間接計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因有兩個：①當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起繁殖時，平板上觀察到的只是一個菌落；②統(tǒng)計結(jié)果只是活細(xì)菌產(chǎn)生的菌落數(shù)，而不包括死細(xì)菌數(shù)目。(2)為使結(jié)果接近真實值，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)；要設(shè)置重復(fù)組，取其平均值。知識貼士2．設(shè)置對照(1)對照實驗：是指除了被測試的條件外，其他條件都相同的實驗。(2)主要目的：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。3．稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計活菌數(shù)(1)原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少活菌。2．設(shè)置對照(2)操作設(shè)置對照組，增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性。將待測樣品經(jīng)一系列10倍稀釋，然后選擇三個稀釋度的菌液，分別取0．1mL接種到已制備好的平板上，然后用無菌涂布器將菌液涂布于整個平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)，計算菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實值，可將同一稀釋度加到三個或三個以上的平板上，經(jīng)涂布、培養(yǎng)、計算出菌落平均數(shù)。(2)操作用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是 ()A．涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B．涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233D典例2用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)[解析]

在設(shè)計實驗時，一定要至少涂布3個平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性，所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。人教生物選修一專題2-課題2課件〔變式訓(xùn)練2〕用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)。原因是 ()A．平板上的一個菌落就是一個細(xì)菌 B．菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的C．此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌 D．此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)一定與活菌的實際數(shù)相同[解析]

用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，平板上的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌，但偶爾也能來自兩個或以上細(xì)菌，所以此方法統(tǒng)計的菌數(shù)可能與活菌的實際數(shù)不相同。C〔變式訓(xùn)練2〕用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中，用無菌小鐵鏟鏟去表層土，迅速取土壤并裝入無菌信封密封↓制備培養(yǎng)基準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基，以尿素為唯一氮源制備9個平板培養(yǎng)基知識點3土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)過程土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中，用無菌小鐵鏟鏟去表層土，迅速樣品的稀釋在火焰旁稱取土壤10g，放入盛有90mL無菌水的三角燒瓶中，振搖使土樣與水充分混合，將菌分散。制成101倍土壤稀釋液，用一支1mL無菌吸管從中吸取1mL土壤懸液注入盛有9mL無菌水試管中，吹吸三次，使充分混勻，制成102倍土壤稀釋液，以此類推制成103、104、105、106倍土壤稀釋液↓取樣涂布在上述培養(yǎng)基的9個平板底面，每三個一組分別用記號筆寫上104、105、106倍的三種稀釋液，然后用三支1mL無菌吸管分別由104、105、106倍的三管土壤稀釋液中吸取0．1mL對號放入已寫好稀釋度的平板中，用無菌涂布器在培養(yǎng)基表面輕輕地涂布均勻人教生物選修一專題2-課題2課件(如圖)(如圖)人教生物選修一專題2-課題2課件(2017·江蘇鹽城中學(xué)高二期末)下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是 ()A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0．1mL，分別涂布于各組平板上C．將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)D典例3(2017·江蘇鹽城中學(xué)高二期末)下列是關(guān)于“檢測[解析]

用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，先經(jīng)高溫、高壓滅菌，后倒平板，A正確；測定土壤中細(xì)菌總數(shù)利用稀釋涂布平板法，即取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0．1ml，分別涂布于各組平板上，B正確；平板倒置后，將實驗組和對照組在37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時，C正確；確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D錯誤。人教生物選修一專題2-課題2課件〔變式訓(xùn)練3〕在“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗中，關(guān)于“選擇培養(yǎng)”步驟敘述正確的是 ()A．可以增加分解尿素的細(xì)菌的濃度B．可以減少分解尿素的細(xì)菌的濃度C．所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基 D．所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基[解析]

選擇培養(yǎng)可以增加分解尿素的細(xì)菌的濃度，實驗室里用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。A〔變式訓(xùn)練3〕在“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗中指點迷津指點迷津一、選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的區(qū)別(規(guī)律方法)培養(yǎng)基種類特點用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進(jìn)所需要的微生物生長培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；用尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于分離分解尿素的細(xì)菌)鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈現(xiàn)紫黑色)一、選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的區(qū)別(規(guī)律方法)培養(yǎng)基種類特點用在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源)，以分離出能分解尿素的細(xì)菌，這種加入尿素的培養(yǎng)基在功能上屬于 ()A．選擇培養(yǎng)基 B．固體培養(yǎng)基C．液體培養(yǎng)基 D．鑒別培養(yǎng)基[解析]

培養(yǎng)基按用途分類，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，按物理性質(zhì)分類，分為液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基能分離出以尿素為唯一氮源的細(xì)菌，故是選擇培養(yǎng)基。A典例4在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源)，以分離出能分解尿素知識貼士不能正確區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的特點和用途，是此類問題出錯的主要原因。知識貼士二、微生物的培養(yǎng)與分離技術(shù)微生物培養(yǎng)中所需的營養(yǎng)及功能、培養(yǎng)基的配制原則和類型、無菌操作技術(shù)等是進(jìn)行微生物培養(yǎng)與分離必不可少的知識。1．培養(yǎng)基的制備計算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板。人教生物選修一專題2-課題2課件2．無菌技術(shù)無菌技術(shù)主要指消毒、滅菌和無菌操作。實驗室中常用紫外線或化學(xué)藥劑消毒，如接種室的紫外線消毒及用酒精擦拭雙手消毒。滅菌的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，主要是針對培養(yǎng)器具、接種器具和培養(yǎng)基的滅菌。另外，還需注意操作過程中無菌環(huán)境的營造，一是可以在滅菌的接種箱中進(jìn)行，二是在酒精燈火焰附近所形成的無菌區(qū)進(jìn)行。人教生物選修一專題2-課題2課件3．倒平板嚴(yán)格按照教材所示的操作步驟進(jìn)行。倒平板時需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近無菌區(qū)進(jìn)行。平板冷卻凝固后，將平板倒置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣處理可防止蒸發(fā)的水分冷卻后在皿蓋上形成水珠落在培養(yǎng)基上，造成污染等。4．平板劃線操作通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，可得到單個分離的菌落。人教生物選修一專題2-課題2課件5．稀釋涂布平板將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋后再涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。6．選擇培養(yǎng)基用來分離某種特定的微生物在選擇培養(yǎng)基配制過程中要注意起選擇作用的成分，如分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基中的特定成分是尿素。人教生物選修一專題2-課題2課件富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一，主要是指利用不同微生物的生命活動特點的不同，限定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點，從物理、化學(xué)、生物等多個方面進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、壓強(qiáng)、光照、氧氣、營養(yǎng)等。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。據(jù)圖回答問題。典例5富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一，主要是人教生物選修一專題2-課題2課件(1)本實驗所需培養(yǎng)基為______________，碳源為________________。(2)實驗原理是__________________________________________________________________________________________________________。(3)①～③重復(fù)培養(yǎng)的目的是______________________________________。(4)⑤的菌落中大部分是能降解________________的微生物。(5)⑥為________組，⑦為________組，設(shè)置⑥的目的是_________________________________________________。(6)⑤→⑥采用______________法。將單菌落接種到⑥的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污染，應(yīng)注意的事項是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。選擇培養(yǎng)基對羥基苯甲酸利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物增大分解對羥基苯甲酸的微生物的比例對羥基苯甲酸對照實驗說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目的微生物單菌落挑取 接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在火焰旁冷卻后，將培養(yǎng)皿蓋打開一條縫隙，挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物(1)本實驗所需培養(yǎng)基為______________，碳源為[解析]

本實驗所用培養(yǎng)基是以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)的微生物是能降解對羥基苯甲酸的微生物。經(jīng)過①②③的重復(fù)培養(yǎng)，增大了分解對羥基苯甲酸的微生物的比例。最后通過設(shè)置對照及單菌落挑取法將培養(yǎng)基上的單菌落分別接種到含有對羥基苯甲酸及不含有該物質(zhì)的培養(yǎng)基上，驗證是否得到了目的微生物。接種過程中為防止污染，應(yīng)注意進(jìn)行一系列的無菌操作。人教生物選修一專題2-課題2課件核心素養(yǎng)核心素養(yǎng) 兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230；第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212和256，該同學(xué)以這三個平板上菌落數(shù)的平均值163作為統(tǒng)計結(jié)果。你認(rèn)為這兩位同學(xué)的實驗應(yīng)如何改進(jìn)？給我們什么啟示？_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________案例提示：第一位同學(xué)只涂布了一個平板，沒有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題，涂布了三個平板，但是，其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將三個平板的計數(shù)值用來求平均值。 兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)[解析]

在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少三個平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實驗結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性。在分析實驗結(jié)果時，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不一致，意味著操作有誤，需要重新實驗。[解析]在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少三個平板，作為重復(fù)組，[規(guī)律總結(jié)]空白對照和重復(fù)實驗的區(qū)別空白對照和重復(fù)實驗的目的是不同的，空白對照的目的是排除因培養(yǎng)基制作不合格導(dǎo)致的實驗誤差，而重復(fù)實驗的目的則是用來消除因?qū)嶒炛谐霈F(xiàn)的偶然事件對實驗結(jié)果的影響，兩者都能增強(qiáng)實驗結(jié)果的說服力。人教生物選修一專題2-課題2課件問題釋疑問題釋疑教材P22“本課題使用的培養(yǎng)基配方”分析1．在該培養(yǎng)基配方中，為微生物的生長提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素。2．該培養(yǎng)基對微生物具有選擇作用，其選擇機(jī)制是只有能夠以尿素作為氮源的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長。教材P22“旁欄思考題”統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計3個平板，計算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M[其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)]進(jìn)行計算。教材P22“本課題使用的培養(yǎng)基配方”分析教材P22“統(tǒng)計菌落數(shù)目”實例分析第一位同學(xué)只涂布了一個平板，沒有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題，涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。教材P24“旁欄思考題”這是因為土壤中各類微生物的數(shù)量(單位：株/kg)是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中，好氧及兼性厭氧細(xì)菌約為2185萬，放線菌約為477萬，霉菌約為23．1萬。因此，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離，同時還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。不同。103～107倍稀釋液。教材P22“統(tǒng)計菌落數(shù)目”實例分析知識構(gòu)建知識構(gòu)建人教生物選修一專題2-課題2課件訓(xùn)練鞏固訓(xùn)練鞏固課時作業(yè)課時作業(yè)人教生物選修一專題2-課題2課件生物必修①·人教版新課標(biāo)導(dǎo)學(xué)生物必修①·人教版新課標(biāo)導(dǎo)學(xué)專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與學(xué)習(xí)目標(biāo)課程標(biāo)準(zhǔn)1．研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。2．利用選擇培養(yǎng)基從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌。(重點)3．利用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌數(shù)目的測定。(難點)1．用土壤浸出液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。2．以尿素為氮源，測定能生長細(xì)菌的數(shù)量。學(xué)習(xí)目標(biāo)課程標(biāo)準(zhǔn)1．研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用1自主學(xué)習(xí)2新知解讀3指點迷津4核心素養(yǎng)5問題釋疑6知識構(gòu)建7訓(xùn)練鞏固8課時作業(yè)1自主學(xué)習(xí)2新知解讀3指點迷津4核心素養(yǎng)5問題釋疑6知識構(gòu)建自主學(xué)習(xí)自主學(xué)習(xí)一、篩選菌株1．自然界中目的菌株篩選的依據(jù)：根據(jù)它對____________的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。2．實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有利于____________生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時________或________其他微生物生長。3．篩選分解尿素的細(xì)菌：在選擇培養(yǎng)基的配方中，把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一________，原則上只有能夠利用________的微生物才能夠生長。生存環(huán)境目的菌株抑制阻止氮源尿素生存環(huán)境目的菌株抑制阻止氮源尿素二、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法1．常用方法：________________________法。2．統(tǒng)計依據(jù)：當(dāng)樣品的__________足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個________。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。3．操作：(1)設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性。(2)為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌株數(shù)在___________的平板進(jìn)行計數(shù)。4．計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的______________，V代表涂布平板時所用的________________，M代表____________。間接計數(shù)(活菌計數(shù))稀釋度活菌30～300平均菌落數(shù)稀釋液的體積稀釋倍數(shù)二、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法間接計數(shù)(活菌計數(shù))稀釋度活菌3三、設(shè)置對照1．對照實驗：是指除了______________以外，其他條件都相同的實驗。2．主要目的：排除實驗組中______________對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。例如，為了確認(rèn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染，需以不進(jìn)行接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)作為空白對照。被測試條件非測試因素被測試條件非測試因素四、實驗設(shè)計1．土壤取樣：(1)取樣原因：土壤有“微生物的______________”之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量________，種類________。(2)土壤要求：富含__________，pH接近________且潮濕。(3)取樣部位：距地表約______________的土壤層。2．樣品稀釋：(1)稀釋原因：樣品的____________直接影響平板上生長的____________。(2)稀釋標(biāo)準(zhǔn)：選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，保證獲得菌落數(shù)在___________，便于計數(shù)。天然培養(yǎng)基最大最多有機(jī)質(zhì)中性3～8cm稀釋程度菌落數(shù)目30～300四、實驗設(shè)計天然培養(yǎng)基最大最多有機(jī)質(zhì)中性3～8c3．微生物的培養(yǎng)與觀察：(1)培養(yǎng)：根據(jù)不同微生物的需要，控制適宜的培養(yǎng)________和培養(yǎng)時間。(2)觀察。①觀察方法：每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。②菌落的特征：包括菌落的________、________、隆起程度和________等。溫度形狀大小顏色溫度形狀大小顏色五、操作提示1．無菌操作：(1)取土樣的用具在使用前都需要__________。(2)實驗操作均應(yīng)在__________進(jìn)行。2．做好標(biāo)記：本實驗使用的平板和試管比較多，為避免混淆，使用前應(yīng)標(biāo)明培養(yǎng)基的________、____________以及平板上培養(yǎng)樣品的__________等。3．制定計劃：對于耗時較長的生物實驗，要事先制定計劃，以便提高_(dá)___________。4．菌種鑒定：細(xì)菌合成的________將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的________增強(qiáng)。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，若指示劑變______，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。滅菌火焰旁種類培養(yǎng)日期稀釋度工作效率脲酶堿性酚紅紅五、操作提示滅菌火焰旁種類培養(yǎng)日期稀釋度工作效率？思考土壤微生物種類最多、數(shù)量最大的原因是什么？提示：土壤中營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，環(huán)境條件適宜等。？思考1．選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。 ()分析：選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基具有分離、鑒定作用。2．統(tǒng)計菌落數(shù)目時為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)目最多的平板進(jìn)行統(tǒng)計。 ()分析：統(tǒng)計菌落數(shù)目時為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行統(tǒng)計。判斷題××1．選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。 ()判斷題3．統(tǒng)計菌落數(shù)目時，統(tǒng)計的菌落數(shù)就是活菌的實際數(shù)目。 ()分析：由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。4．設(shè)置對照的目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。 ()5．統(tǒng)計菌落數(shù)目的理論依據(jù)是一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。 ()6．統(tǒng)計菌落數(shù)目時應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。 ()×√√√3．統(tǒng)計菌落數(shù)目時，統(tǒng)計的菌落數(shù)就是活菌的實際數(shù)目。 (新知解讀新知解讀1．原理人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物生長。2．實例從熱泉中篩選出Taq細(xì)菌。熱泉70～80℃的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物，而使耐熱的Taq細(xì)菌脫穎而出。知識點1篩選菌株的原理與方法知識貼士科學(xué)家從該細(xì)菌中分離到的TaqDNA聚合酶能夠忍受93℃左右的高溫。1．原理知識點1篩選菌株的原理與方法知識貼士3．選擇培養(yǎng)基(1)概念：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。(2)原理：根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基。例如：用培養(yǎng)基選擇能分解尿素的微生物的原理培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源，而不能生長、繁殖，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出能分解尿素的微生物。3．選擇培養(yǎng)基(3)方法①在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的“加入”是在培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入。②改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如，缺乏氮源時可以分離固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分離出能消除石油污染的微生物。③改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物。人教生物選修一專題2-課題2課件用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是 ()A．未接種的選擇培養(yǎng)基 B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D．接種了的選擇培養(yǎng)基[解析]

將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量原則。C典例1用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照〔變式訓(xùn)練1〕下面是某一課題將用到的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)下表回答下面的問題：編號成分含量①KH2PO41.4g②Na2HPO42.1g③MgSO4·7H2O0.2g④葡萄糖10.g⑤尿素1.0g⑥瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL〔變式訓(xùn)練1〕下面是某一課題將用到的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)下(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源的是__________，提供氮源的是________。(2)絕大多數(shù)微生物能利用__________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解________。(3)分析該培養(yǎng)基的配方，該培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，又是如何進(jìn)行選擇的？__________________________________________________________________________________葡萄糖尿素葡萄糖尿素具有。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以分離到產(chǎn)生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。葡萄糖尿素葡萄糖尿素具有。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可[解析]

碳源是提供碳元素的物質(zhì)，氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的原則是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。人教生物選修一專題2-課題2課件1．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法微生物生長量的測定有計數(shù)法、重量法、生理指標(biāo)法等方法，一般使用計數(shù)法。計數(shù)法可分為直接計數(shù)法和間接計數(shù)法，兩者的比較如下表所示。知識點2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法及設(shè)置對照項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法原理利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌1．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法知識點2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法及設(shè)置對照項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法主要用具顯微鏡、細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板培養(yǎng)基計數(shù)依據(jù)菌體本身培養(yǎng)基上的菌落數(shù)優(yōu)點計數(shù)方便、操作簡單計數(shù)的活菌缺點死菌、活菌都計算在內(nèi)操作較復(fù)雜，且有一定誤差計算公式每毫升原液含菌數(shù)＝(每格平均菌體數(shù)×400)÷計數(shù)室容積×稀釋倍數(shù)①注：①400是常數(shù)。每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M。其中，C表示某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法主要用具顯微鏡、細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計知識貼士(1)間接計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因有兩個：①當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起繁殖時，平板上觀察到的只是一個菌落；②統(tǒng)計結(jié)果只是活細(xì)菌產(chǎn)生的菌落數(shù)，而不包括死細(xì)菌數(shù)目。(2)為使結(jié)果接近真實值，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)；要設(shè)置重復(fù)組，取其平均值。知識貼士2．設(shè)置對照(1)對照實驗：是指除了被測試的條件外，其他條件都相同的實驗。(2)主要目的：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。3．稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計活菌數(shù)(1)原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少活菌。2．設(shè)置對照(2)操作設(shè)置對照組，增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性。將待測樣品經(jīng)一系列10倍稀釋，然后選擇三個稀釋度的菌液，分別取0．1mL接種到已制備好的平板上，然后用無菌涂布器將菌液涂布于整個平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)，計算菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實值，可將同一稀釋度加到三個或三個以上的平板上，經(jīng)涂布、培養(yǎng)、計算出菌落平均數(shù)。(2)操作用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是 ()A．涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B．涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238C．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D．涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233D典例2用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)[解析]

在設(shè)計實驗時，一定要至少涂布3個平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性，所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。人教生物選修一專題2-課題2課件〔變式訓(xùn)練2〕用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)。原因是 ()A．平板上的一個菌落就是一個細(xì)菌 B．菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的C．此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌 D．此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)一定與活菌的實際數(shù)相同[解析]

用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，平板上的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌，但偶爾也能來自兩個或以上細(xì)菌，所以此方法統(tǒng)計的菌數(shù)可能與活菌的實際數(shù)不相同。C〔變式訓(xùn)練2〕用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中，用無菌小鐵鏟鏟去表層土，迅速取土壤并裝入無菌信封密封↓制備培養(yǎng)基準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基，以尿素為唯一氮源制備9個平板培養(yǎng)基知識點3土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)過程土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中，用無菌小鐵鏟鏟去表層土，迅速樣品的稀釋在火焰旁稱取土壤10g，放入盛有90mL無菌水的三角燒瓶中，振搖使土樣與水充分混合，將菌分散。制成101倍土壤稀釋液，用一支1mL無菌吸管從中吸取1mL土壤懸液注入盛有9mL無菌水試管中，吹吸三次，使充分混勻，制成102倍土壤稀釋液，以此類推制成103、104、105、106倍土壤稀釋液↓取樣涂布在上述培養(yǎng)基的9個平板底面，每三個一組分別用記號筆寫上104、105、106倍的三種稀釋液，然后用三支1mL無菌吸管分別由104、105、106倍的三管土壤稀釋液中吸取0．1mL對號放入已寫好稀釋度的平板中，用無菌涂布器在培養(yǎng)基表面輕輕地涂布均勻人教生物選修一專題2-課題2課件(如圖)(如圖)人教生物選修一專題2-課題2課件(2017·江蘇鹽城中學(xué)高二期末)下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是 ()A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0．1mL，分別涂布于各組平板上C．將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)D典例3(2017·江蘇鹽城中學(xué)高二期末)下列是關(guān)于“檢測[解析]

用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，先經(jīng)高溫、高壓滅菌，后倒平板，A正確；測定土壤中細(xì)菌總數(shù)利用稀釋涂布平板法，即取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0．1ml，分別涂布于各組平板上，B正確；平板倒置后，將實驗組和對照組在37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時，C正確；確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D錯誤。人教生物選修一專題2-課題2課件〔變式訓(xùn)練3〕在“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗中，關(guān)于“選擇培養(yǎng)”步驟敘述正確的是 ()A．可以增加分解尿素的細(xì)菌的濃度B．可以減少分解尿素的細(xì)菌的濃度C．所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基 D．所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基[解析]

選擇培養(yǎng)可以增加分解尿素的細(xì)菌的濃度，實驗室里用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。A〔變式訓(xùn)練3〕在“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗中指點迷津指點迷津一、選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的區(qū)別(規(guī)律方法)培養(yǎng)基種類特點用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進(jìn)所需要的微生物生長培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；用尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于分離分解尿素的細(xì)菌)鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈現(xiàn)紫黑色)一、選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的區(qū)別(規(guī)律方法)培養(yǎng)基種類特點用在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源)，以分離出能分解尿素的細(xì)菌，這種加入尿素的培養(yǎng)基在功能上屬于 ()A．選擇培養(yǎng)基 B．固體培養(yǎng)基C．液體培養(yǎng)基 D．鑒別培養(yǎng)基[解析]

培養(yǎng)基按用途分類，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，按物理性質(zhì)分類，分為液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基能分離出以尿素為唯一氮源的細(xì)菌，故是選擇培養(yǎng)基。A典例4在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源)，以分離出能分解尿素知識貼士不能正確區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的特點和用途，是此類問題出錯的主要原因。知識貼士二、微生物的培養(yǎng)與分離技術(shù)微生物培養(yǎng)中所需的營養(yǎng)及功能、培養(yǎng)基的配制原則和類型、無菌操作技術(shù)等是進(jìn)行微生物培養(yǎng)與分離必不可少的知識。1．培養(yǎng)基的制備計算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板。人教生物選修一專題2-課題2課件2．無菌技術(shù)無菌技術(shù)主要指消毒、滅菌和無菌操作。實驗室中常用紫外線或化學(xué)藥劑消毒，如接種室的紫外線消毒及用酒精擦拭雙手消毒。滅菌的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，主要是針對培養(yǎng)器具、接種器具和培養(yǎng)基的滅菌。另外，還需注意操作過程中無菌環(huán)境的營造，一是可以在滅菌的接種箱中進(jìn)行，二是在酒精燈火焰附近所形成的無菌區(qū)進(jìn)行。人教生物選修一專題2-課題2課件3．倒平板嚴(yán)格按照教材所示的操作步驟進(jìn)行。倒平板時需待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近無菌區(qū)進(jìn)行。平板冷卻凝固后，將平板倒置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣處理可防止蒸發(fā)的水分冷卻后在皿蓋上形成水珠落在培養(yǎng)基上，造成污染等。4．平板劃線操作通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，可得到單個分離的菌落。人教生物選修一專題2-課題2課件5．稀釋涂布平板將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋后再涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。6．選擇培養(yǎng)基用來分離某種特定的微生物在選擇培養(yǎng)基配制過程中要注意起選擇作用的成分，如分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基中的特定成分是尿素。人教生物選修一專題2-課題2課件富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一，主要是指利用不同微生物的生命活動特點的不同，限定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點，從物理、化學(xué)、生物等多個方面進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、壓強(qiáng)、光照、氧氣、營養(yǎng)等。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。據(jù)圖回答問題。典例5富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一，主要是人教生物選修一專題2-課題2課件(1)本實驗所需培養(yǎng)基為______________，碳源為________________。(2)實驗原理是__________________________________________________________________________________________________________。(3)①～③重復(fù)培養(yǎng)的目的是______________________________________。(4)⑤的菌落中大部分是能降解________________的微生物。(5)⑥為________組，⑦為________組，設(shè)置⑥的目的是_________________________________________________。(6)⑤→⑥采用______________