無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁(yè)次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1菌種試驗(yàn)用菌株多少傳代次數(shù)不得超過(guò)5代（從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0代），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。檢定菌種類(lèi)菌種號(hào)檢定菌種類(lèi)菌種號(hào)金黃色葡萄球菌【CMCC（B）26003】枯草芽胞桿菌【CMCC（B）63501】銅綠假單胞菌【CMCC（B）10104】生孢梭菌【CMCC（B）64941】白色念珠菌【CMCC（F）98001】黑曲霉【CMCC（F）98003】2菌液制備金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物接種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上，生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，于30～35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)；上述培養(yǎng)物用無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或%無(wú)菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液。白色念珠菌白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，于20～25℃培養(yǎng)24～48小時(shí)。上述培養(yǎng)物用無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或%無(wú)菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液。黑曲霉黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物接種至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，于20～25℃培養(yǎng)5～7天。加入3~5ml含%（ml/ml）聚山梨酯80的無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫，然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用含%（ml/ml）聚山梨酯80的無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或%無(wú)菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的菌懸液。備注：菌懸液若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用，若保存在2~8℃可在24小時(shí)內(nèi)使用；黑曲霉的孢子懸液可保存在2～8℃，在驗(yàn)證過(guò)的儲(chǔ)存期內(nèi)使用。3無(wú)菌試驗(yàn)用培養(yǎng)基的適用性檢查具體方法培養(yǎng)基名稱(chēng)胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度20~25℃30~35℃無(wú)菌性檢查每批培養(yǎng)基隨機(jī)取不少于5支(瓶)，置各培養(yǎng)基規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天，應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。靈敏度檢查試驗(yàn)用菌株枯草芽胞桿菌、白色念珠菌、黑曲霉金黃葡萄球菌、銅綠假單孢菌、生孢梭菌培養(yǎng)基裝量9ml/管12ml/管培養(yǎng)時(shí)間5天3天接種方法分別接種各試驗(yàn)用菌懸液于該培養(yǎng)基（2支）中，接種量小于100cfu；另1支