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文檔簡介
動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)1動(dòng)物生理學(xué)常用器械一.蛙類手術(shù)器械1.探針:用于破壞腦和脊髓。2.粗剪刀:用于剪骨、肌肉、皮膚等較粗硬組織。3.眼科剪;用于剪神經(jīng)、血管等細(xì)軟組織。4.外科鑷:用于夾捏組織和牽提切口處的皮膚。5.眼科鑷:用于夾捏細(xì)軟組織。6.玻璃分針:用于分離神經(jīng)和血管等。7.蛙板:用于固定蛙類。動(dòng)物生理學(xué)常用器械一.蛙類手術(shù)器械2二.哺乳類手術(shù)器械8.玻璃板:用于制備神經(jīng)肌肉標(biāo)本。1.注射器:用于注射藥液。2.剪毛翦:用于術(shù)部剪毛。3.手術(shù)刀:用于切割皮膚、肌肉和臟器。4.止血鉗:除用于止血外,有齒的用于提起皮膚,無齒的用于分離皮下組織。5.外科鑷:用于夾捏較大或較厚的組織,牽拉皮膚切口。6.外科剪:用于剪皮膚、皮下組織、肌肉等。7.眼科剪:用于剪血管、神經(jīng)。8.眼科鑷:用于捏和分離神經(jīng)、血管等。9,骨鉗:用于咬切骨質(zhì)。10.骨剪;用于剪切骨質(zhì)。11.顱骨鉆:用于鉆孔開顱12.持針鉗:用于夾持縫合針。13.縫合針、線:用于縫合皮膚、肌肉臟器等。二.哺乳類手術(shù)器械3動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件4動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
常用酌麻醉藥物動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
常用酌麻醉藥物5動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
常用酌麻醉藥物動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
常用酌麻醉藥物6動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
常用酌麻醉藥物動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
常用酌麻醉藥物7常用的給藥方法1.經(jīng)口投藥法(口服、灌服)2.注射給藥法(皮下、肌肉、腹腔、靜脈)常用的給藥方法1.經(jīng)口投藥法(口服、灌服)8常用的動(dòng)物麻醉方法及注意事項(xiàng)1.全身麻醉:吸入、注射2.局部麻醉:點(diǎn)眼、注射麻醉注意事項(xiàng)1、麻醉前應(yīng)正確選用麻醉藥品、用藥劑量及給藥途徑。2、密切觀察動(dòng)物麻醉狀態(tài)及反應(yīng),以便準(zhǔn)確判斷麻醉深度。3、如麻醉較淺,動(dòng)物出現(xiàn)掙扎或呼吸急促等,需補(bǔ)充麻醉藥以維持適當(dāng)?shù)穆樽?。一次補(bǔ)充藥量不宜超過原總用藥量的五分之一。4、麻醉過程中,應(yīng)隨時(shí)保持呼吸道通暢,并注意保溫。5、在手術(shù)操作復(fù)雜、創(chuàng)傷大、實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長或麻醉深度不理想等情況下,可配合局部浸潤麻醉或基礎(chǔ)麻醉。6、實(shí)驗(yàn)中注意液體的輸入量及排出量,維持體液平衡,防止酸中毒及肺水腫的發(fā)生。常用的動(dòng)物麻醉方法及注意事項(xiàng)1.全身麻醉:吸入、注射9實(shí)驗(yàn)一血液的組成[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解血液的組成,區(qū)別血漿、血清及纖維蛋白。實(shí)驗(yàn)一血液的組成[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解血液的組成,區(qū)別血漿10[實(shí)驗(yàn)原理]
血液是由液態(tài)的血漿和懸浮于血漿中的血細(xì)胞組成。在血液中加一定量的抗凝劑檸檬酸鈉或草酸鉀,使血液抗凝,由于血細(xì)胞比重略大于血漿,靜置或經(jīng)過離心,將出現(xiàn)分層。上面無色(或淡黃色)透明的部分為血漿,下面紅色部分為紅細(xì)胞,在紅細(xì)胞之上有一薄層灰白色部分為白細(xì)胞和血小板。下部壓緊的血細(xì)胞占全血的體積比稱為紅細(xì)胞壓積,又叫紅細(xì)胞比容。若不加抗凝劑任血液自然凝固或去纖維蛋白,就可區(qū)別血清、血塊及纖維蛋白。[實(shí)驗(yàn)原理]血液是由液態(tài)的血漿和懸浮于血漿中的血細(xì)胞組11動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件12[材料及用具]
雞,新鮮血,抗凝血,離心管,離心機(jī),小試管刷,燒杯,試管架,試管,天平。[方法及步驟]制備抗凝血:常用的抗凝劑為3.8%檸檬酸鈉,其用量:1ml血需5mg檸檬酸鈉→10ml血→50mg檸檬酸鈉。(計(jì)算50mg檸檬酸鈉相當(dāng)于多少毫升3.8%檸檬酸鈉)100:3.8g=x:50mg100:3800mg=x:50mgx=(100×50)÷3800≈1.32檸檬酸鈉抗凝機(jī)理:檸檬酸鈉與血中的鈣離子結(jié)合,形成可溶化物而抗凝。其優(yōu)點(diǎn)是毒性低。[材料及用具]雞,新鮮血,抗凝血,離心管,離心機(jī),小試管刷13[方法及步驟]1.取抗凝血(1毫升血液加檸檬酸鈉5毫克;或1毫升血液加草酸鉀2毫克)10毫升(如抗凝血放置過久,還須將其充分搖勻),置于有刻度的離心管中。將離心管放入電動(dòng)離心機(jī)中,以每分鐘3000轉(zhuǎn)的速度旋轉(zhuǎn)20—30分鐘,使血細(xì)胞完全沉于管底,然后取出離心管觀察,其上層為血漿,底層為壓緊的深紅色的紅細(xì)胞,中間一白色薄層為白細(xì)胞和血小板。[方法及步驟]142.取新鮮血50毫升放在小燒杯中,用小試管刷攪動(dòng)數(shù)分鐘后,取出試管刷,可見試管刷上有許多絲狀物纏繞,此即為纖維蛋白。用水沖洗后,觀察其顏色及韌性。脫去纖維蛋白的血液稱“去纖維蛋白血”。3.取“去纖維蛋白血液”10毫升,依1法離心后,上層為血清,下層為血細(xì)胞。觀察其顏色及透明度。4.取新鮮血10毫升置試管中,靜置片刻。則見有凝固現(xiàn)象發(fā)生,渾濁的血變?yōu)橐粭l血凝塊(凝塊稱血塊),血塊回縮,周圍有清亮的液體析出,該液體為血清。為加速此過程,可先離心幾分鐘或略加溫。2.取新鮮血50毫升放在小燒杯中,用小試管刷攪動(dòng)數(shù)分鐘后,取15[注意事項(xiàng)]使用離心機(jī)時(shí),應(yīng)用天平稱量使離心機(jī)旋轉(zhuǎn)軸兩側(cè)相應(yīng)的兩個(gè)套筒及其內(nèi)容物的總重量相等。開動(dòng)離心機(jī)應(yīng)由慢而快,使轉(zhuǎn)速逐漸達(dá)到3000轉(zhuǎn)/分,停止時(shí)應(yīng)由快而慢逐漸停止。要求與思考題1.血漿與血清有哪些區(qū)別?2.寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告,該實(shí)驗(yàn)報(bào)告采用畫圖法最直觀。[注意事項(xiàng)]16滲溶液的抵抗力越大,紅細(xì)胞在量效關(guān)系:先加1~2滴,觀察效應(yīng),不明顯可再用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(圖B)。[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯學(xué)習(xí)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本的組織分離技術(shù);再將標(biāo)本背面向上,用鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支,直至腘窩(圖A),并搭放在腓腸肌上。[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響。兔的胃腸運(yùn)動(dòng)活躍且運(yùn)動(dòng)形式典用任氏液洗去心內(nèi)外的余血后,注入新鮮任氏液備用。脊髓蟾蜍的制備:左手持蟾蜍,用食指分開其上下頜,右手用粗剪刀由兩側(cè)口裂沿口角至眼后方剪去蟾蜍腦部,保留下頜和脊髓,制備成去腦的脊髓蟾蜍。仔細(xì)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,記錄觀標(biāo)本在任氏液中浸泡的時(shí)間不夠,興奮性不穩(wěn)定;使糖原合成酶的濃度增高,而且還使肝細(xì)胞內(nèi)球磷酸腺苷(cAMP)減②部分紅細(xì)胞溶血的試管:液體下層為紅細(xì)胞沉淀,上層出現(xiàn)透明淡紅(淡用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(圖B)。平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。反射弧包括感受器、傳入神經(jīng)、反射中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器五部分。[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
觀察胃腸道的各種運(yùn)動(dòng)形式,以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)[材料及設(shè)備]小白鼠,廣口瓶(或干燥器),水檢壓計(jì),鈉石灰,10實(shí)驗(yàn)十二胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響2、觀察相對(duì)正常情況下胃腸運(yùn)動(dòng)的形式,注意胃腸的蠕動(dòng)、逆蠕動(dòng)和實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白的測定[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
熟悉用比色法測定血紅蛋白的方法。[實(shí)驗(yàn)原理]
血紅蛋白測定的方法有多種,最常用而最簡單的是比色法。由于血紅蛋白的顏色,常隨結(jié)合的氧量多少而改變,因而不利于比色,但血紅蛋白與稀鹽酸作用后,能使亞鐵血紅素變成不易變色的棕色的高鐵血紅蛋白,用水稀釋后可與標(biāo)準(zhǔn)比色板比色,從而測得血紅蛋白含量。通常以每100毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)來表示。滲溶液的抵抗力越大,紅細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白的測定17[材料及用具]
血紅蛋白計(jì),抗凝血,吸血管,濾紙,
1/10N鹽酸,蒸餾水等。[材料及用具]血紅蛋白計(jì),抗凝血,吸血管,濾紙,18[方法及步驟]1.實(shí)驗(yàn)前先檢查血紅蛋白計(jì)的測定管是否清潔。2.將1/10N鹽酸加入測定管中至刻度“2”或“10%”處。3.用吸血管吸制備好的抗凝血至刻度20立方毫米處。4.將吸血管內(nèi)的血液完全移入稀釋管內(nèi),混合均勻,放置10分鐘。5.把稀釋管插入比色架中,使無刻度的兩側(cè)面位于空格的前后。6.用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水,邊滴邊抖動(dòng)手腕搖勻邊觀察顏色,直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色柱相同為止。7.從比色箱中取出測定管,讀出其中液體表面(凹面)的刻度。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100ml血液中血紅蛋白的克數(shù)。[方法及步驟]19[注意事項(xiàng)]
1.血液和鹽酸作用的時(shí)間不可少于10分鐘,否則,血紅蛋白不能充分轉(zhuǎn)變成高鐵血紅蛋白,使結(jié)果偏低。2.加蒸餾水時(shí),開始可以稍多加幾滴,隨后則不能過快,以防稀釋過頭。3.比色時(shí)最好在自然光下,而不應(yīng)在黃色光下進(jìn)行,以免影響結(jié)果。4.整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均應(yīng)注意避免起泡。[注意事項(xiàng)]20實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞的脆性試驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
紅細(xì)胞的理化特性及其變化受動(dòng)物自身狀況影響,在臨床上具有檢驗(yàn)診斷價(jià)值。通過紅細(xì)胞滲透脆性實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞對(duì)不同低滲溶液的滲透抵抗力,即測定正常動(dòng)物紅細(xì)胞滲透脆性的方法,理解細(xì)胞外液滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞的脆性試驗(yàn)21[實(shí)驗(yàn)原理]
正常紅細(xì)懸浮于等滲的血漿中,若置于高滲溶液內(nèi),則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮;反之,置于低滲溶液內(nèi),則水進(jìn)入紅細(xì)胞,使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼續(xù)下降,紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂,釋放血紅蛋白,稱之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一定的抵抗力,紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液的抵抗力越大,紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生溶血,即紅細(xì)胞滲透脆性越小。將血液滴入不同的低滲溶液中,可檢查紅細(xì)胞膜對(duì)于低滲溶液抵抗力的大小。[實(shí)驗(yàn)原理]正常紅細(xì)懸浮于等滲的血漿中,若置于高滲溶液內(nèi)22
紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)就是測定紅細(xì)胞對(duì)低于0.9%NaCl溶液的耐受能力。耐受力高者,紅細(xì)胞不易破裂,即脆性低,反之,耐受力低者,紅細(xì)胞易于破裂,即脆性高。凡上層溶液開始微呈淡紅色,而極大部分紅細(xì)胞下沉,稱開始溶血或最小抗力(紅細(xì)胞的最小抵抗力)。凡液體呈均勻紅色,管底無紅細(xì)胞下沉,則稱完全溶血或最大抗力(紅細(xì)胞的最大抵抗力)。[材料及用具]試管,試管架,吸管,移液管,抗凝血,1%NaCl,蒸餾水。紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)就是測定紅細(xì)胞對(duì)低于0.9%NaCl溶23[方法及步驟]1.先將試管分別排列在試管架上,按下表把1%NaCl,稀釋成不同濃度的低滲溶液,每管溶液均為2ml。
試管號(hào)123456789101%NaCl1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50蒸餾水0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50NaCl濃度0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.252.采取血液,并在上列各管中各加入大小相等的血液1滴,然后,用拇指堵住試管口,將試管慢慢倒置一、二次,使血液與管內(nèi)鹽水混合均勻。[方法及步驟]試管號(hào)123456789101%1.401.3243.在室溫中靜置1小時(shí),觀察結(jié)果:根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同,判斷紅細(xì)胞脆性。4.依上述說明,判定出開始溶血及開始完全溶血的氯化鈉濃度百分率。前者為紅細(xì)胞的最小抗力,后者為紅細(xì)胞的最大抗力。①未發(fā)生溶血的試管:液體下層為大量紅細(xì)胞沉淀,上層為無色透明,表明無紅細(xì)胞破裂。②部分紅細(xì)胞溶血的試管:液體下層為紅細(xì)胞沉淀,上層出現(xiàn)透明淡紅(淡紅棕)色,表明部分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂,稱為不完全溶血。③紅細(xì)胞全部溶血的試管:液體完全變成透明紅色,管底無紅細(xì)胞沉淀,表明紅細(xì)胞完全破裂,稱為完全溶血。3.在室溫中靜置1小時(shí),觀察結(jié)果:根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度25[注意事項(xiàng)]1.小試管要干燥,加血的量要一致,只加一滴。2.混勻時(shí),輕輕傾倒1~2次,減少機(jī)械震動(dòng),避免人為溶血。3.配制不同濃度的NaCl溶液時(shí)應(yīng)力求準(zhǔn)確、無誤。[注意事項(xiàng)]26[實(shí)驗(yàn)原理]心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性,但各部分的自動(dòng)節(jié)將腎上腺素或乙酰膽堿分別滴在小腸上,觀察小腸運(yùn)動(dòng)沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪去股骨上端的1/3(保留2/3),制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本(2)完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下,提起腓腸肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。固定胸套管或針頭(用膠布)后,即可開始實(shí)驗(yàn)觀察和記錄。受力高者,紅細(xì)胞不易破裂,即脆性低,反之,耐受力低者,紅細(xì)胞易于標(biāo)本在任氏液中浸泡的時(shí)間不夠,興奮性不穩(wěn)定;平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。住試管口,將試管慢慢倒置一、二次,使血液與管內(nèi)鹽水混合均勻。標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中備用。4.外科鑷:用于夾捏組織和牽提切口處的皮膚。8%檸檬酸鈉,其用量:1ml血需5mg檸檬酸蛙類手術(shù)器械1套,血管鉗1把,鐵支架和鐵夾1個(gè),玻璃杯,玻璃平皿,濾紙(約lcm×lcm),小棉球,紗布?jí)K,0.每次硫酸刺激后,應(yīng)及時(shí)用清水洗去皮膚上殘余的硫酸以免燒傷蟾蜍皮膚,并用紗布擦干以免稀釋硫酸溶液。穿透胸腔對(duì)胸內(nèi)負(fù)壓的影響:用粗針頭穿透靠右側(cè)胸腔,使胸膜腔與大氣直接相通,形成氣胸。凡上層溶液開始微呈淡紅色,而極大部分紅細(xì)胞下沉,稱開始溶血或最小/分,停止時(shí)應(yīng)由快而慢逐漸停止。(一)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備操作:動(dòng)物以20%烏拉坦溶液靜脈注射,麻醉后俯臥固定于通常以每100毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)來表示。坐骨神經(jīng)-腓腸肌分離步驟[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解小腸吸收與腸內(nèi)容物滲透壓間的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)四紅細(xì)胞沉降率(血沉)的測定[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
了解正常動(dòng)物紅細(xì)胞沉降率并掌握其測定方法。[實(shí)驗(yàn)原理]心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性,但各部分的自27[實(shí)驗(yàn)原理]
紅細(xì)胞在循環(huán)血液中具有懸浮穩(wěn)定性,但在血沉管中,會(huì)因重力逐漸下沉。將加有抗凝劑的血液置于一特制的具有刻度的玻管內(nèi),置于血沉架上,紅細(xì)胞因重力作用而逐漸下沉,上層留下一層黃色透明的血漿。經(jīng)一定時(shí)間(通常以第1小時(shí)末紅細(xì)胞下降的距離,作為沉降率的指標(biāo),簡稱為血沉)沉降的紅細(xì)胞上面的血漿柱的高度,即表示紅細(xì)胞的沉降率。血漿中的某些特性能改變紅細(xì)胞的沉降率,因此血沉可作為某些疾病檢測的指標(biāo)之一。[材料及用具]
血沉管,血沉管架,洗耳球,抗凝血,干棉球。[實(shí)驗(yàn)原理]紅細(xì)胞在循環(huán)血液中具有懸浮穩(wěn)定性,但在血沉管中28[方法及步驟]1.制備抗凝血(雞血)。2.用清潔、干燥的血沉管,小心地吸血至最高刻度“0”處,搽去血沉管尖端外周的血液。在吸血之前,須將血液充分搖勻(但不可過份振蕩以免紅細(xì)胞破壞)。吸血時(shí),要絕對(duì)避免產(chǎn)生氣泡,否則須重做。將吸有血液的血沉管垂直置于血沉管架上,分別在15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)(4只管),檢查血沉管上部血漿的高度,以毫米表示之,并將所得結(jié)果記錄于下表:時(shí)間15min30min45min1h血沉[方法及步驟]時(shí)間15min30min45min1h血沉29[注意事項(xiàng)]1.采血后實(shí)驗(yàn)應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完畢,否則血液放置過久,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.沉降管應(yīng)垂直豎立,不能稍有傾斜,不得有氣泡和漏血。3.沉降率隨溫度的升高而加快,故應(yīng)在室溫18—27℃時(shí)測定為宜。4.血沉管必須清結(jié),如內(nèi)壁不清潔可使血沉顯著變慢。[注意事項(xiàng)]30實(shí)驗(yàn)ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)ABO血型的鑒定31[實(shí)驗(yàn)原理]
ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面存在的凝集原決定的。存在A凝集原的稱為A血型,存在B凝集原的稱為B血型。而血清中還存在凝集素。當(dāng)A凝集原與抗A凝集素相遇或B凝集原與抗B凝集素相遇時(shí),會(huì)發(fā)生紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。一般A型標(biāo)準(zhǔn)血清中含有抗B凝集素,B型標(biāo)準(zhǔn)血清中含有抗A凝集素,因此可以用標(biāo)準(zhǔn)血清中的凝集素與被測者紅細(xì)胞反應(yīng),以確定其血型。[設(shè)計(jì)要求]
:已知甲某的血型為A型(或B型),現(xiàn)在又無標(biāo)準(zhǔn)血清,要求設(shè)計(jì)一實(shí)驗(yàn)來判斷乙某的血型?[實(shí)驗(yàn)原理]
ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞表面存32
33[材料及用具]
正常人,雙凹玻片,采血針,竹簽,75%酒精棉球,干棉球,玻璃蠟筆(記號(hào)筆),尖頭滴管。[方法與步驟]
1.在雙凹玻片兩端分別標(biāo)上A和B,中央標(biāo)記受試者的號(hào)碼。
2.在A端和B端的凹面中分別滴上相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)血清少許。
3.75%酒精棉球消毒無名指端,用采血針刺破指端,用消毒后的尖頭滴管吸取少量血,分別與A端和B端凹面中的標(biāo)準(zhǔn)血清混合,放置1~2
min后,肉眼觀察有無凝血現(xiàn)象,肉眼不易分辨的用顯微鏡觀察。
4.根據(jù)凝集現(xiàn)象的有無判斷血型。[材料及用具]正常人,雙凹玻片,采血針,竹簽,75%酒精棉34
血型鑒定TypeATypeBTypeOTypeABanti-Aanti-Banti-Aanti-Banti-Aanti-Banti-Aanti-B血型鑒定TypeATypeBTypeOTypeAB35[注意事項(xiàng)]1.指端、采血針和尖頭滴管務(wù)必做好消毒準(zhǔn)備。做到一人一針,不能混用。使用過的物品(包括竹簽)均應(yīng)放入污物桶,不得再到采血部位采血。
2.消毒部位自然風(fēng)干后再采血,血液容易聚集成滴,便于取血。取血不宜過少,以免影響觀察。
3.采血后要迅速與標(biāo)準(zhǔn)血清混勻,以防血液凝固。
4.在進(jìn)行交叉配血實(shí)驗(yàn)時(shí),一定要防止將主側(cè)配血和次側(cè)配血搞混了。
[注意事項(xiàng)]36在A端和B端的凹面中分別滴上相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)血清少許。[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯用結(jié)扎的方法來觀察蛙的心搏的起點(diǎn),以及心臟不同部位[方法及步驟]將兔麻醉固定后,剖開腹腔(亦可利用實(shí)驗(yàn)三十五的胃通過紅細(xì)胞滲透脆性實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞對(duì)鉀2毫克)10毫升(如抗凝血放置過久,還[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]蟾蜍或蛙在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下,機(jī)體對(duì)各種刺激發(fā)生的反應(yīng)過程稱為反射。在A端和B端的凹面中分別滴上相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)血清少許。2.寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告,該實(shí)驗(yàn)報(bào)告采用畫圖法最直觀。全身麻醉:吸入、注射蛙類的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似,若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。比色時(shí)最好在自然光下,而不應(yīng)在黃色光下進(jìn)行,以免影[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響。100ml:20g=xml:3gx=15(ml)負(fù)壓消失,肺組織萎縮。不能充分轉(zhuǎn)變成高鐵血紅蛋白,使結(jié)果偏低。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織分離直到腘窩,但不要傷及神經(jīng),其分支待以后用手術(shù)剪剪斷。將兔麻醉仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,剪去頸部和腹部的被毛,沿腹中線切小心剪斷組織后,摘出心臟。夾住脊椎骨碎片將坐骨神經(jīng)輕輕平搭在肌槽的刺激電極上。實(shí)驗(yàn)五蛙心起搏點(diǎn)的觀察[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
用結(jié)扎的方法來觀察蛙的心搏的起點(diǎn),以及心臟不同部位傳導(dǎo)系統(tǒng)的自動(dòng)節(jié)律性高低。[實(shí)驗(yàn)原理]
心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性,但各部分的自動(dòng)節(jié)律性高低不同。蛙心的起搏點(diǎn)是靜脈竇(哺乳動(dòng)物是竇房結(jié)),自動(dòng)節(jié)律性也以靜脈竇(竇房結(jié))為最高。正常心臟的每次搏動(dòng)都由靜脈竇(竇房結(jié))發(fā)出,沿心房傳至房室結(jié),再由房室結(jié)經(jīng)房室束傳至心室肌肉。若阻斷心臟的正常傳導(dǎo),則出現(xiàn)不同的收縮障礙。在A端和B端的凹面中分別滴上相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)血清少許。實(shí)驗(yàn)五蛙37[方法及步驟]1.認(rèn)識(shí)蛙心各部分的構(gòu)造和名稱:自心臟腹面認(rèn)識(shí)心室、心房、動(dòng)脈圓錐(動(dòng)脈球)和主動(dòng)脈。然后用玻璃解剖針向前翻轉(zhuǎn)蛙心,從心臟背面區(qū)別靜脈竇和心房。[方法及步驟]382.觀察蛙心各部分收縮的順序:自心臟背面觀察靜脈竇、心房、心室三部分。觀察他們的跳動(dòng)次序,并記數(shù)每分鐘的收縮次數(shù)。3.用小鑷子在靜脈竇與心房之間穿一絲線,并進(jìn)行結(jié)扎。此時(shí)心房與心室均停止于舒張狀態(tài),而靜脈竇依然搏動(dòng)。記數(shù)其頻率。待心房和心室又開始收縮后,記數(shù)單位時(shí)間內(nèi)靜脈竇和心房、心室的收縮頻率,兩者是否一致?說明什么問題?4.另取一線,在心房與心室之間結(jié)扎,觀察心臟跳動(dòng)有何變化?2.觀察蛙心各部分收縮的順序:自心臟背面觀察靜脈竇、心房、心39[注意事項(xiàng)]1.結(jié)扎前要認(rèn)真識(shí)別心臟各部分的界線。2.結(jié)扎的部位要準(zhǔn)確地落在相鄰部位的交界處,結(jié)扎時(shí)用力逐漸增加,直至心房、心室搏動(dòng)停止。3.蛙心正常起搏點(diǎn)在靜脈竇,潛在起搏點(diǎn)在心房?;卮饐栴}:1.正常蛙心起搏點(diǎn)是什么?傳導(dǎo)順序如何?2.結(jié)扎后靜脈竇、心房、心室的搏動(dòng)次數(shù)是多少?[注意事項(xiàng)]40實(shí)驗(yàn)六離體蛙心灌流[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
用離體灌流的方法,觀察各理化因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響重要作用,了解腎上腺素、乙酰膽堿等激素、神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)心臟活動(dòng)的調(diào)節(jié)意義。[實(shí)驗(yàn)原理]
維持心臟正常收縮的節(jié)律和強(qiáng)度,需要有一個(gè)適當(dāng)?shù)睦砘h(huán)境(離子的濃度、比例、溶液的酸堿度、環(huán)境溫度等),這種環(huán)境條件稍有改變,便可影響心臟的正?;顒?dòng)。[材料及設(shè)備]牛蛙,蛙心套管,任氏液,2%氯化鈉,1%氯化鈣,1%氯化鉀,0.01%腎上腺素,0.01%乙酰膽堿,滴管,細(xì)線,鐵柱,試管夾,蛙心夾、生物信號(hào)采集系統(tǒng)。
實(shí)驗(yàn)六離體蛙心灌流41斯式蛙心插管法手術(shù)過程(一)手術(shù)關(guān)鍵1.確保斯式蛙心插管前(尖)端進(jìn)入心室腔2.確保蛙心插管內(nèi)液體與心室內(nèi)液體連接暢通3.千萬不能損傷靜脈竇4.防止漏液。斯式蛙心插管法手術(shù)過程(一)手術(shù)關(guān)鍵1.確保斯式蛙心插管前42(二)手術(shù)操作步驟:用刺蛙針找到枕骨大孔,對(duì)蛙行腦、脊髓雙刺毀仰臥固定于蛙板上(二)手術(shù)操作步驟:用刺蛙針找到枕骨大孔,仰臥固定于蛙板上43用剪刀剪去胸壁用剪刀剪去胸壁44用眼科剪小心地剪開心包膜,暴露心臟用眼科剪小心地剪開心包膜,暴露心臟45把主動(dòng)脈左支上端穿線把主動(dòng)脈左支上46紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一緊張性收縮,以及小腸的分節(jié)運(yùn)動(dòng)等。描記速度要求每刺激一次神經(jīng),都應(yīng)在記錄紙或屏幕上記錄(或顯示)一次收縮曲線(應(yīng)為一短線)。如蟾蜍仍有反射活動(dòng),表示腦和脊髓破壞不徹底,應(yīng)重新破壞。度可以通過測定單位時(shí)間內(nèi)二氧化碳的產(chǎn)生量或耗氧量以及呼吸商來間[材料和設(shè)備]兔,手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械,注射(計(jì)算50mg檸檬酸鈉相當(dāng)于多少毫升3.實(shí)驗(yàn)十小白鼠能量代謝的測定境條件稍有改變,便可影響心臟的正?;顒?dòng)。實(shí)驗(yàn)16刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
觀察胃腸道的各種運(yùn)動(dòng)形式,以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)物表現(xiàn)出四肢伸直,頭部后仰,尾巴豎立等現(xiàn)再將探針退回至枕骨大孔,使針尖轉(zhuǎn)向尾端,捻動(dòng)探針使其刺入椎管,搗毀脊髓。余線則扎于套管的玻璃小鉤上,以免心臟滑脫。結(jié)扎的部位要準(zhǔn)確地落在相鄰部位的交界處,結(jié)扎時(shí)用力逐漸增加,手術(shù)臺(tái)上,在右側(cè)胸部剪毛。用單刺激作用于坐骨神經(jīng),可記錄到肌肉的單收縮曲線。脊髓蟾蜍的制備:左手持蟾蜍,用食指分開其上下頜,右手用粗剪刀由兩側(cè)口裂沿口角至眼后方剪去蟾蜍腦部,保留下頜和脊髓,制備成去腦的脊髓蟾蜍。蛙心正常起搏點(diǎn)在靜脈竇,潛在起搏點(diǎn)在心房。使用單脈沖刺激方式,波寬調(diào)至并固定在1ms,刺激強(qiáng)度從零開始逐漸增大;結(jié)扎于主動(dòng)脈分支下預(yù)埋一條棉線做一個(gè)松結(jié)備用。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一結(jié)扎于主動(dòng)脈分支下47
剪口的位置應(yīng)視蛙心插管前端細(xì)小部分的長度而定。輕提主動(dòng)脈上的結(jié)扎線,用眼科剪剪在左主動(dòng)脈近動(dòng)脈球結(jié)扎處下方一小“V”形向心斜切口, 剪口的位置輕提主動(dòng)脈上的結(jié)扎線,用眼科剪剪在左主動(dòng)脈48
插管內(nèi)事先裝好干凈的任氏液,可滴加若干滴肝素(抗凝劑)于其中。將注有任氏液的斯氏套管插入動(dòng)脈干內(nèi),然后左手持左側(cè)血管分支上的結(jié)扎線向外拉,右手將蛙心套管送入動(dòng)脈球 插管內(nèi)事先裝滴肝素(抗凝劑)將注有任氏液的斯氏套管插入動(dòng)脈49
將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主動(dòng)脈,至動(dòng)脈圓錐時(shí)略“向后向下”反復(fù)試插,當(dāng)心室收縮時(shí)插入向心室后壁方向插入容易經(jīng)主動(dòng)脈瓣入心室腔內(nèi)(插入過深可因室壁堵住插管下口不通,可稍退)。插管若成功進(jìn)入心室,可見下列四者之一可確定:①管內(nèi)液面隨心縮而升舒而降②血若“噴泉”涌入插管③用滴管吹之心室膨大④手指壓室壁可觸及有插管抵觸。
50動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件51
此處一定要扎緊且不能松脫,以防漏液。即將已作虛結(jié)之絲線把血管和套管固定起來 此處一定即將已作虛結(jié)之絲線把血管和套管固定起來52余線則扎于套管的玻璃小鉤上,以免心臟滑脫。提起套管,剪斷與心臟相連的血管和組織(注意勿損傷靜脈竇及兩心房)余線則扎于套管的玻璃小鉤上,以免心臟滑脫。提起套管,剪斷53動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件54小心剪斷組織后,摘出心臟。小心剪斷組織后,摘出心臟。55用任氏液洗去心內(nèi)外的余血后,注入新鮮任氏液備用。用任氏液洗去心內(nèi)外的余血后,注入新鮮任氏液備用。56通常以每100毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)來表示。去除感受器對(duì)反射的影響:圍繞左側(cè)小腿將皮膚作一環(huán)形切口,由此將切口以下小腿皮膚剝?nèi)ィ慈コつw對(duì)酸刺激的感受器),再用1%硫酸溶液浸沾沒有皮膚的足趾,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。刺穿胸腔家兔出現(xiàn)什么變化?在血液中加一定量的抗凝劑檸檬酸鈉或草酸鉀,使血液抗按圖裝置小白鼠代謝器。1/10N鹽酸,蒸餾水等。避免蟾蜍體表毒液和血液污染標(biāo)本,壓擠、損傷和用力牽拉標(biāo)本,不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。觀察他們的跳動(dòng)次序,并記數(shù)每分鐘的收縮次數(shù)。剪去其它不用的組織操作從脊柱向小腿方向進(jìn)行。小心剪斷組織后,摘出心臟。另取一線,在心房與心室之間結(jié)扎,標(biāo)記不同的收縮曲線,然后進(jìn)行剪輯、粘貼(或打印)。假定小白鼠年食為混合食物,其呼吸商為0.[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解小腸吸收與腸內(nèi)容物滲透壓間的關(guān)系。滲溶液的抵抗力越大,紅細(xì)胞在由于皮膚感受器在環(huán)形切口之上仍然存在,這時(shí)可以觀察到屈腿反射。[材料及設(shè)備]兔(或小白鼠),胰島素,0.用單刺激作用于坐骨神經(jīng),可記錄到肌肉的單收縮曲線。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(圖B)。若兩次刺激的間隔短于肌肉收縮的縮短期,使后一刺激落在前一次刺激引起收縮的縮短期內(nèi),則出現(xiàn)一次收縮正在進(jìn)行接著又產(chǎn)生一次收縮,收縮的幅度高于單收縮的幅度(圖1)。通常以每100毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)來表示。57動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件58四、實(shí)驗(yàn)裝置與連接四、實(shí)驗(yàn)裝置與連接59動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件60動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件61(二)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目1.正常心臟收縮的曲線:用滴管向蛙心套管中注入1—3毫升任氏液(以后的溶液量均應(yīng)與第一次相同)。注意觀察心跳頻率和收縮強(qiáng)度。2.鈉離子的影響:向套管中加入1%氯化鈉數(shù)滴,并與管中溶液混均,同時(shí)做一記號(hào)。觀察心臟活動(dòng)有何變化?待心臟活動(dòng)發(fā)生明顯改變時(shí),應(yīng)迅速吸出套管內(nèi)的溶液,并添加新鮮的任氏液進(jìn)行洗滌,反復(fù)數(shù)次,直至心臟恢復(fù)正?;顒?dòng)后,再加入其它溶液(以下實(shí)驗(yàn)皆同此)。3.依照步驟2的方法分別向套管中加入氯化鈣、氯化鉀、腎上腺素、乙酰膽堿,觀察心臟活動(dòng)有何變化?以冰塊、40℃熱水接觸靜脈竇,觀察心跳頻率有何變化。4.用生物信號(hào)采集系統(tǒng)記錄實(shí)驗(yàn)全過程,并保存打印附于實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。(二)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目621.成功插管:注意勿剪破心臟血管、勿結(jié)扎靜脈竇。2.及時(shí)搶救:如加入KCl和Ach后,要及時(shí)沖洗避
免過度抑制而死亡。3.前后對(duì)照:每步加藥前均應(yīng)設(shè)有藥前“對(duì)照”。4.液面相同:末次沖洗時(shí)應(yīng)調(diào)整液面相同,才具有
可比性?!咀⒁馐马?xiàng)】1.成功插管:注意勿剪破心臟血管、勿結(jié)扎靜脈竇。免過635.避免污染:吸干凈液與臟液的兩吸管不要混用避免殘液影響。6.量效關(guān)系:先加1~2滴,觀察效應(yīng),不明顯可再補(bǔ)加。7.沖洗濕潤:沖洗3次以上,常滴液于心臟表面使之濕潤。8.指標(biāo)標(biāo)記:觀察指標(biāo)為心率和心收縮力;每步驟均應(yīng)標(biāo)記。5.避免污染:吸干凈液與臟液的兩吸管不要混用避免殘液影響64[討論]上述各種因素對(duì)心臟活動(dòng)有什么影響?為什么?[討論]65實(shí)驗(yàn)七
胸內(nèi)負(fù)壓測定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
驗(yàn)證胸內(nèi)負(fù)壓的存在,了解胸內(nèi)壓產(chǎn)生的原理以及一些因素的影響,以加深對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)的產(chǎn)生及調(diào)節(jié)的理解。實(shí)驗(yàn)七胸內(nèi)負(fù)壓測定【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹框?yàn)證胸內(nèi)負(fù)壓的存在,66[實(shí)驗(yàn)原理]
胸內(nèi)壓系指胸膜腔內(nèi)的壓力,通常低于大氣壓,故也稱為胸內(nèi)負(fù)壓。胸內(nèi)負(fù)壓主要由肺的彈性回縮力所產(chǎn)生,并隨呼吸運(yùn)動(dòng)而變化,吸氣時(shí)負(fù)壓增大,呼氣時(shí)負(fù)壓減小。胸腔內(nèi)負(fù)壓的存在是保持持呼吸運(yùn)動(dòng)正常進(jìn)行的必要條件,穿刺胸腔,破壞胸膜腔的密閉性,則胸內(nèi)負(fù)壓消失,肺組織萎縮。[材料和設(shè)備]
兔,手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械,注射針頭,橡皮管,水檢壓計(jì),20%烏拉坦溶液。[實(shí)驗(yàn)原理]胸內(nèi)壓系指胸膜腔內(nèi)的壓力,通常低于大氣壓,故67動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件68動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件69[方法及步驟]動(dòng)物全身麻醉:⑴麻醉藥選擇20%的烏拉坦;⑵麻醉藥劑量1—1.5g/Kg;⑶麻醉方法:家兔耳緣靜脈注射。若2千克體重的家兔應(yīng)注射20%烏拉坦的量為10—15ml。100ml:20g=xml:2gx=10(ml)100ml:20g=xml:3gx=15(ml)(一)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備操作:動(dòng)物以20%烏拉坦溶液靜脈注射,麻醉后俯臥固定于手術(shù)臺(tái)上,在右側(cè)胸部剪毛。再于右側(cè)胸部第四肋間切開皮膚1.0—1.5厘米,。然后由第三與第四或第四與第五肋間插入以橡皮管連接水檢壓計(jì)(或壓力換能器)的胸套管或特制的粗注射針頭,深度以水檢壓計(jì)浮標(biāo)隨呼吸明顯波動(dòng)為止;固定胸套管或針頭(用膠布)后,即可開始實(shí)驗(yàn)觀察和記錄。[方法及步驟]70(二)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目1.胸內(nèi)負(fù)壓的觀察:當(dāng)胸套管或注射針頭插入胸膜腔時(shí)即可見水檢壓計(jì)與胸膜腔相通的一側(cè)液面上升,而與空氣相通的一側(cè)液面下降,表明胸膜腔內(nèi)的壓力低于大氣壓,為負(fù)壓。2.胸內(nèi)負(fù)壓隨呼吸運(yùn)動(dòng)的變化:觀察記錄吸氣和呼氣時(shí)的胸內(nèi)負(fù)壓有什么變化。3.增大呼吸無效腔對(duì)胸內(nèi)負(fù)壓的影響:捏住家兔鼻孔造成呼吸運(yùn)動(dòng)加強(qiáng),觀察對(duì)胸內(nèi)負(fù)壓有什么影響。4.穿透胸腔對(duì)胸內(nèi)負(fù)壓的影響:用粗針頭穿透靠右側(cè)胸腔,使胸膜腔與大氣直接相通,形成氣胸。觀察胸內(nèi)負(fù)壓和呼吸運(yùn)動(dòng)的變化情況。(二)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目71
回答問題:1.胸內(nèi)壓是正壓還是負(fù)壓?2.家兔吸氣和呼氣胸內(nèi)負(fù)壓如何變化?3.捏住家兔鼻孔,胸內(nèi)負(fù)壓怎樣變化?4.刺穿胸腔家兔出現(xiàn)什么變化?回答問題:72實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
觀察胃腸道的各種運(yùn)動(dòng)形式,以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)。[實(shí)驗(yàn)原理]
消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性,可以形成多種形式的運(yùn)動(dòng),主要有:緊張性收縮、蠕動(dòng)、分節(jié)運(yùn)動(dòng)及擺動(dòng)。在整體情況下,消化道平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。兔的胃腸運(yùn)動(dòng)活躍且運(yùn)動(dòng)形式典型,是觀察胃腸運(yùn)動(dòng)的好材料。
實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察73動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件74動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件75動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件76實(shí)驗(yàn)七胸內(nèi)負(fù)壓測定負(fù)壓消失,肺組織萎縮。[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解小腸吸收與腸內(nèi)容物滲透壓間的關(guān)系。[可能出現(xiàn)的問題與解釋]耗了氧氣,而所產(chǎn)生的CO2又被廣口瓶內(nèi)的鈉石灰吸收,所以廣口瓶內(nèi)氣體實(shí)驗(yàn)十二胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響色,直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)比色柱相同為止。破壞腦、脊髓由枕骨大孔處垂直刺入椎管(圖)。劑任血液自然凝固或去纖維蛋白,就5、在手術(shù)操作復(fù)雜、創(chuàng)傷大、實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長或麻醉深度不理想等情況下,可配合局部浸潤麻醉或基礎(chǔ)麻醉。普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、雙凹夾。實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察胃腸在空氣中暴露時(shí)間過長時(shí),會(huì)導(dǎo)致腹腔溫度下降。糖,注射器,恒溫水浴槽等。色部分為白細(xì)胞和血小板。7.眼科剪:用于剪血管、神經(jīng)。用小鑷子在靜脈竇與心房之間穿一絲線,并進(jìn)行結(jié)扎。去除感受器對(duì)反射的影響:圍繞左側(cè)小腿將皮膚作一環(huán)形切口,由此將切口以下小腿皮膚剝?nèi)ィ慈コつw對(duì)酸刺激的感受器),再用1%硫酸溶液浸沾沒有皮膚的足趾,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。蛙類的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似,若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。用任氏液洗去心內(nèi)外的余血后,注入新鮮任氏液備用。蠕動(dòng)
分節(jié)運(yùn)動(dòng)
實(shí)驗(yàn)七胸內(nèi)負(fù)壓測定蠕動(dòng)分節(jié)運(yùn)動(dòng)77動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件78[材料和設(shè)備]
兔,20%烏拉坦溶液、腎上腺素、毛果蕓香堿,手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械、紗布、絲線。[方法與步驟]
1.
將兔麻醉仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,剪去頸部和腹部的被毛,沿腹中線切開皮膚、打開腹腔,暴露胃腸。2、觀察相對(duì)正常情況下胃腸運(yùn)動(dòng)的形式,注意胃腸的蠕動(dòng)、逆蠕動(dòng)和緊張性收縮,以及小腸的分節(jié)運(yùn)動(dòng)等。在幽門與十二指腸的接合部可觀察到小腸的擺動(dòng)。3.將腎上腺素或乙酰膽堿分別滴在小腸上,觀察小腸運(yùn)動(dòng)有何變化?
[材料和設(shè)備]兔,20%烏拉坦溶液、腎上腺素、毛果蕓香堿,79[注意事項(xiàng)]1.胃腸在空氣中暴露時(shí)間過長時(shí),會(huì)導(dǎo)致腹腔溫度下降。為了避免胃腸表面干燥,應(yīng)隨時(shí)用溫生理鹽水濕潤胃腸,防止降溫和干燥。2.實(shí)驗(yàn)前2~3h將兔喂飽,實(shí)驗(yàn)結(jié)果較好。[思考題]1.胃腸上滴加乙酰膽堿或腎上腺素,胃腸運(yùn)動(dòng)有何變化?為什么?2.正常情況下胃、小腸有哪些運(yùn)動(dòng)形式?
[注意事項(xiàng)]80實(shí)驗(yàn)九小腸吸收和滲透壓的關(guān)系[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
了解小腸吸收與腸內(nèi)容物滲透壓間的關(guān)系。[實(shí)驗(yàn)原理]
腸內(nèi)容物的滲透壓為制約腸吸收的重要因素。同種溶液在一定濃度范圍內(nèi),濃度愈大,吸收愈慢;濃度過高時(shí),反而會(huì)出現(xiàn)反滲透現(xiàn)象,使內(nèi)容物的滲透壓降低至一定程度后,再被吸收。由于飽和硫酸鎂溶液對(duì)腸壁具有反滲透作用,因此可用作瀉鹽。[材料及用具]
兔,固定臺(tái),手術(shù)器械,20%烏拉坦,飽和硫酸鎂溶液,0.7%氯化鈉溶液,注射器,棉繩。實(shí)驗(yàn)九小腸吸收和滲透壓的關(guān)系81[方法及步驟]
將兔麻醉固定后,剖開腹腔(亦可利用實(shí)驗(yàn)三十五的胃腸運(yùn)動(dòng)直接觀察的動(dòng)物),取出長約16厘米的空腸一段,在其中點(diǎn)用棉繩結(jié)扎,另在距中點(diǎn)上下各8厘米處分別結(jié)扎,于是分為兩段等長的腸腔(設(shè)A及B)。在A段中注入5毫升飽和硫酸鎂溶液,在B段中注入30毫升0.7%氯化鈉溶液。注射完畢后將腸置入腹腔中,30分鐘后檢查兩段中各有何變化?何故?[注意事項(xiàng)]1.結(jié)扎腸段時(shí)應(yīng)防止把血管結(jié)扎,以免影響實(shí)驗(yàn)效果。
2.注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保溫。[方法及步驟]將兔麻醉固定后,剖開腹腔(亦可利用實(shí)驗(yàn)三十82實(shí)驗(yàn)十小白鼠能量代謝的測定[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
了解間接測量小動(dòng)物能量代謝的基本方法和原理。[實(shí)驗(yàn)原理]
動(dòng)物機(jī)體內(nèi)物質(zhì)代謝過程總伴有能量的轉(zhuǎn)換。它的代謝強(qiáng)度可以通過測定單位時(shí)間內(nèi)二氧化碳的產(chǎn)生量或耗氧量以及呼吸商來間接推算。本實(shí)驗(yàn)是通過測定小白鼠消耗一定量氧所需要的時(shí)間,推算每小時(shí)的耗氧量,從而計(jì)算出小白鼠的能量代謝。[材料及設(shè)備]小白鼠,廣口瓶(或干燥器),水檢壓計(jì),鈉石灰,10毫升注射器,液體石蠟,,秒表,橡皮管。實(shí)驗(yàn)十小白鼠能量代謝的測定83[方法及步驟]1.按圖裝置小白鼠代謝器。然后將注射器內(nèi)涂抹少許液體石蠟,往返抽送數(shù)次,使液體石蠟在注射器內(nèi)壁形成均勻薄層,以防止氣體逸出。[方法及步驟]842.檢查小白鼠代謝器是否漏氣以注射器推進(jìn)一定量的氣體,使水檢壓計(jì)一側(cè)水柱液面上升到一定高度,然后夾閉進(jìn)氣管或保持注射器在一定位置。觀察5—10分鐘,如水柱高度不變,表示不漏氣可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3.將小白鼠放入廣口瓶內(nèi),加蓋密閉,待小白鼠比較安靜時(shí)開始實(shí)驗(yàn)。4.注射器內(nèi)先裝有10毫升空氣,然后將注射器向前推進(jìn)2—3毫升,則見水檢壓計(jì)與大氣相通的水柱液面升高,同時(shí)記下時(shí)間。因?yàn)樾“资蟠x過程中消耗了氧氣,而所產(chǎn)生的CO2又被廣口瓶內(nèi)的鈉石灰吸收,所以廣口瓶內(nèi)氣體逐漸減少,水柱液面也隨之回降。待液面降至原來水平時(shí),再將注射器向前推進(jìn)2—3毫升,如此重復(fù)進(jìn)行,直至推入10毫升為止。待水檢壓計(jì)兩邊的水柱液面降到同一水平時(shí),記下時(shí)間。從開始至此時(shí)即為消耗10毫升氧所需的時(shí)間。2.檢查小白鼠代謝器是否漏氣以注射器推進(jìn)一定量的氣體,使855.假定小白鼠年食為混合食物,其呼吸商為0.82,每消耗1升氧所產(chǎn)生的熱量為4.825千卡,計(jì)算小白鼠能量代謝。6.小白鼠能量代謝的量為:(1升氧的熱價(jià)×1小時(shí)耗氧量)÷(小白鼠的體表面積)
=產(chǎn)熱量(千卡)/平方米/小時(shí)附小白鼠的體表面積(平方米)=0.09133(Rubner公式)或:體表面積=體重0.425×(公斤)×體長0.725(厘米)×0.007184Log面積=0.425Log(公斤)+0.725Iog(厘米)+Log0.007184小白鼠體長:從鼻尖至尾根的長度。5.假定小白鼠年食為混合食物,其呼吸商為0.82,每消耗1升86[注意事項(xiàng)]1.本實(shí)驗(yàn)所求得的數(shù)值為近似值。如通入氧以代替空氣,并按標(biāo)準(zhǔn)狀況校正氣體容積,則可獲得較準(zhǔn)確的數(shù)值。2.鈉石灰要新鮮干燥。3.開始實(shí)驗(yàn)和消耗10毫升氧所觀察的水柱液面一定要在水平上,記下準(zhǔn)確的時(shí)間,計(jì)算時(shí)才能縮小誤差。為了便于觀察可將水檢壓計(jì)內(nèi)的水染成紅色。[注意事項(xiàng)]87實(shí)驗(yàn)十一去大腦僵直[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
了解去大腦后動(dòng)物肌肉緊張的改變。[實(shí)驗(yàn)原理]
中樞神經(jīng)系統(tǒng)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中,存在著抑制肌緊張系統(tǒng)和易化肌緊張系統(tǒng)。兩者之間既互相拮抗又互相協(xié)調(diào),使骨胳肌維持適度的肌緊張,保持動(dòng)物體的正常姿勢。在中腦上下疊體之間橫斷腦干,由于切斷抑制肌緊張系統(tǒng)的聯(lián)系較多,易化肌緊張的作用相對(duì)加強(qiáng),導(dǎo)致反射性伸肌緊張性亢進(jìn)。動(dòng)物表現(xiàn)出四肢伸直,頭部后仰,尾巴豎立等現(xiàn)象,這種癥狀稱去大腦僵直。[材料及設(shè)備]兔,手術(shù)器械,脫脂紗布,烏拉坦,氣管套管,骨鉆,線。實(shí)驗(yàn)十一去大腦僵直88[方法及步驟](一)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1.將家兔用烏拉坦進(jìn)行全身麻醉,麻醉藥劑量為每公斤體重1.0—1.5克,麻醉方法為家兔耳緣靜脈注射后俯臥固定于手術(shù)臺(tái)上。2.在頭頂正中自眉弓至枕部切開皮膚,露出頭骨,分離顳肌和骨膜,用骨鉆在顱骨旁鉆孔,并用骨鉗擴(kuò)大,使后半部大腦半球暴露,再剪除硬腦膜,露出腦面。[方法及步驟]893.松開家兔四肢。左手托起動(dòng)物頭部,右手用刀柄從大腦半球后緣輕輕翻開枕葉,露出四疊體即可見到中腦上、下丘部分(上丘較粗大,下丘較?。?。用刀柄在上、下丘之間向口裂方向呈45°方向插入,同時(shí)向兩邊撥動(dòng)、推壓,切斷腦干,即成為去大腦動(dòng)物。腦干切斷部位示意圖背面觀腹面觀家兔腦的構(gòu)造3.松開家兔四肢。左手托起動(dòng)物頭部,右手用刀柄從大腦半球后緣90(二)進(jìn)行觀察手術(shù)后數(shù)分種,動(dòng)物四肢逐漸伸直,頭向后仰,尾向上翅,呈角弓反張狀態(tài)。(二)進(jìn)行觀察手術(shù)后數(shù)分種,動(dòng)物四肢逐漸伸直,頭向后仰91動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件92動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件93動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件94動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件95[注意事項(xiàng)]1.手術(shù)過程中如有出血,則以紗布?jí)浩戎寡粢馇形饌皺M竇,以免大量出血。2.切斷腦干時(shí)須認(rèn)準(zhǔn)部位,一刀切斷。[注意事項(xiàng)]96實(shí)驗(yàn)十二胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
了解胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響。[實(shí)驗(yàn)原理]
胰島素具有降低血糖的作用。它通過促進(jìn)易化擴(kuò)散作用從而增強(qiáng)多種組織攝取糖的機(jī)能;同時(shí)它不但激活肝細(xì)胞內(nèi)葡萄糖激酶和使糖原合成酶的濃度增高,而且還使肝細(xì)胞內(nèi)球磷酸腺苷(cAMP)減少;腎上腺素能使cAMP增加,從而增加磷酸化酶的活性,促進(jìn)糖原分解,增加血糖的濃度。[材料及設(shè)備]
兔(或小白鼠),胰島素,0.01%腎上腺素,20%葡萄糖,注射器,恒溫水浴槽等。實(shí)驗(yàn)十二胰島素、腎上腺素對(duì)血糖的影響97[方法和步驟]1.取事先經(jīng)過饑餓24—36小時(shí)的兔2只,稱其體重后,從耳靜脈注射胰島素10—20國際單位/每公斤體重。約經(jīng)1—2小時(shí),觀察動(dòng)物有無不安,呼吸局促,痙攣,甚至休克現(xiàn)象的發(fā)生。待低血糖癥狀出現(xiàn)時(shí),給甲兔及時(shí)靜脈注射20%葡萄糖20毫升(溫?zé)幔?,給乙兔及時(shí)皮下注射0.1%腎上腺素(按0.4毫升/每公斤體重)。仔細(xì)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,記錄觀察結(jié)果。[方法和步驟]98實(shí)驗(yàn)十三反射弧的分析
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
分析反射弧的組成部分,探討反射弧的完整性與反射活動(dòng)的關(guān)系。【實(shí)驗(yàn)原理】
在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下,機(jī)體對(duì)各種刺激發(fā)生的反應(yīng)過程稱為反射。反射弧是反射發(fā)生的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。反射弧包括感受器、傳入神經(jīng)、反射中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器五部分。反射弧完整是引發(fā)反射的必要條件,一旦其中任何一個(gè)環(huán)節(jié)的解剖結(jié)構(gòu)和生理完整性受到破壞,反射活動(dòng)就無法實(shí)現(xiàn)。硫酸對(duì)皮膚的傷害性刺激可以引起受刺激肢體的反射性屈曲,本實(shí)驗(yàn)以此屈曲反射來分析反射弧的組成。實(shí)驗(yàn)十三反射弧的分析【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?9【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】
蛙或蟾蜍【實(shí)驗(yàn)器材與藥品】
蛙類手術(shù)器械1套,血管鉗1把,鐵支架和鐵夾1個(gè),玻璃杯,玻璃平皿,濾紙(約lcm×lcm),小棉球,紗布?jí)K,0.5%、1%和2%硫酸溶液,1%可卡因(或普魯卡因、氯仿)。
【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】1001.脊髓蟾蜍的制備:左手持蟾蜍,用食指分開其上下頜,右手用粗剪刀由兩側(cè)口裂沿口角至眼后方剪去蟾蜍腦部,保留下頜和脊髓,制備成去腦的脊髓蟾蜍。用鐵夾夾住蟾蜍下頜,將其懸掛于鐵支架上(如圖)。用清潔水沖洗蟾蜍兩下肢皮膚并用紗布擦干,然后進(jìn)行下列各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)?!緦?shí)驗(yàn)方法和步驟】【實(shí)驗(yàn)方法和步驟】1012.正常反射的觀察:用0.5%硫酸溶液分別浸沾蟾蜍左右后肢的足趾尖,觀察雙側(cè)后肢的反應(yīng)。酸對(duì)皮膚的刺激將引起屈腿的反射動(dòng)作。發(fā)生反射后,馬上用清水洗凈皮膚上的硫酸。在此反射的基礎(chǔ)上,對(duì)此反射弧進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)分析?!緦?shí)驗(yàn)方法和步驟】2.正常反射的觀察:用0.5%硫酸溶液分別浸沾蟾蜍左右后肢1023.去除感受器對(duì)反射的影響:圍繞左側(cè)小腿將皮膚作一環(huán)形切口,由此將切口以下小腿皮膚剝?nèi)ィ慈コつw對(duì)酸刺激的感受器),再用1%硫酸溶液浸沾沒有皮膚的足趾,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。由于去除了皮膚對(duì)酸刺激的感受器,這時(shí)屈腿反射不再出現(xiàn)。此時(shí),再用硫酸刺激該側(cè)小腿環(huán)形切口之上皮膚完好的部位,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。由于皮膚感受器在環(huán)形切口之上仍然存在,這時(shí)可以觀察到屈腿反射。這說明感受器破壞后反射將不能能夠進(jìn)行?!緦?shí)驗(yàn)方法和步驟】3.去除感受器對(duì)反射的影響:圍繞左側(cè)小腿將皮膚作一環(huán)形切口1034.阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)對(duì)反射的影響:沿坐骨神經(jīng)走向在右側(cè)大腿后面切開皮膚,用玻璃針撥開肌肉(股二頭肌和半膜肌之間),暴露坐骨神經(jīng)。在神經(jīng)下面放一條線,用線將神經(jīng)提起,在神經(jīng)下面放一塊浸有1%可卡因(局部浸潤麻醉藥)的棉球。然后,每間隔1分鐘,用1%硫酸刺激右側(cè)足趾,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。由于坐骨神經(jīng)內(nèi)的傳入神經(jīng)纖維被麻醉,這是屈腿反射不再出現(xiàn)。在屈腿反射不再出現(xiàn)后立即用2%的硫酸浸過的濾紙皮貼于與該后肢同側(cè)之軀干部皮膚,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。由于坐骨神經(jīng)的傳出纖維較傳入纖維后被麻醉,這時(shí)還能看到屈腿反射。隨著麻醉時(shí)間的延長,傳出纖維也被麻醉。這時(shí)不論刺激蟾蜍何處的皮膚,右側(cè)肢體都不再出現(xiàn)屈腿反射。(也可采用將坐骨神經(jīng)剪斷的方法觀察是否有反射的出現(xiàn))【實(shí)驗(yàn)方法和步驟】【實(shí)驗(yàn)方法和步驟】1045.破壞神經(jīng)中樞對(duì)反射的影響:用鑷子夾蟾蜍的后腿,當(dāng)觀察到反射性屈腿反射后,用蛙針刺入椎管內(nèi)將脊髓破壞。這時(shí)再用鑷子刺激,觀察是否出現(xiàn)屈腿反射。由于反射中樞被破壞,這時(shí)便不能看到屈腿反射,同時(shí)其他一些反射活動(dòng)也都消失?!緦?shí)驗(yàn)方法和步驟】5.破壞神經(jīng)中樞對(duì)反射的影響:用鑷子夾蟾蜍的后腿,當(dāng)觀察到1051.離斷蟾蜍顱腦要適當(dāng),太高可能保留部分腦組織而出現(xiàn)自主活動(dòng),太低會(huì)影響反射的引出。2.剝離小腿皮膚時(shí),足趾尖不能殘留皮膚,否則硫酸刺激仍會(huì)引起屈腿反射。3.浸入硫酸的部位僅限于足趾尖,不要浸入過多,每次浸泡的范圍也應(yīng)恒定。4.每次硫酸刺激后,應(yīng)及時(shí)用清水洗去皮膚上殘余的硫酸以免燒傷蟾蜍皮膚,并用紗布擦干以免稀釋硫酸溶液。5.活標(biāo)本的神經(jīng)不能用鑷子等夾持?!咀⒁馐马?xiàng)】【注意事項(xiàng)】106【思考題】反射弧有哪幾部分組成,各部分具有什么作用?【思考題】反射弧有哪幾部分組成,各部分具有什么作用?107實(shí)驗(yàn)14
坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯學(xué)習(xí)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本的組織分離技術(shù);學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的方法;了解刺激的種類。[實(shí)驗(yàn)原理]蛙類的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似,若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激,可在神經(jīng)和肌肉上產(chǎn)生一個(gè)動(dòng)作電位,肉眼可看到肌肉收縮和舒張一次,表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性;刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等,制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技術(shù)。實(shí)驗(yàn)14
坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯學(xué)習(xí)生理108[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]蟾蜍或蛙[實(shí)驗(yàn)藥品]任氏液、食鹽、1%H2SO4濾紙[儀器與器械]普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、鋅銅弓(或電子刺激器)、酒精燈。[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]蟾蜍或蛙109[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]1.破壞腦、脊髓由枕骨大孔處垂直刺入椎管(圖)。然后將探針改向前刺入顱腔內(nèi),左右攪動(dòng)探針2~3次,搗毀腦組織。如果探針在顱腔內(nèi),應(yīng)有碰及顱底骨的感覺。再將探針退回至枕骨大孔,使針尖轉(zhuǎn)向尾端,捻動(dòng)探針使其刺入椎管,搗毀脊髓。如蟾蜍仍有反射活動(dòng),表示腦和脊髓破壞不徹底,應(yīng)重新破壞。[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]1.破壞腦、脊髓由枕骨大孔處垂直刺入1102.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蟾蜍的脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷,然后左手握住蟾蜍的后肢,緊靠脊柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去(注意避開坐骨神經(jīng)),并剪去肛門周圍的皮膚,留下脊柱和后肢。
3.剝皮一只手捏住脊柱的斷端(注意不要捏住脊柱兩側(cè)的神經(jīng)),另一只手捏住其皮膚的邊緣,向下剝?nèi)ト亢笾钠つw(圖)。將標(biāo)本放在干凈的任氏液中。將手及使用過的探針、剪刀全部沖洗干凈。1234562.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蟾蜍的脊柱,右手持粗1114.分離兩腿用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出的骶骨(也可不進(jìn)行此步)。然后將脊柱腹側(cè)向上,左手的兩個(gè)手指捏住脊柱斷端的橫突,另一手指將兩后肢擔(dān)起,形成一個(gè)平面。此時(shí)用粗剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(注意,勿傷坐骨神經(jīng))。將一半后肢標(biāo)本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進(jìn)行下列操作。123456784.分離兩腿用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本背面朝1125.辯認(rèn)蛙后肢的主要肌肉,蛙類的坐骨神經(jīng)是由第7、8、9對(duì)脊神經(jīng)從相對(duì)應(yīng)的椎間孔穿出匯合而成,行走于脊柱的兩側(cè),到尾端(肛門處)繞過坐骨聯(lián)合,到達(dá)后肢背側(cè),行走于梨狀肌下的股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝內(nèi),到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸?。▓D)。5.辯認(rèn)蛙后肢的主要肌肉,蛙類的坐骨神經(jīng)是由第7、8、9對(duì)1136.游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌用蛙釘或左手的兩個(gè)手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織分離直到腘窩,但不要傷及神經(jīng),其分支待以后用手術(shù)剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與其下的結(jié)締組織分離并在其跟腱處穿線、結(jié)扎。6.游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌1147.剪去其它不用的組織操作從脊柱向小腿方向進(jìn)行。(1)剪去多余的脊柱和肌肉將后肢標(biāo)本腹面向上,將坐骨神經(jīng)連同2~3節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來。再將標(biāo)本背面向上,用鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支,直至腘窩(圖A),并搭放在腓腸肌上。沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪去股骨上端的1/3(保留2/3),制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本(2)完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下,提起腓腸肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(圖B)。
7.剪去其它不用的組織操作從脊柱向小腿方向進(jìn)行。(1)剪115坐骨神經(jīng)-腓腸肌分離步驟坐骨神經(jīng)-腓腸肌分離步驟1168.檢驗(yàn)標(biāo)本用沾有任氏液的鋅銅弓觸及一下(或電刺激刺激)坐骨神經(jīng)或用鑷子夾持坐骨神經(jīng)中樞端,如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮,說明標(biāo)本的興奮性良好。標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中備用。8.檢驗(yàn)標(biāo)本用沾有任氏液的鋅銅弓觸及一下(或電刺激刺激)坐1171.避免蟾蜍體表毒液和血液污染標(biāo)本,壓擠、損傷和用力牽拉標(biāo)本,不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。2.在操作過程中,應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影響標(biāo)本的興奮性。3.標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。[注意事項(xiàng)][注意事項(xiàng)]118實(shí)驗(yàn)15
刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯學(xué)習(xí)神經(jīng)-肌肉實(shí)驗(yàn)的電刺激方法和記錄肌肉收縮的方法。觀察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮之間的關(guān)系;掌握閾刺激、閾下刺激、閾上刺激、最大(最適)刺激等概念。實(shí)驗(yàn)15
刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響119[實(shí)驗(yàn)原理]對(duì)于單根神經(jīng)纖維或肌纖維來說,對(duì)刺激的反應(yīng)具有“全或無”的特性。神經(jīng)-肌肉標(biāo)本是由許多興奮性不同的神經(jīng)纖維(細(xì)胞)-肌纖維(細(xì)胞)組成,在保持足夠的刺激時(shí)間(脈沖波寬)不變時(shí),刺激強(qiáng)度過小,不能引起任何反應(yīng);隨著刺激強(qiáng)度增加到某一定值,可引起少數(shù)興奮性較高的運(yùn)動(dòng)單位興奮,引起少數(shù)肌纖維收縮,表現(xiàn)出較小的張力變化。該刺激強(qiáng)度為閾強(qiáng)度,具有閾強(qiáng)度的刺激叫閾刺激。此后隨著刺激強(qiáng)度的繼續(xù)增加,會(huì)有較多的運(yùn)動(dòng)單位興奮,肌肉收縮幅度、產(chǎn)生的張力也不斷增加,此時(shí)的刺激均稱為閾上刺激。但當(dāng)刺激強(qiáng)度增大到某一臨界值時(shí),所有的運(yùn)動(dòng)單位都被興奮,引起肌肉最大幅度的收縮,產(chǎn)生的張力也最大,此后再增加刺激強(qiáng)度,不會(huì)再引起反應(yīng)的繼續(xù)增加??梢鹕窠?jīng)、肌肉最大反應(yīng)的最小刺激強(qiáng)度為最適刺激強(qiáng)度,該刺激叫最大刺激或最適刺激。[實(shí)驗(yàn)原理]對(duì)于單根神經(jīng)纖維或肌纖維來說,對(duì)刺激的反應(yīng)具有“120[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]蟾蜍或蛙[實(shí)驗(yàn)藥品]任氏液
[儀器與器材]肌槽、張力換能器(50~100g)、生理紀(jì)錄儀、刺激器或計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng);普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、雙凹夾。[實(shí)驗(yàn)對(duì)象]蟾蜍或蛙121[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]1.坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備2.儀器及標(biāo)本的連結(jié):將肌槽、張力換能器均用雙凹夾固定于支架上;標(biāo)本的股骨殘端插入肌槽的小孔內(nèi)并固定之;腓腸肌跟腱上的連線連于張力換能器的應(yīng)變片上(暫不要將線拉緊)。夾住脊椎骨碎片將坐骨神經(jīng)輕輕平搭在肌槽的刺激電極上。[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]122坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本實(shí)驗(yàn)裝置坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本實(shí)驗(yàn)裝置1233.生物信號(hào)采集系統(tǒng)的連接與設(shè)置:將張力換能器的輸出插頭插入生物信號(hào)采集儀的統(tǒng)的一個(gè)信號(hào)輸入通道插座(CH1);電極的插頭插入該系統(tǒng)的刺激輸出插孔。打開計(jì)算機(jī),啟動(dòng)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng),進(jìn)入“刺激強(qiáng)度對(duì)骨骼肌收縮的影響”實(shí)驗(yàn)菜單。3.生物信號(hào)采集系統(tǒng)的連接與設(shè)置:將張力換能器的輸出插頭插124實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目1.使用單脈沖刺激方式,波寬調(diào)至并固定在1ms,刺激強(qiáng)度從零開始逐漸增大;首先找到能引起肌肉收縮的最小強(qiáng)度,該強(qiáng)度即是閾強(qiáng)度。描記速度要求每刺激一次神經(jīng),都應(yīng)在記錄紙或屏幕上記錄(或顯示)一次收縮曲線(應(yīng)為一短線)。
2.將刺激強(qiáng)度逐漸增大,觀察肌肉收縮幅度是否隨著增加,記下的收縮曲線幅度是否也隨之升高?3.繼續(xù)增大刺激強(qiáng)度,直至連續(xù)3~4個(gè)肌肉收縮曲線的幅度不再隨刺激增高為止,讀出剛剛引起最大收縮的刺激強(qiáng)度,即為最適刺激強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目125[實(shí)驗(yàn)結(jié)果]1.標(biāo)記不同的收縮曲線,然后進(jìn)行剪輯、粘貼(或打?。?。[實(shí)驗(yàn)結(jié)果]1.標(biāo)記不同的收縮曲線,然后進(jìn)行剪輯、粘貼(126[注意事項(xiàng)]1.刺激之后必須讓標(biāo)本休息一段時(shí)間,約0.5~1min。實(shí)驗(yàn)過程中標(biāo)本的興奮性會(huì)發(fā)生改變,因此還要抓緊時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
2.整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中要不斷給標(biāo)本滴加任氏液,防止標(biāo)本干燥,保持其興奮性。[注意事項(xiàng)]1.刺激之后必須讓標(biāo)本休息一段時(shí)間,約0.5~1127[可能出現(xiàn)的問題與解釋]
(1)未能找出最大刺激。雖已調(diào)至刺激器的最大刺激強(qiáng)度,但經(jīng)液體介質(zhì)短路后輸出,強(qiáng)度有所降低,對(duì)刺激的神經(jīng)仍不能達(dá)到最大刺激強(qiáng)度,此時(shí)可增大刺激波寬。(2)單收縮曲線忽高忽低。標(biāo)本在任氏液中浸泡的時(shí)間不夠,興奮性不穩(wěn)定;肌槽上液體堆積過多,造成短路使刺激強(qiáng)度不穩(wěn)。(3)標(biāo)本發(fā)生不規(guī)則收縮或痙攣。肌槽不干凈,留有刺激物(如鹽漬);周圍環(huán)境有干擾;儀器接地不良或人體感應(yīng)帶電,接觸潮濕臺(tái)面或支架等。[可能出現(xiàn)的問題與解釋]128[思考題]1.引起組織興奮的刺激必須具備那些條件?2.何為閾下刺激、閾刺激、閾上刺激和最適刺激?在閾刺激和最適刺激之間為什么肌肉的收縮隨刺激強(qiáng)度增加而增加?3.實(shí)驗(yàn)過程中標(biāo)本的閾值是否會(huì)改變?為什么?[思考題]1.引起組織興奮的刺激必須具備那些條件?129實(shí)驗(yàn)16刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響
[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯觀察用不同頻率的最適刺激刺激坐骨神經(jīng)對(duì)腓腸肌收縮形式的影響及其特征。了解和掌握單收縮、復(fù)合收縮、強(qiáng)直收縮特征和形成的基本原理。實(shí)驗(yàn)16刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯130[實(shí)驗(yàn)原理]蛙的坐骨神經(jīng)肌肉標(biāo)本單收縮的總時(shí)程約為0.11s,其中潛伏期、縮短期共占0,05s,舒張期占0.06s(圖5.3-1)。若給予標(biāo)本相繼兩個(gè)最適刺激,使兩次刺激的間隔小于該肌肉收縮的總時(shí)程時(shí),則會(huì)出現(xiàn)一連續(xù)的收縮,叫復(fù)合收縮(或收縮總和)。若兩個(gè)刺激的時(shí)間間隔短于肌肉收縮總時(shí)程,而長于肌肉收縮的潛伏期和縮短期時(shí)程,使后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的舒張期內(nèi),則出現(xiàn)一次收縮尚未完全舒張又引起一次收縮;若兩次刺激的間隔短于肌肉收縮的縮短期,使后一刺激落在前一次刺激引起收縮的縮短期內(nèi),則出現(xiàn)一次收縮正在進(jìn)行接著又產(chǎn)生一次收縮,收縮的幅度高于單收縮的幅度(圖1)。根據(jù)這個(gè)原理,若給予標(biāo)本一連串的最適刺激,則因刺激頻率不同會(huì)得到一連串的單收縮、不完全強(qiáng)直收縮或完全強(qiáng)直收縮的復(fù)合收縮(圖2)。[實(shí)驗(yàn)原理]蛙的坐骨神經(jīng)肌肉標(biāo)本單收縮的總時(shí)程約為0.11131圖1圖2圖1圖2132[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]1.坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備2.儀器及標(biāo)本的連結(jié)見上一實(shí)驗(yàn);當(dāng)用計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),則打開計(jì)算機(jī),啟動(dòng)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng),進(jìn)入“刺激頻率對(duì)骨骼肌收縮的影響”模擬實(shí)驗(yàn)菜單。[實(shí)驗(yàn)方法與步驟]1333.以波寬為1ms,從最小刺激強(qiáng)度開始逐漸增加刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉進(jìn)行刺激,找到剛剛引起肌肉最大收縮的刺激強(qiáng)度,即為該標(biāo)本的最適刺激強(qiáng)度,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均固定在此刺激強(qiáng)度上(一般為5~7.5v)。3.以波寬為1ms,從最小刺激強(qiáng)度開始逐漸增加刺激強(qiáng)度對(duì)肌1344.用單刺激作用于坐骨神經(jīng),可記錄到肌肉的單收縮曲線。5.用雙刺激作用于坐骨神經(jīng),使兩次刺激間隔時(shí)間為0.06~0.08s,記錄復(fù)合收縮曲線(紙速25~50mm/s)。6.將刺激方式置于“連續(xù)”,其余參數(shù)固定不變,用頻率為1、6、10、15、20、30Hz的連續(xù)刺激作用于作用于坐骨神經(jīng),可記錄到單收縮、不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮曲線(紙速2~10mm/s)。4.用單刺激作用于坐骨神經(jīng),可記錄到肌肉的單收縮曲線。135[實(shí)驗(yàn)結(jié)果]1.標(biāo)記不同的收縮曲線,然后進(jìn)行剪輯、粘貼(或打?。實(shí)驗(yàn)結(jié)果]136[注意事項(xiàng)]1.經(jīng)常給標(biāo)本滴加任氏液,保持標(biāo)本良好的興奮性。2.連續(xù)刺激時(shí),每次刺激持續(xù)時(shí)間要保持一致,不得超過3~4s(為什么?),每次刺激后要休息30s以免標(biāo)本疲勞。3.若刺激神經(jīng)引起的肌肉收縮不穩(wěn)定時(shí),可直接刺激肌肉。4.可根據(jù)實(shí)際需要調(diào)整刺激頻率。[注意事項(xiàng)]137[思考題]1.何為單收縮?單收縮的潛伏期包括了那些時(shí)間因素?對(duì)有神經(jīng)和無神經(jīng)的標(biāo)本有何差異?2.何為不完全強(qiáng)直收縮、完全強(qiáng)直收縮?它們是如何形成的?3.肌肉收縮張力曲線融合時(shí),神經(jīng)干細(xì)胞的動(dòng)作電位是否也發(fā)生融合?為什么?4.此次實(shí)驗(yàn)為什么要將刺激強(qiáng)度固定在最適刺激強(qiáng)度?5.為什么刺激頻率增高,肌肉收縮的幅度也增高?[思考題]1.何為單收縮?單收縮的潛伏期包括了那些時(shí)間因素?138[可能出現(xiàn)的問題與解釋](1)隨著刺激頻率增加,肌肉復(fù)合收縮的幅度不是逐漸升高,而是下降。這可能是標(biāo)本保護(hù)不當(dāng),肌肉受損或疲勞,或刺激頻率過高。[可能出現(xiàn)的問題與解釋](1)隨著刺激頻率增加,肌肉復(fù)合收縮139動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)優(yōu)質(zhì)精選課件140實(shí)驗(yàn)一血液的組成[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解血液的組成,區(qū)別血漿、血清及纖維蛋白。實(shí)驗(yàn)一血液的組成[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯了解血液的組成,區(qū)別血漿141實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白的測定[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
熟悉用比色法測定血紅蛋白的方法。[實(shí)驗(yàn)原理]
血紅蛋白測定的方法有多種,最常用而最簡單的是比色法。由于血紅蛋白的顏色,常隨結(jié)合的氧量多少而改變,因而不利于比色,但血紅蛋白與稀鹽酸作用后,能使亞鐵血紅素變成不易變色的棕色的高鐵血紅蛋白,用水稀釋后可與標(biāo)準(zhǔn)比色板比色,從而測得血紅蛋白含量。通常以每100毫升血液中血紅蛋白的克數(shù)來表示。實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白的測定142[方法及步驟]1.認(rèn)識(shí)蛙心各部分的構(gòu)造和名稱:自心臟腹面認(rèn)識(shí)心室、心房、動(dòng)脈圓錐(動(dòng)脈球)和主動(dòng)脈。然后用玻璃解剖針向前翻轉(zhuǎn)蛙心,從心臟背面區(qū)別靜脈竇和心房。[方法及步驟]143[注意事項(xiàng)]1.結(jié)扎前要認(rèn)真識(shí)別心臟各部分的界線。2.結(jié)扎的部位要準(zhǔn)確地落在相鄰部位的交界處,結(jié)扎時(shí)用力逐漸增加,直至心房、心室搏動(dòng)停止。3.蛙心正常起搏點(diǎn)在靜脈竇,潛在起搏點(diǎn)在心房?;卮饐栴}:1.正常蛙心起搏點(diǎn)是什么?傳導(dǎo)順序如何?2.結(jié)扎后靜脈竇、心房、心室的搏動(dòng)次數(shù)是多少?[注意事項(xiàng)]144小心剪斷組織后,摘出心臟。小心剪斷組織后,摘出心臟。145實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
觀察胃腸道的各種運(yùn)動(dòng)形式,以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)。[實(shí)驗(yàn)原理]
消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性,可以形成多種形式的運(yùn)動(dòng),主要有:緊張性收縮、蠕動(dòng)、分節(jié)運(yùn)動(dòng)及擺動(dòng)。在整體情況下,消化道平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。兔的胃腸運(yùn)動(dòng)活躍且運(yùn)動(dòng)形式典型,是觀察胃腸運(yùn)動(dòng)的好材料。
實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察1464.阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)對(duì)反射的影響:沿坐骨神經(jīng)走向在右側(cè)大腿后面切開皮膚,用玻璃針撥開肌肉(股二頭肌和半膜肌之間),暴露坐骨神經(jīng)。在神經(jīng)下面放一條線,用線將神經(jīng)提起,在神經(jīng)下面放一塊浸有1%可卡因(局部浸潤麻醉藥)的棉球。然后,每間隔1分鐘,用1%硫酸刺激右側(cè)足趾,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。由于坐骨神經(jīng)內(nèi)的傳入神經(jīng)纖維被麻醉,這是屈腿反射不再出現(xiàn)。在屈腿反射不再出現(xiàn)后立即用2%的硫酸浸過的濾紙皮貼于與該后肢同側(cè)之軀干部皮膚,觀察屈腿反射是否出現(xiàn)。由于坐骨神經(jīng)的傳出纖維較傳入纖維后被麻醉,這時(shí)還能看到屈腿反射。隨著麻醉時(shí)間的延長,傳出纖維也被麻醉。這時(shí)不論刺激蟾蜍何處的皮膚,右側(cè)肢體都不再出現(xiàn)屈腿反射。(也可采用將坐骨神經(jīng)剪斷的方法觀察是否有反射的出現(xiàn))【實(shí)驗(yàn)方法和步驟】【實(shí)驗(yàn)方法和步驟】147動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)148動(dòng)物生理學(xué)常用器械一.蛙類手術(shù)器械1.探針:用于破壞腦和脊髓。2.粗剪刀:用于剪骨、肌肉、皮膚等較粗硬組織。3.眼科剪;用于剪神經(jīng)、血管等細(xì)軟組織。4.外科鑷:用于夾捏組織和牽提切口處的皮膚。5.眼科鑷:用于夾捏細(xì)軟組織。6.玻璃分針:用于分離神經(jīng)和血管等。7.蛙板:用于固定蛙類。動(dòng)物生理學(xué)常用器械一.蛙類手術(shù)器械149二.哺乳類手術(shù)器械8.玻璃板:用于制備神經(jīng)肌肉標(biāo)本。1.注射器:用于注射藥液。2.剪毛翦:用于術(shù)部剪毛。3.手術(shù)刀:用于切割皮膚、肌肉和臟器。4.止血鉗:除用于止血外,有齒的用于提起皮膚,無齒的用于分離皮下組
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