2022年醫(yī)學專題-人體X-染色質(zhì)的觀察

實驗(shíyàn)三

人體(réntǐ)x-染色質(zhì)的觀察第一頁，共二十三頁。一.實驗(shíyàn)目的

觀察與區(qū)別X染色質(zhì)：通過實驗初步掌握簡易方法，識別其形態(tài)及所在部位(bùwèi)，為進一步研究人體染色質(zhì)的畸變與疾病提供參考條件。第二頁，共二十三頁。

1949年Barr等發(fā)現(xiàn)，在雌貓的神經(jīng)細胞核間期有一個凝縮的深染小體，而在雄性的細胞中沒有(méiyǒu)。后來了解，在雌體中的兩條X染色體在間期時有一條(或這條的大部分)處于凝集而不活動狀態(tài)，從而形成了這種X-染色質(zhì)(或稱性染色質(zhì)、Barr小體)。

二.實驗(shíyàn)原理第三頁，共二十三頁。1932年美國遺傳學家首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了劑量補償效應，并把它看作是維持雌雄兩性生物基因表達的一致所特有的一種遺傳效應。劑量補償效應：在XY型性別(xìngbié)決定機制的生物中，使性連鎖基因在兩種性別(xìngbié)中有相等或近乎相等的有效劑量的遺傳效應。

第四頁，共二十三頁。進一步研究發(fā)現(xiàn)，所有哺乳類雌體細胞中都有一條這種表現(xiàn)的X染色體；

Lyon假說：1961年由Lyon提出，又稱單個活性X染色體假說。1．正常雌性哺乳動物的體細胞中，兩條X染色體中只有一條有活性(activationX,Xa)，另一條失活(inactivationX,Xi)；2．失活是隨機的；3．失活發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期；4．雜合體(hétǐ)雌性在伴性基因的作用上是嵌合體(hétǐ)。

第五頁，共二十三頁。

第六頁，共二十三頁。

人類正常的男女體細胞中，分別有XY和XX性染色體，女性的兩條X染色體中，在間期也有一條不表現(xiàn)活性而保持濃縮狀態(tài)，因此易于用適當?shù)娜玖?rǎnliào)加以顯示，成為便于觀察的X-染色質(zhì)（Barr小體）。在個別的雌或雄體中，有多于2條X染色體時，在間期細胞內(nèi)除一條外，其余都將形成X-染色質(zhì)，以維持劑量補償。第七頁，共二十三頁。

第八頁，共二十三頁?！?/p>

X-染色質(zhì)的形態(tài)(xíngtài)：1.結(jié)構(gòu)致密的濃染小體，輪廓清楚；2.大小約1u左右，常附著于核膜(hémó)邊緣或靠近內(nèi)側(cè)；3.其形狀有微凸形、三角形、卵形、短棒形及雙球形；第九頁，共二十三頁。MALEFEMALE第十頁，共二十三頁。第十一頁，共二十三頁。第十二頁，共二十三頁。三.實驗(shíyàn)材料1.女性口腔(kǒuqiāng)頰部黏膜細胞2.毛發(fā)根部細胞第十三頁，共二十三頁。四.實驗儀器(yíqì)及試劑

儀器:顯微鏡

試劑(shìjì):1M鹽酸、蒸餾水、改良苯酚品紅第十四頁，共二十三頁。五.實驗方法(fāngfǎ)和步驟1.口腔頰部黏膜細胞的觀察：

a.刮取口腔黏膜細胞:漱口，用牙簽從女性口腔兩側(cè)頰部刮取上皮黏膜細胞，原位刮2-3次，分別涂抹在干凈載片上，每次可涂1-2片，涂抹范圍約蓋片大小(男性做對照)。b.染色:待稍干后，滴加1-2滴改良(gǎiliáng)苯酚品紅，染色10-15分鐘。第十五頁，共二十三頁。

c.壓片:加蓋片，覆以吸水紙，用手指輕度壓片。d.鏡檢:鏡下檢測典型的可數(shù)細胞，標準是：⑴核質(zhì)呈網(wǎng)狀或細顆粒狀分布；⑵核膜清晰、無缺損；⑶染色(rǎnsè)適度；⑷周圍無雜質(zhì)。

第十六頁，共二十三頁。

2．毛發(fā)根部細胞的觀察：

拔取(báqǔ)一根帶有毛根的頭發(fā)，自基部截取2cm左右置載片上，再加一滴1M鹽酸解離5-7分鐘，待毛根后鞘軟化后拔去毛干，蒸餾水清洗3-5次，滴加一滴染液染10-15分鐘，吸取多余的染料，再覆以蓋片，隔一片吸水紙用手指輕度加壓后鏡檢。

第十七頁，共二十三頁。六.實驗(shíyàn)結(jié)果1.觀察50個女性可數(shù)細胞(xìbāo)，同時觀察50個男性者為對照，分別計算顯示X-染色質(zhì)細胞(xìbāo)所占的百分比。2.觀察中選繪4-5個典型細胞，示明X-染色質(zhì)的形態(tài)部位。第十八頁，共二十三頁。Barr小體(xiǎotǐ)Barr小體(xiǎotǐ)DetectionofsexchromatinbyThioninstain×400第十九頁，共二十三頁。七.實驗分析(fēnxī)與討論

1.分析此次實驗成敗的原因。2.此次實驗有哪些地方可以(kěyǐ)改進?

第二十頁，共二十三頁。八.思考題

為什么雄性的一條(yītiáo)X-染色體不濃縮？它的合理的解釋是什么？它的遺傳學意義是什么？第二十一頁，共二十三頁。九.參考文獻1.遺傳學實驗(shíyàn)高等教育出版社2.遺傳學實驗方法和技術(shù)高等教育出版社第二十二頁，共二十三頁。內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)實驗三。觀察與區(qū)別X染色質(zhì)：通過實驗初步掌握簡易方法，識別其形態(tài)及所在部位，