神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件

神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)

神經(jīng)干細(xì)胞的概念NeuralStemCell

根據(jù)1997年Mckay在Science上發(fā)表的文章認(rèn)為，神經(jīng)干細(xì)胞就是指具有分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，能自我更新并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞。（專能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞）先祖細(xì)胞(Progenitor)：前體細(xì)胞(Precursor)：神經(jīng)干細(xì)胞的概念根據(jù)199神經(jīng)干細(xì)胞的研究歷史神經(jīng)干細(xì)胞的研究歷史

傳統(tǒng)觀點(diǎn)：

神經(jīng)細(xì)胞是永久性細(xì)胞，是不可能分裂的。神經(jīng)細(xì)胞損傷后由神經(jīng)膠質(zhì)增生進(jìn)行修復(fù)。這種觀點(diǎn)使人們對帕金森病、多發(fā)性硬化及腦脊髓損傷等疾病的治療受到了很大的限制。

傳統(tǒng)觀點(diǎn)：

早在20世紀(jì)60年代，Altman用同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶摻入腦中，發(fā)現(xiàn)在新皮質(zhì)、海馬、嗅球的細(xì)胞有同位素?fù)饺?，證明這些區(qū)域有能分裂的細(xì)胞存在。但是，由于當(dāng)時(shí)的條件無法進(jìn)行活體追蹤，體外培養(yǎng)也未能建立，因此傳統(tǒng)的觀點(diǎn)一直占優(yōu)勢。這應(yīng)該是對神經(jīng)干細(xì)胞最早的研究。早在20世紀(jì)60年代，Altman用同

對腦內(nèi)存在干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)是從研究胚胎腦發(fā)育開始的：

對腦內(nèi)存在干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)是從研究胚胎腦發(fā)育開始

1989年Temple從13天大鼠胚胎腦的隔區(qū)取出少量細(xì)胞進(jìn)行單個(gè)培養(yǎng)，看到這些細(xì)胞能發(fā)育成神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞；

1991年Williams等人的實(shí)驗(yàn)顯示，將近20%的胚胎腦的皮質(zhì)細(xì)胞可形成神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞；

1989年Temple從13天大鼠胚胎腦的隔1994年Davis和Temple通過單獨(dú)培養(yǎng)大鼠胚胎腦皮質(zhì)先祖細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，單個(gè)細(xì)胞可以分化成神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，即全部神經(jīng)組織細(xì)胞類型。他們發(fā)現(xiàn)，約有7%的先祖細(xì)胞具有這種能力。1994年Davis和Temple通過單獨(dú)培養(yǎng)大鼠胚在成年動(dòng)物的腦組織中也存在神經(jīng)干細(xì)胞：

在成年動(dòng)物的腦組織中也存在神經(jīng)干細(xì)胞：

1992年，Reynolds等首先從紋狀體培養(yǎng)出干細(xì)胞樣的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多潛能細(xì)胞，后來知道這些細(xì)胞來自室管膜下區(qū)；1997年，Palmer等又從成年大鼠的海馬齒狀回培養(yǎng)出神經(jīng)干細(xì)胞；此外，在成年動(dòng)物的脊髓、小腦等也都分離和培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞；1992年，Reynolds等首先從紋狀體培

在人類同樣分離和培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞。更令人興奮的是，1998年由Eriksson等從成人的海馬中也存在神經(jīng)元的前體細(xì)胞。在人類同樣分離和培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞。更令人興

總之，在動(dòng)物和人類的神經(jīng)系統(tǒng)中，從胚胎時(shí)期到成年時(shí)期均存在著神經(jīng)干細(xì)胞?？傊?，在動(dòng)物和人類的神經(jīng)系統(tǒng)中，從胚胎時(shí)期神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn)神經(jīng)干細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：

1，具有多種分化潛能，即分化為神經(jīng)組織的各種細(xì)胞，包括神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞（專能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞）。

神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn)神經(jīng)干細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：2，具有自我更新的能力，所謂自我更新，指將干細(xì)胞的屬性從親代傳遞到子代細(xì)胞，即在分裂增殖過程中子代細(xì)胞仍然維持干細(xì)胞的屬性（親代干細(xì)胞和子代干細(xì)胞）。2，具有自我更新的能力，所謂自我更新，指將干細(xì)胞的屬3，具有很強(qiáng)的分裂增殖能力。3，具有很強(qiáng)的分裂增殖能力。4，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。4，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。5，免疫特性：表達(dá)成神經(jīng)上皮細(xì)胞標(biāo)記

Nestin,Notch1,EGFR,FGFR(不表達(dá)NSE,GFAP,NF)5，免疫特性：表達(dá)成神經(jīng)上皮細(xì)胞標(biāo)記

6，神經(jīng)干細(xì)胞通過兩種方式生長,一種是對稱分裂,形成兩個(gè)相同的神經(jīng)干細(xì)胞;另一種是非對稱分裂,由于細(xì)胞質(zhì)中的調(diào)節(jié)分化蛋白不均勻的分配,使得一個(gè)子細(xì)胞不可逆的走向分化的終端而成為功能專一的分化細(xì)胞,另一個(gè)子細(xì)胞則保持親代的特征,仍作為神經(jīng)干細(xì)胞保留下來。分化細(xì)胞的數(shù)目受分化前干細(xì)胞的數(shù)目和分裂次數(shù)控制。

6，神經(jīng)干細(xì)胞通過兩種方式生長,一種是對稱分裂神經(jīng)干細(xì)胞與其它類型干細(xì)胞的關(guān)系

干細(xì)胞基本上可分為3種類型第一類是全能干細(xì)胞第二類是多能干細(xì)胞第三類是單能干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞與其它類型干細(xì)胞的關(guān)系

干細(xì)胞基本上神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件

骨髓干細(xì)胞可轉(zhuǎn)變?yōu)槟X細(xì)胞

美國國家神經(jīng)疾病與中風(fēng)研究院的一組專家，在病理解剖一些女性死者時(shí)發(fā)現(xiàn)了上述現(xiàn)象。這些女性死者生前都接受過骨髓移植。被移植的骨髓都來自男性捐獻(xiàn)者?？茖W(xué)家們在這些女性死者的大腦細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了Y染色體。Y染色體只存在于男性身上的細(xì)胞。科學(xué)家們因此判斷這些帶有Y染色體的細(xì)胞來自移植過來的骨髓干細(xì)胞骨髓干細(xì)胞可轉(zhuǎn)變?yōu)槟X細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞的分布

在胚胎發(fā)育過程中，神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)管壁增殖，新生的細(xì)胞沿放射狀纖維遷移至特定位置。此外，正如前面提到的在大腦的隔區(qū)、大腦皮質(zhì)等都培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞。

神經(jīng)干細(xì)胞的分布在胚胎發(fā)育過程中，神經(jīng)干

在成年的腦組織中，分離腦內(nèi)各區(qū)域細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng)，證實(shí)成年腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞分布廣泛，室管膜、腦室下區(qū)、紋狀體、海馬齒狀回、嗅球、脊髓等處。（分離不同腦區(qū)的細(xì)胞，體外進(jìn)行培養(yǎng)）在成年的腦組織中，分離腦內(nèi)各區(qū)域細(xì)胞并進(jìn)行體外神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法

獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法有四種：獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法有四1，取胚胎、新生動(dòng)物和成年動(dòng)物的富于神經(jīng)干細(xì)胞的腦組織在體外進(jìn)行培養(yǎng)。1，取胚胎、新生動(dòng)物和成年動(dòng)物的富于神經(jīng)2，用反轉(zhuǎn)錄病毒導(dǎo)入原癌基因，如v-myc和SV40大T抗原等，部分細(xì)胞因此獲得持續(xù)分裂的能力

2，用反轉(zhuǎn)錄病毒導(dǎo)入原癌基因，如v-myc和3，通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞，使其分化成神經(jīng)干細(xì)胞，當(dāng)受到外界因素刺激或拆去生長因子時(shí)，細(xì)胞即開始分化成各種成熟的神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞。3，通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞，使其分化成神經(jīng)干

4，非神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞分化誘導(dǎo)4，非神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞分化誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞的分化機(jī)制

神經(jīng)干細(xì)胞的分化機(jī)制神經(jīng)干細(xì)胞的分化受基因調(diào)控

Pevny等將神經(jīng)元特異性的Soｘ2基因轉(zhuǎn)染胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)維甲酸誘導(dǎo),可獲得90%以上的神經(jīng)細(xì)胞。Giebel等表達(dá)Nurrl基因?qū)τ谥心X神經(jīng)前體細(xì)胞分化為多巴胺能神經(jīng)元起決定作用。這些研究表明基因調(diào)控與神經(jīng)干細(xì)胞的定向分化密切相關(guān)。神經(jīng)干細(xì)胞的分化受基因調(diào)控Pevny等將神經(jīng)元細(xì)胞因子與神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化密切相關(guān)

細(xì)胞因子與神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化密切相關(guān)（一）、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)對神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響（一）、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)對神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影

FGF家族包括至少15個(gè)成員。FGFs主要通過四種成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR1~4)傳導(dǎo)信號(hào)。FGF1和FGF2目前研究比較多。

FGFs和FGFR1~4在胚胎期和成年中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)隨著時(shí)間和區(qū)域變化而有所不同，表明它們所起的作用不同。FGF家族包括至少15個(gè)成員。FGFs主要

體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明FGF2在調(diào)節(jié)神經(jīng)前體細(xì)胞增殖方面起著重要作用。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明FGF2在調(diào)節(jié)神經(jīng)前體細(xì)胞增殖方面起

幼鼠皮下注射FGF2能刺激海馬和小腦的顆粒細(xì)胞層內(nèi)的神經(jīng)生發(fā)區(qū)域神經(jīng)干細(xì)胞增殖。若注入FGF2的中和抗體，則可使神經(jīng)生發(fā)區(qū)域的DNA合成降低50%。將FGF2注入成年鼠的側(cè)腦室內(nèi)可引起腦室下區(qū)前體細(xì)胞增殖，數(shù)量增加，以及從室下區(qū)遷移至嗅球的神經(jīng)元數(shù)量增加。幼鼠皮下注射FGF2能刺激海馬和小腦的顆粒細(xì)

體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)FGF2具有有絲分裂原的作用，可促進(jìn)細(xì)胞的增殖；同時(shí)可抑制前體細(xì)胞的分化；這種刺激增殖和抑制分化作用與FGF2的濃度有關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)FGF2具有有絲分裂原的作用，可促進(jìn)

在培養(yǎng)過程中，當(dāng)FGF2減少時(shí)，神經(jīng)干細(xì)胞即分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。當(dāng)FGF2的濃度為0.1ng/ml時(shí)，皮質(zhì)神經(jīng)前體細(xì)胞增殖并形成神經(jīng)元克隆。而FGF2的濃度為1ng~10ng/ml時(shí)，皮質(zhì)神經(jīng)前體細(xì)胞可分化成神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞，如加入其他因子，可分化成星形膠質(zhì)細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中，當(dāng)FGF2減少時(shí)，神經(jīng)干細(xì)胞

產(chǎn)生以上結(jié)果的原因：

FGF2與不同的受體親和力不同，引起的信號(hào)傳導(dǎo)通路不同。FGF濃度決定它與不同受體的親和力。0.1ng/mlFGF2可激活FGFR1和FGFR2，但對FGFR3無任何作用。1ng~10ng/mlFGF2可激活FGFR3，推測低濃度FGF2啟動(dòng)分裂信號(hào)，而高濃度啟動(dòng)分裂和分化信號(hào)。產(chǎn)生以上結(jié)果的原因：FGF和其他生長因子的協(xié)同作用：FGF和其他生長因子的協(xié)同作用：1，在胰島素樣生長因子（IGF）和血小板衍生的生長因子(PDGF)存在下，F(xiàn)GF2對能分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞和2型星形膠質(zhì)細(xì)胞的雙潛能0-2A膠質(zhì)前體細(xì)胞具有促進(jìn)增殖的作用.1，在胰島素樣生長因子（IGF）和血小板衍生的生長2,加入腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、胰島素樣生長因子1（IGF1）、神經(jīng)營養(yǎng)素3（NT3）主要促使其向神經(jīng)元方向分化。2,加入腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、胰島素樣生長3,FGF1也可以使神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化時(shí)，抑制Notch信號(hào)途徑（維持干細(xì)胞狀態(tài)的信號(hào)），并同時(shí)激活FGF1介導(dǎo)的信號(hào)通路。3,FGF1也可以使神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。誘導(dǎo)

4，星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化依賴于白細(xì)胞抑制因子受體（LIFR）信號(hào)傳導(dǎo)。如抑制LIFR信號(hào)傳導(dǎo)，則向神經(jīng)元方向分化。提示信號(hào)傳導(dǎo)可抑制神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化?；罨腖IFR通過JAK-STAT途徑直接啟動(dòng)GFAP基因的表達(dá)。已有研究證實(shí)，STAT3能直接連接到GFAP基因啟動(dòng)子的保守位點(diǎn)并調(diào)節(jié)其表達(dá)。4，星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化依賴于白細(xì)胞抑制因子受體（二）表皮生長因子（EGF）對神經(jīng)干細(xì)胞的影響（二）表皮生長因子（EGF）對神經(jīng)干細(xì)胞的影響

表皮生長因子通過其受體起作用。與FGF比較：①EGF在發(fā)育較晚期起作用，因?yàn)樵贓15天才能檢測到EGFRmRNA;表皮生長因子通過其受體起作用。與FGF比較：

②EGF的作用范圍也較窄，因?yàn)镋GFR的分布不如FGFR分布廣泛；②EGF的作用范圍也較窄，因?yàn)镋GFR的分布不③EGF在前體細(xì)胞增殖和分化中起作用，也可能對細(xì)胞生存和遷移起作用，但往往對膠質(zhì)前體細(xì)胞有促增殖作用（而FGF2對分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)干細(xì)胞有促增殖作用）③EGF在前體細(xì)胞增殖和分化中起作用，也可

也有另外一種觀點(diǎn)：將腦組織消化后，在有EGF存在的情況下，一些分裂細(xì)胞形成球狀團(tuán)快，然后對這種球狀團(tuán)快進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)檢測，發(fā)現(xiàn)這種小球的細(xì)胞能生成神經(jīng)系統(tǒng)的三種細(xì)胞，即神經(jīng)元、星形膠質(zhì)和少突膠質(zhì)細(xì)胞。如果將這些細(xì)胞分離后用FGF2刺激，發(fā)現(xiàn)其對兩種不同細(xì)胞有刺激在一定范圍內(nèi)增殖的作用：一種是單潛能的神經(jīng)先祖細(xì)胞（一個(gè)細(xì)胞只分裂成3~17個(gè)神經(jīng)細(xì)胞），另一種則是雙潛能的先祖細(xì)胞，能形成有限數(shù)量的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。也有另外一種觀點(diǎn)：將腦組織消化后，在有EGF無血清培養(yǎng)液中懸浮的克隆，體外培養(yǎng)第7d無血清培養(yǎng)液中懸浮的克隆，體外培養(yǎng)第7d克隆細(xì)胞呈Nestin陽性(FITC免疫熒光)，克隆細(xì)胞呈Nestin陽性(FITC免疫熒光)，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在神經(jīng)干細(xì)胞分化中十分重要

Notch信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)Janus激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活劑(JAK-STAT)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在神經(jīng)干細(xì)胞分化中十分重要Notch信號(hào)傳導(dǎo)系神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)疾病治療中的一些應(yīng)用神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)疾病治

在成功分離和培養(yǎng)了神經(jīng)干細(xì)胞之后，人們很自然地想到利用它治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病。歸納起來有以下幾方面：在成功分離和培養(yǎng)了神經(jīng)干細(xì)胞之后，人們很1、利用神經(jīng)干細(xì)胞直接進(jìn)行移植治療（干細(xì)胞體外擴(kuò)增），神經(jīng)干細(xì)胞腦中能根據(jù)其周圍環(huán)境的誘導(dǎo)而分裂，分化成相應(yīng)的細(xì)胞類型，其形態(tài)和功能與附近的宿主細(xì)胞非常類似。加之，中樞神經(jīng)系統(tǒng)具備特殊的結(jié)構(gòu)——血腦屏障，使得淋巴細(xì)胞很難進(jìn)入，因而不同個(gè)體之間，甚至是不同種物之間的神經(jīng)干細(xì)胞，都幾乎沒有排斥反應(yīng)，大大拓寬了神經(jīng)干細(xì)胞的應(yīng)用。1、利用神經(jīng)干細(xì)胞直接進(jìn)行移植治療（干細(xì)胞體外擴(kuò)增）

2，神經(jīng)干細(xì)胞在體外定向誘導(dǎo)分化，然后再移植到神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)。2，神經(jīng)干細(xì)胞在體外定向誘導(dǎo)分化，然神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件

3，神經(jīng)干細(xì)胞的在體誘導(dǎo)分化。由于正常成年個(gè)體環(huán)繞側(cè)腦室的室管膜下層、紋狀體等地方仍存在神經(jīng)干細(xì)胞，這些干細(xì)胞在正常情況下處于靜息狀態(tài)，如能將其在體內(nèi)誘導(dǎo)分化以替代神經(jīng)細(xì)胞或膠質(zhì)細(xì)胞。

3，神經(jīng)干細(xì)胞的在體誘導(dǎo)分化。由于正常成年個(gè)體

Craig將EGF連續(xù)六天注入成年鼠的側(cè)腦室中，發(fā)現(xiàn)被標(biāo)記的室管膜下細(xì)胞增加了17倍，并從側(cè)腦室壁轉(zhuǎn)移至鄰近的皮層、紋狀體和透明隔，七周后發(fā)現(xiàn)一部分細(xì)胞分化成新的神經(jīng)元、星形細(xì)胞和少枝膠質(zhì)細(xì)胞。由引可見，通過誘導(dǎo)神經(jīng)系統(tǒng)中的原位神經(jīng)干細(xì)胞增殖、遷移和分化也可達(dá)到修復(fù)受損神經(jīng)元的目的。Craig將EGF連續(xù)六天注入成年鼠的側(cè)腦室

4，神經(jīng)干細(xì)胞可以在體外根據(jù)不同的需要導(dǎo)入相應(yīng)的外源性基因，成為一種廣譜的細(xì)胞載體。由于神經(jīng)干細(xì)胞在植入后，會(huì)在周圍環(huán)境的誘導(dǎo)下分化成熟，所以要使其處于不斷分裂中，必須將神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行永生化。所謂永生化就是將細(xì)胞總是處于連續(xù)的細(xì)胞周期內(nèi)而中止其分化發(fā)育進(jìn)程。永生化后，在導(dǎo)入外源性基因，讓其能穩(wěn)定的表達(dá)。

4，神經(jīng)干細(xì)胞可以在體外根據(jù)不同的需要導(dǎo)入相

使細(xì)胞永生化的方法很多，但最常用的方法是導(dǎo)入外源性的癌基因，如V-myc,neu,p53,腺病毒E1A和SV40的大T抗原（T-ag），其中以myc和大T抗原基因?yàn)樽畛Ｒ?。以下是來自哺乳?dòng)物CNS的永生化細(xì)胞系(神經(jīng)干細(xì)胞系）使細(xì)胞永生化的方法很多，但最常用的方細(xì)胞系動(dòng)物部位永生化基因分化潛能Hib5ratE16hippocapustsA58/U19T-agmutipotentST14A,ST-86ratE14stratumtsA58/U19T-agmutipotentST-79-13ARN33BratE13medullaryraphetsA58T-agneuronesRN46AratE13medullaryraphetsA58T-agneuronesC17-2,C27-3mousePNcere3bellarEGLv-mycmutipotentCSM14.1.4ratE14ventraltsA58T-ag?mesencephalon細(xì)胞系動(dòng)物部位

用永生化的細(xì)胞系作為腦內(nèi)植入和基因轉(zhuǎn)移有很多優(yōu)點(diǎn)：用永生化的細(xì)胞系作為腦內(nèi)植入和基因轉(zhuǎn)移有很多優(yōu)（1）它們能自我更新并能在培養(yǎng)中增殖；（2）易于表達(dá)外源性基因；（3）可被分離成單一的克隆；（4）到了體內(nèi)不易改變其類似干細(xì)胞的特點(diǎn)；（5）可人為控制外源基因的表達(dá)；據(jù)報(bào)道，在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素后使得V-myc蛋白減少并導(dǎo)致細(xì)胞停止增殖，并出現(xiàn)神經(jīng)元的分化。（1）它們能自我更新并能在培養(yǎng)中增殖；神經(jīng)干細(xì)胞用于中樞神經(jīng)疾病治療舉例：神經(jīng)干細(xì)胞用于中樞神經(jīng)疾病治療舉例：帕金森氏病

帕金森氏病的發(fā)病率在神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病中位居第而，主要是因?yàn)槎喟桶纺苌窠?jīng)元的退化、死亡，導(dǎo)致多巴胺的水平下降所致。臨床主要表現(xiàn)震顫麻痹。帕金森氏病帕金森氏病的發(fā)病率在神經(jīng)系統(tǒng)退行性Anormallypigmentedsubstantianigraisseengrosslyinthemidbrainontheright,butthemidbrainontheleftfromthepatientwithParkinson'sdiseaseshowsapalesubstantianigra.AnormallypigmentedsubstantiAnormallypigmentedsubstantianigraisseenontheleft,butthepatientwithParkinson'sdiseasehasdecreasedneuronsandpigmentasseenmicroscopicallyattheright.Anormallypigmentedsubstanti

治療該疾病有兩種思路，提出兩種治療方案。治療該疾病有兩種思路，提出兩種治療方案。

1，表達(dá)外源基因的途徑導(dǎo)入酪氨酸羥化酶的外源性基因。因?yàn)槔野彼崃u化酶是多巴胺合成過程中的限速酶（為了保證其在體內(nèi)不至于過高表達(dá)，將酪胺酸羥化酶基因置于一個(gè)四環(huán)素的基因負(fù)調(diào)控系統(tǒng)中，停用四環(huán)素后，酪胺酸羥化酶表達(dá)可恢復(fù)，使癥狀得到緩解）。1，表達(dá)外源基因的途徑

2，利用神經(jīng)干細(xì)胞的多相分化潛能，在體外誘導(dǎo)分化成具有多巴胺能表型的神經(jīng)元，再進(jìn)行體內(nèi)移植。2，利用神經(jīng)干細(xì)胞的多相分化潛能，在體外誘導(dǎo)分神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件黑朦病(Tay-Sachsdisease,TSD)

該疾病缺乏β-氨基己糖酶A(HexA)的α亞單位，使神經(jīng)節(jié)苷脂GM2無法轉(zhuǎn)變成GM3，GM2在腦中的積累就導(dǎo)致神經(jīng)元退變。黑朦病(Tay-Sachsdisease,TSD)Theseenlarged,paleneuronsareinababywithTay-Sachsdisease,whichisseenmostlyinpersonsofEuropeanJewishheritage.Thediseaseisoftenfirstnoticedatanageof6months,becausethebabyisnotprogressingdevelopmentally.Theseenlarged,paleneuronsa

對這種疾病的治療，可以用C17-2和C27-3這兩個(gè)細(xì)胞系來表達(dá)人的β-氨基己糖酶A(HexA)的α亞單位。這無論在體內(nèi)還是在體外都有效果；其中植入正常胚胎或新生小鼠腦后，此酶至少能表達(dá)3~8周并增加酶的活性14%~76%。對這種疾病的治療，可以用C17-2和C27-粘多糖病Ⅶ型(MPSⅦ,Sly癥）

粘多糖?、餍褪怯蛇z傳缺乏β-葡萄糖苷酸酶（GUSB)基因所致，造成神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的變性。通過逆轉(zhuǎn)錄病毒可將人的GUSB基因轉(zhuǎn)入C17-2細(xì)胞系內(nèi)，把細(xì)胞植入新生模型動(dòng)物的腦室系統(tǒng)后，這些細(xì)胞可以散布到CNS的廣泛部位，達(dá)到治療疾病的目的。粘多糖?、餍?MPSⅦ,Sly癥）粘多糖病多發(fā)性硬化（MS)

多發(fā)性硬化也是一種較為高發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。主要是少突膠質(zhì)細(xì)胞被破壞或失去功能，導(dǎo)致軸突脫髓鞘，引起神經(jīng)功能紊亂。多發(fā)性硬化（MS)多發(fā)性硬化也是一種較為高發(fā)

其治療有兩種不同的方法（1）將神經(jīng)干細(xì)胞直接移植到病變的小鼠模型中；（2）把神經(jīng)干細(xì)胞在體外進(jìn)行分化誘導(dǎo)。然后再移植到病變的模型中（O-2A干細(xì)胞）。其治療有兩種不同的方法（1）將神經(jīng)干細(xì)胞直接導(dǎo)入神經(jīng)營養(yǎng)因子基因

這些神經(jīng)營養(yǎng)因子如：

NGF,BDGF,PDGF,CNTF,NT-3,NT-4/5,IGF等等，對神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有營養(yǎng)作用。

用于腦出血、腦脊髓損傷、腦腫瘤基因治療等等的治療導(dǎo)入神經(jīng)營養(yǎng)因子基因這些神經(jīng)營養(yǎng)因子如：轉(zhuǎn)導(dǎo)報(bào)告基因(LacZ基因)

將神經(jīng)干細(xì)胞在體外用于報(bào)告基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)，使用的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是BAG病毒，這種病毒含有大腸桿菌LacZ基因(半乳糖苷酶基因)，此基因可整和到增殖細(xì)胞的DNA中，并且能夠遺傳至子細(xì)胞。通過免疫組化法可將LacZ基因定位。因此，使用LacZ基因可以跟蹤移植后的干細(xì)胞及其子細(xì)胞，并且LacZ基因移植后的穩(wěn)定表達(dá)證實(shí)干細(xì)胞作為外源基因載體的可行性。

轉(zhuǎn)導(dǎo)報(bào)告基因(LacZ基因)將神經(jīng)干細(xì)胞在體目前研究的幾個(gè)方向：目前研究的幾個(gè)方向：1，神經(jīng)干細(xì)胞在腦內(nèi)起源、分布的研究及神經(jīng)干細(xì)胞的分離、純化和擴(kuò)增的條件。2，神經(jīng)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化及遷移的機(jī)制3，生長因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子對神經(jīng)干細(xì)胞的影響4，在體誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞的定向分化5，神經(jīng)干細(xì)胞在治療中的應(yīng)用6，人類的神經(jīng)干細(xì)胞是否也向其它胚層的細(xì)胞轉(zhuǎn)化。1，神經(jīng)干細(xì)胞在腦內(nèi)起源、分布的研究及神經(jīng)干謝謝！謝謝！神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)

神經(jīng)干細(xì)胞的概念NeuralStemCell

根據(jù)1997年Mckay在Science上發(fā)表的文章認(rèn)為，神經(jīng)干細(xì)胞就是指具有分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，能自我更新并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞。（專能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞）先祖細(xì)胞(Progenitor)：前體細(xì)胞(Precursor)：神經(jīng)干細(xì)胞的概念根據(jù)199神經(jīng)干細(xì)胞的研究歷史神經(jīng)干細(xì)胞的研究歷史

傳統(tǒng)觀點(diǎn)：

神經(jīng)細(xì)胞是永久性細(xì)胞，是不可能分裂的。神經(jīng)細(xì)胞損傷后由神經(jīng)膠質(zhì)增生進(jìn)行修復(fù)。這種觀點(diǎn)使人們對帕金森病、多發(fā)性硬化及腦脊髓損傷等疾病的治療受到了很大的限制。

傳統(tǒng)觀點(diǎn)：

早在20世紀(jì)60年代，Altman用同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶摻入腦中，發(fā)現(xiàn)在新皮質(zhì)、海馬、嗅球的細(xì)胞有同位素?fù)饺耄C明這些區(qū)域有能分裂的細(xì)胞存在。但是，由于當(dāng)時(shí)的條件無法進(jìn)行活體追蹤，體外培養(yǎng)也未能建立，因此傳統(tǒng)的觀點(diǎn)一直占優(yōu)勢。這應(yīng)該是對神經(jīng)干細(xì)胞最早的研究。早在20世紀(jì)60年代，Altman用同

對腦內(nèi)存在干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)是從研究胚胎腦發(fā)育開始的：

對腦內(nèi)存在干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)是從研究胚胎腦發(fā)育開始

1989年Temple從13天大鼠胚胎腦的隔區(qū)取出少量細(xì)胞進(jìn)行單個(gè)培養(yǎng)，看到這些細(xì)胞能發(fā)育成神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞；

1991年Williams等人的實(shí)驗(yàn)顯示，將近20%的胚胎腦的皮質(zhì)細(xì)胞可形成神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞；

1989年Temple從13天大鼠胚胎腦的隔1994年Davis和Temple通過單獨(dú)培養(yǎng)大鼠胚胎腦皮質(zhì)先祖細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，單個(gè)細(xì)胞可以分化成神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，即全部神經(jīng)組織細(xì)胞類型。他們發(fā)現(xiàn)，約有7%的先祖細(xì)胞具有這種能力。1994年Davis和Temple通過單獨(dú)培養(yǎng)大鼠胚在成年動(dòng)物的腦組織中也存在神經(jīng)干細(xì)胞：

在成年動(dòng)物的腦組織中也存在神經(jīng)干細(xì)胞：

1992年，Reynolds等首先從紋狀體培養(yǎng)出干細(xì)胞樣的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多潛能細(xì)胞，后來知道這些細(xì)胞來自室管膜下區(qū)；1997年，Palmer等又從成年大鼠的海馬齒狀回培養(yǎng)出神經(jīng)干細(xì)胞；此外，在成年動(dòng)物的脊髓、小腦等也都分離和培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞；1992年，Reynolds等首先從紋狀體培

在人類同樣分離和培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞。更令人興奮的是，1998年由Eriksson等從成人的海馬中也存在神經(jīng)元的前體細(xì)胞。在人類同樣分離和培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞。更令人興

總之，在動(dòng)物和人類的神經(jīng)系統(tǒng)中，從胚胎時(shí)期到成年時(shí)期均存在著神經(jīng)干細(xì)胞。總之，在動(dòng)物和人類的神經(jīng)系統(tǒng)中，從胚胎時(shí)期神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn)神經(jīng)干細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：

1，具有多種分化潛能，即分化為神經(jīng)組織的各種細(xì)胞，包括神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞（專能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞）。

神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn)神經(jīng)干細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：2，具有自我更新的能力，所謂自我更新，指將干細(xì)胞的屬性從親代傳遞到子代細(xì)胞，即在分裂增殖過程中子代細(xì)胞仍然維持干細(xì)胞的屬性（親代干細(xì)胞和子代干細(xì)胞）。2，具有自我更新的能力，所謂自我更新，指將干細(xì)胞的屬3，具有很強(qiáng)的分裂增殖能力。3，具有很強(qiáng)的分裂增殖能力。4，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。4，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。5，免疫特性：表達(dá)成神經(jīng)上皮細(xì)胞標(biāo)記

Nestin,Notch1,EGFR,FGFR(不表達(dá)NSE,GFAP,NF)5，免疫特性：表達(dá)成神經(jīng)上皮細(xì)胞標(biāo)記

6，神經(jīng)干細(xì)胞通過兩種方式生長,一種是對稱分裂,形成兩個(gè)相同的神經(jīng)干細(xì)胞;另一種是非對稱分裂,由于細(xì)胞質(zhì)中的調(diào)節(jié)分化蛋白不均勻的分配,使得一個(gè)子細(xì)胞不可逆的走向分化的終端而成為功能專一的分化細(xì)胞,另一個(gè)子細(xì)胞則保持親代的特征,仍作為神經(jīng)干細(xì)胞保留下來。分化細(xì)胞的數(shù)目受分化前干細(xì)胞的數(shù)目和分裂次數(shù)控制。

6，神經(jīng)干細(xì)胞通過兩種方式生長,一種是對稱分裂神經(jīng)干細(xì)胞與其它類型干細(xì)胞的關(guān)系

干細(xì)胞基本上可分為3種類型第一類是全能干細(xì)胞第二類是多能干細(xì)胞第三類是單能干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞與其它類型干細(xì)胞的關(guān)系

干細(xì)胞基本上神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件

骨髓干細(xì)胞可轉(zhuǎn)變?yōu)槟X細(xì)胞

美國國家神經(jīng)疾病與中風(fēng)研究院的一組專家，在病理解剖一些女性死者時(shí)發(fā)現(xiàn)了上述現(xiàn)象。這些女性死者生前都接受過骨髓移植。被移植的骨髓都來自男性捐獻(xiàn)者?？茖W(xué)家們在這些女性死者的大腦細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了Y染色體。Y染色體只存在于男性身上的細(xì)胞?？茖W(xué)家們因此判斷這些帶有Y染色體的細(xì)胞來自移植過來的骨髓干細(xì)胞骨髓干細(xì)胞可轉(zhuǎn)變?yōu)槟X細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞的分布

在胚胎發(fā)育過程中，神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)管壁增殖，新生的細(xì)胞沿放射狀纖維遷移至特定位置。此外，正如前面提到的在大腦的隔區(qū)、大腦皮質(zhì)等都培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞。

神經(jīng)干細(xì)胞的分布在胚胎發(fā)育過程中，神經(jīng)干

在成年的腦組織中，分離腦內(nèi)各區(qū)域細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng)，證實(shí)成年腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞分布廣泛，室管膜、腦室下區(qū)、紋狀體、海馬齒狀回、嗅球、脊髓等處。（分離不同腦區(qū)的細(xì)胞，體外進(jìn)行培養(yǎng)）在成年的腦組織中，分離腦內(nèi)各區(qū)域細(xì)胞并進(jìn)行體外神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法

獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法有四種：獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法獲取神經(jīng)干細(xì)胞的方法有四1，取胚胎、新生動(dòng)物和成年動(dòng)物的富于神經(jīng)干細(xì)胞的腦組織在體外進(jìn)行培養(yǎng)。1，取胚胎、新生動(dòng)物和成年動(dòng)物的富于神經(jīng)2，用反轉(zhuǎn)錄病毒導(dǎo)入原癌基因，如v-myc和SV40大T抗原等，部分細(xì)胞因此獲得持續(xù)分裂的能力

2，用反轉(zhuǎn)錄病毒導(dǎo)入原癌基因，如v-myc和3，通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞，使其分化成神經(jīng)干細(xì)胞，當(dāng)受到外界因素刺激或拆去生長因子時(shí)，細(xì)胞即開始分化成各種成熟的神經(jīng)細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞。3，通過誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞，使其分化成神經(jīng)干

4，非神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞分化誘導(dǎo)4，非神經(jīng)系統(tǒng)的干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞分化誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞的分化機(jī)制

神經(jīng)干細(xì)胞的分化機(jī)制神經(jīng)干細(xì)胞的分化受基因調(diào)控

Pevny等將神經(jīng)元特異性的Soｘ2基因轉(zhuǎn)染胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)維甲酸誘導(dǎo),可獲得90%以上的神經(jīng)細(xì)胞。Giebel等表達(dá)Nurrl基因?qū)τ谥心X神經(jīng)前體細(xì)胞分化為多巴胺能神經(jīng)元起決定作用。這些研究表明基因調(diào)控與神經(jīng)干細(xì)胞的定向分化密切相關(guān)。神經(jīng)干細(xì)胞的分化受基因調(diào)控Pevny等將神經(jīng)元細(xì)胞因子與神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化密切相關(guān)

細(xì)胞因子與神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化密切相關(guān)（一）、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)對神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響（一）、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)對神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影

FGF家族包括至少15個(gè)成員。FGFs主要通過四種成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR1~4)傳導(dǎo)信號(hào)。FGF1和FGF2目前研究比較多。

FGFs和FGFR1~4在胚胎期和成年中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)隨著時(shí)間和區(qū)域變化而有所不同，表明它們所起的作用不同。FGF家族包括至少15個(gè)成員。FGFs主要

體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明FGF2在調(diào)節(jié)神經(jīng)前體細(xì)胞增殖方面起著重要作用。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明FGF2在調(diào)節(jié)神經(jīng)前體細(xì)胞增殖方面起

幼鼠皮下注射FGF2能刺激海馬和小腦的顆粒細(xì)胞層內(nèi)的神經(jīng)生發(fā)區(qū)域神經(jīng)干細(xì)胞增殖。若注入FGF2的中和抗體，則可使神經(jīng)生發(fā)區(qū)域的DNA合成降低50%。將FGF2注入成年鼠的側(cè)腦室內(nèi)可引起腦室下區(qū)前體細(xì)胞增殖，數(shù)量增加，以及從室下區(qū)遷移至嗅球的神經(jīng)元數(shù)量增加。幼鼠皮下注射FGF2能刺激海馬和小腦的顆粒細(xì)

體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)FGF2具有有絲分裂原的作用，可促進(jìn)細(xì)胞的增殖；同時(shí)可抑制前體細(xì)胞的分化；這種刺激增殖和抑制分化作用與FGF2的濃度有關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)FGF2具有有絲分裂原的作用，可促進(jìn)

在培養(yǎng)過程中，當(dāng)FGF2減少時(shí)，神經(jīng)干細(xì)胞即分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞。當(dāng)FGF2的濃度為0.1ng/ml時(shí)，皮質(zhì)神經(jīng)前體細(xì)胞增殖并形成神經(jīng)元克隆。而FGF2的濃度為1ng~10ng/ml時(shí)，皮質(zhì)神經(jīng)前體細(xì)胞可分化成神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞，如加入其他因子，可分化成星形膠質(zhì)細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中，當(dāng)FGF2減少時(shí)，神經(jīng)干細(xì)胞

產(chǎn)生以上結(jié)果的原因：

FGF2與不同的受體親和力不同，引起的信號(hào)傳導(dǎo)通路不同。FGF濃度決定它與不同受體的親和力。0.1ng/mlFGF2可激活FGFR1和FGFR2，但對FGFR3無任何作用。1ng~10ng/mlFGF2可激活FGFR3，推測低濃度FGF2啟動(dòng)分裂信號(hào)，而高濃度啟動(dòng)分裂和分化信號(hào)。產(chǎn)生以上結(jié)果的原因：FGF和其他生長因子的協(xié)同作用：FGF和其他生長因子的協(xié)同作用：1，在胰島素樣生長因子（IGF）和血小板衍生的生長因子(PDGF)存在下，F(xiàn)GF2對能分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞和2型星形膠質(zhì)細(xì)胞的雙潛能0-2A膠質(zhì)前體細(xì)胞具有促進(jìn)增殖的作用.1，在胰島素樣生長因子（IGF）和血小板衍生的生長2,加入腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、胰島素樣生長因子1（IGF1）、神經(jīng)營養(yǎng)素3（NT3）主要促使其向神經(jīng)元方向分化。2,加入腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、胰島素樣生長3,FGF1也可以使神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化時(shí)，抑制Notch信號(hào)途徑（維持干細(xì)胞狀態(tài)的信號(hào)），并同時(shí)激活FGF1介導(dǎo)的信號(hào)通路。3,FGF1也可以使神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化。誘導(dǎo)

4，星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化依賴于白細(xì)胞抑制因子受體（LIFR）信號(hào)傳導(dǎo)。如抑制LIFR信號(hào)傳導(dǎo)，則向神經(jīng)元方向分化。提示信號(hào)傳導(dǎo)可抑制神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元方向分化?；罨腖IFR通過JAK-STAT途徑直接啟動(dòng)GFAP基因的表達(dá)。已有研究證實(shí)，STAT3能直接連接到GFAP基因啟動(dòng)子的保守位點(diǎn)并調(diào)節(jié)其表達(dá)。4，星形膠質(zhì)細(xì)胞的分化依賴于白細(xì)胞抑制因子受體（二）表皮生長因子（EGF）對神經(jīng)干細(xì)胞的影響（二）表皮生長因子（EGF）對神經(jīng)干細(xì)胞的影響

表皮生長因子通過其受體起作用。與FGF比較：①EGF在發(fā)育較晚期起作用，因?yàn)樵贓15天才能檢測到EGFRmRNA;表皮生長因子通過其受體起作用。與FGF比較：

②EGF的作用范圍也較窄，因?yàn)镋GFR的分布不如FGFR分布廣泛；②EGF的作用范圍也較窄，因?yàn)镋GFR的分布不③EGF在前體細(xì)胞增殖和分化中起作用，也可能對細(xì)胞生存和遷移起作用，但往往對膠質(zhì)前體細(xì)胞有促增殖作用（而FGF2對分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)干細(xì)胞有促增殖作用）③EGF在前體細(xì)胞增殖和分化中起作用，也可

也有另外一種觀點(diǎn)：將腦組織消化后，在有EGF存在的情況下，一些分裂細(xì)胞形成球狀團(tuán)快，然后對這種球狀團(tuán)快進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)檢測，發(fā)現(xiàn)這種小球的細(xì)胞能生成神經(jīng)系統(tǒng)的三種細(xì)胞，即神經(jīng)元、星形膠質(zhì)和少突膠質(zhì)細(xì)胞。如果將這些細(xì)胞分離后用FGF2刺激，發(fā)現(xiàn)其對兩種不同細(xì)胞有刺激在一定范圍內(nèi)增殖的作用：一種是單潛能的神經(jīng)先祖細(xì)胞（一個(gè)細(xì)胞只分裂成3~17個(gè)神經(jīng)細(xì)胞），另一種則是雙潛能的先祖細(xì)胞，能形成有限數(shù)量的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。也有另外一種觀點(diǎn)：將腦組織消化后，在有EGF無血清培養(yǎng)液中懸浮的克隆，體外培養(yǎng)第7d無血清培養(yǎng)液中懸浮的克隆，體外培養(yǎng)第7d克隆細(xì)胞呈Nestin陽性(FITC免疫熒光)，克隆細(xì)胞呈Nestin陽性(FITC免疫熒光)，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在神經(jīng)干細(xì)胞分化中十分重要

Notch信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)Janus激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活劑(JAK-STAT)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在神經(jīng)干細(xì)胞分化中十分重要Notch信號(hào)傳導(dǎo)系神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)疾病治療中的一些應(yīng)用神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)疾病治

在成功分離和培養(yǎng)了神經(jīng)干細(xì)胞之后，人們很自然地想到利用它治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病。歸納起來有以下幾方面：在成功分離和培養(yǎng)了神經(jīng)干細(xì)胞之后，人們很1、利用神經(jīng)干細(xì)胞直接進(jìn)行移植治療（干細(xì)胞體外擴(kuò)增），神經(jīng)干細(xì)胞腦中能根據(jù)其周圍環(huán)境的誘導(dǎo)而分裂，分化成相應(yīng)的細(xì)胞類型，其形態(tài)和功能與附近的宿主細(xì)胞非常類似。加之，中樞神經(jīng)系統(tǒng)具備特殊的結(jié)構(gòu)——血腦屏障，使得淋巴細(xì)胞很難進(jìn)入，因而不同個(gè)體之間，甚至是不同種物之間的神經(jīng)干細(xì)胞，都幾乎沒有排斥反應(yīng)，大大拓寬了神經(jīng)干細(xì)胞的應(yīng)用。1、利用神經(jīng)干細(xì)胞直接進(jìn)行移植治療（干細(xì)胞體外擴(kuò)增）

2，神經(jīng)干細(xì)胞在體外定向誘導(dǎo)分化，然后再移植到神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)。2，神經(jīng)干細(xì)胞在體外定向誘導(dǎo)分化，然神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件神經(jīng)干細(xì)胞及其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用課件

3，神經(jīng)干細(xì)胞的在體誘導(dǎo)分化。由于正常成年個(gè)體環(huán)繞側(cè)腦室的室管膜下層、紋狀體等地方仍存在神經(jīng)干細(xì)胞，這些干細(xì)胞在正常情況下處于靜息狀態(tài)，如能將其在體內(nèi)誘導(dǎo)分化以替代神經(jīng)細(xì)胞或膠質(zhì)細(xì)胞。

3，神經(jīng)干細(xì)胞的在體誘導(dǎo)分化。由于正常成年個(gè)體

Craig將EGF連續(xù)六天注入成年鼠的側(cè)腦室中，發(fā)現(xiàn)被標(biāo)記的室管膜下細(xì)胞增加了17倍，并從側(cè)腦室壁轉(zhuǎn)移至鄰近的皮層、紋狀體和透明隔，七周后發(fā)現(xiàn)一部分細(xì)胞分化成新的神經(jīng)元、星形細(xì)胞和少枝膠質(zhì)細(xì)胞。由引可見，通過誘導(dǎo)神經(jīng)系統(tǒng)中的原位神經(jīng)干細(xì)胞增殖、遷移和分化也可達(dá)到修復(fù)受損神經(jīng)元的目的。Craig將EGF連續(xù)六天注入成年鼠的側(cè)腦室

4，神經(jīng)干細(xì)胞可以在體外根據(jù)不同的需要導(dǎo)入相應(yīng)的外源性基因，成為一種廣譜的細(xì)胞載體。由于神經(jīng)干細(xì)胞在植入后，會(huì)在周圍環(huán)境的誘導(dǎo)下分化成熟，所以要使其處于不斷分裂中，必須將神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行永生化。所謂永生化就是將細(xì)胞總是處于連續(xù)的細(xì)胞周期內(nèi)而中止其分化發(fā)育進(jìn)程。永生化后，在導(dǎo)入外源性基因，讓其能穩(wěn)定的表達(dá)。

4，神經(jīng)干細(xì)胞可以在體外根據(jù)不同的需要導(dǎo)入相

使細(xì)胞永生化的方法很多，但最常用的方法是導(dǎo)入外源性的癌基因，如V-myc,neu,p53,腺病毒E1A和SV40的大T抗原（T-ag），其中以myc和大T抗原基因?yàn)樽畛Ｒ姟Ｒ韵率莵碜圆溉閯?dòng)物CNS的永生化細(xì)胞系(神經(jīng)干細(xì)胞系）使細(xì)胞永生化的方法很多，但最常用的方細(xì)胞系動(dòng)物部位永生化基因分化潛能Hib5ratE16hippocapustsA58/U19T-agmutipotentST14A,ST-86ratE14stratumtsA58/U19T-agmutipotentST-79-13ARN33BratE13medullaryraphetsA58T-agneuronesRN46AratE13medullaryraphetsA58T-agneuronesC17-2,C27-3mousePNcere3bellarEGLv-mycmutipotentCSM14.1.4ratE14ventraltsA58T-ag?mesencephalon細(xì)胞系動(dòng)物部位

用永生化的細(xì)胞系作為腦內(nèi)植入和基因轉(zhuǎn)移有很多優(yōu)點(diǎn)：用永生化的細(xì)胞系作為腦內(nèi)植入和基因轉(zhuǎn)移有很多優(yōu)（1）它們能自我更新并能在培養(yǎng)中增殖；（2）易于表達(dá)外源性基因；（3）可被分離成單一的克??；（4）到了體內(nèi)不易改變其類似干細(xì)胞的特點(diǎn)；（5）可人為控制外源基因的表達(dá)；據(jù)報(bào)道，在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素后使得V-myc蛋白減少并導(dǎo)致細(xì)胞停止增殖，并出現(xiàn)神經(jīng)元的分化。（1）它們能自我更新并能在培養(yǎng)中增殖；神經(jīng)干細(xì)胞用于中樞神經(jīng)疾病治療舉例：神經(jīng)干細(xì)胞用于中樞神經(jīng)疾病治療舉例：帕金森氏病

帕金森氏病的發(fā)病率在神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病中位居第而，主要是因?yàn)槎喟桶纺苌窠?jīng)元的退化、死亡，導(dǎo)致多巴胺的水平下降所致。臨床主要表現(xiàn)震顫麻痹。帕金森氏病帕金森氏病的發(fā)病率在神經(jīng)系統(tǒng)退行性Anormallypigmentedsubstantianigraisseengrosslyinthemidbrainontheright,butthemidbrainontheleftfromthepatientwithParkinson'sdiseaseshowsapalesubstantianigra.AnormallypigmentedsubstantiAnormallypigmentedsubstantianigraisseenontheleft,b