標準病理制片流程課件

標準病理制片流程標準病理制片流程1標準病理制片流程課件2標準病理制片流程課件3標準病理制片流程課件4標準病理制片流程課件5標準病理制片流程課件6標準病理制片流程課件7標準病理制片流程課件8標準病理制片流程課件9標準病理制片流程課件10標準病理制片流程課件11標準病理制片流程課件12謝謝聆聽~~謝謝聆聽~~13HE染色操作步驟蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining)，簡稱HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。HE染色操作步驟14工具/原料固定液——甲醛（福爾馬林）脫水劑——酒精透明劑——二甲苯石蠟脫蠟劑：二甲苯至水劑：酒精染色劑：蘇木精水溶液，酒精伊紅染色液生理鹽水、蒸餾水、PBS實驗必備溶劑工具/原料15適用范圍

組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。適用范圍

組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。16he染色實驗具體步驟1取材，固定：固定液——甲醛（福爾馬林）從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0．5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10％福爾馬林，Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質(zhì)變性凝固，以防止細胞死后的自溶或細菌的分解，從而保持細胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。he染色實驗具體步驟17修剪，脫水，透明：脫水劑——酒精透明劑——二甲苯不同組織固定時間不同，固定成功后需要修剪25px*25px*5px，放入包埋盒中，流水沖洗（去除組織中的固定液）30分鐘。至于不同濃度的酒精脫水，一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明，以二甲苯替換出組織塊的中酒精，才能浸蠟包埋。修剪，脫水，透明：脫水劑——酒精18浸蠟，包埋：石蠟將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中，放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋，冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬，才能在切片機上切成很薄的切片。切片、展片、烤片：將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片，一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折，要放到加熱的水中燙平，再貼到載玻片上，放45℃恒溫箱中烘干。浸蠟，包埋：石蠟19脫蠟、至水、染色：脫蠟劑：二甲苯脫水劑：酒精染色劑：蘇木精水溶液，酒精伊紅染脫蠟、至水、染色：20染色液染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，最后入蒸餾水，就可染色。蘇木精(Hematoxylin，H)是一種堿性染料，可將細胞核和細胞內(nèi)核糖體染成藍紫色，被堿性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿性。伊紅(Eosin，E)是一種酸性染料，能將細胞質(zhì)染成紅色或淡紅色，被酸性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸性。染色液21HE染色過程：1將已入蒸餾水后的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘。2酸水及氨水中分色，各數(shù)秒鐘。3流水沖洗1小時后入蒸餾水片刻。4入70％和90％酒精中脫水各10分鐘。5入酒精伊紅染色液染色2—3分鐘。HE染色過程：22脫水、透明：染色后的切片經(jīng)純酒精脫水，再經(jīng)二甲苯使切片透明。封片將已透明的切片滴上樹膠，蓋上蓋玻片封固。待樹膠略干后，貼上標箋，切片標本就可使用。脫水、透明：23請觀看視頻～～～謝謝聆聽~~請觀看視頻～～～24謝謝觀賞謝謝觀賞25標準病理制片流程標準病理制片流程26標準病理制片流程課件27標準病理制片流程課件28標準病理制片流程課件29標準病理制片流程課件30標準病理制片流程課件31標準病理制片流程課件32標準病理制片流程課件33標準病理制片流程課件34標準病理制片流程課件35標準病理制片流程課件36標準病理制片流程課件37謝謝聆聽~~謝謝聆聽~~38HE染色操作步驟蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining)，簡稱HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。HE染色操作步驟39工具/原料固定液——甲醛（福爾馬林）脫水劑——酒精透明劑——二甲苯石蠟脫蠟劑：二甲苯至水劑：酒精染色劑：蘇木精水溶液，酒精伊紅染色液生理鹽水、蒸餾水、PBS實驗必備溶劑工具/原料40適用范圍

組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。適用范圍

組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。41he染色實驗具體步驟1取材，固定：固定液——甲醛（福爾馬林）從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0．5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10％福爾馬林，Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質(zhì)變性凝固，以防止細胞死后的自溶或細菌的分解，從而保持細胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。he染色實驗具體步驟42修剪，脫水，透明：脫水劑——酒精透明劑——二甲苯不同組織固定時間不同，固定成功后需要修剪25px*25px*5px，放入包埋盒中，流水沖洗（去除組織中的固定液）30分鐘。至于不同濃度的酒精脫水，一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明，以二甲苯替換出組織塊的中酒精，才能浸蠟包埋。修剪，脫水，透明：脫水劑——酒精43浸蠟，包埋：石蠟將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中，放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋，冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬，才能在切片機上切成很薄的切片。切片、展片、烤片：將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片，一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折，要放到加熱的水中燙平，再貼到載玻片上，放45℃恒溫箱中烘干。浸蠟，包埋：石蠟44脫蠟、至水、染色：脫蠟劑：二甲苯脫水劑：酒精染色劑：蘇木精水溶液，酒精伊紅染脫蠟、至水、染色：45染色液染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，最后入蒸餾水，就可染色。蘇木精(Hematoxylin，H)是一種堿性染料，可將細胞核和細胞內(nèi)核糖體染成藍紫色，被堿性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿性。伊紅(Eosin，E)是一種酸性染料，能將細胞質(zhì)染成紅色或淡紅色，被酸性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸性。染色液46HE染色過程：1將已入蒸餾水后的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘。2酸水及氨水中分色，各數(shù)秒鐘。3流水沖洗1小時后入蒸餾水片刻。4入70％和90％酒精中脫水各10