高中生物專(zhuān)題12 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用（解析版）

2020屆高考生物難點(diǎn)及易錯(cuò)題精講精練專(zhuān)題12微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用【難點(diǎn)精講】一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和無(wú)菌技術(shù)例題：(2018·全國(guó)Ⅱ，37)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)__________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是_____________________________________________________________________________。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_______________________。在照射前，適量噴灑________，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是____________________?！敬鸢浮?1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【解析】(1)干熱滅菌是指將物品放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃條件下加熱1～2h。耐高溫、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等，可采用干熱滅菌的方法。(2)巴氏消毒法是在70～75℃條件下煮30min或在80℃條件下煮15min，可以殺死牛奶中的微生物，并且使牛奶的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前，可以用紫外線照射30min，紫外線能破壞微生物的DNA結(jié)構(gòu)，以殺死物體表面或空氣中的微生物。在照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以強(qiáng)化消毒效果。(4)自來(lái)水通常是用氯氣進(jìn)行消毒的。(5)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是鍋內(nèi)原有的冷空氣沒(méi)有排盡?！倦y點(diǎn)突破】無(wú)菌技術(shù)(1)含義：在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)常用方法大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基eq\x(計(jì)算)→eq\x(稱(chēng)量)→eq\x(溶化)→eq\x(調(diào)pH)→eq\x(滅菌)→eq\x(倒平板)(2)純化大腸桿菌的方法①平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。(3)菌種的保存方法①對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。②對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。變式訓(xùn)練：（2018·河北衡水中學(xué)七調(diào)）下列表格是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列相關(guān)問(wèn)題。成分含量蛋白胨10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0gK2HPO42.0g顯色劑（伊紅美藍(lán)）0.2g瓊脂12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL（1）根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需對(duì)培養(yǎng)基做出的最關(guān)鍵的調(diào)整是，若還需鑒定分解尿素的細(xì)菌.需做出的調(diào)整是。（2）從培養(yǎng)基的成分上看，大腸桿菌的同化類(lèi)型為。該培養(yǎng)基能否用于分離篩選出大腸桿菌？為什么？_______________________________。（3）在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí)，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是，紫外線可對(duì)空氣進(jìn)行滅菌的原因是_____________________________________________________。（4）某同學(xué)嘗試純化大腸桿菌，其中一個(gè)平板的菌落分布如上圖，推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是__________________________________________。【解析】（1）伊紅美藍(lán)是鑒定大腸桿菌的試劑，因此該培養(yǎng)基從用途上分屬于鑒別培養(yǎng)基；若要分離能分解尿素的細(xì)菌，則需要保證培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，即將蛋白胨換成尿素；鑒定分解尿素的細(xì)菌，需要使用酚紅指示劑。（2）大腸桿菌需要從培養(yǎng)基中獲得碳源，因此其同化作用類(lèi)型是異養(yǎng)型；由于表格中的培養(yǎng)基中的碳源種類(lèi)很多，可供多種微生物生存，因此該培養(yǎng)基不能用于分離篩選出大腸桿菌。（3）微生物培養(yǎng)時(shí)，關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的感染；空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能讓蛋白質(zhì)變性，同時(shí)還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)。（4）由題圖可知，接種時(shí)該同學(xué)采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒(méi)有很好地分散開(kāi)來(lái)，可能是涂布不均勻?qū)е碌??！敬鸢浮浚?）鑒別將蛋白胨換成尿素將伊紅美藍(lán)換成酚紅指示劑（2）異養(yǎng)型不能，原因是培養(yǎng)基中的碳源種類(lèi)很多，可供多種微生物生存（3）防止外來(lái)雜菌的感染紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)（4）涂布不均勻目標(biāo)微生物的篩選與鑒定例題：（2017·全國(guó)卷Ⅰ，37）某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________________，但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是______________（答出兩點(diǎn)即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________________________________________________。（3）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_________________________________________________（答出兩點(diǎn)即可）?！敬鸢浮浚?）脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料（2）尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用（3）為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽離子，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定【解析】（1）只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素的細(xì)菌是一種分解者，屬于異養(yǎng)型生物，不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源。能分解尿素的細(xì)菌可以以葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，另一方面其代謝中間產(chǎn)物可為多種有機(jī)物的合成提供原料。（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，而其他兩組都含有含氮物質(zhì)NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3不能起到篩選作用。（3）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用：KH2PO4和Na2HPO4構(gòu)成緩沖液，可維持培養(yǎng)基的pH相對(duì)穩(wěn)定；KH2PO4和Na2HPO4能為微生物生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽離子?！倦y點(diǎn)突破】分離微生物的原理與措施（1）原理：自然環(huán)境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養(yǎng)物應(yīng)首先采用的方法是將單個(gè)的微生物與其他微生物分離，再給該微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和條件，使其生長(zhǎng)成為可見(jiàn)的群體。（2）常用措施①接種過(guò)程中盡量使微生物分散開(kāi)來(lái)，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。②運(yùn)用選擇培養(yǎng)基的作用特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中添加某種特定的物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需微生物的生長(zhǎng)。選擇培養(yǎng)基四種常見(jiàn)制備方法或?qū)嵗兪接?xùn)練：(2018·山東、湖北部分重點(diǎn)中學(xué)高考沖刺模擬)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌，具有下列類(lèi)似的操作過(guò)程：(1)在過(guò)程④的選擇培養(yǎng)基是________培養(yǎng)基(填“固體”或“液體”)，過(guò)程⑧的選擇培養(yǎng)基是________培養(yǎng)基(填“固體”或“液體”)。④的具體操作是________________；⑧的具體操作是________________________________________________________________________。(2)在過(guò)程③樣品梯度稀釋后，一般只將稀釋度為104～106倍的菌液分別接種到3個(gè)平板培養(yǎng)基上。接種的常用方法為_(kāi)___________________________。(3)過(guò)程⑩采用______________________的鑒別方法較簡(jiǎn)單。周?chē)霈F(xiàn)透明圈但不能100%確定為纖維素分解菌的菌落，原因是_________________________________________?！敬鸢浮?1)固體液體以尿素為唯一氮源以纖維素為唯一碳源(2)稀釋涂布平板(或平板劃線)法(3)倒平板時(shí)加入剛果紅染液不分解纖維素(如分解剛果紅)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈【解析】(1)將微生物接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，才能形成菌落，可見(jiàn)，過(guò)程④的選擇培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。進(jìn)行梯度稀釋并接種前要進(jìn)行過(guò)程⑧所示的選擇培養(yǎng)，因此過(guò)程⑧的選擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。④選擇培養(yǎng)的目的是篩選尿素分解菌，所以具體的操作是以尿素為唯一氮源；⑧選擇培養(yǎng)的目的是篩選纖維素分解菌，所以⑧的具體操作是以纖維素為唯一碳源。(2)常采用稀釋涂布平板(或平板劃線)法，將稀釋度為104～106倍的菌液分別接種到3個(gè)平板培養(yǎng)基上。(3)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。可見(jiàn)，過(guò)程⑩采用倒平板時(shí)加入剛果紅染液的鑒別方法較簡(jiǎn)單。由于不分解纖維素(如分解剛果紅)的微生物菌落也可能出現(xiàn)透明圈，所以周?chē)霈F(xiàn)透明圈的菌落，不能100%確定為纖維素分解菌的菌落。【真題回顧】一、單選題1．（2019·北京高考真題）篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈（如圖），實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。菌種菌落直徑：C（mm）透明圈直徑：H（mm）H/C細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是A．培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B．篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布C．以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D．H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異【答案】C【解析】培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時(shí)，需要對(duì)菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)賹⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會(huì)產(chǎn)生透明圈，說(shuō)明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細(xì)胞外分解淀粉，C錯(cuò)誤；淀粉分解菌的H/C越大，說(shuō)明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對(duì)越多，可說(shuō)明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強(qiáng)，D正確。因此，本題答案選C。2．（2019·江蘇省高考真題）下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不合理的是A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C．在分離平板上長(zhǎng)出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值【答案】A【解析】應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌，只有纖維素分解菌能夠存活，A錯(cuò)誤；木材、秸稈中富含纖維素，故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，B正確；用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌后，為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，C正確；用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，可以把纖維素分解成葡萄糖，提高飼用價(jià)值，D正確。故選A。3．（2019·江蘇省高考真題）下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是A．培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C．接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染D．菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基【答案】A【解析】接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理，接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基及多種器材用高壓蒸汽滅菌法處理，A錯(cuò)誤；為了防止雜菌污染，每次接種前后，接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒滅菌，B正確；接種后，培養(yǎng)皿需要倒置，以防皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染，C正確；分離菌種可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者還可以用于微生物的計(jì)數(shù)，所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，D正確。故選A。二、綜合題4．（2019·全國(guó)高考真題）已知一種有機(jī)物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌（目標(biāo)菌）。Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無(wú)機(jī)鹽（適量），X（15g/L）。Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無(wú)機(jī)鹽（適量）。X（45g/L）?；卮鹣铝袉?wèn)題。（1）在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有機(jī)物是_________。（2）若將土壤懸浮液種在Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)_________，其原因是_________。（3）Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是______________。（4）假設(shè)從Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長(zhǎng)提供_________和_________。【答案】牛肉膏、蛋白胨X下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖稀釋涂布平板法能量合成其他物質(zhì)的原料【解析】（1）氮源是微生物生長(zhǎng)需要的一類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長(zhǎng)提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨來(lái)源于動(dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號(hào)培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長(zhǎng)所需要的一類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長(zhǎng)提供碳元素，而有機(jī)物均含碳元素，II、III號(hào)培養(yǎng)基均含有有機(jī)物X，因此，II、III號(hào)培養(yǎng)基為微生物的生長(zhǎng)提供碳源的均為有機(jī)物X。（2）由于II號(hào)培養(yǎng)基含有的碳源只有有機(jī)物X，因此若將土壤懸浮液接種在II號(hào)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌由于無(wú)法獲得碳源而無(wú)法增殖導(dǎo)致其比例減少。（3）微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個(gè)菌落是由菌液中的一個(gè)活菌繁殖而來(lái)，所以常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。（4）丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長(zhǎng)提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。5．（2018·全國(guó)高考真題）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制___________的生長(zhǎng)，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類(lèi)型除氮源外還有___________（答出兩點(diǎn)即可）。氮源進(jìn)入細(xì)菌后，可參與合成的生物大分子有___________（答出兩點(diǎn)即可）。（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長(zhǎng)出菌落后可通過(guò)加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是___________，該方法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理___________。（4）甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133。乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是：_____________________?！敬鸢浮考?xì)菌選擇碳源、無(wú)機(jī)鹽蛋白質(zhì)、DNA、RNA碘液淀粉遇碘顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶菌落周?chē)矸郾凰?，形成透明圈乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差【解析】（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說(shuō)明M培養(yǎng)基能滿(mǎn)足真菌的生長(zhǎng)，而能抑制其它微生物的生長(zhǎng)，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（2）微生物生長(zhǎng)需要多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無(wú)機(jī)鹽、水以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸（DNA、RNA）。（3）淀粉與碘液會(huì)變成藍(lán)色，篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周?chē)矸郾凰?，形成透明圈，再根?jù)透明圈，來(lái)篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。（4）乙同學(xué)結(jié)果不合理，因?yàn)?個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊較大，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡(jiǎn)單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。6．（2018·全國(guó)高考真題）回答下列與酵母菌有關(guān)的問(wèn)題：（1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)觀察到菌落，菌落的含義是_______________。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，可促進(jìn)______________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)_________（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）。（3）制作面包時(shí)，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是______________________?！敬鸢浮葵溠恐傊邏赫羝梢粋€(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生酵母菌分解葡萄糖會(huì)產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟【解析】（1）麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細(xì)胞增殖快；若進(jìn)行無(wú)氧培養(yǎng)，進(jìn)行無(wú)氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，增殖慢。（3）制作面包時(shí)，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔。7．（2019·全國(guó)高考真題）回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題。（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是________。硝化細(xì)菌在沒(méi)有碳源的培養(yǎng)基上______（填“能夠”或“不能”）生長(zhǎng)，原因是____________。（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板____________（填“倒置”或“正置”）。（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是____________。（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過(guò)____________處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。【答案】蛋白胨不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征滅菌【解析】（1）葡萄糖只能為細(xì)菌提供碳源，硝酸鈉為細(xì)菌提供無(wú)機(jī)鹽，而蛋白胨既可以為細(xì)菌碳源，也可以為細(xì)菌提供氮源；由于不同的細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；硝化細(xì)菌屬于化能自養(yǎng)型微生物，其可以利用氨氧化釋放的能量將空氣中的二氧化碳固定為有機(jī)物，因此硝化細(xì)菌可以在無(wú)碳培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將平板倒置培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（3）由于每一大類(lèi)微生物都有其獨(dú)特的細(xì)胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物。（4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。三、實(shí)驗(yàn)題8．（2019·全國(guó)高考真題）物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌（目標(biāo)菌）?；卮鹣铝袉?wèn)題。（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是________。（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，?qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即_______。（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________，三處滴加量相同。②一段時(shí)間后，測(cè)量透明圈的直徑。若C處沒(méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說(shuō)明___________?！敬鸢浮縒乙乙菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明乙菌能降解W將甲、乙菌分別接種在無(wú)氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長(zhǎng)，則說(shuō)明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈淳彌_液緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近【解析】（1）該研究小組的目標(biāo)菌是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。（2）研究小組的目標(biāo)菌，是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標(biāo)細(xì)菌。（3）目標(biāo)菌能夠利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無(wú)氮源的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌便是目的細(xì)菌，故實(shí)驗(yàn)操作為：將甲、乙菌分別接種在無(wú)氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長(zhǎng)，則說(shuō)明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。?）①C處作為空白對(duì)照，要排除作為溶劑的緩沖液對(duì)實(shí)驗(yàn)可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說(shuō)明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說(shuō)明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。9．（2018·全國(guó)高考真題）在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染。回答下列問(wèn)題：（1）在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)_______（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是________。（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________，在照射前，適量噴灑_________，可強(qiáng)化消毒效果。（4）水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)________（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。（5）某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是__________________________。【答案】可以在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液氯氣未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【解析】（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。（2）煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30min或在80℃煮15min，可以殺死微生物，并且保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法的優(yōu)點(diǎn)是在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。（3）因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。（4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來(lái)水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無(wú)法使用；因此水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)氯氣消毒的。（5）采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會(huì)出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。10．（2018·江蘇省高考真題）酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來(lái)源。有些酵母可以利用工業(yè)廢中醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類(lèi)酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題:（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱(chēng)量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的_________，及時(shí)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行_________滅菌。（2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約_________（在25℃、50℃或80℃中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。（3）挑取分離平板中長(zhǎng)出的單菌落，按步驟④進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有_________。（多選）a.為保證無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測(cè)定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過(guò)逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株（4）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用_________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過(guò)程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和_________供應(yīng)。為監(jiān)測(cè)酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺(tái)盼藍(lán)染液染色，用25×16型（1mm×lmm×O.1mm）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上_________色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于_________，才能達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。【答案】pH高壓蒸汽50℃a、b、d麥芽汁瓊脂氧氣無(wú)30【解析】（1）配制培養(yǎng)基的操作步驟為稱(chēng)量→溶化→定容→調(diào)pH→培養(yǎng)基的分裝→包扎→滅菌，因此微生物的培養(yǎng)基配制好后應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH，再分裝。常見(jiàn)的滅菌方法有：干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌。培養(yǎng)基適宜用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。（2）在步驟③中，待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板。（3）在劃線過(guò)程中，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，以防止雜菌污染，a正確；劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，否則將不能形成正常菌落，b正確；該實(shí)驗(yàn)的目的是獲得利用工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母菌，不需要測(cè)定酵母菌中的甲醇含量，c錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中的甲醇濃度越高，此種培養(yǎng)基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越強(qiáng)，因此可以通過(guò)逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株，d正確。（4）酵母菌通過(guò)有氧呼吸大量繁殖，因此為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過(guò)程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣供應(yīng)；臺(tái)盼藍(lán)是大分子物質(zhì)，不能將活細(xì)胞染色，再根據(jù)25×16型的血球計(jì)數(shù)板：1毫升懸液中待測(cè)標(biāo)本（菌體）總數(shù)=80小方格內(nèi)菌體數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)。而臺(tái)盼藍(lán)與菌液等體積加入，因此要達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度，理論上無(wú)色細(xì)胞數(shù)應(yīng)該不少于（3×109）÷（1000×2×104×400÷80）=30個(gè)?！拘骂}精練】一、單選題1．（2020·山東省濟(jì)南外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高三其他）用紙片擴(kuò)散法測(cè)定某病原菌對(duì)各種抗生素敏感性的實(shí)驗(yàn)，是在某病原菌均勻分布的平板上，鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖示為培養(yǎng)的結(jié)果，其中抑菌圈是在紙片周?chē)霈F(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是A．在圖示固體培養(yǎng)基上可用平板劃線法或涂布法接種病原菌B．未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異C．形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感D．不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響【答案】D【解析】A、在圖示固體培養(yǎng)基上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種病原菌，A錯(cuò)誤；B、病原菌發(fā)生抗性變異在接觸之前，B錯(cuò)誤；C、微生物對(duì)藥物較敏感形成的抑菌圈應(yīng)較大，C錯(cuò)誤；D、紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周?chē)鷧^(qū)域擴(kuò)散，不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，D正確。故選D。2．（2020·山東省高三二模）尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有關(guān)土壤中尿素分解菌的分離和培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A．培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基B．測(cè)定土壤中分解尿素的細(xì)菌數(shù)量和測(cè)定土壤中其他細(xì)菌的數(shù)量可采用相同的稀釋度C．細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高D．利用稀釋涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離計(jì)數(shù)和純化鑒定【答案】C【解析】A、培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量不同，故為獲得不同類(lèi)型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離，B錯(cuò)誤；C、細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，可加入酚紅指示劑進(jìn)行檢測(cè)，C正確；D、鑒定分解尿素的細(xì)菌應(yīng)該用加酚紅的鑒別培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。故選C。3．（2020·江蘇省高三一模）下圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟。有關(guān)敘述正確的是（）A．步驟①操作時(shí)，倒好平板后應(yīng)立即將其倒置，防止冷凝水落在培養(yǎng)基上造成污染B．步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒，接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液C．步驟③沿多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋?zhuān)囵B(yǎng)后可根據(jù)出現(xiàn)的單個(gè)菌落計(jì)數(shù)D．步驟④將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一段時(shí)間后所得到的都是X細(xì)菌菌落【答案】B【解析】A、倒好平板后需待培養(yǎng)基凝固再倒置，A錯(cuò)誤；B、接種環(huán)和試管口的灼燒都屬于無(wú)菌操作，接種環(huán)冷卻后才能沾取菌液，B正確；C、計(jì)數(shù)一般使用稀釋涂布平板法，平板劃線法不適合，C錯(cuò)誤；D、步驟④培養(yǎng)后得到的菌落可能還有雜菌，需要進(jìn)一步純化，D錯(cuò)誤。故選B。4．（2020·江蘇省高三其他）穿刺接種是用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng)，則在穿刺線周?chē)軌蛏L(zhǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．與平板劃線法所用的培養(yǎng)基相比，穿刺接種所需的培養(yǎng)基添加的瓊脂較少B．穿刺接種可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)C．穿刺接種可用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動(dòng)D．穿刺接種可用于鑒定微生物的呼吸作用類(lèi)型【答案】B【解析】A、由于是半固體培養(yǎng)基，因此與平板劃線法所用的培養(yǎng)基相比，穿刺接種的培養(yǎng)基添加的瓊脂較少，A正確；B、穿刺接種不可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)，因?yàn)榻臃N是不定量的，B錯(cuò)誤；C、由于是半固體培養(yǎng)基，所以穿刺接種可用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動(dòng)，C正確；D、由于穿刺接種后微生物可以分布于培養(yǎng)基的各個(gè)部位，因此可用于鑒定微生物的呼吸作用類(lèi)型，D正確。故選B。二、綜合題（2020·上海高三二模）人類(lèi)歷史發(fā)展至今，已經(jīng)歷過(guò)數(shù)次微生物傳染病的爆發(fā)流行，遠(yuǎn)者如1347～1353年間席卷歐洲的黑死病（鼠疫），近者如2020新年伊始由新型冠狀病毒SARS-CoV2引發(fā)的COVID-19。5．圖1所示為鼠疫的傳播過(guò)程。由圖可知，鼠疫的傳播途徑是。A．空氣傳播 B．接觸傳播C．媒介物傳播 D．病媒傳播6．鼠疫桿菌的研究中常用到龍膽紫血液瓊脂培養(yǎng)基，其配方如表所示：成分蛋白胨牛肉粉氯化鈉龍膽紫瓊脂濃度（g/L)10．03．05．00．0115．0注：（1）調(diào)節(jié)pH至70-7．2使用；（2）滅菌冷卻后每1000mL培養(yǎng)基應(yīng)加入lmL脫纖維兔血。脫纖維兔血可刺激鼠疫桿菌的生長(zhǎng)，而龍膽紫則抑制其他雜菌的生長(zhǎng)。關(guān)于該培養(yǎng)基的說(shuō)法，正確的是。A．此為液體培養(yǎng)基 B．此為通用培養(yǎng)基C．調(diào)節(jié)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行 D．滅菌的條件應(yīng)設(shè)定為100℃，30min7．在18～22℃條件下鼠疫噬菌體只裂解鼠疫桿菌而不裂解其他菌。某實(shí)驗(yàn)室擬用鼠疫噬菌體裂解試驗(yàn)對(duì)其分離到的疑似鼠疫桿菌菌株進(jìn)行鑒定，所得結(jié)果如圖2所示并由此確定該菌株為鼠疫桿菌。據(jù)此推測(cè)，鼠疫噬菌體裂解試驗(yàn)的步驟為：（1）在酒精燈火焰附近使用___________（選填“平板劃線法”或“涂布平板法”）接種待鑒定的菌株；（2）在圖2所示平板上___________（選填“A點(diǎn)”或“B點(diǎn)”）位置滴加含鼠疫噬菌體的溶液；（3）將平板___________（選填“倒置”或“直立”）放置，置于20℃條件下培養(yǎng)24h。（說(shuō)明：“倒置”指平板與水平面平行，接種面朝下；“直立”指平板與水平面垂直）[COVID-19和SARS-CoV2]2020年3月4日，國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》在原有確診標(biāo)準(zhǔn)（病毒核酸檢測(cè)）上新增了血淸SARS-CoV2特異性IgM和IgG抗體作為病原學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)。8．關(guān)于IgM和IgG，下列說(shuō)法正確的是。A．二者均存在于內(nèi)環(huán)境中B．漿細(xì)胞和記憶B細(xì)胞均可分泌C．高爾基體是二者的合成場(chǎng)所D．二者參與的特異性免疫稱(chēng)細(xì)胞免疫9．如圖所示為SARS-CoV2感染后發(fā)展示意圖，下列說(shuō)法正確的是。A．COVID-19易感人群的血清中檢測(cè)不到SARS-CoV2特異性IgM和IgGB．患者感染SARS-CoV2后體內(nèi)產(chǎn)生IgM和IgG屬于先天免疫C．隱性感染者體內(nèi)也會(huì)產(chǎn)生SARS-COV2特異性IgM和IgGD．IgG抗體的產(chǎn)生晚于IgM抗體，但在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間長(zhǎng)于IgM抗體E.IgG抗體陽(yáng)性可提示近期感染，而IgM抗體陽(yáng)性可提示感染時(shí)間較長(zhǎng)的既往感染【答案】5．D6．C7．平板劃線法A點(diǎn)直立8．A9．ACD【解析】1、一些生物能攜帶病原體，并將其直接或間接地傳播給人，使人得傳染病，這類(lèi)生物被稱(chēng)作病媒生物，這種傳播傳染病的途徑被稱(chēng)為病媒傳播。常見(jiàn)的可以被病媒生物傳播的傳染病很多，如鼠疫、流行性出血熱、流行性乙型腦炎（乙腦）、人粒細(xì)胞無(wú)形體病等。2、常用的微生物接種方法為：平板劃線法和稀釋涂布平板法。5．由圖可知，鼠疫的傳播是由于跳蚤叮咬鼠時(shí)攜帶了鼠疫桿菌，并在叮咬人的過(guò)程中將鼠疫桿菌傳播給人，所以鼠疫的傳播途徑是病媒傳播，即D正確，ABC錯(cuò)誤。故選D。6．A、此培養(yǎng)基含有瓊脂，為固體培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、此培養(yǎng)基中的脫纖維兔血可刺激鼠疫桿菌的生長(zhǎng)，而龍膽紫則抑制其他雜菌的生長(zhǎng)，故此培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，不是通用培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)基制備過(guò)程中調(diào)節(jié)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，C正確；D、該培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)為高壓蒸汽滅菌，滅菌的條件應(yīng)設(shè)定為121℃，15min，D錯(cuò)誤。故選C。7．（1）根據(jù)圖2可知，微生物的接種方法為平板劃線法。（2）（3）根據(jù)在18～22℃條件下鼠疫噬菌體只裂解鼠疫桿菌而不裂解其他菌可知，在圖2所示平板上A點(diǎn)位置滴加含鼠疫噬菌體的溶液；將平板直立放置，使含鼠疫噬菌體的溶液沿著垂直方向向下滲透，置于20℃條件下培養(yǎng)24h，可出現(xiàn)圖示中的平板中間不含鼠疫桿菌的結(jié)果。8．A、抗體主要存在于血漿、組織液等內(nèi)環(huán)境中，A正確；B、只有漿細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，記憶B細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，B錯(cuò)誤；C、抗體的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，合成場(chǎng)所是核糖體，C錯(cuò)誤；D、抗體參與的特異性免疫稱(chēng)體液免疫，D錯(cuò)誤。故選A。9．A、由圖可知，潛伏期的2周內(nèi)血清中沒(méi)有抗體，所以COVID-19易感人群的血清中可能檢測(cè)不到SARS-CoV2特異性IgM和IgG，A正確；B、患者感染SARS-CoV2后體內(nèi)產(chǎn)生IgM和IgG屬于后天產(chǎn)生的特異性免疫，B錯(cuò)誤；C、由圖可知，隱性感染者體內(nèi)也會(huì)產(chǎn)生SARS-COV2特異性IgM和IgG，C正確；D、由圖可知，IgG抗體的產(chǎn)生晚于IgM抗體，但在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間長(zhǎng)于IgM抗體，D正確；E、根據(jù)IgG抗體的產(chǎn)生晚于IgM抗體，但在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間長(zhǎng)于IgM抗體，可知IgM抗體陽(yáng)性可提示近期感染，而IgG抗體陽(yáng)性可提示感染時(shí)間較長(zhǎng)的既往感染，E錯(cuò)誤。故選ACD。10．（2020·湖北省高三二模）隨著人們生活質(zhì)量的提高，餐飲含油脂廢水的排放量大量增加，合理處置油脂廢水也成為新的課題。已知芽孢桿菌中有多種分解油脂產(chǎn)酸的菌種，科研人員欲采用下列流程篩選出能高效分解油脂的微生物。菌種取樣→分離培養(yǎng)→菌株的篩選→形態(tài)特征觀察和生理生化反應(yīng)鑒定回答下列問(wèn)題：（1）選取飯店附近排污渠的含油脂廢水作為樣本，采樣約10g，立即裝于試管內(nèi)，此試管使用前需要經(jīng)過(guò)________處理。（2）樣品分離培養(yǎng)前，一般需要將菌液進(jìn)行________處理，然后吸取0．2ml菌液涂布到營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h，記錄菌落總數(shù)。將分離出的菌株按照菌落________等表觀特征初步分類(lèi)。（3）上述步驟篩選出的菌株分別接種到含“花生油”的瓊脂培養(yǎng)基平板上，37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，篩選出油脂降解菌，培養(yǎng)基中“花生油”為菌種繁殖提供________。在該培養(yǎng)基還需要加入中性紅染料（中性紅為脂溶性染料，遇酸為紅色，遇堿為黃色），挑選菌株要挑選顯________降解圈的菌株，并且選顏色較________（填“深或淺”）的為宜。（4）實(shí)際操作中，由于油脂易聚集成液滴，常在培養(yǎng)基中加入2-3滴乳化劑使油脂分散均勻，鑒定效果更好，試分析原因________________?！敬鸢浮繙缇♂屝螤睢⒋笮?、隆起程度和顏色碳源和能源紅色深油脂乳化后均勻分散在培養(yǎng)基表面，分解油脂的微生物產(chǎn)生的降解圈更為明顯，便于快速分離和鑒定【解析】（1）微生物實(shí)驗(yàn)需要無(wú)菌操作，所以試管使用前需要經(jīng)過(guò)滅菌處理。（2）菌液一般需要先經(jīng)過(guò)稀釋處理，再進(jìn)行涂布。不同微生物菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色不同，所以可以根據(jù)菌落的特征初步分類(lèi)。（3）花生油的主要成分是脂肪，所以為菌種提供碳源和能源。脂肪可以被分解為甘油和脂肪酸，使培養(yǎng)基呈酸性，所以選擇紅色降解圈的菌株，并且顏色較深的脂肪酸含量越高，說(shuō)明分解能力越強(qiáng)。（4）油脂乳化后均勻分散在培養(yǎng)基表面，分解油脂的微生物產(chǎn)生的降解圈更為明顯，便于快速分離和鑒定摸索與可以在培養(yǎng)基中加入2-3滴乳化劑。11．（2020·遼寧省高三其他）大腸桿菌是人和許多動(dòng)物腸道中最主要且數(shù)量最多的一類(lèi)細(xì)菌，含有2000種以上的蛋白質(zhì)；大腸桿菌的數(shù)量是檢測(cè)自來(lái)水是否受糞便污染的最直接的指標(biāo)?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）利用凝膠色譜法分離提取到的部分大腸桿菌蛋白質(zhì)時(shí)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，加入pH為7.0、濃度為20mmol/L的___________到適當(dāng)高度進(jìn)行洗脫，結(jié)果甲蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)，乙蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)，則相對(duì)分子質(zhì)量較大的是_____蛋白質(zhì)。（2）通過(guò)濾膜法可以測(cè)定自來(lái)水中大腸桿菌的數(shù)目：一定體積的自來(lái)水樣過(guò)濾后，將濾膜放在伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、瓊脂、乳糖、伊紅和美藍(lán)水溶液）上培養(yǎng)，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅-美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目，計(jì)算出大腸桿菌的數(shù)量。①伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基屬于____（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基，蛋白胨的作用有_________。②在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和高壓蒸汽滅菌。配制伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，乳糖需要單獨(dú)在壓力為70kPa，溫度為115℃滅菌20min，原因是__________。接種前通常需要檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否滅菌合格，檢測(cè)方法是___________。③濾膜法是根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是_______________。【答案】磷酸緩沖液甲鑒別提供碳源、氮源、維生素干熱滅菌乳糖在高溫下會(huì)破壞將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)（當(dāng)樣品中細(xì)菌濃度低時(shí)，）培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品中的一個(gè)活菌【解析】（1）利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，需要加入pH為7.0、濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度進(jìn)行洗脫，若甲蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)，乙蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)，說(shuō)明甲蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量較大。（2）①伊紅-美藍(lán)可以將大腸桿菌染成深紫色，因此伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，其中蛋白胨可以為大腸桿菌提供碳源、氮源、維生素。②微生物培養(yǎng)過(guò)程中，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。由于乳糖在高溫下會(huì)破壞，所以在配制伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，乳糖需要單獨(dú)在壓力為70kPa，溫度為115℃滅菌20min。接種前通常需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜的條件下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)，以檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否滅菌合格。③濾膜法是根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品中的一個(gè)活菌。12．（2020·江蘇省江浦高級(jí)中學(xué)高三二模）土壤中含有能將難溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)變成植物可以吸收利用的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株Q。下圖1表示制備固體培養(yǎng)基過(guò)程中的某操作，圖2是科研人員從土壤中分離出菌株Q的部分過(guò)程示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）圖1所示操作稱(chēng)為_(kāi)_________________，待平板冷凝后__________，以防止__________________。（2）圖2所示接種方法是_______________________。在3個(gè)平板上分別接入0．1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上菌落數(shù)分別是38、42、40，則1g土壤中的活菌數(shù)約為_(kāi)_________________個(gè)。（3）圖是某同學(xué)利用不同于圖2方法分離菌株Q的示意圖。下列對(duì)其操作及結(jié)果的敘述錯(cuò)誤的有_______。a．操作前用無(wú)水乙醇對(duì)雙手進(jìn)行消毒處理b．劃線時(shí)沾有菌種的接種環(huán)不能插入培養(yǎng)基中c．只有在⑤區(qū)域中才能得到所需菌落d．整個(gè)過(guò)程需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行6次灼燒（4）固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在菌株Q的作用下溶解，會(huì)在菌落周?chē)纬赏该魅Γㄈ缦聢D所示），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解難溶磷酸鹽的能力大小。下表是初步篩選出的三種優(yōu)良解磷菌株。菌株透明圈直徑(D)菌落直徑(d)M—3—0118．812．3B3—5—620．78．0T—4—019．16．5根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，溶解難溶性磷酸鹽能力最強(qiáng)的菌株是______________。該菌種分離純化后，常用______________________法進(jìn)行長(zhǎng)期保存。【答案】倒平板倒置皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基稀釋涂布平板法4×108a、cB3－5－6甘油管藏【解析】（1）圖1所示操作稱(chēng)為倒平板，待平板冷凝后需要將其倒置，以防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，對(duì)培養(yǎng)基造成污染。（2）圖2所示接種方法是稀釋涂布平板法，1g土壤共稀釋了106倍。平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)=(38+42+40)÷3=40個(gè)，每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M=(40÷0.1)×106=4×108個(gè)。（3）a、操作前用70%的酒精對(duì)接種人員的雙手進(jìn)行消毒處理，a錯(cuò)誤；b、劃線時(shí)沾有菌種的接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面，b正確；c、在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落，c錯(cuò)誤；d、在每次劃線前和最后一次劃線結(jié)束均需對(duì)接種環(huán)滅菌，因此需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行6次灼燒，d正確。故選ac。（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理中“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解難溶磷酸鹽的能力大小”，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可以確定溶解難溶性磷酸鹽能力最強(qiáng)的菌株是B3-5-6。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏法。13．（2020·四川省高三三模）大腸桿菌是動(dòng)物腸道中的正常寄居菌。少數(shù)種類(lèi)的大腸桿菌在一定條件下會(huì)使人患病，如腸道出血性大腸桿菌可使人腹瀉和便血，嚴(yán)重時(shí)危及生命。出血性大腸桿菌在添加血液的平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，紅細(xì)胞被細(xì)菌破壞而褪色，導(dǎo)致菌落周?chē)纬赏该魅?。下圖表示從污染的食物中分離和提純?cè)摷?xì)菌的操作流程。請(qǐng)回答問(wèn)題：（1）細(xì)菌從肉湯培養(yǎng)基獲得的營(yíng)養(yǎng)成分有______________。（2）據(jù)操作流程可知，將細(xì)菌接種在血平板上的方法是______________，接種完畢后要灼燒接種工具的目的是為了______________。（3）研究細(xì)菌的致病性，先要獲得純度較高的細(xì)菌蛋白，凝膠色譜法是分離蛋白質(zhì)的常用方法，在裝填凝膠柱時(shí)不得有氣泡產(chǎn)生，因?yàn)開(kāi)_____________；若腸道出血性大腸桿菌的A蛋白質(zhì)比B蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)，則______________的相對(duì)分子質(zhì)量較大。（4）純化后的細(xì)菌蛋白可以用_________測(cè)定分子量大小，在此過(guò)程中加入的SDS掩蓋了不同蛋白質(zhì)間的電荷差異，使得______________完全取決于分子的大小?！敬鸢浮刻荚础⒌?、水、無(wú)機(jī)鹽等平板劃線法避免污染環(huán)境和感染操作者氣泡會(huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果B蛋白電泳法電泳遷移率【解析】（1）肉湯培養(yǎng)基中含有水分、無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)等物質(zhì)，因此可為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分有：碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。（2）據(jù)操作流程可知，圖中的接種工具是接種環(huán)，故將細(xì)菌接種在血平板上的方法是平板劃線法；接種完畢后要灼燒接種工具的目的是避免污染環(huán)境和感染操作者。（3）研究細(xì)菌的致病性，先要獲得純度較高的細(xì)菌蛋白，凝膠色譜法是分離蛋白質(zhì)的常用方法，由于氣泡會(huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，故在裝填凝膠柱時(shí)不得有氣泡產(chǎn)生；凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快，因此若腸道出血性大腸桿菌的A蛋白質(zhì)比B蛋白質(zhì)后洗脫出來(lái)，則B蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量較大。（4）純化后的細(xì)菌蛋白可以用凝膠電泳法測(cè)定分子量大??；用凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)，需要在凝膠中加入SDS，目的是消除凈電荷對(duì)遷移率的影響（或掩蓋不同種蛋白間的電荷差別），使電泳遷移率完全取決于分子的大小。14．（2020·江蘇省高三其他）鎮(zhèn)江香醋是我國(guó)傳統(tǒng)固態(tài)釀造食醋的典型代表，具有醇香濃厚、回味悠長(zhǎng)的特點(diǎn)。由于發(fā)酵過(guò)程的半開(kāi)放模式，來(lái)源于釀造原料、生產(chǎn)過(guò)程和操作器械的大量微生物會(huì)進(jìn)入發(fā)酵液中，與釀醋功能微生物構(gòu)成競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng)?？蒲腥藛T研究釀醋主要功能微生物的發(fā)酵上清液對(duì)雜菌生長(zhǎng)的抑制效果，并初步研究了抑菌活性物質(zhì)的種類(lèi)和特性，下面為部分研究結(jié)果。請(qǐng)分析回答：（1）鎮(zhèn)江香醋釀制的主要功能微生物除乳酸桿菌外，還有________等，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所需培養(yǎng)皿、接種用具均需________處理。（2）科研人員先將10mL含2%瓊脂的肉湯培養(yǎng)基傾注平板，待凝固后將無(wú)菌牛津杯(一種不銹鋼管)嵌于培養(yǎng)基中。接著將冷卻至50℃，含0．75%瓊脂糖的肉湯培養(yǎng)基與大腸桿菌混合后傾注于牛津杯中，以制備含菌培養(yǎng)皿。待培養(yǎng)基冷卻后取出牛津杯，每孔注入150μL待測(cè)樣品，置于37℃下過(guò)夜培養(yǎng)，測(cè)定抑菌圈大小，得到如上圖1所示結(jié)果。①上述制備含大腸桿菌的培養(yǎng)皿所采用的接種方法是________________(選填稀釋涂布平板法或平板劃線法)。②每孔分別注入的是滅菌的超純水和發(fā)酵2天、4天、10天、20天后提取的發(fā)酵上清液，得到了圖1中0～4的抑菌圈，說(shuō)明______________________________________。（3）研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵微生物上清液如果加熱處理，抑菌圈會(huì)減小，由此可見(jiàn)，該上清液含有________(選填熱敏感/耐熱的或熱敏感和耐熱的)的抑