動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體正式版課件

2．2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體2．2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1課標(biāo)領(lǐng)航1．掌握動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。2．理解單克隆抗體技術(shù)。3．了解動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用?！局攸c(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；單克隆抗體技術(shù)?！倦y點(diǎn)】雜交瘤細(xì)胞的篩選過程。課標(biāo)領(lǐng)航2情景導(dǎo)航20世紀(jì)90年代初，英國科學(xué)家成功地利用“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體瞄準(zhǔn)并殺死了癌細(xì)胞，使患血癌的一名67歲退休教授與一名女患者的癌細(xì)胞奇跡般消失了。被稱為“生物導(dǎo)彈”的單克隆抗體，能夠跟蹤和殺死細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞。情景導(dǎo)航3

核心要點(diǎn)突破基礎(chǔ)自主梳理知能過關(guān)演練2.2.2

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 核心要點(diǎn)突破基礎(chǔ)自主梳理知能過關(guān)演練2.2.24基礎(chǔ)自主梳理兩個(gè)或多個(gè)雜交DNA雜交基礎(chǔ)自主梳理兩個(gè)或多個(gè)雜交DNA雜交54．意義：克服了______雜交的不親合性，成為研究細(xì)胞_____、_________、腫瘤和生物_______培育的重要手段。二、單克隆抗體1．傳統(tǒng)抗體的獲得(1)方法：①向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種_____，使動(dòng)物產(chǎn)生_____；②從動(dòng)物_____中分離所需抗體。(2)特點(diǎn)：_______、純度低、_______差。遠(yuǎn)緣遺傳細(xì)胞免疫新品種抗原抗體血清產(chǎn)量低特異性4．意義：克服了______雜交的不親合性，成為研究細(xì)胞__62．單克隆抗體的制備脾骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生抗體克隆化抗體2．單克隆抗體的制備脾骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生7體外培養(yǎng)小鼠腹腔細(xì)胞培養(yǎng)液腹水3．單克隆抗體的應(yīng)用(1)優(yōu)點(diǎn)：_________、_________、產(chǎn)量大。(2)應(yīng)用①作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、_____、簡易、_____的優(yōu)點(diǎn)。②用于_________和_________。特異性強(qiáng)靈敏度高高效快速治療疾病運(yùn)載藥物體外培養(yǎng)小鼠腹腔細(xì)胞培養(yǎng)液腹水3．單克隆抗體的應(yīng)用特異性強(qiáng)靈8思考感悟什么是單克隆抗體？鼠的單克隆抗體能否用于人體疾病的治療？為什么？【提示】單克隆抗體是由單一雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的高度專一的抗體。不能。因?yàn)槭蟮腂淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體與人體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是不同的。思考感悟9核心要點(diǎn)突破動(dòng)物細(xì)胞融合1．原理：膜的流動(dòng)性。2．誘導(dǎo)方法：物理法——離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法——聚乙二醇；生物方法——滅活的病毒。3．動(dòng)物細(xì)胞融合的過程核心要點(diǎn)突破動(dòng)物細(xì)胞融合1．原理：膜的流動(dòng)性。104．優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限性，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。特別提醒滅活是指用物理或化學(xué)的手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。4．優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限性，使遠(yuǎn)緣115．植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段離心、電激、振動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果獲取雜種植株獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,擴(kuò)展雜交親本組合范圍，培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等5．植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物12(2010年安慶高二檢測)某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處是不正確的(

)例1植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)，植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合，單克隆抗體的制備特殊處理機(jī)械法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理，制作細(xì)胞懸液融合方法物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法典型應(yīng)用人工種子、雜種植株單克隆抗體的制備培養(yǎng)基區(qū)別生長素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化動(dòng)物血清不可缺少(2010年安慶高二檢測)某同學(xué)在學(xué)習(xí)“13A.1

B．2C．3 D．4【嘗試解答】

B【解析】選B。植物細(xì)胞工程常采用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交。動(dòng)物細(xì)胞工程常采用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備，還有胚胎移植、核移植等。動(dòng)、植物細(xì)胞工程中都需要對所取材料進(jìn)行特殊處理，植物細(xì)胞工程要利用酶解法去除細(xì)胞壁，得到有生A.1 B．214活力的原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞工程則需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織。動(dòng)、植物細(xì)胞工程所用的培養(yǎng)基是不同的，植物細(xì)胞工程中利用固體或半固體培養(yǎng)基,含有蔗糖、植物必需的礦質(zhì)元素、植物激素等，動(dòng)物細(xì)胞工程中利用液體培養(yǎng)基，含有動(dòng)物所需的營養(yǎng)物質(zhì)、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等?！净?dòng)探究】

動(dòng)物細(xì)胞融合中兩種不同細(xì)胞融合,則：①融合的方式有幾種？②融合完成的標(biāo)志是什么？活力的原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞工程則需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織。動(dòng)15【提示】

①三種；②細(xì)胞核融合成一個(gè)核。【易誤警示】

(1)常用的病毒誘導(dǎo)劑有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。(2)用做誘導(dǎo)劑的病毒必須事先滅活，使病毒的感染活性、增殖能力喪失但不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)?！咎崾尽竣偃N；②細(xì)胞核融合成一個(gè)核。16跟蹤訓(xùn)練

(2011年灤縣高二檢測)能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因素是(

)A．離心

B．滅活的病毒C．電激

D．振動(dòng)答案：B跟蹤訓(xùn)練(2011年灤縣高二檢測)能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的17單克隆抗體的制備1．關(guān)鍵思路及操作依據(jù)

(1)關(guān)鍵思路①克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。②將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。(2)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因單克隆抗體的制備1．關(guān)鍵思路及操作依據(jù)18①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。②B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。

2．單克隆抗體的制備過程①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)193．單克隆抗體制備過程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，因?yàn)橛腥N融合情況：B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。3．單克隆抗體制備過程中的篩選及原因20(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。特別提醒上述B淋巴細(xì)胞為經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交21(2011年青島市高二檢測)如圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請回答下列問題。例2(2011年青島市高二檢測)如圖表示用生物工22(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原的特異_____;從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是________。(2)圖中細(xì)胞1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細(xì)胞后而獲得的________細(xì)胞，這種細(xì)胞具有產(chǎn)生_________________________________________________的特點(diǎn)，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能________________，但不會產(chǎn)生抗體。(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原的特異_____;23(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)生融合，形成圖中的細(xì)胞3，這種細(xì)胞稱為________。把它在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這種方法稱為________。(4)過程①的主要目的是______________________。通過過程②或③的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量________抗體。(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促24【嘗試解答】

(1)糖蛋白抗原(2)B淋巴單一的抗A抗體(或單一的特異性抗體)快速大量增殖(3)雜交瘤細(xì)胞單克隆(4)篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞抗A單克隆【解析】此題主要考查了單克隆抗體的制備過程及其相關(guān)知識。(1)紅細(xì)胞表面的凝集原與細(xì)胞識別有關(guān)，其化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白。從免疫學(xué)角度看是抗原?！緡L試解答】(1)糖蛋白抗原25(2)小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖但不能產(chǎn)生抗體。(3)通過動(dòng)物細(xì)胞融合的方式可以獲得雜交瘤細(xì)胞，產(chǎn)生單克隆抗體。

(4)過程①的目的是篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞,通過②或③可大量產(chǎn)生抗A單克隆抗體。(2)小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一26【易誤警示】解答單克隆抗體的有關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：(1)所用B淋巴細(xì)胞是否是經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合之后需要經(jīng)過兩次篩選，方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈”，其選擇性是由抗體決定的，與藥物無關(guān)?！疽渍`警示】解答單克隆抗體的有關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：27跟蹤訓(xùn)練

(2011年惠州高二檢測)關(guān)于應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下，其中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述中不正確的是

(

)①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞②從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞③利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合④將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)跟蹤訓(xùn)練(2011年惠州高二檢測)關(guān)于應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)28⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑥從腹水中提取抗體A．實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥B．④過程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過程也為克隆C．③過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖D．③到⑤的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選解析：選C。本題考查的是單克隆抗體的制備，屬于考綱識記層次。解答本題的關(guān)鍵是知道單克隆抗體制備的過程，理解其原理。只有骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞的融合體才可以無限增殖。⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞29知能過關(guān)演練知能過關(guān)演練30本部分內(nèi)容講解結(jié)束點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝使用本部分內(nèi)容講解結(jié)束點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝31隨著年歲的疊加，我們會漸漸發(fā)現(xiàn)：越是有智慧的人，越是謙虛，因?yàn)榘侯^的只是稗子，低頭的才是稻子；越是富有的人，越是高貴，因?yàn)檎嬲母辉Ｊ庆`魂上的高貴以及精神世界的富足；越是優(yōu)秀的人，越是努力，因?yàn)閮?yōu)秀從來不是與生俱來，從來不是一蹴而就。隨著滄桑的累積，我們也會慢慢懂得：成功的路，其實(shí)并不擁擠，因?yàn)槟軌驁?jiān)持到底的人實(shí)在太少；所有優(yōu)秀的人，其實(shí)就是活得很努力的人，所謂的勝利，其實(shí)最后就是自身價(jià)值觀的勝利。人到中年，突然間醒悟許多，總算明白：人生，只有將世間的路一一走遍，才能到盡頭；生活，只有將塵世況味種種嘗遍，才能熬出頭。這世間，從來沒有最好，只有更好。每天，總想要努力醒得比太陽還早，因?yàn)榭傆X得世間萬物，太陽是最能賜人力量和能量的。每當(dāng)面對噴薄的日出，心中的太陽隨之冉冉騰起，生命之火熊熊燃燒，生活的熱情就會光芒四射。我真的難以想象，那些從來不早起的人，一生到底能夠看到幾回日升？那些從來沒有良好習(xí)慣的人，活到最后到底該是多么的遺憾與愧疚？曾國藩說：早晨不起，誤一天的事；幼時(shí)不學(xué)，誤一生的事。尼采也說：每一個(gè)不曾起舞的日子，都是對生命的辜負(fù)。光陰易逝，豈容我待？越是努力的人，越是沒有時(shí)間抱怨，越是沒有工夫頹喪。每當(dāng)走在黎明的曙光里，看到那些兢兢業(yè)業(yè)清潔城市的“美容師”，我就會由衷地欣賞并在心底贊嘆他們，因?yàn)樗麄兓畹煤芘苷J(rèn)真。每當(dāng)看見那些奔跑在朝霞絢爛里的晨練者，我就會從心里為他們豎起大拇指，因?yàn)樗麄兘o自己力量的同時(shí)，也贈(zèng)予他人能量。我總覺得：你可以不優(yōu)秀，但你必須有認(rèn)真的態(tài)度；你可以不成功，但你必須努力。這個(gè)世界上，從來沒有誰比誰更優(yōu)秀，只有誰比誰更努力。我也始終認(rèn)為：一個(gè)活得很努力的人，自帶光芒萬丈；一個(gè)人認(rèn)真的樣子，比任何時(shí)候都要美好；一個(gè)能夠自律自控的人，他的人生也就成功了大半。世間每一種的好，從來都只為懂得努力的人盛裝而來。有時(shí)候，我真的感覺，人生的另一個(gè)名字應(yīng)該叫做努力，努力了就會無悔，努力了就會無愧；生活的另一種說法應(yīng)該叫做煎熬，熬過了漫漫黑夜，天就亮了，熬過了蕭蕭冬日，春天就來了。人生不易，越努力越幸運(yùn)；余生不長，越珍惜越精彩。人生，是一本太倉促的書，越認(rèn)真越深刻；生命，是一條無名的河，越往前越深邃。愿你不要為已逝的年華嘆息，不要為前路的茫茫而裹足不前愿你相信所有的堅(jiān)持總能奏響黎明的號角，所有的努力總能孕育碩果的盛駕光臨。愿你堅(jiān)信越是成功的人越是不允許自己頹廢散漫，越是優(yōu)秀的人越是努力……生活中很多時(shí)候，我們遇到一些復(fù)雜的情況，會很容易被眼前的障礙所蒙蔽，找不到解決問題的方法。這時(shí)候，如果能從當(dāng)前的環(huán)境脫離出來，從一個(gè)新角度去解決問題，也許就會柳暗花明。一個(gè)土豪，每次出門都擔(dān)心家中被盜，想買只狼狗栓門前護(hù)院，但又不想雇人喂狗浪費(fèi)銀兩?？嗨剂季煤蠼K得一法：每次出門前把WiFi修改成無密碼，然后放心出門每次回來都能看到十幾個(gè)人捧著手機(jī)蹲在自家門口，從此無憂。護(hù)院，未必一定要養(yǎng)狗換個(gè)角度想問題，結(jié)果大不同。一位大爺?shù)讲耸袌鲑I菜，挑了3個(gè)西紅柿到到秤盤，攤主秤了下：“一斤半3塊7?！贝鬆敚骸白鰷挥媚敲炊?。”去掉了最大的西紅柿。攤主:“一斤二兩，3塊?！闭?dāng)身邊人想提醒大爺注意秤時(shí)，大爺從容的掏出了七毛錢，拿起剛剛?cè)サ舻哪莻€(gè)大的西紅柿，瀟灑地?fù)Q種算法，獨(dú)辟蹊徑，你會發(fā)現(xiàn)解決問題的另一個(gè)方法。生活中，我們特別容易陷入非A即B的思維死角，但其實(shí)，遭遇兩難困境時(shí)換個(gè)角度思考，也許就會明白：路的旁邊還有路。一個(gè)魚塘新開張，釣費(fèi)100塊。釣了一整天沒釣到魚，老板說凡是沒釣到的就送一只雞。很多人都去了，回來的時(shí)候每人拎著一只雞，大家都很高興！覺得老板很夠意思。后來，釣魚場看門大爺告訴大家，老板本來就是個(gè)養(yǎng)雞專業(yè)戶，這魚塘本來就沒魚。巧妙的去庫存，還讓顧客心甘情愿買單。新時(shí)代，做營銷，必須打破傳統(tǒng)思維。孩子不愿意做爸爸留的課外作業(yè)，于是爸爸靈機(jī)一動(dòng)說：兒子，我來做作業(yè)，你來檢查如何？孩子高興的答應(yīng)了，并且把爸爸的“作業(yè)”認(rèn)真的檢查了一遍，還列出算式給爸爸講解了一遍不過他可能怎么也不明白為什么爸爸所有作業(yè)都做錯(cuò)了。巧妙轉(zhuǎn)換角色，后退一步，有時(shí)候是另一種前進(jìn)。一個(gè)博士群里有人提問：一滴水從很高很高的地方自由落體下來，砸到人會不會砸傷？或砸死？群里一下就熱鬧起來，各種公式，各種假設(shè)，各種阻力，重力，加速度的計(jì)算，足足討論了近一個(gè)小時(shí)后來，一個(gè)不小心進(jìn)錯(cuò)群的人默默問了一句：你們沒有淋過雨嗎人們常常容易被日常思維所禁錮，而忘卻了最簡單也是最直接的路有兩個(gè)年輕人，大學(xué)畢業(yè)后一起到廣州闖天下。隨著年歲的疊加，我們會漸漸發(fā)現(xiàn)：越是有智慧的人，越是謙虛，因322．2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體2．2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體33課標(biāo)領(lǐng)航1．掌握動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。2．理解單克隆抗體技術(shù)。3．了解動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用?！局攸c(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；單克隆抗體技術(shù)。【難點(diǎn)】雜交瘤細(xì)胞的篩選過程。課標(biāo)領(lǐng)航34情景導(dǎo)航20世紀(jì)90年代初，英國科學(xué)家成功地利用“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體瞄準(zhǔn)并殺死了癌細(xì)胞，使患血癌的一名67歲退休教授與一名女患者的癌細(xì)胞奇跡般消失了。被稱為“生物導(dǎo)彈”的單克隆抗體，能夠跟蹤和殺死細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞。情景導(dǎo)航35

核心要點(diǎn)突破基礎(chǔ)自主梳理知能過關(guān)演練2.2.2

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 核心要點(diǎn)突破基礎(chǔ)自主梳理知能過關(guān)演練2.2.236基礎(chǔ)自主梳理兩個(gè)或多個(gè)雜交DNA雜交基礎(chǔ)自主梳理兩個(gè)或多個(gè)雜交DNA雜交374．意義：克服了______雜交的不親合性，成為研究細(xì)胞_____、_________、腫瘤和生物_______培育的重要手段。二、單克隆抗體1．傳統(tǒng)抗體的獲得(1)方法：①向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種_____，使動(dòng)物產(chǎn)生_____；②從動(dòng)物_____中分離所需抗體。(2)特點(diǎn)：_______、純度低、_______差。遠(yuǎn)緣遺傳細(xì)胞免疫新品種抗原抗體血清產(chǎn)量低特異性4．意義：克服了______雜交的不親合性，成為研究細(xì)胞__382．單克隆抗體的制備脾骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生抗體克隆化抗體2．單克隆抗體的制備脾骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生39體外培養(yǎng)小鼠腹腔細(xì)胞培養(yǎng)液腹水3．單克隆抗體的應(yīng)用(1)優(yōu)點(diǎn)：_________、_________、產(chǎn)量大。(2)應(yīng)用①作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、_____、簡易、_____的優(yōu)點(diǎn)。②用于_________和_________。特異性強(qiáng)靈敏度高高效快速治療疾病運(yùn)載藥物體外培養(yǎng)小鼠腹腔細(xì)胞培養(yǎng)液腹水3．單克隆抗體的應(yīng)用特異性強(qiáng)靈40思考感悟什么是單克隆抗體？鼠的單克隆抗體能否用于人體疾病的治療？為什么？【提示】單克隆抗體是由單一雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的高度專一的抗體。不能。因?yàn)槭蟮腂淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體與人體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是不同的。思考感悟41核心要點(diǎn)突破動(dòng)物細(xì)胞融合1．原理：膜的流動(dòng)性。2．誘導(dǎo)方法：物理法——離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法——聚乙二醇；生物方法——滅活的病毒。3．動(dòng)物細(xì)胞融合的過程核心要點(diǎn)突破動(dòng)物細(xì)胞融合1．原理：膜的流動(dòng)性。424．優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限性，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。特別提醒滅活是指用物理或化學(xué)的手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。4．優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限性，使遠(yuǎn)緣435．植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段離心、電激、振動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果獲取雜種植株獲得雜交細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,擴(kuò)展雜交親本組合范圍，培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等5．植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物44(2010年安慶高二檢測)某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處是不正確的(

)例1植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)，植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合，單克隆抗體的制備特殊處理機(jī)械法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理，制作細(xì)胞懸液融合方法物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法典型應(yīng)用人工種子、雜種植株單克隆抗體的制備培養(yǎng)基區(qū)別生長素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化動(dòng)物血清不可缺少(2010年安慶高二檢測)某同學(xué)在學(xué)習(xí)“45A.1

B．2C．3 D．4【嘗試解答】

B【解析】選B。植物細(xì)胞工程常采用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交。動(dòng)物細(xì)胞工程常采用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備，還有胚胎移植、核移植等。動(dòng)、植物細(xì)胞工程中都需要對所取材料進(jìn)行特殊處理，植物細(xì)胞工程要利用酶解法去除細(xì)胞壁，得到有生A.1 B．246活力的原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞工程則需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織。動(dòng)、植物細(xì)胞工程所用的培養(yǎng)基是不同的，植物細(xì)胞工程中利用固體或半固體培養(yǎng)基,含有蔗糖、植物必需的礦質(zhì)元素、植物激素等，動(dòng)物細(xì)胞工程中利用液體培養(yǎng)基，含有動(dòng)物所需的營養(yǎng)物質(zhì)、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等?！净?dòng)探究】

動(dòng)物細(xì)胞融合中兩種不同細(xì)胞融合,則：①融合的方式有幾種？②融合完成的標(biāo)志是什么？活力的原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞工程則需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織。動(dòng)47【提示】

①三種；②細(xì)胞核融合成一個(gè)核?！疽渍`警示】

(1)常用的病毒誘導(dǎo)劑有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。(2)用做誘導(dǎo)劑的病毒必須事先滅活，使病毒的感染活性、增殖能力喪失但不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)?！咎崾尽竣偃N；②細(xì)胞核融合成一個(gè)核。48跟蹤訓(xùn)練

(2011年灤縣高二檢測)能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因素是(

)A．離心

B．滅活的病毒C．電激

D．振動(dòng)答案：B跟蹤訓(xùn)練(2011年灤縣高二檢測)能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的49單克隆抗體的制備1．關(guān)鍵思路及操作依據(jù)

(1)關(guān)鍵思路①克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。②將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。(2)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因單克隆抗體的制備1．關(guān)鍵思路及操作依據(jù)50①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。②B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。

2．單克隆抗體的制備過程①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)513．單克隆抗體制備過程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，因?yàn)橛腥N融合情況：B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。3．單克隆抗體制備過程中的篩選及原因52(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。特別提醒上述B淋巴細(xì)胞為經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交53(2011年青島市高二檢測)如圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請回答下列問題。例2(2011年青島市高二檢測)如圖表示用生物工54(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原的特異_____;從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是________。(2)圖中細(xì)胞1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細(xì)胞后而獲得的________細(xì)胞，這種細(xì)胞具有產(chǎn)生_________________________________________________的特點(diǎn)，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能________________，但不會產(chǎn)生抗體。(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱為凝集原的特異_____;55(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)生融合，形成圖中的細(xì)胞3，這種細(xì)胞稱為________。把它在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這種方法稱為________。(4)過程①的主要目的是______________________。通過過程②或③的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量________抗體。(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促56【嘗試解答】

(1)糖蛋白抗原(2)B淋巴單一的抗A抗體(或單一的特異性抗體)快速大量增殖(3)雜交瘤細(xì)胞單克隆(4)篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞抗A單克隆【解析】此題主要考查了單克隆抗體的制備過程及其相關(guān)知識。(1)紅細(xì)胞表面的凝集原與細(xì)胞識別有關(guān)，其化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白。從免疫學(xué)角度看是抗原。【嘗試解答】(1)糖蛋白抗原57(2)小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖但不能產(chǎn)生抗體。(3)通過動(dòng)物細(xì)胞融合的方式可以獲得雜交瘤細(xì)胞，產(chǎn)生單克隆抗體。

(4)過程①的目的是篩選出能產(chǎn)生單一抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞,通過②或③可大量產(chǎn)生抗A單克隆抗體。(2)小鼠受到抗原刺激后能產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，這種細(xì)胞能產(chǎn)生單一58【易誤警示】解答單克隆抗體的有關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：(1)所用B淋巴細(xì)胞是否是經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合之后需要經(jīng)過兩次篩選，方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈”，其選擇性是由抗體決定的，與藥物無關(guān)?！疽渍`警示】解答單克隆抗體的有關(guān)題目時(shí)要特別注意以下幾點(diǎn)：59跟蹤訓(xùn)練

(2011年惠州高二檢測)關(guān)于應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下，其中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述中不正確的是

(

)①將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞②從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞③利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合④將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)跟蹤訓(xùn)練(2011年惠州高二檢測)關(guān)于應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)60⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑥從腹水中提取抗體A．實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥B．④過程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過程也為克隆C．③過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖D．③到⑤的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選解析：選C。本題考查的是單克隆抗體的制備，屬于考綱識記層次。解答本題的關(guān)鍵是知道單克隆抗體制備的過程，理解其原理。只有骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞的融合體才可以無限增殖。⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞61知能過關(guān)演練知能過關(guān)演練62本部分內(nèi)容講解結(jié)束點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝使用本部分內(nèi)容講解結(jié)束點(diǎn)此進(jìn)入課件目錄按ESC鍵退出全屏播放謝謝63隨著年歲的疊加，我們會漸漸發(fā)現(xiàn)：越是有智慧的人，越是謙虛，因?yàn)榘侯^的只是稗子，低頭的才是稻子；越是富有的人，越是高貴，因?yàn)檎嬲母辉Ｊ庆`魂上的高貴以及精神世界的富足；越是優(yōu)秀的人，越是努力，因?yàn)閮?yōu)秀從來不是與生俱來，從來不是一蹴而就。隨著滄桑的累積，我們也會慢慢懂得：成功的路，其實(shí)并不擁擠，因?yàn)槟軌驁?jiān)持到底的人實(shí)在太少；所有優(yōu)秀的人，其實(shí)就是活得很努力的人，所謂的勝利，其實(shí)最后就是自身價(jià)值觀的勝利。人到中年，突然間醒悟許多，總算明白：人生，只有將世間的路一一走遍，才能到盡頭；生活，只有將塵世況味種種嘗遍，才能熬出頭。這世間，從來沒有最好，只有更好。每天，總想要努力醒得比太陽還早，因?yàn)榭傆X得世間萬物，太陽是最能賜人力量和能量的。每當(dāng)面對噴薄的日出，心中的太陽隨之冉冉騰起，生命之火熊熊燃燒，生活的熱情就會光芒四射。我真的難以想象，那些從來不早起的人，一生到底能夠看到幾回日升？那些從來沒有良好習(xí)慣的人，活到最后到底該是多么的遺憾與愧疚？曾國藩說：早晨不起，誤一天的事；幼時(shí)不學(xué)，誤一生的事。尼采也說：每一個(gè)不曾起舞的日子，都是對生命的辜負(fù)。光陰易逝，豈容我待？越是努力的人，越是沒有時(shí)間抱怨，越是沒有工夫頹喪。每當(dāng)走在黎明的曙光里，看到那些兢兢業(yè)業(yè)清潔城市的“美容師”，我就會由衷地