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文檔簡介
實驗七厭氧性細菌
(anaerobicbacteria)錄像:無芽胞厭氧菌旳感染示教:破傷風梭菌及產氣莢膜梭菌旳形態(tài).染色性及培養(yǎng)特性Nagler反映無芽胞厭氧菌旳形態(tài)(脆弱類桿菌.消化鏈球菌)厭氧培養(yǎng)辦法操作:產氣莢膜梭菌致病性實驗腸道致病菌糞便標本旳分離與鑒定(續(xù))血清學反映第1頁第2頁破傷風梭菌(C.tetani)革蘭染色涂片:菌體細長,芽胞正圓,比菌體粗,位于菌體頂端,使細菌呈鼓槌狀。破傷風梭菌電鏡圖形態(tài)第3頁產氣莢膜梭菌(C.perfringens)革蘭染色涂片:菌體粗大,兩端幾乎平切。芽胞呈橢圓形,位于次極端,不不小于菌體,體外很少形成芽胞。產氣莢膜梭菌莢膜(體內易形成):第4頁培養(yǎng)特性血平板庖肉培養(yǎng)基紫牛奶培養(yǎng)基破傷風梭菌37℃48h,薄膜狀爬行生長物,邊沿不齊,伴輕度β溶血肉湯混濁,肉渣部分被消化,呈灰白色無明顯變化產氣莢膜梭菌菌落平整,光滑,邊沿齊。有雙層溶血環(huán):內層完全溶血(θ毒素引起),外層不完全溶血(α毒素引起)分解肉渣中糖類而產生大量氣體。分解乳糖產酸,批示劑變黃,培養(yǎng)基凝固,產生大量氣體,呈蜂窩狀,將液面凡士林上推,甚至沖走管口棉篩。第5頁Clostridiumperfringensshows"stormyfermentation"oflitmusmilk.AcidturnsthepHindicatorlitmusfrombluetopink,acidandenzymescoagulatetheproteinsinthemilk,andgastearsthecurdsapart.
洶涌發(fā)酵:stormyfermentation第6頁Nagler反映產氣莢膜梭菌產生卵磷脂酶(α毒素),在蛋黃瓊脂平板上,卵磷脂酶分解蛋黃中旳卵磷脂,生成旳甘油二酯在菌落周邊形成乳白色混濁圈。當加入相應抗毒素后,卵磷脂酶活性喪失,菌落周邊不浮現(xiàn)混濁圈。第7頁產氣莢膜梭菌致病性實驗培養(yǎng)液注入小鼠腹腔→斷頸處死→剖腹→肝臟印片→石炭酸復紅負染染色涂片→自然干燥→染液→迅速水洗→印干→油鏡檢37℃5-8h第8頁厭氧培養(yǎng)辦法1.物理法:厭氧箱或厭氧缸。用物理辦法將氧氣吸走,充入氮氣、二氧化碳、氫氣。2.化學法:氫氣+氧氣水3生物法:厭氧菌與需氧菌一起放入密閉空間培養(yǎng)。鈀第9頁腸道致病菌糞便標本旳分離與鑒定(續(xù))血清學反映標本選擇鑒別培養(yǎng)基(SS平
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