支原體肺炎診斷及病原學(xué)檢測(cè)教學(xué)課件

支原體肺炎診斷

及病原學(xué)檢測(cè)

1支原體肺炎診斷

及病原學(xué)檢測(cè)1肺炎支原體肺炎的診斷臨床表現(xiàn)影像學(xué)表現(xiàn)病原學(xué)診斷2肺炎支原體肺炎的診斷2臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查潛伏期1-3周起病形式多樣，多數(shù)患者僅以低熱、疲乏起病部分患者可以突發(fā)高熱并伴有明顯的頭痛、肌痛、惡心等全身中毒癥狀呼吸道癥狀以干咳最突出，常持續(xù)4周以上，多伴有顯著咽痛，偶有胸痛、痰中帶血；呼吸道以外的癥狀中，以耳痛、麻疹樣或猩紅熱樣皮疹較多見陽性體征以顯著的咽部充血和耳鼓膜充血較多見外周血白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞比例多正常，有些患者可升高3臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查潛伏期1-3周呼吸道癥狀以干咳最突出，常病變多為邊緣模糊、密度較低的云霧樣片狀浸潤影，從肺門向外周肺野放射，肺實(shí)質(zhì)受累時(shí)也可呈大片實(shí)變影肺部陽性體征少而影像表現(xiàn)明顯是支原體肺炎的一個(gè)重要特點(diǎn)與普通細(xì)菌性肺炎通常表現(xiàn)為下肺單一的實(shí)變影或片狀浸潤影相比，支原體肺炎累及上肺者或同時(shí)累及雙肺者更多一些，且吸收較慢肺部影像學(xué)表現(xiàn)4病變多為邊緣模糊、密度較低的云霧樣片狀浸潤影，從肺門向外周肺病原學(xué)診斷血清特異性抗體檢測(cè)傳統(tǒng)檢測(cè)方法：明膠凝集法，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。無法區(qū)分IgG和IgM酶免疫試驗(yàn)或免疫熒光法：可以分別檢測(cè)特異性IgG和IgM，1周出現(xiàn)，3周高峰，但部分反復(fù)發(fā)生肺炎支原體感染的成年患者，特異性IgM可能持續(xù)陰性血清冷凝集試驗(yàn)：不再做為肺炎支原體感染的診斷參考快速培養(yǎng)鑒定法基于核酸技術(shù)的肺炎支原體檢測(cè)方法最早采血時(shí)間應(yīng)在起病后的7-10天，這樣才能確定是否MP感染5病原學(xué)診斷血清特異性抗體檢測(cè)最早采血時(shí)間應(yīng)在起病后的7-10血清學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”：急性期及恢復(fù)期的雙份血清標(biāo)本中，肺炎支原體特異性抗體滴度呈4倍或4倍以上增高，均可確診肺炎支原體感染明膠顆粒凝集試驗(yàn)特異性抗體滴度≥l：160，或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)特異性抗體滴度≥1：64，或特異性IgM陽性，也可作為診斷肺炎支原體近期感染或急性感染的依據(jù)。MP-IgM陽性代表著近期感染。MP-IgG陽性一般代表著既往感染。6血清學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”：急性期及恢復(fù)期的雙份血清標(biāo)本中人類對(duì)Mp無先天免疫性，尚無可實(shí)際應(yīng)用的有效疫苗，感染后也不能產(chǎn)生完全的保護(hù)性免疫M(jìn)p特異性的IgM抗體在發(fā)病后不久即可出現(xiàn)升高，1~4周內(nèi)達(dá)到峰值，然后在幾個(gè)月內(nèi)逐漸下降到?jīng)]有臨床意義的水平。急性感染后IgM的持續(xù)時(shí)間在不同個(gè)體中差異較大。兒童的IgM反應(yīng)一般強(qiáng)于成人，約50%的成人患者無法在Mp感染后測(cè)到IgM的升高IgG的出現(xiàn)時(shí)間晚于IgM，5周左右達(dá)到峰值，上升速度較慢且在體內(nèi)的持續(xù)時(shí)間較長（4年左右），但在感染數(shù)月后就會(huì)下降到較低水平。有些兒童無法測(cè)得明顯的IgG反應(yīng)特異性IgA的免疫反應(yīng)與IgM類似，但其在成年人尤其是老年人中的反應(yīng)水平更高M(jìn)P的免疫性7人類對(duì)Mp無先天免疫性，尚無可實(shí)際應(yīng)用的有效疫苗，感染后也不血清學(xué)檢測(cè)原理冷凝集試驗(yàn)：MP感染患者血清中常含有較高滴度的寒冷紅細(xì)胞凝集素（簡(jiǎn)稱冷凝集素）。它能與患者自身紅細(xì)胞或“O”型人紅細(xì)胞于0～4℃條件下起凝集反應(yīng)，在37℃時(shí)已凝集的紅細(xì)胞呈可逆性的完全散開。

8血清學(xué)檢測(cè)原理冷凝集試驗(yàn)：MP感染患者血清中常含有較高滴度的凝集試驗(yàn)與ELISA的原理比較ELISA凝集試驗(yàn)9凝集試驗(yàn)與ELISA的原理比較ELISA凝集試驗(yàn)9補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)10補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)10冷凝集試驗(yàn)：冷凝集素是對(duì)Mp最早的體液反應(yīng)，50%的病人在Mp感染第2周時(shí)的滴度可達(dá)到1:32以上，而6周內(nèi)即降至感染前的水平。冷凝集試驗(yàn)雖然簡(jiǎn)便、快速，但它不是針對(duì)Mp的特異性試驗(yàn)，多種其他微生物感染（如EB病毒、巨細(xì)胞病毒、肺炎克雷伯菌）和自身免疫性疾病時(shí)冷凝集素滴度均可升高。同時(shí)，該試驗(yàn)的敏感性也只有50~60%，對(duì)于12歲以下的兒童其敏感性則更差補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)：十幾年前，CFT仍是Mp血清學(xué)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)方法，但越來越多的研究表明該方法的敏感性和特異性都不夠高。CFT所用的抗原為Mp的氯仿-甲醇糖脂抽提物，它可與人類、細(xì)菌及植物的某些抗原表位發(fā)生交叉反應(yīng)（如腦膜炎時(shí)，CFT滴度可明顯升高）。CFT測(cè)定的主要是IgM，對(duì)IgG不很敏感，導(dǎo)致其整體敏感性偏低。

各血清學(xué)檢測(cè)方法的特點(diǎn)11冷凝集試驗(yàn)：冷凝集素是對(duì)Mp最早的體液反應(yīng)，50%的病人在M間接血凝試驗(yàn)(PHA)：將提純的Mp抗原連接到紅細(xì)胞（禽類或羊）上，與血清中的抗Mp抗體可發(fā)生凝集反應(yīng)。該試驗(yàn)的敏感性和特異性均明顯優(yōu)于CFT。PHA不能區(qū)分抗體的類型，因此單份測(cè)定出現(xiàn)低滴度的抗體陽性結(jié)果并不能確定是既往感染還是新近感染。明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)：其原理與間接血凝試驗(yàn)基本相同，只是用人工合成的明膠顆粒取代了紅細(xì)胞作為凝集試驗(yàn)的載體，從而使結(jié)果判定更清晰，靜置穩(wěn)定性更好，非特異性反應(yīng)大大減少，檢測(cè)的敏感性也有了進(jìn)一步提高（對(duì)IgM和IgA更敏感）12間接血凝試驗(yàn)(PHA)：將提純的Mp抗原連接到紅細(xì)胞（禽類或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：是目前Mp血清學(xué)試驗(yàn)中常用的方法，可分開檢測(cè)IgM、IgG和IgA，敏感性和特異性均能達(dá)到較高的水平。雖然單次測(cè)定IgM（或IgA）陽性即可基本判定為Mp的新近感染，但陰性時(shí)卻無法排除感染的可能性。IgG一般須進(jìn)行間隔2周以上的雙份血清測(cè)定，有4倍以上滴度上升時(shí)才能做出Mp新近感染的診斷。因此，在ELISA測(cè)定中應(yīng)強(qiáng)調(diào)同時(shí)檢測(cè)IgG和IgM（或IgA），且最好能對(duì)間隔2周以上的雙份配對(duì)血清進(jìn)行抗體轉(zhuǎn)化情況的測(cè)定，從而做出明確的診斷其它方法：間接免疫熒光試驗(yàn)（IFA）、乳膠凝集試驗(yàn)（LA）、免疫印跡測(cè)定（WB）、黏附抑制試驗(yàn)、放射免疫沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體介導(dǎo)的殺傷試驗(yàn)等13酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：是目前Mp血清學(xué)試驗(yàn)中常用的其他病原學(xué)檢測(cè)方法PCR、單克隆抗體法等檢測(cè)分泌物中抗原及DNA，敏感性、特異性高，可用于早期診斷，但操作復(fù)雜，同位素、假陽性的問題限制了推廣和使用，PCR實(shí)驗(yàn)條件要求嚴(yán)格，只限于實(shí)驗(yàn)研究。MP的分離培養(yǎng)和鑒定是支原體檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，MP對(duì)培養(yǎng)條件要求苛刻，生長緩慢，一般為7-10天，作出判定需3-4周。利用肺炎支原體生長過程中分解葡萄糖并產(chǎn)酸的特點(diǎn)設(shè)計(jì)了快速培養(yǎng)鑒定方法，通過觀察培養(yǎng)基顏色的變化來早期發(fā)現(xiàn)肺炎支原體的生長。14其他病原學(xué)檢測(cè)方謝謝！15謝謝！15個(gè)人觀點(diǎn)供參考，歡迎討論！個(gè)人觀點(diǎn)供參考，歡迎討論！支原體肺炎診斷

及病原學(xué)檢測(cè)

17支原體肺炎診斷

及病原學(xué)檢測(cè)1肺炎支原體肺炎的診斷臨床表現(xiàn)影像學(xué)表現(xiàn)病原學(xué)診斷18肺炎支原體肺炎的診斷2臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查潛伏期1-3周起病形式多樣，多數(shù)患者僅以低熱、疲乏起病部分患者可以突發(fā)高熱并伴有明顯的頭痛、肌痛、惡心等全身中毒癥狀呼吸道癥狀以干咳最突出，常持續(xù)4周以上，多伴有顯著咽痛，偶有胸痛、痰中帶血；呼吸道以外的癥狀中，以耳痛、麻疹樣或猩紅熱樣皮疹較多見陽性體征以顯著的咽部充血和耳鼓膜充血較多見外周血白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞比例多正常，有些患者可升高19臨床表現(xiàn)及實(shí)驗(yàn)室檢查潛伏期1-3周呼吸道癥狀以干咳最突出，常病變多為邊緣模糊、密度較低的云霧樣片狀浸潤影，從肺門向外周肺野放射，肺實(shí)質(zhì)受累時(shí)也可呈大片實(shí)變影肺部陽性體征少而影像表現(xiàn)明顯是支原體肺炎的一個(gè)重要特點(diǎn)與普通細(xì)菌性肺炎通常表現(xiàn)為下肺單一的實(shí)變影或片狀浸潤影相比，支原體肺炎累及上肺者或同時(shí)累及雙肺者更多一些，且吸收較慢肺部影像學(xué)表現(xiàn)20病變多為邊緣模糊、密度較低的云霧樣片狀浸潤影，從肺門向外周肺病原學(xué)診斷血清特異性抗體檢測(cè)傳統(tǒng)檢測(cè)方法：明膠凝集法，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。無法區(qū)分IgG和IgM酶免疫試驗(yàn)或免疫熒光法：可以分別檢測(cè)特異性IgG和IgM，1周出現(xiàn)，3周高峰，但部分反復(fù)發(fā)生肺炎支原體感染的成年患者，特異性IgM可能持續(xù)陰性血清冷凝集試驗(yàn)：不再做為肺炎支原體感染的診斷參考快速培養(yǎng)鑒定法基于核酸技術(shù)的肺炎支原體檢測(cè)方法最早采血時(shí)間應(yīng)在起病后的7-10天，這樣才能確定是否MP感染21病原學(xué)診斷血清特異性抗體檢測(cè)最早采血時(shí)間應(yīng)在起病后的7-10血清學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”：急性期及恢復(fù)期的雙份血清標(biāo)本中，肺炎支原體特異性抗體滴度呈4倍或4倍以上增高，均可確診肺炎支原體感染明膠顆粒凝集試驗(yàn)特異性抗體滴度≥l：160，或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)特異性抗體滴度≥1：64，或特異性IgM陽性，也可作為診斷肺炎支原體近期感染或急性感染的依據(jù)。MP-IgM陽性代表著近期感染。MP-IgG陽性一般代表著既往感染。22血清學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”：急性期及恢復(fù)期的雙份血清標(biāo)本中人類對(duì)Mp無先天免疫性，尚無可實(shí)際應(yīng)用的有效疫苗，感染后也不能產(chǎn)生完全的保護(hù)性免疫M(jìn)p特異性的IgM抗體在發(fā)病后不久即可出現(xiàn)升高，1~4周內(nèi)達(dá)到峰值，然后在幾個(gè)月內(nèi)逐漸下降到?jīng)]有臨床意義的水平。急性感染后IgM的持續(xù)時(shí)間在不同個(gè)體中差異較大。兒童的IgM反應(yīng)一般強(qiáng)于成人，約50%的成人患者無法在Mp感染后測(cè)到IgM的升高IgG的出現(xiàn)時(shí)間晚于IgM，5周左右達(dá)到峰值，上升速度較慢且在體內(nèi)的持續(xù)時(shí)間較長（4年左右），但在感染數(shù)月后就會(huì)下降到較低水平。有些兒童無法測(cè)得明顯的IgG反應(yīng)特異性IgA的免疫反應(yīng)與IgM類似，但其在成年人尤其是老年人中的反應(yīng)水平更高M(jìn)P的免疫性23人類對(duì)Mp無先天免疫性，尚無可實(shí)際應(yīng)用的有效疫苗，感染后也不血清學(xué)檢測(cè)原理冷凝集試驗(yàn)：MP感染患者血清中常含有較高滴度的寒冷紅細(xì)胞凝集素（簡(jiǎn)稱冷凝集素）。它能與患者自身紅細(xì)胞或“O”型人紅細(xì)胞于0～4℃條件下起凝集反應(yīng)，在37℃時(shí)已凝集的紅細(xì)胞呈可逆性的完全散開。

24血清學(xué)檢測(cè)原理冷凝集試驗(yàn)：MP感染患者血清中常含有較高滴度的凝集試驗(yàn)與ELISA的原理比較ELISA凝集試驗(yàn)25凝集試驗(yàn)與ELISA的原理比較ELISA凝集試驗(yàn)9補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)26補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)10冷凝集試驗(yàn)：冷凝集素是對(duì)Mp最早的體液反應(yīng)，50%的病人在Mp感染第2周時(shí)的滴度可達(dá)到1:32以上，而6周內(nèi)即降至感染前的水平。冷凝集試驗(yàn)雖然簡(jiǎn)便、快速，但它不是針對(duì)Mp的特異性試驗(yàn)，多種其他微生物感染（如EB病毒、巨細(xì)胞病毒、肺炎克雷伯菌）和自身免疫性疾病時(shí)冷凝集素滴度均可升高。同時(shí)，該試驗(yàn)的敏感性也只有50~60%，對(duì)于12歲以下的兒童其敏感性則更差補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)：十幾年前，CFT仍是Mp血清學(xué)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)方法，但越來越多的研究表明該方法的敏感性和特異性都不夠高。CFT所用的抗原為Mp的氯仿-甲醇糖脂抽提物，它可與人類、細(xì)菌及植物的某些抗原表位發(fā)生交叉反應(yīng)（如腦膜炎時(shí)，CFT滴度可明顯升高）。CFT測(cè)定的主要是IgM，對(duì)IgG不很敏感，導(dǎo)致其整體敏感性偏低。

各血清學(xué)檢測(cè)方法的特點(diǎn)27冷凝集試驗(yàn)：冷凝集素是對(duì)Mp最早的體液反應(yīng)，50%的病人在M間接血凝試驗(yàn)(PHA)：將提純的Mp抗原連接到紅細(xì)胞（禽類或羊）上，與血清中的抗Mp抗體可發(fā)生凝集反應(yīng)。該試驗(yàn)的敏感性和特異性均明顯優(yōu)于CFT。PHA不能區(qū)分抗體的類型，因此單份測(cè)定出現(xiàn)低滴度的抗體陽性結(jié)果并不能確定是既往感染還是新近感染。明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)：其原理與間接血凝試驗(yàn)基本相同，只是用人工合成的明膠顆粒取代了紅細(xì)胞作為凝集試驗(yàn)的載體，從而使結(jié)果判定更清晰，靜置穩(wěn)定性更好，非特異性反應(yīng)大大減少，檢測(cè)的敏感性也有了進(jìn)一步提高（對(duì)IgM和IgA更敏感）28間接血凝試驗(yàn)(PHA)：將提純的Mp抗原連接到紅細(xì)胞（禽類或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）：是目前Mp血清學(xué)試驗(yàn)中常用的方法，可分開檢測(cè)IgM、IgG和IgA，敏感性和特異性均能達(dá)到較高的水平。雖然單次測(cè)定IgM（或IgA）陽性即可基本判定為Mp的新近感染，但陰性時(shí)卻無