動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)(上課用)課件

2.2動物細(xì)胞工程2.2動物細(xì)胞工程1、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用2、對比說出動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)原理、條件、結(jié)果、培養(yǎng)目的學(xué)習(xí)目標(biāo)：學(xué)習(xí)目標(biāo)：動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞核移植技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù)、生產(chǎn)單克隆抗體技術(shù)復(fù)習(xí)：植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞核一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程閱讀“動物細(xì)胞培養(yǎng)過程”并思考：1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念是什么？該技術(shù)實施的原理是什么？特點是什么？2、為什么要對取出的動物組織進(jìn)行處理，使細(xì)胞分散？3、用胰蛋白酶對動物組織進(jìn)行處理是因為細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么？用胃蛋白酶可以嗎？4、胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？5、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？6、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的操作過程一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程閱讀“動物細(xì)胞培養(yǎng)過程”并思考：動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念是什么？該技術(shù)實施的原理是什么？從動物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。

原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂）。聚焦一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念是什么？該技術(shù)實施的原理動物細(xì)胞生長特點：細(xì)胞貼壁：

懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。細(xì)胞的接觸抑制：

當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

動物細(xì)胞生長特點：細(xì)胞貼壁：細(xì)胞貼壁過程那么什么是接觸抑制？細(xì)胞貼壁過程那么什么是接觸抑制？接觸抑制：細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制動物細(xì)胞生長特性部分細(xì)胞突變，獲得不死性，向癌細(xì)胞方向發(fā)展，糖蛋白減少。接觸抑制：細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，2、為什么要對取出的動物組織進(jìn)行處理，使細(xì)胞分散？分散的單個細(xì)胞容易攝取所需的營養(yǎng)，排出代謝廢物；而用大塊組織培養(yǎng)時，內(nèi)部細(xì)胞的營養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢物的排出都較困難。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程2、為什么要對取出的動物組織進(jìn)行處理，使細(xì)胞3、用胰蛋白酶對動物組織進(jìn)行處理是因為細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么？用胃蛋白酶可以嗎？細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)（膠原纖維）。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2～8.4。多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程3、用胰蛋白酶對動物組織進(jìn)行處理是因為細(xì)胞間的4、胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細(xì)胞膜蛋白，對細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程4、胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？胰5、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？動物胚胎或幼齡動物的組織、器官，它們的細(xì)胞分化程度低，增殖能力強(qiáng)，分裂旺盛，容易培養(yǎng)。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程5、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織6、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體傳代培養(yǎng)一般傳至10代直至50代就不能再分裂了，這時細(xì)胞核內(nèi)遺傳物質(zhì)未發(fā)生變化，形成的細(xì)胞群傳代培養(yǎng)過程中有個別細(xì)胞傳至50代以后，由于遺傳物質(zhì)改變，失去控制，成為無限增殖的不死的癌癥細(xì)胞，形成的細(xì)胞群6、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮7、什么是原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)？為什么要進(jìn)行傳代培養(yǎng)？原代培養(yǎng)：

取材（動物組織）→細(xì)胞分散→初次培養(yǎng)傳代培養(yǎng)：

培養(yǎng)的細(xì)胞→細(xì)胞分散→繼續(xù)培養(yǎng)進(jìn)行傳代培養(yǎng)的原因：

接觸抑制一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程7、什么是原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)？為什么要進(jìn)行傳代培8、傳代培養(yǎng)中，第10代細(xì)胞與第50代以后細(xì)胞的主要區(qū)別是什么？細(xì)胞癌變,失去接觸抑制特性。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程8、傳代培養(yǎng)中，第10代細(xì)胞與第50代以后細(xì)胞的主要區(qū)別是什9、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否象植物組織培養(yǎng)那樣獲得克隆個體？需要誘導(dǎo)其脫分化的過程嗎？不可以，因為高度分化的動物細(xì)胞的全能性受到抑制。不需要誘導(dǎo)其脫分化。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程9、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否象植物組織培養(yǎng)那樣獲得克隆原代培養(yǎng)定義：把第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。過程：從動物機(jī)體中取出組織剪碎加胰蛋白酶細(xì)胞游離加培養(yǎng)液將細(xì)胞接種到培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)（1—2天換一次培養(yǎng)液）細(xì)胞貼壁生長長成單層細(xì)胞取材（動物組織）→細(xì)胞分散→初次培養(yǎng)原代培養(yǎng)定義：把第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為傳代培養(yǎng)定義：當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長停止，這時如果要使細(xì)胞繼續(xù)生長，就要及時用胰蛋白酶等，使細(xì)胞從瓶壁上解離下來，然后加入新的培養(yǎng)液，將細(xì)胞分離稀釋，并從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，這個過程稱傳代培養(yǎng)培養(yǎng)的細(xì)胞→細(xì)胞分散→繼續(xù)培養(yǎng)傳代培養(yǎng)定義：當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長停止，這時如果要使細(xì)胞繼續(xù)

細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)細(xì)胞群中篩選出進(jìn)行傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，能傳到40-50代，其遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化。

細(xì)胞系：傳到40-50代后有部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，帶有癌變的特點，可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。細(xì)胞株：細(xì)胞系：二、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件1、無菌、無毒的環(huán)境（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等。）3、溫度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境：O2和CO2（95%空氣和5%CO2）保證細(xì)胞順利的生長增殖二、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件1、無菌、無毒的環(huán)境保證細(xì)胞順利的生長增思考：動物血清的作用？主要是：提供有利于細(xì)胞生長增殖所需的激素、生長因子或提供合成培養(yǎng)基所缺乏的營養(yǎng)物質(zhì)等。思考：動物血清的作用？主要是：提供有利于細(xì)胞生長增殖所需的激動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。與植物培養(yǎng)基相比其特點是：（1）液體培養(yǎng)基（2）含有動物血清動物體細(xì)胞大都生活在液體的環(huán)境植物組織培養(yǎng)呢？無機(jī)鹽、蔗糖、維生素、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、植物激素成分比較：動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動三、動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、獲得細(xì)胞產(chǎn)物，如蛋白質(zhì)生物制品－病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等2、獲得燒傷病人植皮所需的細(xì)胞3、獲得細(xì)胞用于檢測有毒物質(zhì)4、為治療及預(yù)防疾病提供理論依據(jù)。三、動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、獲得細(xì)胞產(chǎn)物，如蛋白四、植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基狀態(tài)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白四、植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物1、說出動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程？2、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？3、說出動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用？4、對比說出動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)原理、條件、結(jié)果、培養(yǎng)目的你達(dá)到學(xué)習(xí)目標(biāo)了嗎？1、說出動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程？你達(dá)到學(xué)習(xí)目標(biāo)了嗎？1.用動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是A．都需用培養(yǎng)箱B．都須用液體培養(yǎng)基C．都要在無菌條件下進(jìn)行D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性C鞏固練習(xí)：外界條件適宜，植物細(xì)胞不需要。動物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要培養(yǎng)箱。1.用動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述2、下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是A.培養(yǎng)基成分不同B.動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D.動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株A3、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是A.動物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細(xì)胞培養(yǎng)D愈傷組織條件適宜可以傳代培養(yǎng)不分化。2、下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是4、細(xì)胞株的特點是 A．遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代

B．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代

C．遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代

D．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，且有癌變特點，可以無限傳代5、在動物細(xì)胞培養(yǎng)中有部分細(xì)胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱之為:A．原代培養(yǎng)B．傳代培養(yǎng)C．細(xì)胞株D．細(xì)胞系CD4、細(xì)胞株的特點是 CD6、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞A.容易產(chǎn)生各種變異B.具有更強(qiáng)的全能性C.取材十分方便D.分裂增殖的能力強(qiáng)D6、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡7.（09江蘇）下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。（1）肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞

。（2）氣室中充入5％C02：氣體的主要作用是

。（3）培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長，但要注意選擇抗生素的

，以保證抗生素對肝臟無害。吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物維持培養(yǎng)液適宜的pH種類和劑量7.（09江蘇）下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培08年寧夏卷回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：⑴在動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面

時，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的

。此時，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是

，要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是

。

⑵隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)

的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成

細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性

，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量

。相互接觸單層胰蛋白酶衰老甚至死亡接觸抑制不死性降低減少08年寧夏卷回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：相互接觸單層胰蛋⑷檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到

期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。⑸在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在

條件下保存細(xì)胞，因為在這種條件下，細(xì)胞中

的活性降低，細(xì)胞的

速率降低。⑹給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因為機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作

進(jìn)行攻擊。中冷凍酶新陳代謝抗原

⑷檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到2.2動物細(xì)胞工程2.2動物細(xì)胞工程1、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用2、對比說出動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)原理、條件、結(jié)果、培養(yǎng)目的學(xué)習(xí)目標(biāo)：學(xué)習(xí)目標(biāo)：動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞核移植技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù)、生產(chǎn)單克隆抗體技術(shù)復(fù)習(xí)：植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞核一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程閱讀“動物細(xì)胞培養(yǎng)過程”并思考：1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念是什么？該技術(shù)實施的原理是什么？特點是什么？2、為什么要對取出的動物組織進(jìn)行處理，使細(xì)胞分散？3、用胰蛋白酶對動物組織進(jìn)行處理是因為細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么？用胃蛋白酶可以嗎？4、胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？5、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？6、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的操作過程一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程閱讀“動物細(xì)胞培養(yǎng)過程”并思考：動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念是什么？該技術(shù)實施的原理是什么？從動物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。

原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂）。聚焦一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程1、動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念是什么？該技術(shù)實施的原理動物細(xì)胞生長特點：細(xì)胞貼壁：

懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。細(xì)胞的接觸抑制：

當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

動物細(xì)胞生長特點：細(xì)胞貼壁：細(xì)胞貼壁過程那么什么是接觸抑制？細(xì)胞貼壁過程那么什么是接觸抑制？接觸抑制：細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制動物細(xì)胞生長特性部分細(xì)胞突變，獲得不死性，向癌細(xì)胞方向發(fā)展，糖蛋白減少。接觸抑制：細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，2、為什么要對取出的動物組織進(jìn)行處理，使細(xì)胞分散？分散的單個細(xì)胞容易攝取所需的營養(yǎng)，排出代謝廢物；而用大塊組織培養(yǎng)時，內(nèi)部細(xì)胞的營養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢物的排出都較困難。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程2、為什么要對取出的動物組織進(jìn)行處理，使細(xì)胞3、用胰蛋白酶對動物組織進(jìn)行處理是因為細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么？用胃蛋白酶可以嗎？細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)（膠原纖維）。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2～8.4。多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程3、用胰蛋白酶對動物組織進(jìn)行處理是因為細(xì)胞間的4、胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外，長時間的作用也會消化細(xì)胞膜蛋白，對細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程4、胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？胰5、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？動物胚胎或幼齡動物的組織、器官，它們的細(xì)胞分化程度低，增殖能力強(qiáng)，分裂旺盛，容易培養(yǎng)。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程5、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織6、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體傳代培養(yǎng)一般傳至10代直至50代就不能再分裂了，這時細(xì)胞核內(nèi)遺傳物質(zhì)未發(fā)生變化，形成的細(xì)胞群傳代培養(yǎng)過程中有個別細(xì)胞傳至50代以后，由于遺傳物質(zhì)改變，失去控制，成為無限增殖的不死的癌癥細(xì)胞，形成的細(xì)胞群6、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細(xì)胞懸浮7、什么是原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)？為什么要進(jìn)行傳代培養(yǎng)？原代培養(yǎng)：

取材（動物組織）→細(xì)胞分散→初次培養(yǎng)傳代培養(yǎng)：

培養(yǎng)的細(xì)胞→細(xì)胞分散→繼續(xù)培養(yǎng)進(jìn)行傳代培養(yǎng)的原因：

接觸抑制一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程7、什么是原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)？為什么要進(jìn)行傳代培8、傳代培養(yǎng)中，第10代細(xì)胞與第50代以后細(xì)胞的主要區(qū)別是什么？細(xì)胞癌變,失去接觸抑制特性。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程8、傳代培養(yǎng)中，第10代細(xì)胞與第50代以后細(xì)胞的主要區(qū)別是什9、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否象植物組織培養(yǎng)那樣獲得克隆個體？需要誘導(dǎo)其脫分化的過程嗎？不可以，因為高度分化的動物細(xì)胞的全能性受到抑制。不需要誘導(dǎo)其脫分化。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程9、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否象植物組織培養(yǎng)那樣獲得克隆原代培養(yǎng)定義：把第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。過程：從動物機(jī)體中取出組織剪碎加胰蛋白酶細(xì)胞游離加培養(yǎng)液將細(xì)胞接種到培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)（1—2天換一次培養(yǎng)液）細(xì)胞貼壁生長長成單層細(xì)胞取材（動物組織）→細(xì)胞分散→初次培養(yǎng)原代培養(yǎng)定義：把第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與10代以內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)統(tǒng)稱為傳代培養(yǎng)定義：當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長停止，這時如果要使細(xì)胞繼續(xù)生長，就要及時用胰蛋白酶等，使細(xì)胞從瓶壁上解離下來，然后加入新的培養(yǎng)液，將細(xì)胞分離稀釋，并從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，這個過程稱傳代培養(yǎng)培養(yǎng)的細(xì)胞→細(xì)胞分散→繼續(xù)培養(yǎng)傳代培養(yǎng)定義：當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長停止，這時如果要使細(xì)胞繼續(xù)

細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)細(xì)胞群中篩選出進(jìn)行傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，能傳到40-50代，其遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化。

細(xì)胞系：傳到40-50代后有部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，帶有癌變的特點，可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。細(xì)胞株：細(xì)胞系：二、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件1、無菌、無毒的環(huán)境（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等。）3、溫度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境：O2和CO2（95%空氣和5%CO2）保證細(xì)胞順利的生長增殖二、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件1、無菌、無毒的環(huán)境保證細(xì)胞順利的生長增思考：動物血清的作用？主要是：提供有利于細(xì)胞生長增殖所需的激素、生長因子或提供合成培養(yǎng)基所缺乏的營養(yǎng)物質(zhì)等。思考：動物血清的作用？主要是：提供有利于細(xì)胞生長增殖所需的激動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。與植物培養(yǎng)基相比其特點是：（1）液體培養(yǎng)基（2）含有動物血清動物體細(xì)胞大都生活在液體的環(huán)境植物組織培養(yǎng)呢？無機(jī)鹽、蔗糖、維生素、生長調(diào)節(jié)物質(zhì)、植物激素成分比較：動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動三、動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、獲得細(xì)胞產(chǎn)物，如蛋白質(zhì)生物制品－病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等2、獲得燒傷病人植皮所需的細(xì)胞3、獲得細(xì)胞用于檢測有毒物質(zhì)4、為治療及預(yù)防疾病提供理論依據(jù)。三、動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、獲得細(xì)胞產(chǎn)物，如蛋白四、植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基狀態(tài)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白四、植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物1、說出動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程？2、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？3、說出動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用？4、對比說出動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)原理、條件、結(jié)果、培養(yǎng)目的你達(dá)到學(xué)習(xí)目標(biāo)了嗎？1、說出動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程？你達(dá)到學(xué)習(xí)目標(biāo)了嗎？1.用動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是A．都需用培養(yǎng)箱B．都須用液體培養(yǎng)基C．都要在無菌條件下進(jìn)行D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性C鞏固練習(xí)：外界條件適宜，植物細(xì)胞不需要。動物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要培養(yǎng)箱。1.用動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述2、下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是A.培養(yǎng)基成分不同B.動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D.動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株A3、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是A.動物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細(xì)胞培養(yǎng)D愈傷組織條件適宜可以傳代培養(yǎng)不分化。2、下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)別的是4、細(xì)胞株的特點是 A．遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代

B．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代

C．遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代

D．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，且有癌變特點，可以無限傳代5、在動物細(xì)胞培養(yǎng)中有部分細(xì)胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱之為:A．原代培養(yǎng)B．傳代培養(yǎng)C．細(xì)胞株D．細(xì)胞系CD4、細(xì)胞株的特點是 CD6、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞A.容易產(chǎn)生各種變異B.具有更強(qiáng)的全能性C.取材十分方便D.分裂增殖的能力強(qiáng)D6、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都