液相色譜系統(tǒng)圖譜相關知識

液相色譜系統(tǒng)圖譜相關知識點擊次數(shù)：429發(fā)布時間：2009-7-17譜圖的各種問題

液相色譜系統(tǒng)的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設備參數(shù)得到解決；而其他的問題必須通過修改操作程序來解決。對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關鍵。

A、峰拖尾

原因

解決方法

1、篩板阻塞

1、a、反沖色譜柱

b、更換進口篩板

c、更換色譜柱

2、色譜柱塌陷

2、填充色譜柱

3、干擾峰

3、a、使用更長的色譜柱

b、改變流動相或更換色譜柱

4、流動相PH選擇錯誤

4、調整PH值。對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰

5、樣品與填料表面的溶化點發(fā)生反應

圖

5、a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑

b、更改色譜柱

B、峰前延

原因

解決方法

1、柱溫低

1、升高柱溫

2、樣品溶劑選擇不恰當

2、使用流動相作為樣品溶劑

3、樣品過載

3、降低樣品含量

4、色譜柱損壞

4、見A1、A2

C、峰分叉

原因

解決方法

1、保護柱或分析柱污染

圖

1、取下保護柱再進行分析。如果必要更換保護柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強保留物質污染，運用適當?shù)脑偕胧?。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。

2、樣品溶劑不溶于流動相

2、改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。

D、峰變形

原因

解決方法

1、樣品過載

1、減少樣品載量

E、早出的峰變形

原因

解決方法

1、樣品溶劑選擇不恰當

1、a、減少進樣體積

b、運用低極性樣品溶劑

F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰

原因

解決方法

1、柱外效應

1、a、調整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）

b、使用小體積的流通池

G、K’增加時，脫尾更嚴重

原因

解決方法

1、二級保留效應，反相模式

1、a、加入三乙胺（或堿性樣品）

b、加入乙酸（或酸性樣品）

c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）

d、更換一支柱子

2、二級保留效應，正相模式

2、a、加入三乙胺（或堿性樣品）

b、加入乙酸（或酸性樣品）

c、加入水（或多官能團化合物）

d、試用另一種方法

3、二級保留效應，離子對

3、加入三乙胺（或堿性樣品）

H、酸性或堿性化合物的峰拖尾

原因

解決方法

1、緩沖不合適

1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液

b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液

I、額外的峰

原因

解決方法

1、樣品中有其他組份

1、正常

2、前一次進樣的洗脫峰

2、a、增加運行時間或梯度斜率

b、提高流速

3、空位或鬼峰

3、a、檢查流動相是否純凈

b、使用流動相作為樣品溶劑

c、減少進樣體積

J、保留時間波動

原因

解決方法

1、溫控不當

1、調好柱溫

2、流動相組分變化

2、防止變化（蒸發(fā)、反應等）

3、色譜柱沒有平衡

3、在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱

K、保留時間不斷變化

原因

解決方法

1、流速變化

1、重新設定流速

2、泵中有氣泡

2、從泵中除去氣泡

3、流動相選擇不恰當

3、a、更換合適的流動相

b、選擇合適的混合流動相

L、基線漂移

原因

解決方法

1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。）

1、控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器

圖

2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導致的漂移。）

2、使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用中使用氦氣。

3、流通池被污染或有氣體

3、用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸）

4、檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線）

4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。

5、流動相配比不當或流速變化

5、更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。

6、柱平衡慢，特別是流動相發(fā)生變化時

6、用中等強度的溶劑進行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。

7、流動相污染、變質或由低品質溶劑配成

7、檢查流動相的組成。使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑

8、樣品中有強保留的物質（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。

8、使用保護柱，如有必要，在進樣之間或在分析過程中，定期用強溶劑沖洗柱子。

9、使用循環(huán)溶劑，但檢測器未調整。

9、重新設定基線。當檢測器動力學范圍發(fā)生變化時，使用新的流動相。

10、檢測器沒有設定在最大吸收波長處。

10、將波長調整至最大吸收波長處

M、基線噪音（規(guī)則的）

原因

解決方法

1、在流動相、檢測器或泵中有空氣

1、流動相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。

2、漏液

圖

2、見第三部分。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。

3、流動相混合不完全

3、用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑

4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱）

4、減少差異或加上熱交換器

5、在同一條線上有其他電子設備

5、斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。

6、泵振動

6、在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器

N、基線噪音（不規(guī)則的）

原因

解決方法

1、漏液

圖

1、見第三部分。檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。

2、流動相污染、變質或由低質溶劑配成

2、檢查流動相的組成。

3、流動相各溶劑不相溶

3、選擇互溶的流動相

4、檢測器/記錄儀電子元件的問題

4、斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。

5、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡

5、用強極性溶液清洗系統(tǒng)

6、檢測器內(nèi)有氣泡

6、清洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調節(jié)器

7、流通池污染（即使是極少的污染物也會產(chǎn)生噪音。）

7、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池

8、檢測器燈能量不足

8、更換燈

9、色譜柱填料流失或阻塞

9、更換色譜柱

10、流動相混合不均勻或混合器工作不正常

10、維修或更換混合器，在流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置

O、寬峰

原因

解決方法

1、流動相組成變化

1、重新制備新的流動相

2、流動相流速太低

2、調節(jié)流速

3、漏液（特別是在柱子和檢測器之間）

3、見section3。檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。

4、檢測器設定不正確

4、調整設定

5、柱外效應影響

a、柱子過載

b、檢測器對反應時間或池體積響應過大

c、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內(nèi)徑太大

d、記錄儀響應時間太長

圖

5、

a、小體積進樣（例如：10ul而不是100ul）以1：10或1：100的比例稀釋樣品

b、減少響應時間或使用更小的流通池

c、使用內(nèi)徑為0.007-0.01的短管路

d、減少響應時間

6、緩沖液濃度太低

6、增加濃度

7、保護柱污染或失效

7、更換保護柱

8、色譜柱污染或失效，塔板數(shù)較低

8、更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強溶劑沖洗舊柱子。

9、柱入口塌陷

9、打開柱入口，填補塌陷或更換柱子

10、呈現(xiàn)兩個或多個未被完全分離的物質的峰

10、選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果

11、柱溫過低

11、提高柱溫。除非特殊情況，溫度不宜超過75℃

12、檢測器時間常數(shù)太大

12、使用較小的時間常數(shù)

P、分離度降低

原因

解決方法

1、流動相污染或變質（引起保留時間變化）

1、重新配置流動相

2、保護柱或分析柱阻塞

圖

2、去掉保護柱進行分析。如果必要則更換保護柱。如果分析柱阻塞，可進行反沖。如果問題仍然存在色譜柱可能被強保留的污染物損壞，建議使用恰當?shù)脑偕绦颉Ｈ绻麊栴}仍然存在，進口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。

Q、所有的峰面積都太小

原因

解決方法

1、檢測器衰減設定過高

1、減少衰減的設定

2、檢測器時間常數(shù)設定太大

2、設定較小的時間常數(shù)

3、進樣量太少

3、增大進樣量

4、記錄儀連接不當

4、使用正確的連接

R、所有的峰面積都太大

原因

解決方法

1、檢測器衰減設定過低

1、采取較大的衰減

2、進樣過多

2、減少進樣量

3、記錄儀連接不正確

3、正確連接記錄儀80degree回復于：2009-6-2520:58:071.1如果柱子性能無損害，寬峰最大可能是樣品濃度過大；或者流動相不合適，多個組分未有效分離。再有就是柱子類型選擇錯了，就是樣品極性與柱子類型不匹配。

1.2饅頭峰最大可能流動相種類梯度不合適，再有就是樣品復雜，總有極相似成分難于分離，這時可采取適當措施簡化樣品或者將樣品分成幾個部分在各自摸索條件。如果饅頭峰出現(xiàn)在較早TR值，可能液相系統(tǒng)中未完全替換上合適流動相，即平衡不充分。另外如果饅頭峰極其夸張而且很多，檢測池也檢查一下吧，會伴有壓力過高，這種情況單純液相色譜中不是很常見。

注：當然這都是首先排除柱子問題！

2.避免寬峰首先要保證樣品濃度足夠小。然后再去摸索流動相吧！饅頭峰如果不是分析對象，無傷大雅的話就湊合用吧（前提是復雜樣品比如中藥提取物）。

3.彌補這個事情很難講的，看你要干什么，具體問題具體分析吧！[em09511]wyqql2060回復于：2009-7-111:25:081.產(chǎn)生寬峰/饅頭峰的原因可能是

a。溶解樣品的溶劑和流動相不是同一個東西。

b。流動相組成比例存在缺陷

c。樣品量過載

d。柱子不能滿足實驗要求

2.平時實驗中怎樣有效避免寬峰/饅頭峰？

a。盡量用流動相溶解樣品，如過不行，進一針溶劑考察一下系統(tǒng)

b。流動相組成應經(jīng)過驗證，尋找最佳比例。

c。驗證最小進樣量，找到最佳的含量進樣量

d。選柱

3.對于已經(jīng)產(chǎn)生寬峰/饅頭峰，有什么好的處理方法來彌補？

a。先考慮是溶劑引起的還是流動相引起的，如果是，不予考慮，但應在報告中說明

b。如果不是目標峰，應該積分，應有說明

c。是目標峰，重新做（減少進樣量；是不行，配制流動相（更換組成比例）；還是不行，換柱

duliuhui回復于：2009-6-2314:58:30除了柱子污染、失效等原因外，可能原因:

樣品與柱子不匹配。

樣品和流動相不匹配。

氣泡。

進樣量過大有時也會變成饅頭峰。

樣品前處理不合適。luxw回復于：2009-6-2315:29:18除了柱子出現(xiàn)損害外，

1.梯度洗脫時比例閥出現(xiàn)問題，分配比例不準了（在安捷倫1100中遇到過）

2.流動相問題，如：內(nèi)有空氣、有機系和水系沒有混勻、調節(jié)ph或加入的離子對量不正確等

3.儀器問題，如：電信號不穩(wěn)定、檢測池有氣泡等

個人見解，僅供交流！[em09511]duankehai回復于：2009-6-2912:29:30我認為，如果是直接用甲醇溶解樣品進樣而出現(xiàn)饅頭峰，出現(xiàn)這種情況比較正常，因為甲醇經(jīng)過柱子后會在樣品出峰時快速與硅醇鏈作用，造成樣品在柱內(nèi)的環(huán)境迅速變化，色譜峰也必定很不理想~！所以，用流動相溶解藥物，為樣品創(chuàng)造一個最協(xié)調穩(wěn)定的環(huán)境，這樣再判斷是否柱子不行！hmzhou83回復于：2009-6-1722:06:591）出現(xiàn)氣泡或者出現(xiàn)塌陷導致的。這個可能性比較大。

2）脫尾那么嚴重，估計污染也很厲害。

3）存在比較大的渦旋死體積了。bestalian回復于：2009-6-188:42:21

1.柱子的柱效下降，進樣量太大，多組分沒有分離開

2.選擇合適的實驗條件，包括柱子，進樣量等

3.已經(jīng)產(chǎn)生的寬峰/饅頭峰，就不能準確的使用面積定量了，所以我都是找找原因重做了liwei7893回復于：2009-6-1810:57:07

1.柱子柱效下降，柱子和樣品不匹配。

2.選擇適當?shù)闹雍土鲃酉嗟壬V條件。

3.沒有，只有找出產(chǎn)生的原因，重做。hgycook回復于：2009-6-1812:17:041.原因

最直接的是色譜柱柱效下降，組分分離效果不好。再有就是流動相污染樣品處理帶入雜質。

2.避免

選擇合適的色譜柱，優(yōu)化分析方法確保流動相純凈。

3.處理

一般出現(xiàn)的饅頭峰不與采納需從新進樣，對饅頭峰造成的干擾也可以采用峰切割，或做拖尾前沿峰處理。

我們的檢品種有這種出饅頭峰的現(xiàn)象，一般對照不產(chǎn)生，樣品進樣一定次數(shù)就會出現(xiàn)，而且位置規(guī)定，峰的大小會隨進樣次數(shù)的多少而遞增。后斷定，這種饅頭峰是樣品中雜質堆積產(chǎn)生的，可以通過設置進樣后運行或走空針的辦法來減小這種饅頭峰。[em09511]zhangjing770880回復于：2009-6-1814:39:151.色譜柱柱效下降，組分分離效果比較差。還可能流動相污染或樣品前處理等過程帶入雜質。

2.選擇合適的色譜柱增大柱效，優(yōu)化試驗方法和確保前處理過程沒有雜質介入以及流動相的純度要保證。

3.多找原因，確保試驗的準確性和科學性。tanggangfeng回復于：2009-6-1914:44:301）進樣量大也會出現(xiàn)饅頭峰

2)樣品的溶解性差微溶或不溶也會這種現(xiàn)象出現(xiàn)（樣品有時碰到難溶的回用dmso用，但實際上樣品不溶于流動相）

3）ph值不合適，尤其是在做胺類化合物。

4）當靠近200nm檢測時，基線的波動是很大的，

5）小極性樣品殘留在柱子里，在分析下一個樣品時被沖出來。（由于擴散效應后沖出來的峰會出現(xiàn)饅頭峰）xiecc76回復于：2009-6-1916:00:571.色譜柱柱效下降，組分分離效果比較差

2.流動相有問題

3.系統(tǒng)可能進氣泡了，不穩(wěn)定amoeba1982回復于：2009-6-1916:48:06原因還是比較多的，比如流動相不合適、洗脫方式不合適、色譜柱不合適、色譜柱污染嚴重等。曾在測定消毒產(chǎn)品中醋酸氯己定時出現(xiàn)這種情況，在更換色譜柱和流動相后，調整流動相pH值，問題得到解決。樣品測定中出現(xiàn)這種情況我們是必須返工重測的。ionbaby回復于：2009-6-209:01:29流動相配比不合適；試劑的原因；檢測器出問題了bluespider回復于：2009-6-2313:03:20柱效下降、靈敏度太高、流動相不合理！zhdpywx回復于：2009-6-2314:23:55樓上的大家說的有道理，另外可以嘗試換臺液相試試！

我遇到一次，拖尾嚴重把主藥后的雜質峰都包進去了，在師姐的建議下?lián)Q臺液相就好了！shidan4401回復于：2009-6-1815:55:25和流動相有關系吧。

可以改變流動相組成，從新進樣。kjh_012回復于：2009-6-1818:40:40同意樓上的我也遇見過可能是流動相不合適樣品吸附的厲害調節(jié)pH植換換流動相比例另外樣品是不是要再處理一下進樣量減少些也許會好些yangxy12345回復于：2009-6-1820:27:37流動相有氣泡是一方面的原因，色譜柱比較臟也是一個可以說明的原因。ywl168回復于：2009-6-198:46:45如果排除柱子的原因就是系統(tǒng)被污染，柱外效應大。pfz1985回復于：2009-6-199:06:26流動相有氣泡，柱效下降，樣品，樣品有污染，流動相比例不合適，基線時間太短都可能造成這些原因biole回復于：2009-6-1810:02:55當年我用AKTA等度時怎么跑都是饅頭峰，換用waters的HPLC，ODS柱梯度跑，少上樣就可以了emoc98311回復于：2009-6-188:24:48饅頭峰原理上就是峰在色譜柱擴展造成的，除了柱子本身的原因外，跟流動相、樣品溶劑的極性都有很大關系。shuizirou回復于：2009-6-2619:25:18柱子污染嚴重，你的樣品在流動相中的溶解性怎么樣？kongqi1999回復于：2009-6-2810:52:11柱效降低，流動性極性選擇、柱溫等因素有關；或者檢查流動性有無污染。土老冒豆豆回復于：2009-6-2923:16:15哎，我只會換根柱子再做lowhand回復于：2009-6-249:08:31原文由tanggangfeng發(fā)表:

1）進樣量大也會出現(xiàn)饅頭峰

2)樣品的溶解性差微溶或不溶也會這種現(xiàn)象出現(xiàn)（樣品有時碰到難溶的回用dmso用，但實際上樣品不溶于流動相）

3）ph值不合適，尤其是在做胺類化合物。

4）當靠近200nm檢測時，基線的波動是很大的，

5）小極性樣品殘留在柱子里，在分析下一個樣品時被沖出來。（由于擴散效應后沖出來的峰會出現(xiàn)饅頭峰）

感覺這個回答最完善，補充一點200nm時，流動相用乙腈代替甲醇要穩(wěn)定一些。zxm721520回復于：2009-6-2612:28:46樓主原來做應該沒有的吧

最近才出現(xiàn)的

看看是不是檢測池不干凈的原因希望對你有幫助am1087回復于：2009-7-615:56:47原文由emoc98311發(fā)表:

饅頭峰原理上就是峰在色譜柱擴展造成的，除了柱子本身的原因外，跟流動相、樣品溶劑的極性都有很大關系。]

還有流速和進樣量.[em09511]jkjungle回復于：2009-6-1815:02:52先說明下，我是新手

在今年5月份跟師哥做高效的時候遇到了，師哥說是流動相有氣泡，就重新超了一次流動相

1#hmzhou83

回復于：2009-6-1722:06:591）出現(xiàn)氣泡或者出現(xiàn)塌陷導致的。這個可能性比較大。

2）脫尾那么嚴重，估計污染也很厲害。

3）存在比較大的渦旋死體積了。

2#emoc98311

回復于：2009-6-188:24:48饅頭峰原理上就是峰在色譜柱擴展造成的，除了柱子本身的原因外，跟流動相、樣品溶劑的極性都有很大關系。

3#bestalian

回復于：2009-6-188:42:21

1.柱子的柱效下降，進樣量太大，多組分沒有分離開

2.選擇合適的實驗條件，包括柱子，進樣量等

3.已經(jīng)產(chǎn)生的寬峰/饅頭峰，就不能準確的使用面積定量了，所以我都是找找原因重做了

4#biole

回復于：2009-6-1810:02:55當年我用AKTA等度時怎么跑都是饅頭峰，換用waters的HPLC，ODS柱梯度跑，少上樣就可以了

5#liwei7893

回復于：2009-6-1810:57:07

1.柱子柱效下降，柱子和樣品不匹配。

2.選擇適當?shù)闹雍土鲃酉嗟壬V條件。

3.沒有，只有找出產(chǎn)生的原因，重做。

6#hgycook

回復于：2009-6-1812:17:041.原因

最直接的是色譜柱柱效下降，組分分離效果不好。再有就是流動相污染樣品處理帶入雜質。

2.避免

選擇合適的色譜柱，優(yōu)化分析方法確保流動相純凈。

3.處理

一般出現(xiàn)的饅頭峰不與采納需從新進樣，對饅頭峰造成的干擾也可以采用峰切割，或做拖尾前沿峰處理。

我們的檢品種有這種出饅頭峰的現(xiàn)象，一般對照不產(chǎn)生，樣品進樣一定次數(shù)就會出現(xiàn)，而且位置規(guī)定，峰的大小會隨進樣次數(shù)的多少而遞增。后斷定，這種饅頭峰是樣品中雜質堆積產(chǎn)生的，可以通過設置進樣后運行或走空針的辦法來減小這種饅頭峰。[em09511]

7#zhangjing770880

回復于：2009-6-1814:39:151.色譜柱柱效下降，組分分離效果比較差。還可能流動相污染或樣品前處理等過程帶入雜質。

2.選擇合適的色譜柱增大柱效，優(yōu)化試驗方法和確保前處理過程沒有雜質介入以及流動相的純度要保證。

3.多找原因，確保試驗的準確性和科學性。

8#jkjungle

回復于：2009-6-1815:02:52先說明下，我是新手

在今年5月份跟師哥做高效的時候遇到了，師哥說是流動相有氣泡，就重新超了一次流動相

9#shidan4401

回復于：2009-6-1815:55:25和流動相有關系吧。

可以改變流動相組成，從新進樣。

10#kjh_012

回復于：2009-6-1818:40:40同意樓上的我也遇見過可能是流動相不合適樣品吸附的厲害調節(jié)pH植換換流動相比例另外樣品是不是要再處理一下進樣量減少些也許會好些

11#yangxy12345

回復于：2009-6-1820:27:37流動相有氣泡是一方面的原因，色譜柱比較臟也是一個可以說明的原因。

12#ywl168

回復于：2009-6-198:46:45如果排除柱子的原因就是系統(tǒng)被污染，柱外效應大。

13#pfz1985

回復于：2009-6-199:06:26流動相有氣泡，柱效下降，樣品，樣品有污染，流動相比例不合適，基線時間太短都可能造成這些原因

14#tanggangfeng

回復于：2009-6-1914:44:301）進樣量大也會出現(xiàn)饅頭峰

2)樣品的溶解性差微溶或不溶也會這種現(xiàn)象出現(xiàn)（樣品有時碰到難溶的回用dmso用，但實際上樣品不溶于流動相）

3）ph值不合適，尤其是在做胺類化合物。

4）當靠近200nm檢測時，基線的波動是很大的，

5）小極性樣品殘留在柱子里，在分析下一個樣品時被沖出來。（由于擴散效應后沖出來的峰會出現(xiàn)饅頭峰）

16#xiecc76

回復于：2009-6-1916:00:571.色譜柱柱效下降，組分分離效果比較差

2.流動相有問題

3.系統(tǒng)可能進氣泡了，不穩(wěn)定

17#amoeba1982

回復于：2009-6-1916:48:06原因還是比較多的，比如流動相不合適、洗脫方式不合適、色譜柱不合適、色譜柱污染嚴重等。曾在測定消毒產(chǎn)品中醋酸氯己定時出現(xiàn)這種情況，在更換色譜柱和流動相后，調整流動相pH值，問題得到解決。樣品測定中出現(xiàn)這種情況我們是必須返工重測的。

18#ionbaby

回復于：2009-6-209:01:29流動相配比不合適；試劑的原因；檢測器出問題了

19#jeanee

回復于：2009-6-2218:45:51學習了長見識了

20#cy7518531

回復于：2009-6-2218:50:07原文由03yx2發(fā)表:圖譜來找茬(第九季)-寬峰/饅頭峰◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆

首先感謝大家一直對本活動的支持，謝謝！

【本帖子參考：

1.自動進樣器進甲醇或標準品出現(xiàn)饅頭峰

2.寬峰有除了柱子不行以外的理由么？】

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現(xiàn)請您來解析:

1.產(chǎn)生寬峰/饅頭峰的原因有哪些？

2.平時實驗中怎樣有效避免寬峰/饅頭峰？

3.對于已經(jīng)產(chǎn)生寬峰/饅頭峰，有什么好的處理方法來彌補？

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圖譜如下:

【附錄】凡參與活動者，同樣必有重獎?。。?/p>

活動截止：2009年7月15日

柱有問題

21#bluespider

回復于：2009-6-2313:03:20柱效下降、靈敏度太高、流動相不合理！

22#zhdpywx

回復于：2009-6-2314:23:55樓上的大家說的有道理，另外可以嘗試換臺液相試試！

我遇到一次，拖尾嚴重把主藥后的雜質峰都包進去了，在師姐的建議下?lián)Q臺液相就好了！

23#duliuhui

回復于：2009-6-2314:58:30除了柱子污染、失效等原因外，可能原因:

樣品與柱子不匹配。

樣品和流動相不匹配。

氣泡。

進樣量過大有時也會變成饅頭峰。

樣品前處理不合適。

24#luxw

回復于：2009-6-2315:29:18除了柱子出現(xiàn)損害外，

1.梯度洗脫時比例閥出現(xiàn)問題，分配比例不準了（在安捷倫1100中遇到過）

2.流動相問題，如：內(nèi)有空氣、有機系和水系沒有混勻、調節(jié)ph或加入的離子對量不正確等

3.儀器問題，如：電信號不穩(wěn)定、檢測池有氣泡等

個人見解，僅供交流！[em09511]

25#lowhand

回復于：2009-6-249:08:31原文由tanggangfeng發(fā)表:

1）進樣量大也會出現(xiàn)饅頭峰

2)樣品的溶解性差微溶或不溶也會這種現(xiàn)象出現(xiàn)（樣品有時碰到難溶的回用dmso用，但實際上樣品不溶于流動相）

3）ph值不合適，尤其是在做胺類化合物。

4）當靠近200nm檢測時，基線的波動是很大的，

5）小極性樣品殘留在柱子里，在分析下一個樣品時被沖出來。（由于擴散效應后沖出來的峰會出現(xiàn)饅頭峰）

感覺這個回答最完善，補充一點200nm時，流動相用乙腈代替甲醇要穩(wěn)定一些。

26#80degree

回復于：2009-6-2520:58:071.1如果柱子性能無損害，寬峰最大可能是樣品濃度過大；或者流動相不合適，多個組分未有效分離。再有就是柱子類型選擇錯了，就是樣品極性與柱子類型不匹配。

1.2饅頭峰最大可能流動相種類梯度不合適，再有就是樣品復雜，總有極相似成分難于分離，這時可采取適當措施簡化樣品或者將樣品分成幾個部分在各自摸索條件。如果饅頭峰出現(xiàn)在較早TR值，可能液相系統(tǒng)中未完全替換上合適流動相，即平衡不充分。另外如果饅頭峰極其夸張而且很多，檢測池也檢查一下吧，會伴有壓力過高，這種情況單純液相色譜中不是很常見。

注：當然這都是首先排除柱子問題！

2.避免寬峰首先要保證樣品濃度足夠小。然后再去摸索流動相吧！饅頭峰如果不是分析對象，無傷大雅的話就湊合用吧（前提是復雜樣品比如中藥提取物）。

3.彌補這個事情很難講的，看