影響血型鑒定常見的問題及處理方法

關(guān)于影響血型鑒定常見的問題及處理方法第一頁，共三十二頁，2022年，8月28日準(zhǔn)確的血型鑒定是臨床安全有效輸血的重要保證，使輸血的成分能在受著體內(nèi)有效存活，無不良反應(yīng)，即輸入的紅細(xì)胞在受著體內(nèi)必須不凝集不溶血，輸入的血漿成分不導(dǎo)致受者自身紅細(xì)胞顯著破壞，才能使受者獲得恢復(fù)健康所需的血液。第二頁，共三十二頁，2022年，8月28日ABO定型試驗(yàn)中常見的問題：一、標(biāo)本問題二、試劑問題三、實(shí)驗(yàn)者操作技術(shù)的錯(cuò)誤四、紅細(xì)胞標(biāo)本問題五、血清標(biāo)本的問題第三頁，共三十二頁，2022年，8月28日一、標(biāo)本問題

血型鑒定血液標(biāo)本的嚴(yán)格要求是安全輸血的關(guān)鍵性措施之一，首先對(duì)標(biāo)本進(jìn)行科學(xué)管理，確保標(biāo)本一一對(duì)應(yīng)防止“張冠李戴”。

1.所用標(biāo)本要能夠恰當(dāng)反映受血者目前的免疫學(xué)狀態(tài)。

2.受血者配血試驗(yàn)的血標(biāo)本必須是輸血前3天內(nèi)采集的。

3.如果受血者需要再次輸注紅細(xì)胞，尤其是受血者最后一次輸注紅細(xì)胞間隔了24小時(shí)，應(yīng)重新采集一份血樣進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，防止新的不規(guī)則抗體產(chǎn)生。第四頁，共三十二頁，2022年，8月28日二、試劑問題

血型定型試劑是做好定型的基礎(chǔ)。現(xiàn)在單克隆試劑是通過雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的，其效價(jià)、特異性、親和力都較人血清有很大進(jìn)步，但試劑的運(yùn)輸、貯存等條件不適可導(dǎo)致試劑變質(zhì)失效，造成鑒定錯(cuò)誤。在實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行試劑外觀、效價(jià)等項(xiàng)目質(zhì)量控制。不同抗凝劑的血液制備的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞質(zhì)量也不同，各實(shí)驗(yàn)室依據(jù)要求正確配制紅細(xì)胞濃度。第五頁，共三十二頁，2022年，8月28日

三、實(shí)驗(yàn)者操作技術(shù)錯(cuò)誤

1.造成假陰性結(jié)果原因：(1)未加入抗體或血清(2)未識(shí)別溶血(3)血清與紅細(xì)胞比例不當(dāng)(4)離心速度、時(shí)間不夠(5)使用失效或錯(cuò)誤試劑(6)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄、解釋錯(cuò)誤第六頁，共三十二頁，2022年，8月28日2.造成假陽性結(jié)果原因：

(1)離心速度過大、時(shí)間過長

(2)使用了受到細(xì)菌污染的試劑

(3)試驗(yàn)器皿不干凈

(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄、解釋錯(cuò)誤第七頁，共三十二頁，2022年，8月28日四、紅細(xì)胞標(biāo)本問題1.患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的紅細(xì)胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型紅細(xì)胞。2.某些ABO基因變異的個(gè)體或ABO亞型紅細(xì)胞，一些白血病或其他惡性疾病患者的紅細(xì)胞ABO抗原太弱，應(yīng)用抗－A、抗－B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反應(yīng)。第八頁，共三十二頁，2022年，8月28日3.紅細(xì)胞獲得性或遺傳性的異常，如獲得性B抗原紅細(xì)胞或Tn/T多凝集紅細(xì)胞，人血清抗－A、抗－B試劑可能與這些異常的紅細(xì)胞反應(yīng)。4.使用未洗滌的紅細(xì)胞標(biāo)本，其表面黏附的血漿或血清中含針對(duì)抗－A、抗－B試劑中染色劑或其他成分的抗體，出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。第九頁，共三十二頁，2022年，8月28日5.患者血清中有高活性、高濃度冷自身抗體嚴(yán)重致敏自身紅細(xì)胞，以至自發(fā)地發(fā)生凝集，而不是抗體試劑的特異性免疫反應(yīng)所致。

6.紅細(xì)胞表面包被IgG類抗體

7.靜脈輸入高分子藥物如甘露醇、右旋糖酐等，可導(dǎo)致紅細(xì)胞成緍錢狀。

第十頁，共三十二頁，2022年，8月28日五、血清標(biāo)本的問題1.纖維蛋白凝集的紅細(xì)胞凝塊被誤認(rèn)為是血液凝集，如使用血漿標(biāo)本或未完全去除纖維蛋白的血清標(biāo)本時(shí)出現(xiàn)假陽性。2.免疫抑制疾病患者血清中ABO抗體減少或消失。老年人ABO抗體減弱。3.新生兒—6個(gè)月內(nèi)嬰兒血清中ABO抗體陰性或很弱，一般只測正定不測反定。第十一頁，共三十二頁，2022年，8月28日4.血清中不正常濃度和比例的蛋白質(zhì)成分或高分子蛋白增多可引起非特異凝集，如緡錢狀紅細(xì)胞的非特異凝集。5.血清中含抗－A、抗－B以外的其他紅細(xì)胞抗體，如抗－M、抗－I等。6.患者接受了ABO血型不同的骨髓移植。第十二頁，共三十二頁，2022年，8月28日7.患者血清中含有針對(duì)紅細(xì)胞保護(hù)劑的抗體。8.ABO抗體被輸入的液體稀釋。第十三頁，共三十二頁，2022年，8月28日結(jié)果分析和處理的基本步驟1.重新采集標(biāo)本，以避免采集、標(biāo)記、污染等錯(cuò)誤。2.查詢患者臨床診斷、既往病史、輸血史、用藥史、骨髓移植史。3.徹底洗滌標(biāo)本或試劑紅細(xì)胞。4.應(yīng)用抗－AB、抗－A1、或抗－H檢測紅細(xì)胞。第十四頁，共三十二頁，2022年，8月28日5.分析抗篩結(jié)果，確定結(jié)果是否受同種異型或自身冷抗體干擾。6.室溫孵育30min后，離心觀察結(jié)果，以檢測弱的抗原抗體反應(yīng)。7.做自身紅細(xì)胞做對(duì)照，以確定自身抗體的干擾。第十五頁，共三十二頁，2022年，8月28日ABO正反定不符的分類一、抗原表達(dá)減弱或丟失所致的ABO正反定不符二、紅細(xì)胞額外反應(yīng)所致的ABO正反定不符三、意外的血清學(xué)反應(yīng)所致的ABO正反定不符第十六頁，共三十二頁，2022年，8月28日一、抗原表達(dá)減弱或丟失

所致的ABO正反定不符常見的原因：1.ABO亞型紅細(xì)胞2.白血病或其他惡性疾病患者的紅細(xì)胞ABO抗原太弱，應(yīng)用抗－A、抗－B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反應(yīng)3.急性大出血第十七頁，共三十二頁，2022年，8月28日處理的方法：1.將抗－A、抗－B和抗－A，B試劑與洗滌過的紅細(xì)胞在室溫或4℃孵育30min，以增強(qiáng)抗原、抗體的結(jié)合。2.用木瓜酶、菠蘿蛋白酶處理紅細(xì)胞，以增強(qiáng)抗原、抗體的結(jié)合。3.應(yīng)用抗－AB、抗－A1、或抗－H檢測紅細(xì)胞。第十八頁，共三十二頁，2022年，8月28日4.用人血清抗－A、抗－B進(jìn)行吸收放散試驗(yàn)，檢測弱A、B抗原，且同時(shí)要做O型血吸收放散試驗(yàn)作對(duì)照。第十九頁，共三十二頁，2022年，8月28日二、紅細(xì)胞額外反應(yīng)

所致的ABO正反定不符常見的原因1.獲得性B紅細(xì)胞（類B）2.混合視野凝集(mf)3.紅細(xì)胞被致敏第二十頁，共三十二頁，2022年，8月28日

獲得性B紅細(xì)胞的特征

1.常出現(xiàn)在有腸道細(xì)菌進(jìn)入血循環(huán)的疾病，也可發(fā)生在正常人；3.常伴有T和Tn多凝集紅細(xì)胞出現(xiàn)(細(xì)菌感染時(shí))；4.自身抗-B不與自身獲得性B抗原反應(yīng)(無自凝現(xiàn)象)第二十一頁，共三十二頁，2022年，8月28日獲得性B紅細(xì)胞的鑒定1.酸化血清抗-B試劑pH至6.0時(shí)，檢測無凝集，即不與獲得性B細(xì)胞反應(yīng)2.乙酸酐處理能明顯減弱其反應(yīng)，但正常B細(xì)胞不受影響3.臨床追蹤，感染控制后“類B”現(xiàn)象消失第二十二頁，共三十二頁，2022年，8月28日混合視野凝集1.非O型人近期輸用O型血；2.骨髓移植后做血型；3A3(B3)細(xì)胞與抗－A(抗-B)呈典型的混合視野凝集現(xiàn)象；4.雙精子受精（嵌合體）第二十三頁，共三十二頁，2022年，8月28日紅細(xì)胞被致敏1.患HDN嬰兒、存在自身免疫或同種異體免疫的成人，其紅細(xì)胞嚴(yán)重包被IgG抗體分子；2.與含一定蛋白質(zhì)濃度的試劑（抗－D、抗－A、抗－B）產(chǎn)生凝集；3.處理方法：45℃放散后，抗體解離，即可準(zhǔn)確定型；第二十四頁，共三十二頁，2022年，8月28日三、意外的血清學(xué)反應(yīng)所致的ABO正反定不符

常見的原因及處理方法：1.抗體太弱或消失如﹤4-6個(gè)月幼兒，老年人、免疫抑制患者，應(yīng)注意患者的年齡和臨床診斷2.非正常高濃度的抗－A、抗－B可引起前帶現(xiàn)象，導(dǎo)致假陰性，將血清稀釋或用EDTA（2.5％）處理可消除；第二十五頁，共三十二頁，2022年，8月28日3.A2、A2B或其他ABO亞型，人血清中可能有抗－A1，抗－A1只凝集A1型紅細(xì)胞而不凝集A2、O型紅細(xì)胞；4.患者靜脈輸用了大量大分子藥物等原因，可發(fā)生類似凝集現(xiàn)象，如緡錢狀凝集，將血清用生理鹽水稀釋3倍或用鹽水替換技術(shù)可消除；第二十六頁，共三十二頁，2022年，8月28日5.冷自身抗體①所有試劑及細(xì)胞37℃孵育,37℃下判讀結(jié)果;②將冷自身抗體在4℃吸收在做血型,③將血清用0.01mol/L二硫蘇糖醇(DTT)處理完再定型；第二十七頁，共三十二頁，2022年，8月28日6.自身免疫性溫型抗體正定被易被誤認(rèn)為AB型，反定易被誤認(rèn)為O型，用遞增溫度(22℃，37℃，45℃)洗滌紅細(xì)胞后再做血型鑒定7.血清蛋白過高試劑紅細(xì)胞多呈假凝集，如肝臟疾病、MM等，加鹽水稀釋后凝集散開第二十八頁，共三十二頁，2022年，8月28日

Rh血型

1.導(dǎo)致Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽性的原因(1)直抗(DAT)陽性；(2)標(biāo)本抗凝不當(dāng)，受檢過程中出現(xiàn)凝血或出現(xiàn)纖維蛋白凝塊，誤判為陽性；(3)受檢細(xì)胞與抗血清孵育的時(shí)間過長；(4)定型血清中含有事先未被檢測的其他特異性抗體，造成假陽性定型結(jié)果；第二十九頁，共三十二頁，2022年，8月28日(5)多凝集細(xì)胞，造成定型的假陽性，如MM。(6)檢定用器材或抗體被污染，造成假陽性。2.導(dǎo)致Rh血型鑒定可