腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件

腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用PPT腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用PPT1腫瘤發(fā)病率和死亡率WHO：全世界每年腫瘤死亡人數(shù)為630萬。1997年全國(guó)腫瘤防治研究所辦公室的統(tǒng)計(jì)資料：我國(guó)惡性腫瘤的死亡率為108.39/10萬，占死亡人數(shù)的17.94%，居死亡原因的第二位。

腫瘤發(fā)病率和死亡率WHO：全世界每年腫瘤死亡人數(shù)為630萬。2

腫瘤免疫學(xué)(tumorimmunology)

是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答、機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤免疫學(xué)診斷和免疫學(xué)防治的科學(xué)。腫瘤免疫學(xué)(tumorimmunology)3

腫瘤抗原

腫瘤抗原（tumorantigen）是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達(dá)的抗原物質(zhì)。

腫瘤抗原

腫瘤抗原（tumorantigen）4機(jī)體產(chǎn)生腫瘤抗原的可能機(jī)制為：①基因突變。②細(xì)胞癌變過程使原本不表達(dá)的某些基因被激活。③抗原合成過程的某些環(huán)節(jié)發(fā)生異常如糖基化異常。機(jī)體產(chǎn)生腫瘤抗原的可能機(jī)制為：5④胚胎時(shí)期抗原或分化抗原的異常、異位表達(dá)。⑤某些基因產(chǎn)物尤其是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的過度表達(dá)。⑥外源性基因（如病毒基因）的表達(dá)。④胚胎時(shí)期抗原或分化抗原的異常、異位表達(dá)。6大家學(xué)習(xí)辛苦了，還是要堅(jiān)持繼續(xù)保持安靜大家學(xué)習(xí)辛苦了，還是要堅(jiān)持繼續(xù)保持安靜7根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類1．腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA）

是腫瘤細(xì)胞所特有的新抗原，它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類1．腫瘤特異性抗原（tumorsp82．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociatedantigen,TAA)

是指非腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞也可表達(dá)的抗原物質(zhì)，但此類抗原在癌變細(xì)胞的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過正常細(xì)胞。2．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociated9根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原2．病毒誘生的腫瘤抗原3．自發(fā)性腫瘤抗原根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原104．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)

⑴分化抗原

⑵過度表達(dá)的抗原

⑶胚胎抗原

⑷細(xì)胞突變產(chǎn)生的獨(dú)特型抗原4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)11機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制

機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜，涉及特異性和非特異性抗腫瘤機(jī)制相互交錯(cuò)，體液免疫與細(xì)胞免疫機(jī)制相互協(xié)調(diào)和補(bǔ)充，從而共同執(zhí)行免疫監(jiān)視功能。機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜12一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制㈠T細(xì)胞

1.CD4+T細(xì)胞

2.CD8+T細(xì)胞(在抗腫瘤效應(yīng)中起關(guān)鍵作用)

3.γδ+T細(xì)胞㈡NK細(xì)胞㈢巨噬細(xì)胞一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制㈠T細(xì)胞13二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制

1．補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)

2．抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)

3．抗體的免疫調(diào)理作用二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制1．補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)144．抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體5．抗體干擾腫瘤細(xì)胞粘附作用6．其他機(jī)制

4．抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體15腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)

腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是指用免疫學(xué)的方法檢測(cè)腫瘤抗原、抗體等腫瘤標(biāo)志物和腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)，為腫瘤的診斷、觀察病情、評(píng)價(jià)療效及預(yù)后具有重要價(jià)值。腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)?zāi)[瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是指用免疫學(xué)的方法檢測(cè)腫瘤抗原16

腫瘤的早期診斷雖有可能(因?yàn)槟[瘤潛伏期可長(zhǎng)達(dá)數(shù)月至數(shù)年)，但實(shí)際上十分困難，因?yàn)槟壳按蠖鄶?shù)的診斷技術(shù)都不適合腫瘤的早期診斷。

腫瘤的早期診斷雖有可能(因?yàn)槟[瘤潛伏期可長(zhǎng)達(dá)17

用生物物理方法，如X線，CT和超聲等檢查，只有當(dāng)腫瘤大小至少到1～2cm時(shí)才能發(fā)現(xiàn)，而此時(shí)腫瘤細(xì)胞數(shù)已達(dá)109以上。用生物物理方法，如X線，CT和超聲等檢查，只有當(dāng)腫瘤大小18

用免疫學(xué)方法檢測(cè)，腫瘤細(xì)胞需達(dá)到106才可檢出，但此時(shí)可能已經(jīng)發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移，而且并不是所有腫瘤在此時(shí)都能被檢出。長(zhǎng)期以來人們致力于尋找一種能夠盡早檢出惡性腫瘤的指標(biāo)，并將已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的一些物質(zhì)稱之為腫瘤標(biāo)志物（TumorMarker,TM）。

用免疫學(xué)方法檢測(cè)，腫瘤細(xì)胞需達(dá)到106才可檢出，但此時(shí)可能19一、腫瘤標(biāo)志物

近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，免疫學(xué)，分子生物學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)，生物化學(xué)的深入研究，發(fā)現(xiàn)了許多特異性較強(qiáng)，有一定臨床價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物100多種，受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的高度重視。一、腫瘤標(biāo)志物近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，免疫學(xué)，分子生201.腫瘤標(biāo)志物的定義

腫瘤標(biāo)志物（tumormarker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身所產(chǎn)生的或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等。1.腫瘤標(biāo)志物的定義

腫瘤標(biāo)志物（tumormark21

患者血液或體液中腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、病情監(jiān)測(cè)以及預(yù)后的評(píng)價(jià)具有一定的價(jià)值。患者血液或體液中腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診22理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有：

⑴特異性100%⑵靈敏度100%⑶器官特異性

⑷與腫瘤的大小或分期有關(guān)

⑸與預(yù)后有關(guān)至今尚無任何腫瘤標(biāo)志物能滿足所有上述標(biāo)準(zhǔn)理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有：23

2.腫瘤標(biāo)志物的分類

體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：⑴胚胎抗原類：如AFP，CEA等。⑵糖鏈抗原類：如CA125，CA15-3，CA19-9等。⑶激素類：如患甲狀腺髓樣癌時(shí)降鈣素升高，患絨毛膜細(xì)胞癌時(shí)hCG明顯升高。

2.腫瘤標(biāo)志物的分類

體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全24⑷酶和同工酶類：γGT，PAP等。⑸蛋白質(zhì)類：β2微球蛋白，鐵蛋白，本周蛋白等。⑹癌基因產(chǎn)物類如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。⑷酶和同工酶類：γGT，PAP等。253.影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素⑴腫瘤的大小和腫瘤細(xì)胞的數(shù)目。⑵腫瘤細(xì)胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度。⑶腫瘤組織的血液供應(yīng)好壞。⑷腫瘤細(xì)胞是否有壞死和壞死的程度。3.影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素⑴腫瘤的大小和腫瘤26⑸腫瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期。⑹腫瘤細(xì)胞是否表達(dá)和合成腫瘤標(biāo)志物。⑺腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)的降解和排泄速度。⑸腫瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期。27腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用正常人群中的篩查有癥狀者的輔助診斷癌癥的臨床階段的分期疾病進(jìn)程的預(yù)后指標(biāo)評(píng)估治療方案判斷癌癥是否復(fù)發(fā)治療應(yīng)答的監(jiān)測(cè)腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用正常人群中的篩查28腫瘤標(biāo)志物用于普查的五項(xiàng)原則應(yīng)十分清楚該腫瘤的發(fā)病率應(yīng)能檢測(cè)早期腫瘤該腫瘤的早期治療比晚期治療更經(jīng)濟(jì)有效測(cè)定方法的靈敏度、特異性和重復(fù)性良好普查所需費(fèi)用能被接受

腫瘤標(biāo)志物用于普查的五項(xiàng)原則應(yīng)十分清楚該腫瘤的發(fā)病率29定位

TM基本上不能對(duì)腫瘤定位極少數(shù)TM如PSA,甲狀腺球白等具器官特異性，但不是腫瘤特異性。定位TM基本上不能對(duì)腫瘤定位30確診

通常不能進(jìn)行確診

因?yàn)門M無足夠的靈敏度，不能排除假陰性結(jié)果。但本周蛋白(多發(fā)性骨髓瘤）、AFP(肝癌)、-HCG（絨毛膜癌）和降鈣素（C-細(xì)胞癌）等有助確診。確診通常不能進(jìn)行確診31分期

大多數(shù)TM與疾病分期有關(guān)，且濃度與腫瘤大小通常存在關(guān)聯(lián)但并不能根據(jù)個(gè)體測(cè)得值來判斷腫瘤大小，也不能以TM濃度精確指示各期腫瘤，因?yàn)楦髌谀[瘤的TM濃度范圍極廣，且互相重疊。分期大多數(shù)TM與疾病分期有關(guān)，且濃度與腫瘤大小32預(yù)后術(shù)前TM濃度增加，術(shù)后降低，表示這些TM對(duì)此腫瘤有預(yù)后價(jià)值。

在病程監(jiān)測(cè)中，TM的濃度增加或降低與疾病的預(yù)后密切相關(guān)。預(yù)后術(shù)前TM濃度增加，術(shù)后降低，表示這些TM對(duì)此腫瘤33TM評(píng)價(jià)治療有效性方案

（Beastall,1991)無效：TM濃度與治療前相比下降<50%改善：TM濃度與治療前相比下降>50%有效：TM濃度與治療前相比下降>90%TM評(píng)價(jià)治療有效性方案

（Beastall,1991)無效34預(yù)測(cè)敏感性陽性結(jié)果在腫瘤患者中的比例

敏感性＝特異性非癌癥患者個(gè)體中(如健康人或良性疾病患者),陰性實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比例

特異性＝

真陽性結(jié)果數(shù)患病人群總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)對(duì)照組人群總數(shù)預(yù)測(cè)敏感性真陽性結(jié)果數(shù)患病人群總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)35實(shí)驗(yàn)結(jié)果的期望值期望值：

陽性期望值(PV+)：在陽性結(jié)果的病人中，癌癥存在的可能性

PV＋＝

陰性期望值(PV－)：在陰性結(jié)果病人中,非癌癥存在的可能性

PV－＝臨界值：把健康人和癌癥病人分開的TM的濃度真陽性結(jié)果數(shù)陽性結(jié)果總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)陰性結(jié)果總數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的期望值真陽性結(jié)果數(shù)陽性結(jié)果總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)陰性結(jié)果36參考值與臨界值對(duì)TM而言，以參考值表示基本無意義，應(yīng)以臨界值來表示。TM在實(shí)際應(yīng)用中注重的是最佳臨界值，即區(qū)分“正?！迸c否的分界線。它不同與參考值，因?yàn)閰⒖贾祦碜砸唤M對(duì)照人群，而臨界值是根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)確診為病人和對(duì)照兩組人群所確定的。參考值與臨界值對(duì)TM而言，以參考值表示基本無意義，應(yīng)以臨界37金標(biāo)準(zhǔn)“金標(biāo)準(zhǔn)”主要指活體組織檢查、病原學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)檢查、特殊影像診斷、長(zhǎng)期隨訪及臨床醫(yī)學(xué)專家共同制訂的公認(rèn)的綜合診斷標(biāo)準(zhǔn)。金標(biāo)準(zhǔn)“金標(biāo)準(zhǔn)”主要指活體組織檢查、病原學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)檢38腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件39腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件40

敏感性和特異性常常是一對(duì)矛盾，提高了敏感性，降低了特異性，即提高了腫瘤的檢出率，同時(shí)提高了腫瘤的假陽性率；反之，提高了特異性，降低了敏感性，即提高了腫瘤診斷的準(zhǔn)確性，同時(shí)降低了腫瘤的檢出率(漏診)。敏感性和特異性常常是一對(duì)矛盾，提高了敏感性，降低了特異41臨界值臨界值由三方面決定根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)確定病人和對(duì)照兩組例數(shù)相似的人群，并測(cè)出各組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。用該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不同域值區(qū)分陽性和陰性的不同分界點(diǎn)，分別計(jì)算靈敏度和特異性。繪制ROC曲線，最接近左上角的點(diǎn)即為最佳臨界值，其靈敏度最高，特異性最強(qiáng)。臨界值臨界值由三方面決定42ROC曲線ROC曲線43

受試者工作特征曲線(ROC曲線)

ROC曲線是反映敏感性和特異性連續(xù)變量的綜合指標(biāo)。

ROC曲線真陽性率為縱坐標(biāo),假陽性率為橫坐標(biāo),在座標(biāo)上由無數(shù)個(gè)臨界值求出的無數(shù)對(duì)真陽性率和假陽性率作圖構(gòu)成。

受試者工作特征曲線(ROC曲線)

ROC曲線是44臨界值應(yīng)根據(jù)需要確定選擇臨界值不能同時(shí)提高靈敏度和特異性。將臨界值提高，特異性增加但靈敏度降低。將臨界值降低，靈敏度提高但特異性下降。體檢時(shí)應(yīng)選擇較高的靈敏度，將有問題的人盡量多地檢出；確診時(shí)應(yīng)選擇較高的特異性，以減少假陽性結(jié)果。臨界值應(yīng)根據(jù)需要確定選擇臨界值不能同時(shí)提高靈敏度和特異性。45腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法標(biāo)記免疫學(xué)的基本原理示蹤物的標(biāo)記技術(shù)+免疫學(xué)技術(shù)根據(jù)示蹤劑的不同可分為化學(xué)發(fā)光免疫分析酶免疫分析熒光免疫分析放射免疫分析金標(biāo)記免疫分析腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)最好能做定量測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法標(biāo)記免疫學(xué)的基本原理腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)最好46臨床免疫檢測(cè)的選擇當(dāng)然是靈敏度更高，同時(shí)特異性更高的方法（化學(xué)發(fā)光及電化學(xué)發(fā)光）！臨床免疫檢測(cè)的選擇當(dāng)然是靈敏度更高，同時(shí)特異性更高的方法（化47二、常見腫瘤標(biāo)志物

1.胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物⑴甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD(生物大分子分子質(zhì)量單位)，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP<20μg/L。二、常見腫瘤標(biāo)志物

1.胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物48①原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高。②病毒性肝炎與肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300μg/L以下。①原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分49③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高。④妊娠三個(gè)月后，血清AFP含量開始升高，分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高，應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性。③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高。50腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件51⑵癌胚抗原（CEA）

1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。參考值：血清CEA<5.0μg/L⑵癌胚抗原（CEA）52①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤也有不同程度的陽性率；在惡性腫瘤的隨訪，病情監(jiān)測(cè)，療效評(píng)價(jià)等方面有重要價(jià)值。①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性惡性腫53②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高。③吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病54

CEA的濃度與癌癥的早、中、晚期有關(guān)，越到晚期CEA值越高。

CEA的濃度與癌癥的早、中、晚期有關(guān)，越到晚期CEA值55

2.糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物2.糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物56（1）糖鏈抗原15-3(CA15-3)CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原，屬糖蛋白，分子量超過400kD，可用一對(duì)單克隆抗體（MAb115D8和MAbDF3）進(jìn)行雙抗體夾心法來識(shí)別。與CA15-3同類的多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有MCA，CA27-29，CA549等。參考值：血清CA15-3<28kU/L。（1）糖鏈抗原15-3(CA15-3)CA15-3是一57①乳腺癌，但在乳腺癌的早期陽性率較低約為30%，轉(zhuǎn)移性乳腺癌陽性率可達(dá)80%。②其他惡性腫瘤，如肺癌，結(jié)腸癌，胰腺癌，卵巢癌，子宮頸癌，原發(fā)性肝癌等，也有不同程度的陽性率。①乳腺癌，但在乳腺癌的早期陽性率較低約為30%，轉(zhuǎn)移性乳腺58③肝臟，胃腸道，肺，乳腺，卵巢等非惡性腫瘤疾病，陽性率一般低于10%。乳癌初期敏感性約為60%，晚期可達(dá)80%。

③肝臟，胃腸道，肺，乳腺，卵巢等非惡性腫瘤疾病，陽性率一般59

（2）糖鏈抗原125(CA125)CA125是很重要的卵巢癌相關(guān)抗原，1981年Bast發(fā)現(xiàn)。CA125是一種大分子多聚糖蛋白。參考值：血清CA125<35kU/L。（2）糖鏈抗原125(CA125)CA125是很重60①卵巢癌，陽性率約為61.4%。手術(shù)和化療有效者CA125水平很快下降，若有復(fù)發(fā)，CA125升高可先于臨床癥狀出現(xiàn)之前。②其他惡性腫瘤，如乳腺癌40%，胰腺癌50%，胃癌47%，肺癌41.4%，結(jié)腸直腸癌34.2%，其他婦科腫瘤43%。③非惡性腫瘤，如子宮內(nèi)膜異位癥，盆腔炎，卵巢囊腫，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也有不同程度升高。④妊娠早期，CA125有升高。①卵巢癌，陽性率約為61.4%。手術(shù)和化療有效者CA1261

（3）糖鏈抗原19-9(CA19-9)

CA19-9是一種與胰腺癌，膽囊癌，結(jié)腸癌和胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，又稱胃腸癌相關(guān)抗原。參考值：血清CA199<37kU/L。

（3）糖鏈抗原19-9(CA19-9)

CA19-9是一62①胰腺癌，膽囊癌，膽管壺腹癌時(shí)，血清CA19-9水平明顯升高，陽性率約為74.9%，尤其是胰腺癌晚期病人，血清CA19-9濃度可達(dá)40萬kU/L，是重要的輔助診斷指標(biāo)。②胃癌，陽性率約為50%，結(jié)腸癌，陽性率約為60%。③急性胰腺炎，膽囊炎，膽汁淤積性膽管炎，肝硬化，肝炎等疾病，CA19-9也有不同程度的升高，注意與惡性腫瘤的鑒別。①胰腺癌，膽囊癌，膽管壺腹癌時(shí)，血清CA19-9水平明顯63

3.酶類腫瘤標(biāo)志物3.酶類腫瘤標(biāo)志物64⑴前列腺特異性抗原(PSA)PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在：一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的游離PSA（f-PSA）形式存在。大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在，稱復(fù)合PSA(c-PSA)?？侾SA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。⑴前列腺特異性抗原(PSA)65血清PSA升高①前列腺癌患者升高，但大約25%患者，其PSA水平正常；而大約有50%的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。為增加PSA對(duì)前列腺癌檢測(cè)的敏感性和特異性，可使用PSA年齡特異性參考范圍，PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等。血清PSA升高66②前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，也可見血清PSA水平升高，故當(dāng)PSA在4.0μg/L～10.0μg/L的灰區(qū)時(shí)，須進(jìn)行f-PSA和f-PSA/t-PSA比值的測(cè)定。②前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，也可見血清PS67【注意事項(xiàng)】在采集病人的血標(biāo)本前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩，導(dǎo)尿等，將會(huì)導(dǎo)致血清PSA升高，應(yīng)注意避免?！咀⒁馐马?xiàng)】在采集病人的血標(biāo)本前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩，導(dǎo)68⑵神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）

NSE是烯醇化酶的一種同功酶，烯醇化酶同功酶根據(jù)α，β，γ三個(gè)亞基的不同，可分為αα、ββ、γγ、αβ和αγ五種二聚體同功酶。

γγ亞基組成的同功酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶，

NSE是一種酸性蛋白酶，參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強(qiáng)，細(xì)胞增殖周期加快，細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放進(jìn)入血液增多，導(dǎo)致此酶在血清內(nèi)含量增高。

⑵神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）69參考值：血清NSE<15μg/L。參考值：血清NSE<15μg/L。70血清NSE升高見于①小細(xì)胞肺癌（SCLC）。可用于鑒別診斷，監(jiān)測(cè)小細(xì)胞肺癌放療、化療后的治療效果。②神經(jīng)母細(xì)胞瘤，患者NSE水平異常增高，而Wilms瘤則升高不明顯，因此測(cè)定NSE的水平可用于上述疾病的診斷和鑒別診斷。血清NSE升高見于71③神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤，如嗜鉻細(xì)胞瘤，胰島細(xì)胞瘤，甲狀腺髓樣癌，黑色素瘤，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤等血清NSE也可增高。【注意事項(xiàng)】NSE也存在于正常紅細(xì)胞中，標(biāo)本溶血會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，因此采血時(shí)要特別注意避免溶血。③神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤，如嗜鉻細(xì)胞瘤，胰島細(xì)胞瘤，甲狀腺髓樣72⑶α-L-巖藻糖苷酶測(cè)定（AFU）AFU是一種溶酶體酸性水解酶，以往主要用于遺傳性AFU缺乏引起的巖藻糖貯積病的診斷。Deugnier等（1984）首先發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌患者血清中AFU活性升高。參考值：血清<420μmol/L⑶α-L-巖藻糖苷酶測(cè)定（AFU）AFU是一種溶酶體酸性水73①原發(fā)性肝癌，患者血清中AFU活性明顯升高，AFP陰性的肝癌患者中AFU也可見升高，因此，兩者聯(lián)合檢測(cè)有較好的互補(bǔ)作用。②其他惡性腫瘤，如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮癌等也可有部分病例升高。①原發(fā)性肝癌，患者血清中AFU活性明顯升高，AFP陰性的肝癌74③慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AFU下降，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)有助于與肝癌的鑒別。④妊娠期間，AFU升高，分娩后迅速下降。③慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AF754.激素類腫瘤標(biāo)志物⑴人絨毛膜促性腺激素(hCG)hCG是胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白類激素，是監(jiān)測(cè)早孕的重要指標(biāo)。在異常情況下，惡性腫瘤也可產(chǎn)生hCG。參考值上限為:5IU/L。4.激素類腫瘤標(biāo)志物⑴人絨毛膜促性腺激素(hCG)76①滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤hCG升高，如絨毛膜細(xì)胞癌、葡萄胎、精原細(xì)胞睪丸癌等。

②其他腫瘤如乳腺癌、胃腸道癌、肺癌等也可見升高。

③良性疾病如卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化等hCG也可見增高。①滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤hCG升高，如絨毛膜細(xì)胞癌、葡萄77⑵降鈣素（calcitonin,CT）CT是由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞即C細(xì)胞分泌的多肽激素，主要生理作用是降低血鈣。參考值＜100ng/L。⑵降鈣素（calcitonin,CT）CT是由甲狀腺濾泡78①甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高，其他腫瘤如肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也見增高。②腎功能衰竭患者降鈣素常升高。①甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高，其他腫瘤如肺癌、乳腺癌、胰腺79【注意事項(xiàng)】由于降鈣素在血液中的半壽期短約為10min，樣本收集后應(yīng)及時(shí)處理，冷凍保存。【注意事項(xiàng)】由于降鈣素在血液中的半壽期短約為10min，樣本805.蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物(1)β2-微球蛋白(β2M)β2M是一種低分子蛋白，人體除成熟紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞以外，所有的有核細(xì)胞都有β2M。因?yàn)棣?M分子量小，易于由腎小球?yàn)V過，但幾乎全部由近曲小管重吸收，因此正常人血和尿中β2M含量很低。參考值：血清<2.4mg/L；尿<320μg/L。5.蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物(1)β2-微球蛋白(β2M)81β2M升高見于:①惡性腫瘤，慢性淋巴細(xì)胞白血病等。②腎臟疾?。杭甭阅I盂腎炎，腎小管藥物性損害等。③腎移植排斥反應(yīng)時(shí)。④免疫性疾?。合到y(tǒng)性紅斑性狼瘡，艾滋病等。β2M升高見于:82【注意事項(xiàng)】尿標(biāo)本采集后，為避免β2M分解，應(yīng)加適當(dāng)?shù)腘aOH緩沖液調(diào)PH至7.0左右，然后置4℃保存，2天內(nèi)測(cè)定?！咀⒁馐马?xiàng)】尿標(biāo)本采集后，為避免β2M分解，應(yīng)加適當(dāng)?shù)腘a83

鐵蛋白是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。Fer升高還與腫瘤有關(guān)，癌細(xì)胞具有較強(qiáng)合成鐵蛋白的能力，因此也是一種腫瘤標(biāo)志物。血清參考值：男性15~200μg/L。女性12~150μg/L。⑵鐵蛋白（ferritin,Fer)

鐵蛋白是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。Fer升高還與84①各種惡性腫瘤和白血病可見血清鐵蛋白升高。②各種炎癥感染、急性心肌梗死、反復(fù)輸血等，見鐵蛋白升高。③鐵蛋白<12μg/L時(shí)即可診斷為缺鐵。是診斷隱性缺鐵性貧血的可靠指標(biāo)。①各種惡性腫瘤和白血病可見血清鐵蛋白升高。85

6.其它常用腫瘤標(biāo)志物6.其它常用腫866.其它常用腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物參考值相關(guān)腫瘤CA50<24kU/L胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等CA72-4<6kU/L胃癌、粘液性卵巢癌等CA242<20kU/L胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等前列腺酸性磷酸酶（PAP）<2.0μg/L前列腺癌鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原（SCC）

<1.5μg/L宮頸癌、肺和頭頸部鱗癌等組織多肽抗原（TPA）

<80U/L膀胱癌、前列腺癌、消化道

惡性腫瘤細(xì)胞角蛋白19片段

<3.3μg/L非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）（CYFRA21-1）唾液酸<1.8mmol/L肺癌、胃癌、黑色素瘤等6.其它常用腫瘤標(biāo)志物871.標(biāo)本采集:各種物理檢查對(duì)TM檢測(cè)的影響藥物對(duì)TM檢測(cè)的影響標(biāo)本保存對(duì)TM檢測(cè)的影響溶血標(biāo)本對(duì)TM檢測(cè)的影響酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物的特點(diǎn)（三）腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的注意事項(xiàng)1.標(biāo)本采集:（三）腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的注意事項(xiàng)882.檢測(cè)方法和試劑：方法學(xué)的差異試劑盒的差異測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化的問題因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。2.檢測(cè)方法和試劑：893.TM檢測(cè)的干擾因素⑴攜帶污染(carry-over)⑵“鉤狀效應(yīng)”（hookeffect）3.TM檢測(cè)的干擾因素90⑶嗜異性抗體：可導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物濃度增高的假象。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被鼠或?qū)櫸镆н^的人，以及使用過動(dòng)物免疫劑（如單克隆抗體）治療過的人。⑶嗜異性抗體：可導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物濃度增91（四）腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用

一種腫瘤可分泌多種腫瘤標(biāo)志物，而不同的腫瘤或同種腫瘤的不同組織類型可有相同的腫瘤標(biāo)志物。因此，單獨(dú)檢測(cè)一種腫瘤標(biāo)志物，可能會(huì)因?yàn)闇y(cè)定方法的敏感性不夠而出現(xiàn)假陰性，聯(lián)合檢測(cè)多種腫瘤標(biāo)志物有利于提高檢出的陽性率。（四）腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用

一種腫瘤可分泌多種腫瘤標(biāo)志物，92

為此，選擇一些特異性較高，可以互補(bǔ)的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定，對(duì)提高腫瘤的檢出率是有價(jià)值的。常用腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合使用。為此，選擇一些特異性較高，可以互補(bǔ)的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定，93

腫瘤首選標(biāo)志物補(bǔ)充標(biāo)志物肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP結(jié)腸直腸癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睪丸腫瘤AFP、hCG宮頸癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌無TPA、CEA骨髓瘤β2-M、本周蛋白

常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用肺癌NSE、CYFRA21-194二、腫瘤患者免疫功能狀態(tài)

的檢測(cè)及臨床意義

腫瘤的發(fā)生與機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，尤其是細(xì)胞免疫狀態(tài)密切相關(guān)。腫瘤患者的免疫功能測(cè)定對(duì)了解病情、評(píng)價(jià)療效、判斷腫瘤的發(fā)展及預(yù)后有重要價(jià)值。二、腫瘤患者免疫功能狀態(tài)

的檢測(cè)及臨床意義

95腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用PPT腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用PPT96腫瘤發(fā)病率和死亡率WHO：全世界每年腫瘤死亡人數(shù)為630萬。1997年全國(guó)腫瘤防治研究所辦公室的統(tǒng)計(jì)資料：我國(guó)惡性腫瘤的死亡率為108.39/10萬，占死亡人數(shù)的17.94%，居死亡原因的第二位。

腫瘤發(fā)病率和死亡率WHO：全世界每年腫瘤死亡人數(shù)為630萬。97

腫瘤免疫學(xué)(tumorimmunology)

是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答、機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤免疫學(xué)診斷和免疫學(xué)防治的科學(xué)。腫瘤免疫學(xué)(tumorimmunology)98

腫瘤抗原

腫瘤抗原（tumorantigen）是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達(dá)的抗原物質(zhì)。

腫瘤抗原

腫瘤抗原（tumorantigen）99機(jī)體產(chǎn)生腫瘤抗原的可能機(jī)制為：①基因突變。②細(xì)胞癌變過程使原本不表達(dá)的某些基因被激活。③抗原合成過程的某些環(huán)節(jié)發(fā)生異常如糖基化異常。機(jī)體產(chǎn)生腫瘤抗原的可能機(jī)制為：100④胚胎時(shí)期抗原或分化抗原的異常、異位表達(dá)。⑤某些基因產(chǎn)物尤其是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的過度表達(dá)。⑥外源性基因（如病毒基因）的表達(dá)。④胚胎時(shí)期抗原或分化抗原的異常、異位表達(dá)。101大家學(xué)習(xí)辛苦了，還是要堅(jiān)持繼續(xù)保持安靜大家學(xué)習(xí)辛苦了，還是要堅(jiān)持繼續(xù)保持安靜102根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類1．腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA）

是腫瘤細(xì)胞所特有的新抗原，它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類1．腫瘤特異性抗原（tumorsp1032．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociatedantigen,TAA)

是指非腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞也可表達(dá)的抗原物質(zhì)，但此類抗原在癌變細(xì)胞的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過正常細(xì)胞。2．腫瘤相關(guān)性抗原(tumorassociated104根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原2．病毒誘生的腫瘤抗原3．自發(fā)性腫瘤抗原根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原1054．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)

⑴分化抗原

⑵過度表達(dá)的抗原

⑶胚胎抗原

⑷細(xì)胞突變產(chǎn)生的獨(dú)特型抗原4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)106機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制

機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜，涉及特異性和非特異性抗腫瘤機(jī)制相互交錯(cuò)，體液免疫與細(xì)胞免疫機(jī)制相互協(xié)調(diào)和補(bǔ)充，從而共同執(zhí)行免疫監(jiān)視功能。機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜107一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制㈠T細(xì)胞

1.CD4+T細(xì)胞

2.CD8+T細(xì)胞(在抗腫瘤效應(yīng)中起關(guān)鍵作用)

3.γδ+T細(xì)胞㈡NK細(xì)胞㈢巨噬細(xì)胞一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制㈠T細(xì)胞108二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制

1．補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)

2．抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)

3．抗體的免疫調(diào)理作用二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制1．補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)1094．抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體5．抗體干擾腫瘤細(xì)胞粘附作用6．其他機(jī)制

4．抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體110腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)

腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是指用免疫學(xué)的方法檢測(cè)腫瘤抗原、抗體等腫瘤標(biāo)志物和腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)，為腫瘤的診斷、觀察病情、評(píng)價(jià)療效及預(yù)后具有重要價(jià)值。腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)?zāi)[瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是指用免疫學(xué)的方法檢測(cè)腫瘤抗原111

腫瘤的早期診斷雖有可能(因?yàn)槟[瘤潛伏期可長(zhǎng)達(dá)數(shù)月至數(shù)年)，但實(shí)際上十分困難，因?yàn)槟壳按蠖鄶?shù)的診斷技術(shù)都不適合腫瘤的早期診斷。

腫瘤的早期診斷雖有可能(因?yàn)槟[瘤潛伏期可長(zhǎng)達(dá)112

用生物物理方法，如X線，CT和超聲等檢查，只有當(dāng)腫瘤大小至少到1～2cm時(shí)才能發(fā)現(xiàn)，而此時(shí)腫瘤細(xì)胞數(shù)已達(dá)109以上。用生物物理方法，如X線，CT和超聲等檢查，只有當(dāng)腫瘤大小113

用免疫學(xué)方法檢測(cè)，腫瘤細(xì)胞需達(dá)到106才可檢出，但此時(shí)可能已經(jīng)發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移，而且并不是所有腫瘤在此時(shí)都能被檢出。長(zhǎng)期以來人們致力于尋找一種能夠盡早檢出惡性腫瘤的指標(biāo)，并將已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的一些物質(zhì)稱之為腫瘤標(biāo)志物（TumorMarker,TM）。

用免疫學(xué)方法檢測(cè)，腫瘤細(xì)胞需達(dá)到106才可檢出，但此時(shí)可能114一、腫瘤標(biāo)志物

近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，免疫學(xué)，分子生物學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)，生物化學(xué)的深入研究，發(fā)現(xiàn)了許多特異性較強(qiáng)，有一定臨床價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物100多種，受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的高度重視。一、腫瘤標(biāo)志物近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，免疫學(xué)，分子生1151.腫瘤標(biāo)志物的定義

腫瘤標(biāo)志物（tumormarker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身所產(chǎn)生的或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等。1.腫瘤標(biāo)志物的定義

腫瘤標(biāo)志物（tumormark116

患者血液或體液中腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、病情監(jiān)測(cè)以及預(yù)后的評(píng)價(jià)具有一定的價(jià)值。患者血液或體液中腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診117理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有：

⑴特異性100%⑵靈敏度100%⑶器官特異性

⑷與腫瘤的大小或分期有關(guān)

⑸與預(yù)后有關(guān)至今尚無任何腫瘤標(biāo)志物能滿足所有上述標(biāo)準(zhǔn)理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有：118

2.腫瘤標(biāo)志物的分類

體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：⑴胚胎抗原類：如AFP，CEA等。⑵糖鏈抗原類：如CA125，CA15-3，CA19-9等。⑶激素類：如患甲狀腺髓樣癌時(shí)降鈣素升高，患絨毛膜細(xì)胞癌時(shí)hCG明顯升高。

2.腫瘤標(biāo)志物的分類

體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全119⑷酶和同工酶類：γGT，PAP等。⑸蛋白質(zhì)類：β2微球蛋白，鐵蛋白，本周蛋白等。⑹癌基因產(chǎn)物類如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。⑷酶和同工酶類：γGT，PAP等。1203.影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素⑴腫瘤的大小和腫瘤細(xì)胞的數(shù)目。⑵腫瘤細(xì)胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度。⑶腫瘤組織的血液供應(yīng)好壞。⑷腫瘤細(xì)胞是否有壞死和壞死的程度。3.影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素⑴腫瘤的大小和腫瘤121⑸腫瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期。⑹腫瘤細(xì)胞是否表達(dá)和合成腫瘤標(biāo)志物。⑺腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)的降解和排泄速度。⑸腫瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期。122腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用正常人群中的篩查有癥狀者的輔助診斷癌癥的臨床階段的分期疾病進(jìn)程的預(yù)后指標(biāo)評(píng)估治療方案判斷癌癥是否復(fù)發(fā)治療應(yīng)答的監(jiān)測(cè)腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用正常人群中的篩查123腫瘤標(biāo)志物用于普查的五項(xiàng)原則應(yīng)十分清楚該腫瘤的發(fā)病率應(yīng)能檢測(cè)早期腫瘤該腫瘤的早期治療比晚期治療更經(jīng)濟(jì)有效測(cè)定方法的靈敏度、特異性和重復(fù)性良好普查所需費(fèi)用能被接受

腫瘤標(biāo)志物用于普查的五項(xiàng)原則應(yīng)十分清楚該腫瘤的發(fā)病率124定位

TM基本上不能對(duì)腫瘤定位極少數(shù)TM如PSA,甲狀腺球白等具器官特異性，但不是腫瘤特異性。定位TM基本上不能對(duì)腫瘤定位125確診

通常不能進(jìn)行確診

因?yàn)門M無足夠的靈敏度，不能排除假陰性結(jié)果。但本周蛋白(多發(fā)性骨髓瘤）、AFP(肝癌)、-HCG（絨毛膜癌）和降鈣素（C-細(xì)胞癌）等有助確診。確診通常不能進(jìn)行確診126分期

大多數(shù)TM與疾病分期有關(guān)，且濃度與腫瘤大小通常存在關(guān)聯(lián)但并不能根據(jù)個(gè)體測(cè)得值來判斷腫瘤大小，也不能以TM濃度精確指示各期腫瘤，因?yàn)楦髌谀[瘤的TM濃度范圍極廣，且互相重疊。分期大多數(shù)TM與疾病分期有關(guān)，且濃度與腫瘤大小127預(yù)后術(shù)前TM濃度增加，術(shù)后降低，表示這些TM對(duì)此腫瘤有預(yù)后價(jià)值。

在病程監(jiān)測(cè)中，TM的濃度增加或降低與疾病的預(yù)后密切相關(guān)。預(yù)后術(shù)前TM濃度增加，術(shù)后降低，表示這些TM對(duì)此腫瘤128TM評(píng)價(jià)治療有效性方案

（Beastall,1991)無效：TM濃度與治療前相比下降<50%改善：TM濃度與治療前相比下降>50%有效：TM濃度與治療前相比下降>90%TM評(píng)價(jià)治療有效性方案

（Beastall,1991)無效129預(yù)測(cè)敏感性陽性結(jié)果在腫瘤患者中的比例

敏感性＝特異性非癌癥患者個(gè)體中(如健康人或良性疾病患者),陰性實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比例

特異性＝

真陽性結(jié)果數(shù)患病人群總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)對(duì)照組人群總數(shù)預(yù)測(cè)敏感性真陽性結(jié)果數(shù)患病人群總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)130實(shí)驗(yàn)結(jié)果的期望值期望值：

陽性期望值(PV+)：在陽性結(jié)果的病人中，癌癥存在的可能性

PV＋＝

陰性期望值(PV－)：在陰性結(jié)果病人中,非癌癥存在的可能性

PV－＝臨界值：把健康人和癌癥病人分開的TM的濃度真陽性結(jié)果數(shù)陽性結(jié)果總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)陰性結(jié)果總數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的期望值真陽性結(jié)果數(shù)陽性結(jié)果總數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)陰性結(jié)果131參考值與臨界值對(duì)TM而言，以參考值表示基本無意義，應(yīng)以臨界值來表示。TM在實(shí)際應(yīng)用中注重的是最佳臨界值，即區(qū)分“正常”與否的分界線。它不同與參考值，因?yàn)閰⒖贾祦碜砸唤M對(duì)照人群，而臨界值是根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)確診為病人和對(duì)照兩組人群所確定的。參考值與臨界值對(duì)TM而言，以參考值表示基本無意義，應(yīng)以臨界132金標(biāo)準(zhǔn)“金標(biāo)準(zhǔn)”主要指活體組織檢查、病原學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)檢查、特殊影像診斷、長(zhǎng)期隨訪及臨床醫(yī)學(xué)專家共同制訂的公認(rèn)的綜合診斷標(biāo)準(zhǔn)。金標(biāo)準(zhǔn)“金標(biāo)準(zhǔn)”主要指活體組織檢查、病原學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)檢133腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件134腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件135

敏感性和特異性常常是一對(duì)矛盾，提高了敏感性，降低了特異性，即提高了腫瘤的檢出率，同時(shí)提高了腫瘤的假陽性率；反之，提高了特異性，降低了敏感性，即提高了腫瘤診斷的準(zhǔn)確性，同時(shí)降低了腫瘤的檢出率(漏診)。敏感性和特異性常常是一對(duì)矛盾，提高了敏感性，降低了特異136臨界值臨界值由三方面決定根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)確定病人和對(duì)照兩組例數(shù)相似的人群，并測(cè)出各組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。用該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不同域值區(qū)分陽性和陰性的不同分界點(diǎn)，分別計(jì)算靈敏度和特異性。繪制ROC曲線，最接近左上角的點(diǎn)即為最佳臨界值，其靈敏度最高，特異性最強(qiáng)。臨界值臨界值由三方面決定137ROC曲線ROC曲線138

受試者工作特征曲線(ROC曲線)

ROC曲線是反映敏感性和特異性連續(xù)變量的綜合指標(biāo)。

ROC曲線真陽性率為縱坐標(biāo),假陽性率為橫坐標(biāo),在座標(biāo)上由無數(shù)個(gè)臨界值求出的無數(shù)對(duì)真陽性率和假陽性率作圖構(gòu)成。

受試者工作特征曲線(ROC曲線)

ROC曲線是139臨界值應(yīng)根據(jù)需要確定選擇臨界值不能同時(shí)提高靈敏度和特異性。將臨界值提高，特異性增加但靈敏度降低。將臨界值降低，靈敏度提高但特異性下降。體檢時(shí)應(yīng)選擇較高的靈敏度，將有問題的人盡量多地檢出；確診時(shí)應(yīng)選擇較高的特異性，以減少假陽性結(jié)果。臨界值應(yīng)根據(jù)需要確定選擇臨界值不能同時(shí)提高靈敏度和特異性。140腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法標(biāo)記免疫學(xué)的基本原理示蹤物的標(biāo)記技術(shù)+免疫學(xué)技術(shù)根據(jù)示蹤劑的不同可分為化學(xué)發(fā)光免疫分析酶免疫分析熒光免疫分析放射免疫分析金標(biāo)記免疫分析腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)最好能做定量測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法標(biāo)記免疫學(xué)的基本原理腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)最好141臨床免疫檢測(cè)的選擇當(dāng)然是靈敏度更高，同時(shí)特異性更高的方法（化學(xué)發(fā)光及電化學(xué)發(fā)光）！臨床免疫檢測(cè)的選擇當(dāng)然是靈敏度更高，同時(shí)特異性更高的方法（化142二、常見腫瘤標(biāo)志物

1.胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物⑴甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD(生物大分子分子質(zhì)量單位)，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP<20μg/L。二、常見腫瘤標(biāo)志物

1.胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物143①原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高。②病毒性肝炎與肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300μg/L以下。①原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分144③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高。④妊娠三個(gè)月后，血清AFP含量開始升高，分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高，應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性。③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高。145腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床應(yīng)用-課件146⑵癌胚抗原（CEA）

1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。參考值：血清CEA<5.0μg/L⑵癌胚抗原（CEA）147①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤也有不同程度的陽性率；在惡性腫瘤的隨訪，病情監(jiān)測(cè)，療效評(píng)價(jià)等方面有重要價(jià)值。①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性惡性腫148②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高。③吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病149

CEA的濃度與癌癥的早、中、晚期有關(guān)，越到晚期CEA值越高。

CEA的濃度與癌癥的早、中、晚期有關(guān)，越到晚期CEA值150

2.糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物2.糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物151（1）糖鏈抗原15-3(CA15-3)CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原，屬糖蛋白，分子量超過400kD，可用一對(duì)單克隆抗體（MAb115D8和MAbDF3）進(jìn)行雙抗體夾心法來識(shí)別。與CA15-3同類的多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有MCA，CA27-29，CA549等。參考值：血清CA15-3<28kU/L。（1）糖鏈抗原15-3(CA15-3)CA15-3是一152①乳腺癌，但在乳腺癌的早期陽性率較低約為30%，轉(zhuǎn)移性乳腺癌陽性率可達(dá)80%。②其他惡性腫瘤，如肺癌，結(jié)腸癌，胰腺癌，卵巢癌，子宮頸癌，原發(fā)性肝癌等，也有不同程度的陽性率。①乳腺癌，但在乳腺癌的早期陽性率較低約為30%，轉(zhuǎn)移性乳腺153③肝臟，胃腸道，肺，乳腺，卵巢等非惡性腫瘤疾病，陽性率一般低于10%。乳癌初期敏感性約為60%，晚期可達(dá)80%。

③肝臟，胃腸道，肺，乳腺，卵巢等非惡性腫瘤疾病，陽性率一般154

（2）糖鏈抗原125(CA125)CA125是很重要的卵巢癌相關(guān)抗原，1981年Bast發(fā)現(xiàn)。CA125是一種大分子多聚糖蛋白。參考值：血清CA125<35kU/L。（2）糖鏈抗原125(CA125)CA125是很重155①卵巢癌，陽性率約為61.4%。手術(shù)和化療有效者CA125水平很快下降，若有復(fù)發(fā)，CA125升高可先于臨床癥狀出現(xiàn)之前。②其他惡性腫瘤，如乳腺癌40%，胰腺癌50%，胃癌47%，肺癌41.4%，結(jié)腸直腸癌34.2%，其他婦科腫瘤43%。③非惡性腫瘤，如子宮內(nèi)膜異位癥，盆腔炎，卵巢囊腫，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也有不同程度升高。④妊娠早期，CA125有升高。①卵巢癌，陽性率約為61.4%。手術(shù)和化療有效者CA12156

（3）糖鏈抗原19-9(CA19-9)

CA19-9是一種與胰腺癌，膽囊癌，結(jié)腸癌和胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，又稱胃腸癌相關(guān)抗原。參考值：血清CA199<37kU/L。

（3）糖鏈抗原19-9(CA19-9)

CA19-9是一157①胰腺癌，膽囊癌，膽管壺腹癌時(shí)，血清CA19-9水平明顯升高，陽性率約為74.9%，尤其是胰腺癌晚期病人，血清CA19-9濃度可達(dá)40萬kU/L，是重要的輔助診斷指標(biāo)。②胃癌，陽性率約為50%，結(jié)腸癌，陽性率約為60%。③急性胰腺炎，膽囊炎，膽汁淤積性膽管炎，肝硬化，肝炎等疾病，CA19-9也有不同程度的升高，注意與惡性腫瘤的鑒別。①胰腺癌，膽囊癌，膽管壺腹癌時(shí)，血清CA19-9水平明顯158

3.酶類腫瘤標(biāo)志物3.酶類腫瘤標(biāo)志物159⑴前列腺特異性抗原(PSA)PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在：一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的游離PSA（f-PSA）形式存在。大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在，稱復(fù)合PSA(c-PSA)?？侾SA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。⑴前列腺特異性抗原(PSA)160血清PSA升高①前列腺癌患者升高，但大約25%患者，其PSA水平正常；而大約有50%的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。為增加PSA對(duì)前列腺癌檢測(cè)的敏感性和特異性，可使用PSA年齡特異性參考范圍，PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等。血清PSA升高161②前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，也可見血清PSA水平升高，故當(dāng)PSA在4.0μg/L～10.0μg/L的灰區(qū)時(shí)，須進(jìn)行f-PSA和f-PSA/t-PSA比值的測(cè)定。②前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病，也可見血清PS162【注意事項(xiàng)】在采集病人的血標(biāo)本前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩，導(dǎo)尿等，將會(huì)導(dǎo)致血清PSA升高，應(yīng)注意避免。【注意事項(xiàng)】在采集病人的血標(biāo)本前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩，導(dǎo)163⑵神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）

NSE是烯醇化酶的一種同功酶，烯醇化酶同功酶根據(jù)α，β，γ三個(gè)亞基的不同，可分為αα、ββ、γγ、αβ和αγ五種二聚體同功酶。

γγ亞基組成的同功酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶，

NSE是一種酸性蛋白酶，參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強(qiáng)，細(xì)胞增殖周期加快，細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放進(jìn)入血液增多，導(dǎo)致此酶在血清內(nèi)含量增高。

⑵神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）164參考值：血清NSE<15μg/L。參考值：血清NSE<15μg/L。165血清NSE升高見于①小細(xì)胞肺癌（SCLC）?？捎糜阼b別診斷，監(jiān)測(cè)小細(xì)胞肺癌放療、化療后的治療效果。②神經(jīng)母細(xì)胞瘤，患者NSE水平異常增高，而Wilms瘤則升高不明顯，因此測(cè)定NSE的水平可用于上述疾病的診斷和鑒別診斷。血清NSE升高見于166③神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤，如嗜鉻細(xì)胞瘤，胰島細(xì)胞瘤，甲狀腺髓樣癌，黑色素瘤，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤等血清NSE也可增高?！咀⒁馐马?xiàng)】NSE也存在于正常紅細(xì)胞中，標(biāo)本溶血會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，因此采血時(shí)要特別注意避免溶血。③神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤，如嗜鉻細(xì)胞瘤，胰島細(xì)胞瘤，甲狀腺髓樣167⑶α-L-巖藻糖苷酶測(cè)定（AFU）AFU是一種溶酶體酸性水解酶，以往主要用于遺傳性AFU缺乏引起的巖藻糖貯積病的診斷。Deugnier等（1984）首先發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌患者血清中AFU活性升高。參考值：血清<420μmol/L⑶α-L-巖藻糖苷酶測(cè)定（AFU）AFU是一種溶酶體酸性水168①原發(fā)性肝癌，患者血清中AFU活性明顯升高，AFP陰性的肝癌患者中AFU也可見升高，因此，兩者聯(lián)合檢測(cè)有較好的互補(bǔ)作用。②其他惡性腫瘤，如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮癌等也可有部分病例升高。①原發(fā)性肝癌，患者血清中AFU活性明顯升高，AFP陰性的肝癌169③慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AFU下降，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)有助于與肝癌的鑒別。④妊娠期間，AFU升高，分娩后迅速下降。③慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AF1704.激素類腫瘤標(biāo)志物⑴人絨毛膜促性腺激素(hCG)hCG是胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白類激素，是監(jiān)測(cè)早孕的重要指標(biāo)。在異常情況下，惡性腫瘤也可產(chǎn)生hCG。參考值上限為:5IU/L。4.激素類腫瘤標(biāo)志物⑴人絨毛膜促性腺激素(hCG)171①滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤hCG升高，如絨毛膜細(xì)胞癌、葡萄胎、精原細(xì)胞睪丸癌等。

②其他腫瘤如乳腺癌、胃腸道癌、肺癌等也可見升高。

③良性疾病如卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化等hCG也可見增高。①滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤hCG升高，如絨毛膜細(xì)胞癌、葡萄172⑵降鈣素（calcitonin,CT）CT是由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞即C細(xì)胞分泌的多肽激素，主要生理作用是降低血鈣。參考值＜100ng/L。⑵降鈣素（calcitonin,CT）CT是由甲狀腺濾泡173①甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高，其他腫瘤如肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也見增高。②腎功能衰竭患者降鈣素常升高。①甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高，其他腫瘤如肺癌、乳腺癌、胰腺174【注意事項(xiàng)】由于降鈣素在血液中的半壽期短約為10min，樣本收集后應(yīng)及時(shí)處理，冷凍保存?！咀⒁馐马?xiàng)】由于降鈣素在血液中的半壽期短約為10min，樣本1755.蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物(1)β2-微球蛋白(β2M)β2M是一種低分子蛋白，人體除成熟紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞以外，所有的有核細(xì)胞都有β2M。因?yàn)棣?M分子量小，易于由腎小球?yàn)V過，但幾乎全部由近曲小管重吸收，因此正常人血和尿中β2M含量很低。參考值：血清<2.4mg/L；尿<320μg/L。5.蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物(1)β2-微球蛋白(β2M)176β2M升高見于:①惡性腫瘤，慢性淋巴細(xì)胞白血病等。②腎臟疾?。杭甭阅I盂腎炎，腎小管藥物性損害等。③腎移植排斥反應(yīng)時(shí)。④免疫性疾?。合到y(tǒng)性紅斑性狼瘡，艾滋病等。β2M升高見于:177【注意事項(xiàng)】尿標(biāo)本采集后，為避免β2M分解，應(yīng)加適當(dāng)?shù)腘aOH緩沖液調(diào)PH至7.0左右，然后置4℃保存，2天內(nèi)測(cè)定?！咀⒁馐马?xiàng)】尿標(biāo)本采集后，為避免β2M分解，應(yīng)加適當(dāng)?shù)腘a178

鐵蛋白是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。Fer升高還與腫瘤有關(guān)，癌細(xì)胞具有較強(qiáng)合成鐵蛋白的能力，因此也是一種腫瘤標(biāo)志物。血清參考值：男性15~200μg/L。女性12~150μg/L。⑵鐵蛋白（ferritin,Fer)

鐵蛋白是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。Fer升高還與179①各種惡性腫瘤和白血病可見血清鐵蛋白升高。②各種炎癥感染、急性心肌梗死、反復(fù)輸血等，見鐵蛋白升高。③鐵蛋白<12μg/L時(shí)即可診斷為缺鐵。是診斷隱性缺鐵性貧血的可