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關(guān)于抗體和免疫球蛋白第一頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日
第一節(jié)免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)和功能一、免疫球蛋白基本結(jié)構(gòu)二、免疫球蛋白的其他成分三、免疫球蛋白的水解片段四、免疫球蛋白的功能第二頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日輕鏈重鏈一免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)四條鏈對(duì)稱結(jié)構(gòu)810第三頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)--四肽鏈對(duì)稱結(jié)構(gòu)(一)重鏈和輕鏈重鏈(heavychain)簡(jiǎn)稱H鏈由440個(gè)氨基酸組成,分子量約55-75KD。
H鏈含有少量糖類,所以Ig屬于糖蛋白。根據(jù)H鏈的抗原性不同,可將免疫球蛋白(Ig)
分為五類。第四頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日五類免疫球蛋白:IgG的H鏈:γ鏈(gamma)IgA的H鏈:α鏈(alpha)IgM的H鏈:μ鏈(mu)IgD的H鏈:δ鏈(delta)IgE的H鏈:ε鏈(epsilon)第五頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(一)重鏈和輕鏈
輕鏈(lightchain)簡(jiǎn)稱L鏈
由214個(gè)氨基酸組成,分子量約25KD
根據(jù)L鏈的抗原性不同,把L鏈分成二型:κ型,λ型同一個(gè)Ig分子上H鏈同類,L鏈同型,把
Ig分子分成五類十型第六頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(二)、可變區(qū)和恒定區(qū)可變區(qū)(variableregion)簡(jiǎn)稱V區(qū),位于L鏈靠近N端的1/2和H鏈的1/4,這個(gè)區(qū)段的氨基酸組成及排列順序是可以變化的。高變區(qū)(hypervariableregion)簡(jiǎn)稱HVR,是V區(qū)中氨基酸的組成和排列順序變化頻率更高的區(qū)域,也是抗體與抗原決定簇結(jié)合的部位,又稱為決定簇互補(bǔ)區(qū)(CDR),又是Ig分子獨(dú)特型決定簇主要存在的部位。骨架區(qū)(frameworkregion,Fr):V區(qū)以外的部位,穩(wěn)定HVR的結(jié)構(gòu)。第七頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第八頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(二)、可變區(qū)和恒定區(qū)恒定區(qū)(Constantregion)簡(jiǎn)稱C區(qū),位于L鏈靠近C端的1/2和H鏈靠近C端的3/4區(qū)域,這一區(qū)域的氨基酸組成和排列順序比較穩(wěn)定,所以叫恒定區(qū),H鏈和L鏈的恒定區(qū)分別稱為CH和CL。第九頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(三)、功能區(qū)Ig分子的H鏈和L鏈可通過(guò)鏈內(nèi)二硫鍵折疊成若干個(gè)球形結(jié)構(gòu),每一個(gè)球形結(jié)構(gòu)由110個(gè)氨基酸組成,具有一定的生理功能,稱為功能區(qū)。
L鏈功能區(qū):VL、CLH鏈功能區(qū):VH、CH1、CH2、CH3第十頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日免疫球蛋白的功能區(qū)第十一頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(三)、功能區(qū)的作用VH和VL共同構(gòu)成抗原結(jié)合的部位。CL和CH1為同種異型遺傳標(biāo)志所在的部位。IgG的CH2和IgM的CH3區(qū)是補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)所在的部位,參與活化補(bǔ)體。IgG的CH3和IgE的CH2、CH3區(qū)能與組織細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合。第十二頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(四)、鉸鏈區(qū)位于CH1和CH2之間含有較多的脯氨酸,具有彈性,可以自由展開(kāi)180度,抗體分子變構(gòu)的特性可使V區(qū)合攏或張開(kāi),適合與抗原結(jié)合;暴露補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn),為補(bǔ)體活化創(chuàng)造條件。對(duì)蛋白酶敏感,經(jīng)蛋白酶處理,多在此區(qū)被切斷。
第十三頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日二、免疫球蛋白的其他成分連接鏈(joiningchain),簡(jiǎn)稱J鏈,由漿細(xì)胞合成,連接5個(gè)單體IgM成五聚體,2個(gè)IgA成雙聚體,故J鏈起穩(wěn)定多聚體的作用。分泌片(secretorypiece),簡(jiǎn)稱SP,由上皮細(xì)胞合成,和分泌型IgA連接,使之不受環(huán)境中酶的破壞。第十四頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日二、免疫球蛋白的其他成分第十五頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日三、免疫球蛋白的水解片斷NN2第十六頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日三、免疫球蛋白的水解片段
1.經(jīng)木瓜蛋白酶水解IgG,得到3個(gè)片段,2個(gè)相同的Fab段和1個(gè)Fc段Fab段—抗原結(jié)合片段(fragmentantigenbinding),每個(gè)Fab段由一條完整的L鏈和一條約1/2的H鏈組成,具有抗體活性,能和一個(gè)抗原結(jié)合表現(xiàn)為單價(jià)。Fc段—可結(jié)晶片段(fragmentcrystallizable)由二條羧基端1/2H鏈組成,不能和抗原結(jié)合,但有Ig的其他活性。2.經(jīng)胃蛋白酶水解IgG,得到2個(gè)片段,F(xiàn)(ab,)2—具有雙價(jià)抗體活性片段pFc’——小分子多肽碎片,無(wú)任何生物活性第十七頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第二節(jié)抗體的異質(zhì)性一、免疫球蛋白的類別:類:根據(jù)Ig重鏈的抗原性不同把人血清中的Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類。亞類:同一類Ig由于鉸鏈區(qū)的氨基酸組成和二硫鍵數(shù)目不同分為不同亞類IgG有IgG1、IgG2、IgG3和IgG4亞類,IgA有IgA1、IgA2亞類。型:
根據(jù)L鏈恒定區(qū)的抗原性不同,把L鏈分成二型:κ型,λ型。亞型:根據(jù)λ鏈恒定區(qū)個(gè)別氨基酸不同分為亞型,λ1、λ2、λ3、λ4第十八頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日二、免疫球蛋白的抗原性
Ig分子上主要存在3種抗原決定簇:同種型決定簇同種異型決定簇獨(dú)特型決定簇第十九頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(一)、同種型同種型:是指同一種屬所有個(gè)體Ig分子所共有的抗原特異性。同種型因種而異。同種型的抗原決定簇存在Ig的恒定區(qū)。表現(xiàn)在全部Ig的類、亞類、型、亞型的分子上。第二十頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(二)、同種異型同種異型:是指同一種屬不同個(gè)體間Ig分子所具有的不同抗原特異性。同種異型決定簇存在Ig的恒定區(qū)。由個(gè)體遺傳基因所決定的,故稱為遺傳標(biāo)記。
1、IgG1、IgG2、IgG3的遺傳標(biāo)記稱Gm,分別稱G1m,G2m,G3m。
2、IgA2的遺傳標(biāo)記稱Am,分別稱A2m1、A2m2。
3、κ鏈的遺傳標(biāo)記稱Km,分別稱Km1、Km2、Km2第二十一頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日(三)、獨(dú)特型獨(dú)特型:是指在同一個(gè)體內(nèi),不同抗體形成細(xì)胞可隆所產(chǎn)生的Ig分子的V區(qū)具有不同的抗原特異性。獨(dú)特型抗原決定簇存在Ig的V區(qū),不同特異性的抗體其獨(dú)特型也不同除血清中的Ig外,淋巴細(xì)胞(T、B細(xì)胞)表面的抗原受體也具有獨(dú)特型決定簇。第二十二頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第四節(jié)五類免疫球蛋白的特性與功能
一、IgG
二、IgM
三、IgA
四、IgD
五、IgE第二十三頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日
第五節(jié)免疫球蛋白的功能一、特異性結(jié)合抗原二、活化補(bǔ)體三、通過(guò)胎盤四、與組織細(xì)胞表面Fc受體結(jié)合
1.介導(dǎo)I型變態(tài)反應(yīng)
2.調(diào)理吞噬作用
3.發(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用
(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity)
簡(jiǎn)稱ADCC作用第二十四頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第二十五頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日第六節(jié)抗體的制備一、多克隆抗體(Polyclonalantibody)
用傳統(tǒng)的抗體制備方法,將抗原物質(zhì)注入動(dòng)物體內(nèi)獲得的免疫血清,是機(jī)體多個(gè)B細(xì)胞克隆針對(duì)抗原分子上的不同抗原決定簇產(chǎn)生的混合抗體,這種用體內(nèi)免疫法制備的免疫血清稱為多克隆抗體.第二十六頁(yè),共二十八頁(yè),2022年,8月28日
二、單克隆抗體(monoclonal
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