第六章-基因表達(dá)調(diào)控課件

本章主要內(nèi)容基本概念與原理原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控真核生物基因表達(dá)調(diào)控本章主要內(nèi)容第一節(jié)基因表達(dá)調(diào)控基本概念與原理

一、基因表達(dá)的概念二、基因表達(dá)的特異性三、基因表達(dá)的方式四、基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義五、基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)的基本要素

第一節(jié)基因表達(dá)調(diào)控基本概念與原理一、基因表達(dá)的概念

基因表達(dá)

是指生物體基因組種結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄及翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定生物學(xué)功能的全過程。

基因表達(dá)產(chǎn)物各種RNA(tRNA、mRNA和rRNA)以及蛋白質(zhì)、多肽。一、基因表達(dá)的概念二、基因表達(dá)的特異性

（一）時(shí)間特異性往往與細(xì)胞或個(gè)體的特定分化、發(fā)育階段相適應(yīng)，又稱階段特異性。（二）空間特異性由細(xì)胞在各組織器官的分布差異所決定的，故又稱為細(xì)胞特異性或組織特異性。二、基因表達(dá)的特異性5時(shí)間特異性(temporalspecificity)

某一基因的表達(dá)嚴(yán)格按特定的時(shí)間順序發(fā)生。

Hb(hemoglobin)α珠蛋白基因簇：ζ（胚胎型）、αβ珠蛋白基因簇：ε（胚胎型）、γ（胎兒型）、β、δζ2ε2→α2γ2→α2β25時(shí)間特異性(temporalspecificity)三、基因表達(dá)的方式

（一）組成性表達(dá)管家基因

在生命全過程都是必需的、且在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因。組成性基因表達(dá)

管家基因較少受環(huán)境因素的影響，在個(gè)體發(fā)育的任一階段都能在大多數(shù)細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)。三、基因表達(dá)的方式（一）組成性表達(dá)（二）誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)誘導(dǎo)表達(dá)

在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，基因表現(xiàn)為開放或增強(qiáng)，表達(dá)產(chǎn)物增加。阻遏表達(dá)在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，基因被抑制，從而使表達(dá)產(chǎn)物減少。（二）誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)（三）協(xié)調(diào)表達(dá)協(xié)調(diào)表達(dá)

在一定機(jī)制控制下，功能相關(guān)的一組基因，協(xié)調(diào)一致，共同表達(dá)。（三）協(xié)調(diào)表達(dá)四、基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義（一）適應(yīng)環(huán)境變化、維持細(xì)胞增殖、分化（二）維持個(gè)體生長(zhǎng)、發(fā)育

四、基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義（一）適應(yīng)環(huán)境變化、維持細(xì)胞增殖五、基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素

（一）特異DNA序列（二）調(diào)節(jié)蛋白（三）RNA聚合酶五、基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素

原核生物的特異DNA序列

原核生物的基因表達(dá)與調(diào)控是通過操縱子機(jī)制實(shí)現(xiàn)的。

操縱子

是由功能上相關(guān)聯(lián)的多個(gè)編碼序列（2個(gè)以上）及其上游的調(diào)控序列（包括操縱序列、啟動(dòng)序列和調(diào)節(jié)序列）等成簇串聯(lián)在一起，構(gòu)成的一個(gè)轉(zhuǎn)錄協(xié)調(diào)單位。

（一）特異DNA序列原核生物的特異DNA序列（一）特異DNA序列

操縱子調(diào)節(jié)序列啟動(dòng)序列操縱序列編碼序列表達(dá)轉(zhuǎn)錄ICAPPOZYA阻遏蛋白結(jié)合部位RNA聚合酶結(jié)合部位

編碼序列

規(guī)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，又稱結(jié)構(gòu)基因；多順反子mRNA

由多個(gè)結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，受同一個(gè)啟動(dòng)序列調(diào)控，轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA,翻譯生成多個(gè)蛋白質(zhì),稱此為多順反子mRNA.多順反子mRNA阻遏蛋白

原核生物的共有序列

原核生物的啟動(dòng)序列，在距離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)－10區(qū)和－35區(qū)往往含有一些重要的保守序列（共有序列）。

－10區(qū)：含TATAAT序列，又稱Pribnow盒。

－35區(qū)：含TTGACA序列。RNA聚合酶結(jié)合部位決定轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)

真核生物的特異DNA序列

真核生物基因組中含有可以調(diào)控自身基因表達(dá)活性的特異DNA序列，稱為順式作用元件。

順式作用元件能夠被轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白特異識(shí)別和結(jié)合，從而影響基因表達(dá)活性。

啟動(dòng)子

順式作用元件又分增強(qiáng)子

沉默子真核生物的特異DNA序列

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)及其周圍的一組轉(zhuǎn)錄調(diào)控組件（包括轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)以及典型的TATA盒）。

（2）增強(qiáng)子是增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的DNA序列，并決定組織特異性表達(dá)。

（3）沉默子能夠?qū)蜣D(zhuǎn)錄起阻遏作用的DNA片段，屬于負(fù)性調(diào)控元件。

（1）啟動(dòng)子第六章-基因表達(dá)調(diào)控課件（二）調(diào)節(jié)蛋白原核生物的調(diào)節(jié)蛋白（3類）特異因子

決定RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)序列的特異識(shí)別和結(jié)合能力；

(RNA聚合酶的－因子)阻遏蛋白

通過與操縱序列結(jié)合，阻遏基因轉(zhuǎn)錄；（由調(diào)節(jié)基因表達(dá)的阻遏蛋白）激活蛋白

與啟動(dòng)子上游DNA序列結(jié)合，促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)序列結(jié)合，促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄。（CAP—分解代謝物基因活化蛋白）（二）調(diào)節(jié)蛋白原核生物的調(diào)節(jié)蛋白（3類）

2.真核生物的調(diào)節(jié)蛋白

反式作用因子

能直接或間接與順式作用元件相互作用，進(jìn)而調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)節(jié)蛋白，統(tǒng)稱為反式作用因子。

按其功能不同，常有以下三類：

（基本）轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子：DNA-蛋白質(zhì)共調(diào)節(jié)因子：蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)2.真核生物的調(diào)節(jié)蛋白第六章-基因表達(dá)調(diào)控課件（1）基本轉(zhuǎn)錄因子

是指能夠直接或間接與啟動(dòng)子核心序列TATA盒特異結(jié)合、并啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)節(jié)蛋白。（參與構(gòu)成基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄裝置所需的一類通用轉(zhuǎn)錄因子）

真核生物RNA聚合酶Ⅱ（RNApolⅡ）識(shí)別啟動(dòng)子所需的轉(zhuǎn)錄因子（TFⅡ）有多種亞類：

TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF，TFⅡ-I等。

其中TFⅡD最先、最直接與啟動(dòng)子TATA盒結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，然后按一定時(shí)空順序依次結(jié)合RNApolⅡ和其他轉(zhuǎn)錄因子，形成一個(gè)轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物（PIC）。（1）基本轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的組裝（PIC)轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物（PIC）轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的組裝（PIC)轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物（PIC）(2)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

這類調(diào)經(jīng)蛋白能識(shí)別并結(jié)合轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游激活序列和遠(yuǎn)端的增強(qiáng)子元件，通過DNA－蛋白質(zhì)相互作用而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性。

起激活轉(zhuǎn)錄作用——轉(zhuǎn)錄激活因子；阻遏轉(zhuǎn)錄作用——轉(zhuǎn)錄阻遏因子。（3）共調(diào)節(jié)因子

首先與轉(zhuǎn)錄因子或轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子發(fā)生蛋白－蛋白相互作用，進(jìn)而影響它們的分子構(gòu)象，以調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性。

如果與轉(zhuǎn)錄激活因子有協(xié)同作用——共激活因子；與轉(zhuǎn)錄阻遏因子有協(xié)同作用——共阻遏因子。(2)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

反式作用因子的特殊功能域

DNA結(jié)合域；轉(zhuǎn)錄激活域；結(jié)合其他蛋白質(zhì)的功能域。

鋅指結(jié)構(gòu)

亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)反式作用因子的特殊功能域鋅

(三)RNA聚合酶

1.啟動(dòng)子與RNA聚合酶活性啟動(dòng)子核苷酸序列影響與RNA聚合酶的親和力。

2.調(diào)節(jié)蛋白與RNA聚合酶的活性調(diào)節(jié)蛋白通過DNA-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用影響RNA酶活性。(三)RNA聚合酶六、基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控

基因結(jié)構(gòu)活化轉(zhuǎn)錄水平

轉(zhuǎn)錄起始

轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄后水平

轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的轉(zhuǎn)運(yùn)

翻譯調(diào)控翻譯水平

翻譯后加工六、基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控基因結(jié)構(gòu)活化

第二節(jié)原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控一、乳糖操縱子調(diào)節(jié)機(jī)制控制區(qū)信息區(qū)結(jié)構(gòu)基因(S)操縱序列（O）啟動(dòng)序列（P）調(diào)節(jié)基因（I）CPA第二節(jié)原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控控制區(qū)信息區(qū)結(jié)構(gòu)基因(

乳糖操縱子結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)物乳糖操縱子結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)物（一）阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)作用I阻遏蛋白

無乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因受阻遏（一）阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)作用I阻遏蛋白無乳糖存在

有乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因表達(dá)有乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因表達(dá)2CAPCAP位點(diǎn)-G,-Lac

阻遏蛋白

操縱序列-G,+LacRNA聚合酶無葡萄糖，無乳糖②無葡萄糖，有乳糖③有葡萄糖，無乳糖④有葡萄糖，有乳糖

啟動(dòng)序列cAMPmRNA5'（二）CAP的正性調(diào)節(jié)作用③①

＋G,-Lac+G,+Lac②④2CAPCAP位點(diǎn)-G,-Lac阻遏蛋白操縱當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度降低而葡萄糖濃度升高時(shí)

細(xì)胞中cAMP濃度降低

缺乏乳糖與阻遏蛋白結(jié)合

CAP失活

阻抑蛋白與操縱基因結(jié)合

CAP及RNA聚合酶不能與啟動(dòng)基因結(jié)合

基因轉(zhuǎn)錄被阻遏

阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度降低而葡萄糖濃度升高時(shí)

當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度升高而葡萄糖濃度降低時(shí)

細(xì)胞中cAMP濃度升高

乳糖作為誘導(dǎo)劑與阻抑蛋白結(jié)合

cAMP與CRP結(jié)合并使之激合

促使阻抑蛋白與操縱基因分離

CRP與啟動(dòng)基因結(jié)合并促使RNA聚合酶與啟動(dòng)基因結(jié)合

基因轉(zhuǎn)錄激活

CAP的正性調(diào)節(jié)當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度升高而葡萄糖濃度降低時(shí)二、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制

色氨酸操縱子（trpoperon）：阻遏型操縱子；主要參與調(diào)控一系列用于色氨酸合成代謝的酶蛋白的轉(zhuǎn)錄合成。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)缺乏色氨酸時(shí)，此操縱子開放；而當(dāng)細(xì)胞內(nèi)合成的色氨酸過多時(shí)，此操縱子被關(guān)閉。

二、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制色氨酸操縱子（trpoperoO阻遏蛋白（無活性）mRNAtrpRPtrpEtrpDtrpCtrpBtrpA前導(dǎo)trpL衰減子

結(jié)構(gòu)基因

調(diào)控區(qū)二、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制

色氨酸合成的酶蛋白O阻遏蛋白mRNAtrpRPtrpEtrpDtrpCtO阻遏蛋白mRNATrp

trpRPtrpEtrpDtrpCtrpBtrpA前導(dǎo)序列（L）衰減子（結(jié)構(gòu)基因關(guān)閉）調(diào)節(jié)區(qū)

在高濃度色氨酸存在下，通過形成特殊的“衰減子”結(jié)構(gòu)，對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行更精細(xì)的調(diào)控。

色氨酸的負(fù)性調(diào)控作用

有活性O(shè)阻遏蛋白mRNATrptrpRPtrpEtrpDtTrp操縱子的trpE基因5′－端“前導(dǎo)序列”

衰減子結(jié)構(gòu)10、11Trp操縱子的trpE基因5′－端“前導(dǎo)序列”衰減子1前導(dǎo)肽核蛋白體衰減子結(jié)構(gòu)RNA聚合酶5'mRNATrp密碼子1234UUUU3'DNADNA前導(dǎo)肽5'1234Trp結(jié)構(gòu)基因MKAIFVLKGMKAIFVLKGWWRTSRNA聚合酶Trp操縱子的轉(zhuǎn)錄衰減機(jī)制前導(dǎo)肽核蛋白體衰減子結(jié)構(gòu)RNA聚合酶5'mRNATrp密碼子三、原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)

主要在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)節(jié)1）σ因子的特異啟動(dòng)作用

2）操縱子調(diào)控機(jī)制具有普遍性3）結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行多順反子轉(zhuǎn)錄4）阻遏蛋白阻遏轉(zhuǎn)錄具有普遍性三、原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)第三節(jié)真核生物基因表達(dá)調(diào)控

一、真核生物基因組特點(diǎn)

（一）基因組結(jié)構(gòu)龐大

人類的單倍體基因組由3X109的核苷酸組成，含有大約2.63.9萬個(gè)基因。（二）形成染色體結(jié)構(gòu)真核生物的基因組是以DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體結(jié)構(gòu)形式而存在于細(xì)胞核。第三節(jié)真核生物基因表達(dá)調(diào)控

一、真核生物基因組特點(diǎn)（（三）單順反子真核基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物一般是單順反子。單順反子

一個(gè)編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA分子，并指導(dǎo)翻譯一條多肽鏈。（四）重復(fù)序列

真核生物基因普遍存在重復(fù)序列。根據(jù)重復(fù)頻率不同，分為以下3類：

高度重復(fù)序列中度重復(fù)序列單拷貝重復(fù)序列反向重復(fù)序列（回文序列）（三）單順反子1.高度重復(fù)序列

重復(fù)數(shù)百萬次，序列簡(jiǎn)單序列，不到10bp;稱為衛(wèi)星DNA；2.中度重復(fù)序列重復(fù)上千次，序列由幾百個(gè)bp構(gòu)成；3.單拷貝序列只出現(xiàn)1次或幾次。真核生物極大多數(shù)為單一基因；反向重復(fù)序列是指在DNA鏈某些區(qū)域，出現(xiàn)反向排列的堿基序列。如：

“－－－CGTACC---/---CCATGC---”,又稱“回文結(jié)構(gòu)”。1.高度重復(fù)序列（五）斷裂基因

外顯子具有實(shí)際編碼意義的結(jié)構(gòu)基因序列；內(nèi)含子不具有編碼意義的堿基序列，又稱插入序列。（六）大多數(shù)為非編碼區(qū)（95％左右）（五）斷裂基因外顯子（一）DNA、染色體水平的變化特點(diǎn)二、真核基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)

1．對(duì)核酸酶極度敏感（一）DNA、染色體水平的變化特點(diǎn)二、真核基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)2．DNA拓樸結(jié)構(gòu)變化

天然雙鏈DNA幾乎均以負(fù)性超螺旋構(gòu)象存在。當(dāng)基因激活后，則轉(zhuǎn)錄區(qū)前方的DNA拓樸結(jié)構(gòu)變?yōu)檎猿菪?，有利于RNA聚合酶向前移動(dòng)，進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。3.DNA甲基化

DNA甲基化程度與基因表達(dá)呈反比。4．染色體結(jié)構(gòu)的變化組蛋白發(fā)生修飾，堿基暴露等原因而引起核小體結(jié)構(gòu)改變，使核小體不穩(wěn)定性增加。2．DNA拓樸結(jié)構(gòu)變化（二）RNA聚合酶、mRNA的轉(zhuǎn)錄激活及調(diào)節(jié)

真核生物有3種RNA聚合酶：RNApolⅠ、Ⅱ、Ⅲ。每種RNA聚合酶有約10個(gè)亞基組成，其中TATA盒結(jié)合蛋白（TBP）為3種酶共有。

RNApolⅡ?qū)Υ呋痬RNA的生成起主要作用。轉(zhuǎn)錄前RNApolⅡ必須與TBP、TFⅡD等各種通用轉(zhuǎn)錄因子形成轉(zhuǎn)錄前復(fù)合體（PIC），從而激活或抑制RNA的轉(zhuǎn)錄。（二）RNA聚合酶、mRNA的轉(zhuǎn)錄激活及調(diào)節(jié)聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的組裝聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的組裝聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體的組裝聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體的組裝（三）正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo)

真核基因一般都處于阻遏狀態(tài)，RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子的親和力很低。通過利用各種轉(zhuǎn)錄因子正性激活RNA聚合酶是真核基因調(diào)控的主要機(jī)制。采用正性調(diào)節(jié)機(jī)制更有效、經(jīng)濟(jì)、特異；采用負(fù)性調(diào)節(jié)不經(jīng)濟(jì)（四）轉(zhuǎn)錄和翻譯過程分開進(jìn)行轉(zhuǎn)錄與翻譯過程分別存在于不同的亞細(xì)胞部位（胞核與胞漿），可分別進(jìn)行調(diào)控。（三）正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo)（五）轉(zhuǎn)錄后加工真核基因大多為斷裂基因，內(nèi)含子和外顯子一起被轉(zhuǎn)錄。轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)物（hnRNA）經(jīng)剪接、加帽、加尾等加工修飾，才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓膍RNA.（五）轉(zhuǎn)錄后加工

本章主要內(nèi)容基本概念與原理原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控真核生物基因表達(dá)調(diào)控本章主要內(nèi)容第一節(jié)基因表達(dá)調(diào)控基本概念與原理

一、基因表達(dá)的概念二、基因表達(dá)的特異性三、基因表達(dá)的方式四、基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義五、基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)的基本要素

第一節(jié)基因表達(dá)調(diào)控基本概念與原理一、基因表達(dá)的概念

基因表達(dá)

是指生物體基因組種結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄及翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定生物學(xué)功能的全過程。

基因表達(dá)產(chǎn)物各種RNA(tRNA、mRNA和rRNA)以及蛋白質(zhì)、多肽。一、基因表達(dá)的概念二、基因表達(dá)的特異性

（一）時(shí)間特異性往往與細(xì)胞或個(gè)體的特定分化、發(fā)育階段相適應(yīng)，又稱階段特異性。（二）空間特異性由細(xì)胞在各組織器官的分布差異所決定的，故又稱為細(xì)胞特異性或組織特異性。二、基因表達(dá)的特異性54時(shí)間特異性(temporalspecificity)

某一基因的表達(dá)嚴(yán)格按特定的時(shí)間順序發(fā)生。

Hb(hemoglobin)α珠蛋白基因簇：ζ（胚胎型）、αβ珠蛋白基因簇：ε（胚胎型）、γ（胎兒型）、β、δζ2ε2→α2γ2→α2β25時(shí)間特異性(temporalspecificity)三、基因表達(dá)的方式

（一）組成性表達(dá)管家基因

在生命全過程都是必需的、且在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因。組成性基因表達(dá)

管家基因較少受環(huán)境因素的影響，在個(gè)體發(fā)育的任一階段都能在大多數(shù)細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)。三、基因表達(dá)的方式（一）組成性表達(dá)（二）誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)誘導(dǎo)表達(dá)

在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，基因表現(xiàn)為開放或增強(qiáng)，表達(dá)產(chǎn)物增加。阻遏表達(dá)在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，基因被抑制，從而使表達(dá)產(chǎn)物減少。（二）誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)（三）協(xié)調(diào)表達(dá)協(xié)調(diào)表達(dá)

在一定機(jī)制控制下，功能相關(guān)的一組基因，協(xié)調(diào)一致，共同表達(dá)。（三）協(xié)調(diào)表達(dá)四、基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義（一）適應(yīng)環(huán)境變化、維持細(xì)胞增殖、分化（二）維持個(gè)體生長(zhǎng)、發(fā)育

四、基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義（一）適應(yīng)環(huán)境變化、維持細(xì)胞增殖五、基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素

（一）特異DNA序列（二）調(diào)節(jié)蛋白（三）RNA聚合酶五、基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)基本要素

原核生物的特異DNA序列

原核生物的基因表達(dá)與調(diào)控是通過操縱子機(jī)制實(shí)現(xiàn)的。

操縱子

是由功能上相關(guān)聯(lián)的多個(gè)編碼序列（2個(gè)以上）及其上游的調(diào)控序列（包括操縱序列、啟動(dòng)序列和調(diào)節(jié)序列）等成簇串聯(lián)在一起，構(gòu)成的一個(gè)轉(zhuǎn)錄協(xié)調(diào)單位。

（一）特異DNA序列原核生物的特異DNA序列（一）特異DNA序列

操縱子調(diào)節(jié)序列啟動(dòng)序列操縱序列編碼序列表達(dá)轉(zhuǎn)錄ICAPPOZYA阻遏蛋白結(jié)合部位RNA聚合酶結(jié)合部位

編碼序列

規(guī)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，又稱結(jié)構(gòu)基因；多順反子mRNA

由多個(gè)結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，受同一個(gè)啟動(dòng)序列調(diào)控，轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA,翻譯生成多個(gè)蛋白質(zhì),稱此為多順反子mRNA.多順反子mRNA阻遏蛋白

原核生物的共有序列

原核生物的啟動(dòng)序列，在距離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)－10區(qū)和－35區(qū)往往含有一些重要的保守序列（共有序列）。

－10區(qū)：含TATAAT序列，又稱Pribnow盒。

－35區(qū)：含TTGACA序列。RNA聚合酶結(jié)合部位決定轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)

真核生物的特異DNA序列

真核生物基因組中含有可以調(diào)控自身基因表達(dá)活性的特異DNA序列，稱為順式作用元件。

順式作用元件能夠被轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白特異識(shí)別和結(jié)合，從而影響基因表達(dá)活性。

啟動(dòng)子

順式作用元件又分增強(qiáng)子

沉默子真核生物的特異DNA序列

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)及其周圍的一組轉(zhuǎn)錄調(diào)控組件（包括轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)以及典型的TATA盒）。

（2）增強(qiáng)子是增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的DNA序列，并決定組織特異性表達(dá)。

（3）沉默子能夠?qū)蜣D(zhuǎn)錄起阻遏作用的DNA片段，屬于負(fù)性調(diào)控元件。

（1）啟動(dòng)子第六章-基因表達(dá)調(diào)控課件（二）調(diào)節(jié)蛋白原核生物的調(diào)節(jié)蛋白（3類）特異因子

決定RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)序列的特異識(shí)別和結(jié)合能力；

(RNA聚合酶的－因子)阻遏蛋白

通過與操縱序列結(jié)合，阻遏基因轉(zhuǎn)錄；（由調(diào)節(jié)基因表達(dá)的阻遏蛋白）激活蛋白

與啟動(dòng)子上游DNA序列結(jié)合，促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)序列結(jié)合，促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄。（CAP—分解代謝物基因活化蛋白）（二）調(diào)節(jié)蛋白原核生物的調(diào)節(jié)蛋白（3類）

2.真核生物的調(diào)節(jié)蛋白

反式作用因子

能直接或間接與順式作用元件相互作用，進(jìn)而調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)節(jié)蛋白，統(tǒng)稱為反式作用因子。

按其功能不同，常有以下三類：

（基本）轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子：DNA-蛋白質(zhì)共調(diào)節(jié)因子：蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)2.真核生物的調(diào)節(jié)蛋白第六章-基因表達(dá)調(diào)控課件（1）基本轉(zhuǎn)錄因子

是指能夠直接或間接與啟動(dòng)子核心序列TATA盒特異結(jié)合、并啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)節(jié)蛋白。（參與構(gòu)成基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄裝置所需的一類通用轉(zhuǎn)錄因子）

真核生物RNA聚合酶Ⅱ（RNApolⅡ）識(shí)別啟動(dòng)子所需的轉(zhuǎn)錄因子（TFⅡ）有多種亞類：

TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF，TFⅡ-I等。

其中TFⅡD最先、最直接與啟動(dòng)子TATA盒結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，然后按一定時(shí)空順序依次結(jié)合RNApolⅡ和其他轉(zhuǎn)錄因子，形成一個(gè)轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物（PIC）。（1）基本轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的組裝（PIC)轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物（PIC）轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的組裝（PIC)轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物（PIC）(2)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

這類調(diào)經(jīng)蛋白能識(shí)別并結(jié)合轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游激活序列和遠(yuǎn)端的增強(qiáng)子元件，通過DNA－蛋白質(zhì)相互作用而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性。

起激活轉(zhuǎn)錄作用——轉(zhuǎn)錄激活因子；阻遏轉(zhuǎn)錄作用——轉(zhuǎn)錄阻遏因子。（3）共調(diào)節(jié)因子

首先與轉(zhuǎn)錄因子或轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子發(fā)生蛋白－蛋白相互作用，進(jìn)而影響它們的分子構(gòu)象，以調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性。

如果與轉(zhuǎn)錄激活因子有協(xié)同作用——共激活因子；與轉(zhuǎn)錄阻遏因子有協(xié)同作用——共阻遏因子。(2)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

反式作用因子的特殊功能域

DNA結(jié)合域；轉(zhuǎn)錄激活域；結(jié)合其他蛋白質(zhì)的功能域。

鋅指結(jié)構(gòu)

亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)反式作用因子的特殊功能域鋅

(三)RNA聚合酶

1.啟動(dòng)子與RNA聚合酶活性啟動(dòng)子核苷酸序列影響與RNA聚合酶的親和力。

2.調(diào)節(jié)蛋白與RNA聚合酶的活性調(diào)節(jié)蛋白通過DNA-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用影響RNA酶活性。(三)RNA聚合酶六、基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控

基因結(jié)構(gòu)活化轉(zhuǎn)錄水平

轉(zhuǎn)錄起始

轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄后水平

轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的轉(zhuǎn)運(yùn)

翻譯調(diào)控翻譯水平

翻譯后加工六、基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控基因結(jié)構(gòu)活化

第二節(jié)原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控一、乳糖操縱子調(diào)節(jié)機(jī)制控制區(qū)信息區(qū)結(jié)構(gòu)基因(S)操縱序列（O）啟動(dòng)序列（P）調(diào)節(jié)基因（I）CPA第二節(jié)原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控控制區(qū)信息區(qū)結(jié)構(gòu)基因(

乳糖操縱子結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)物乳糖操縱子結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)物（一）阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)作用I阻遏蛋白

無乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因受阻遏（一）阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)作用I阻遏蛋白無乳糖存在

有乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因表達(dá)有乳糖存在時(shí)，結(jié)構(gòu)基因表達(dá)2CAPCAP位點(diǎn)-G,-Lac

阻遏蛋白

操縱序列-G,+LacRNA聚合酶無葡萄糖，無乳糖②無葡萄糖，有乳糖③有葡萄糖，無乳糖④有葡萄糖，有乳糖

啟動(dòng)序列cAMPmRNA5'（二）CAP的正性調(diào)節(jié)作用③①

＋G,-Lac+G,+Lac②④2CAPCAP位點(diǎn)-G,-Lac阻遏蛋白操縱當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度降低而葡萄糖濃度升高時(shí)

細(xì)胞中cAMP濃度降低

缺乏乳糖與阻遏蛋白結(jié)合

CAP失活

阻抑蛋白與操縱基因結(jié)合

CAP及RNA聚合酶不能與啟動(dòng)基因結(jié)合

基因轉(zhuǎn)錄被阻遏

阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度降低而葡萄糖濃度升高時(shí)

當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度升高而葡萄糖濃度降低時(shí)

細(xì)胞中cAMP濃度升高

乳糖作為誘導(dǎo)劑與阻抑蛋白結(jié)合

cAMP與CRP結(jié)合并使之激合

促使阻抑蛋白與操縱基因分離

CRP與啟動(dòng)基因結(jié)合并促使RNA聚合酶與啟動(dòng)基因結(jié)合

基因轉(zhuǎn)錄激活

CAP的正性調(diào)節(jié)當(dāng)培養(yǎng)基中乳糖濃度升高而葡萄糖濃度降低時(shí)二、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制

色氨酸操縱子（trpoperon）：阻遏型操縱子；主要參與調(diào)控一系列用于色氨酸合成代謝的酶蛋白的轉(zhuǎn)錄合成。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)缺乏色氨酸時(shí)，此操縱子開放；而當(dāng)細(xì)胞內(nèi)合成的色氨酸過多時(shí)，此操縱子被關(guān)閉。

二、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制色氨酸操縱子（trpoperoO阻遏蛋白（無活性）mRNAtrpRPtrpEtrpDtrpCtrpBtrpA前導(dǎo)trpL衰減子

結(jié)構(gòu)基因

調(diào)控區(qū)二、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制

色氨酸合成的酶蛋白O阻遏蛋白mRNAtrpRPtrpEtrpDtrpCtO阻遏蛋白mRNATrp

trpRPtrpEtrpDtrpCtrpBtrpA前導(dǎo)序列（L）衰減子（結(jié)構(gòu)基因關(guān)閉）調(diào)節(jié)區(qū)

在高濃度色氨酸存在下，通過形成特殊的“衰減子”結(jié)構(gòu)，對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行更精細(xì)的調(diào)控。

色氨酸的負(fù)性調(diào)控作用

有活性O(shè)阻遏蛋白mRNATrptrpRPtrpEtrpDtTrp操縱子的trpE基因5′－端“前導(dǎo)序列”

衰減子結(jié)構(gòu)10、11Trp操縱子的trpE基因5′－端“前導(dǎo)序列”衰減子1前導(dǎo)肽核蛋白體衰減子結(jié)構(gòu)RNA聚合酶5'mRNATrp密碼子1234UUUU3'DNADNA前導(dǎo)肽5'1234Trp結(jié)構(gòu)基因MKAIFVLKGMKAIFVLKGWWRTSRNA聚合酶Trp操縱子的轉(zhuǎn)錄衰減機(jī)制前導(dǎo)肽核蛋白體衰減子結(jié)構(gòu)RNA聚合酶5'mRNATrp密碼子三、原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)

主要在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)節(jié)1）σ因子的特異啟動(dòng)作用

2）操縱子調(diào)控機(jī)制具有普遍性3）結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行多順反子轉(zhuǎn)錄4）阻遏蛋白阻遏轉(zhuǎn)錄具有普遍性三、原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)第三節(jié)真核生物基因表達(dá)調(diào)控

一、真核生物基因組特點(diǎn)

（一）基因組結(jié)構(gòu)龐大

人類的單倍體基因組由3X109的核苷酸組成，含有大約2.63.9萬個(gè)基因。（二）形成染色體結(jié)構(gòu)真核生物的基因組是以DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體結(jié)構(gòu)形式而存在于細(xì)胞核