“瘦肉精”監(jiān)測(cè)技術(shù)要點(diǎn)及注意事項(xiàng)

“瘦肉精”監(jiān)管關(guān)鍵點(diǎn)控制2023/1/111中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心趙思俊瘦肉精？瘦肉精與獸醫(yī)工作的關(guān)系？“瘦肉精”監(jiān)管關(guān)鍵點(diǎn)控制2023/1/112“瘦肉精”??“瘦肉精”最初是鹽酸克倫特羅的俗稱

1964年由美國氰胺公司首次合成，作為一種治療呼吸道疾病的藥物。20世紀(jì)80年代初，美國研究人員意外發(fā)現(xiàn)鹽酸克倫特羅可以促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)合成和肌肉組織生長，減少脂肪尤其是皮下脂肪的沉積，從而提高瘦肉率和飼料轉(zhuǎn)化率。之后，美國開始將其用于畜禽養(yǎng)殖，并逐漸推廣到世界其他國家，并于20世紀(jì)80年代末傳入我國。2023/1/1132023/1/114鹽酸克倫特羅專指泛指泛指養(yǎng)殖業(yè)非法使用的具有促進(jìn)動(dòng)物生長、提高瘦肉率的含β-腎上腺能受體激動(dòng)劑類的一類物質(zhì)我國禁止瘦肉精的種類第176號(hào)公告（二〇〇二年二月九日）第193號(hào)公告（二○○二年四月九日）第235號(hào)公告（二〇〇二年十二月二十四日）第1519號(hào)公告（二〇一〇年十二月二十七日）2023/1/115第176號(hào)公告：鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、萊克多巴胺、鹽酸多巴胺、西馬特羅、硫酸特布他林第193號(hào)公告：克侖特羅、沙丁胺醇、西馬特羅及其鹽、酯及制劑

第235號(hào)公告克侖特羅、沙丁胺醇、西馬特羅及其鹽、酯及制劑2023/1/116第1519號(hào)公告

苯乙醇胺A、班布特羅、鹽酸齊帕特羅、鹽酸氯丙那林、馬布特羅、西布特羅、溴布特羅、酒石酸阿福特羅、富馬酸福莫特羅、鹽酸可樂定、鹽酸賽庚啶2023/1/1172023/1/118其他賽庚啶：抗組胺藥物，H1受體拮抗劑，也是5-羥色胺受體拮抗劑，可在下丘腦食欲中樞拮抗5-羥色胺，具有刺激食欲的功能，以達(dá)到促進(jìn)動(dòng)物增重的作用。可樂定：一種抗高血壓藥物，腎上腺素能α2-受體激動(dòng)劑，通過促進(jìn)下丘腦生長腺素神經(jīng)元合成和釋放生長腺素，從而調(diào)控生長激素的分泌，從而促進(jìn)動(dòng)物生長。2023/1/119瘦肉精與獸醫(yī)工作？？獸醫(yī)工作的主要內(nèi)容？2023/1/1110動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督工作的主要內(nèi)容？OIE世界動(dòng)物衛(wèi)生組織-向各國政府通告全世界范圍內(nèi)發(fā)生的動(dòng)物疫情以及疫情的起因，并通告控制這些疾病的方法。-在全球范圍內(nèi)，就動(dòng)物疾病的監(jiān)測(cè)和控制進(jìn)行國際研究。-協(xié)調(diào)各成員國在動(dòng)物和動(dòng)物產(chǎn)品貿(mào)易方面的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。2023/1/1111保證動(dòng)物及其產(chǎn)品的國際貿(mào)易衛(wèi)生安全OIE發(fā)展的新趨勢(shì)近幾年來，增加了動(dòng)物福利、抗生素耐藥性監(jiān)測(cè)、食品安全的內(nèi)容專門成立了食品安全工作組加強(qiáng)了與FAO、WHO、CAC等國際組織在有關(guān)動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全安全方面的合作2023/1/1112我國新時(shí)期對(duì)獸醫(yī)工作的定位：

“以有效控制動(dòng)物疫病和保障動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全為目標(biāo)，著力推動(dòng)實(shí)現(xiàn)動(dòng)物疫病從有效控制到逐步根除的質(zhì)的跨越，著力推動(dòng)實(shí)行動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全全過程監(jiān)管……確保動(dòng)物產(chǎn)品生產(chǎn)供應(yīng)安全、動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全和公共衛(wèi)生安全，……”（全國獸醫(yī)事業(yè)發(fā)展十二五規(guī)劃）2023/1/11132023/1/1114獸醫(yī)工作動(dòng)物產(chǎn)品供給動(dòng)物產(chǎn)品安全公共衛(wèi)生安全動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)目標(biāo)動(dòng)物防疫法農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法食品安全法中央編辦發(fā)【2010】105號(hào)“農(nóng)業(yè)部牽頭負(fù)責(zé)“瘦肉精”監(jiān)管工作，負(fù)責(zé)生豬養(yǎng)殖、收購、販運(yùn)、定點(diǎn)屠宰環(huán)節(jié)對(duì)“瘦肉精”的檢驗(yàn)、認(rèn)定和查處……”2023/1/1115國務(wù)院食安辦印發(fā)了《“瘦肉精”專項(xiàng)整治方案》食安辦【2011】14號(hào)開展了“瘦肉精”源頭整治、養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、收購販運(yùn)環(huán)節(jié)、屠宰環(huán)節(jié)等7個(gè)環(huán)節(jié)的整治工作農(nóng)業(yè)部文件農(nóng)業(yè)部關(guān)于深入推進(jìn)“瘦肉精”專項(xiàng)整治工作的意見（農(nóng)牧發(fā)【2011】12號(hào)）農(nóng)業(yè)部關(guān)于加強(qiáng)生豬定點(diǎn)屠宰環(huán)節(jié)“瘦肉精”監(jiān)管工作的通知（農(nóng)醫(yī)發(fā)【2011】18號(hào)）

進(jìn)一步明確了畜牧獸醫(yī)主管部門對(duì)“瘦肉精”的監(jiān)管職責(zé)2023/1/1116如何做好“瘦肉精”監(jiān)管工作？依法、合法工作到位，不出位、不越位2023/1/1117檢測(cè)監(jiān)督抽檢立案查處科學(xué)的檢測(cè)結(jié)果是正確執(zhí)法辦案的前提“瘦肉精”監(jiān)督抽檢可靠檢測(cè)試劑適宜的場(chǎng)所科學(xué)的檢測(cè)流程2023/1/1118樣品的抽取現(xiàn)場(chǎng)篩選陽性確證正確的抽樣方式具有資質(zhì)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)移送公安機(jī)關(guān)樣品抽檢2023/1/1119養(yǎng)殖環(huán)節(jié)？販運(yùn)環(huán)節(jié)？屠宰環(huán)節(jié)？《農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)管理辦法》2012年明確規(guī)定：第二十一條：抽樣人員在抽樣前應(yīng)當(dāng)向被抽樣人出示執(zhí)法證件或工作證件。具有執(zhí)法證件的抽樣人員不得少于2名。抽樣人員應(yīng)準(zhǔn)確、客觀、完整填寫抽樣單。加蓋抽樣單位印章，并由抽樣人員或被抽查人簽字或捺印；被抽查人為單位的，應(yīng)加蓋被抽查人印章或由其工作人員簽字或捺印。2023/1/1120農(nóng)醫(yī)發(fā)【2011】18號(hào)樣品抽樣方法：《豬肉、豬肝、豬尿抽樣方法》NY/T763-2004檢測(cè)方法、限量標(biāo)準(zhǔn)、確證方法按照國家和農(nóng)業(yè)部有關(guān)規(guī)定陽性樣品的確證：由省級(jí)獸藥監(jiān)察機(jī)構(gòu)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)或省級(jí)畜牧獸醫(yī)主管部門指定的有資質(zhì)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)承擔(dān)2023/1/1121膠體金檢測(cè)試紙條ELISA試劑盒液質(zhì)聯(lián)用儀氣質(zhì)聯(lián)用儀“瘦肉精”檢測(cè)

篩選確證檢測(cè)方法靈敏度檢測(cè)時(shí)間保存條件測(cè)試對(duì)象技術(shù)要求假陽性率檢測(cè)成本其他膠體金試紙條2-5μg/kg5-10min4-30℃尿樣、組織操作簡(jiǎn)便較高低

酶聯(lián)免疫試劑盒0.05-0.2μg/kg1.5-2h2-8℃尿樣、血清、組織、飼料等操作相對(duì)復(fù)雜、需簡(jiǎn)單培訓(xùn)較低較低

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法0.5μg/kg1天—全部樣品需系統(tǒng)知識(shí)、技術(shù)培訓(xùn)確證方法高需衍生化液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法0.05μg/kg1天—全部樣品需系統(tǒng)知識(shí)、技術(shù)培訓(xùn)確證方法高不需衍生化2023/1/1123標(biāo)準(zhǔn)文號(hào)公告名稱1SN/T1924-2007

進(jìn)出口動(dòng)物源性食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測(cè)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法2農(nóng)業(yè)部公告[2007]958號(hào)

動(dòng)物源食品中萊克多巴胺殘留量的測(cè)定高效液相色譜法-質(zhì)譜法3農(nóng)業(yè)部公告[2007]958號(hào)動(dòng)物組織及動(dòng)物尿液中萊克多巴胺殘留檢測(cè)方法氣相色譜-質(zhì)譜法4農(nóng)業(yè)部公告[2008]1025號(hào)

動(dòng)物性食品中萊克多巴胺殘留檢測(cè)酶聯(lián)免疫吸附法5農(nóng)業(yè)部公告[2008]1025號(hào)豬尿中β-受體激動(dòng)劑多殘留檢測(cè)液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法6農(nóng)業(yè)部公告[2008]1025號(hào)動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法7農(nóng)業(yè)部公告[2008]1031號(hào)豬肝和豬尿中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)氣相色譜－質(zhì)譜法8農(nóng)業(yè)部公告[2008]1063號(hào)動(dòng)物尿液中11種β—受體激動(dòng)劑的檢測(cè)液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜法9農(nóng)業(yè)部公告[2008]1063號(hào)飼料中13種β—受體激動(dòng)劑的檢測(cè)液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜法10農(nóng)業(yè)部公告[2008]1063號(hào)飼料中8種β—受體激動(dòng)劑的監(jiān)測(cè)氣相色譜——質(zhì)譜法11農(nóng)業(yè)部公告[2010]1486號(hào)飼料中苯乙醇胺A的測(cè)定

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法12GB/T5009.192-2003動(dòng)物源食品中克倫特羅殘留量的測(cè)定13GB21313-2007動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法14GB-T22286-2008動(dòng)物源性食品中多種β-受體激動(dòng)劑殘留量的測(cè)定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法15GB/T22147-2008飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測(cè)定液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法16NY/T468-2006

動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法2023/1/1124農(nóng)業(yè)部審查、備案制度自2005年10月起，農(nóng)業(yè)部對(duì)快速篩選試劑盒、膠體金試紙條實(shí)行了審查、備案制度，對(duì)符合相關(guān)規(guī)定的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、膠體金試紙條準(zhǔn)予備案，允許生產(chǎn)和用于全國獸藥殘留監(jiān)控計(jì)劃的檢測(cè)。（農(nóng)業(yè)部公告第558號(hào)）2023/1/1125快速篩選檢測(cè)試劑農(nóng)業(yè)部公告號(hào)公告名稱網(wǎng)址第1483號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/201012/t20101207_34910.htm第1432號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/201008/t20100813_34263.htm第1387號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/201006/t20100604_34026.htm第1344號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/201003/t20100312_33628.htm第1260號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/200910/t20091025_32982.htm第1172號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/200903/t20090313_31938.htm第1098號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/200812/t20081209_30729.htm第1044號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/200812/t20081209_30761.htm第964號(hào)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案目錄/gg/200812/t20081209_30801.htm第797號(hào)關(guān)于克倫特羅酶聯(lián)免疫試劑盒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等/gg/200812/t20081209_30866.htm第558號(hào)關(guān)于準(zhǔn)予克侖特羅等14種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒備案的公告/gg/200812/t20081209_30972.htm2023/1/1126農(nóng)業(yè)部有關(guān)獸藥殘留檢測(cè)試劑盒備案的相關(guān)規(guī)定如何篩選出符合要求的檢測(cè)試劑？膠體金試紙條篩選考核指標(biāo)：

靈敏度重復(fù)性穩(wěn)定性交叉反應(yīng)性假陰性率假陽性率與液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀比較膠體金試紙條保存條件

室溫（25℃左右最好），不宜暴曬和冷藏、冷凍測(cè)試過程試紙條從包裝撕開取出后，請(qǐng)盡快測(cè)試，時(shí)間不宜過長，一般應(yīng)在1h內(nèi)檢測(cè)完成；滴加尿液并非越多越好，實(shí)際滴加量請(qǐng)按說明書執(zhí)行，一般以100μL為宜；加樣后一般觀察時(shí)間為5~10min。結(jié)果判定

陽性：C線顯色，T線不出現(xiàn)紅色條帶，判為陽性陰性：C線顯色，T線出現(xiàn)紅色條帶，判為陰性無效：C線不顯色，判為無效1.空白樣品2.標(biāo)準(zhǔn)溶液克倫特羅，純度為98.5%萊克多巴胺，純度為97.0%沙丁胺醇，純度為99.5%3.標(biāo)準(zhǔn)溶液配置均購自德國Dr.E公司標(biāo)準(zhǔn)品

稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品分別于10mL棕色容量瓶中，甲醇定容，稀釋成1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

分別吸取適量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至100ml容量瓶中，用純水定容，稀釋成200μg/L，放于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩Ｉi屠宰場(chǎng)采集并經(jīng)LC-MS/MS法檢測(cè)為不含待測(cè)物的空白豬尿。-20℃保存?zhèn)溆眯蛱?hào)測(cè)試藥物測(cè)試藥物濃度（μg/L）1鹽酸克倫特羅0，2，3，5，8，10，152萊克多巴胺0，3，5，8，10，15，203沙丁胺醇0，4，5，8，10，15，20根據(jù)試紙條所標(biāo)注的靈敏度及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，每種試紙條選擇7個(gè)濃度（n=6）進(jìn)行敏感性和重復(fù)性測(cè)試，并進(jìn)行批內(nèi)重復(fù)試驗(yàn)（n=3）和批間重復(fù)試驗(yàn)（n=3）各檢測(cè)試紙條靈敏度、重復(fù)性測(cè)試濃度靈敏度、重復(fù)性測(cè)定2023/1/1134穩(wěn)定性2-8℃和室溫保存性試驗(yàn)37℃和-20℃老化試驗(yàn)

將待測(cè)的3類膠體金檢測(cè)試紙條在60℃的烘箱中保存（根據(jù)報(bào)道，膠體金免疫檢測(cè)試紙條60℃條件下保存一天，相當(dāng)于常溫保存一個(gè)半月，以此類推。），分別于第2、4、8天后取出（分別相當(dāng)于常溫保存3、9、12個(gè)月），選擇不同濃度的豬尿添加樣品進(jìn)行試驗(yàn)（n≥6）。試紙條種類測(cè)試藥物濃度（μg/L）鹽酸克倫特羅萊克多巴胺沙丁胺醇鹽酸克倫特羅―20、5020、50萊克多巴胺20、50―20、50沙丁胺醇20、5020、50―選擇兩個(gè)濃度的含結(jié)構(gòu)相似物的豬尿添加樣品進(jìn)行試驗(yàn)（n=7），各廠家的三種檢測(cè)試紙條具體選擇豬尿添加樣品及濃度如下表，判斷檢測(cè)試紙條的特異性。檢測(cè)試紙條特異性測(cè)試濃度特異性測(cè)定（交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)）D公司該產(chǎn)品與克倫特羅有“強(qiáng)”交叉反應(yīng)高度特異，不與其他兩種結(jié)構(gòu)相似的“瘦肉精”發(fā)生交叉反應(yīng)假陽性結(jié)