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神經(jīng)干動(dòng)作電位、傳導(dǎo)速度及不應(yīng)期測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)神經(jīng)干標(biāo)本的制備。觀察坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動(dòng)作電位、雙向性傳導(dǎo)并測(cè)定其傳導(dǎo)速度。觀察機(jī)械損傷對(duì)神經(jīng)興奮和傳導(dǎo)的影響學(xué)習(xí)絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期的測(cè)定方法了解蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)干產(chǎn)生動(dòng)作電位后其興奮性的規(guī)律性變化實(shí)驗(yàn)原理用電刺激神經(jīng),在刺激電極的負(fù)極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化,當(dāng)去極化達(dá)到閾電位,膜上產(chǎn)生一次可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn),即動(dòng)作電位神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動(dòng)作電位是以膜外記錄方式記錄到的復(fù)合動(dòng)作電位如果兩個(gè)引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面,興奮波先后通過(guò)兩個(gè)電極處,便引導(dǎo)出兩個(gè)方向相反的電位波形,稱(chēng)雙相動(dòng)作電位雙相動(dòng)作電位BiphasicActionPotential興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計(jì)+++++++++++++++------------------------------+++++++++++++++----++++++++----動(dòng)作電位的傳導(dǎo)ConductionofAP
動(dòng)作電位以局部電流的形式傳導(dǎo)++++++++++++++++--------------------------------++++++++++++++++----++++++++----局部電流實(shí)驗(yàn)原理:如果兩個(gè)引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)纖維完全損傷,興奮波只通過(guò)第一個(gè)引導(dǎo)電極,不能傳至第二個(gè)引導(dǎo)電極,則只能引導(dǎo)出一個(gè)方向的電位偏向波形,稱(chēng)單向動(dòng)作電位單相動(dòng)作電位MonophasicActionPotential損傷區(qū)興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計(jì)刺激偽跡(Stimulusartifact)刺激偽跡AP刺激器放大器+-地刺激電流i-i+R+R-地刺激偽跡是刺激電流通過(guò)導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號(hào)。動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定
MeasurementofConductionVelocityofAP-+SΔt
傳導(dǎo)速度測(cè)定
υ=
SACΔt刺激器輸入通道R1-Rr1+R2-R2+實(shí)驗(yàn)原理:神經(jīng)組織在接受一次刺激產(chǎn)生興奮后,其興奮性將會(huì)發(fā)生規(guī)律性的變化,依次經(jīng)過(guò)絕對(duì)不應(yīng)期、相對(duì)不應(yīng)期、超常期和低常期,然后回到正常水平。采用兩次脈沖,通過(guò)調(diào)節(jié)兩次脈沖間隔,可測(cè)得坐骨神經(jīng)的絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期材料和方法-材料蟾蜍或蛙;蛙板、探針、粗剪刀、細(xì)剪刀、尖鑷子、玻璃分針、大頭針、培養(yǎng)皿、滴管、瓷碗、鋅銅弓或鋁銀電極、任氏液、鐵支架,張力換能器,瓷碗,培養(yǎng)皿,微機(jī)生物信號(hào)采集處理儀等。
1.坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備1.1毀腦脊髓
1.2剪除軀干上部及內(nèi)臟
1.3剝皮(之后洗凈雙手和用過(guò)的全部手術(shù)器械)1.4完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本1.4.1分離兩腿
1.4.2游離坐骨神經(jīng)
1.4.3完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本
材料和方法-方法剪除軀干上部及內(nèi)臟圖4-1-4剝?nèi)テつwN標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)干制備蟾蜍毀腦脊髓,去上肢和內(nèi)臟,下肢剝皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;標(biāo)本腹面向上,用玻璃分針?lè)蛛x脊柱兩側(cè)神經(jīng)叢,用線在近脊柱處結(jié)扎,剪斷神經(jīng);將神經(jīng)干從腹面移向背面。標(biāo)本背面向上固定,從大腿至跟腱分離坐骨神經(jīng)。坐骨神經(jīng)標(biāo)本置任氏液中備用。
采樣頻率通道模式掃描速度靈敏度濾波頻率時(shí)間常數(shù)材料和方法-方法3.傳導(dǎo)速度的測(cè)定(及參數(shù)設(shè)置)材料和方法-方法4.不應(yīng)期的測(cè)定(及參數(shù)設(shè)置)采用雙刺激模式,逐步增加波間隔第二個(gè)動(dòng)作電位出現(xiàn)時(shí)的刺激間隔及第二個(gè)動(dòng)作電位振幅剛開(kāi)始與第一個(gè)相等時(shí)的刺激間隔
討論單相、雙相動(dòng)作電位的形成動(dòng)作電位傳導(dǎo)的速度測(cè)定的原理和常見(jiàn)的影響因素絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期形成的原因影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要干擾因素注意事項(xiàng)神經(jīng)盡可能分離得長(zhǎng)一些標(biāo)本制備時(shí)要注意保持標(biāo)本的濕潤(rùn)標(biāo)本制備時(shí)盡量避免使用尖銳的器械,以免損傷神經(jīng)使用電刺激時(shí),刺激強(qiáng)度不宜太大,否則可能導(dǎo)致神經(jīng)的損
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