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文檔簡介
實驗二組織原代培養(yǎng)培養(yǎng)瓶小燒杯培養(yǎng)皿直頭吸管彎頭吸管大直頭鑷子小彎頭鑷子眼科剪試劑與器材一、器材:超凈工作臺培養(yǎng)箱二、試劑:Hank’s液原代培養(yǎng)液消毒液(酒精75%)雜用品:一次性注射針筒、棉花、牛皮紙等三、實驗材料:鴨胚1、取出活胚胎,置于培養(yǎng)器中;2、選好鴨卵,將鴨胚移入培養(yǎng)皿中。3、Hank’s溶液洗滌胚胎;4、剖開胚體,分離若干器官;5、選擇器官組織,切成大小約0.5mm3;6、貼瓶;7、加液;8、翻瓶;9、培養(yǎng)。培養(yǎng)步驟:無菌室和操作臺消毒:無菌室每周用紫外線消毒1-2次。實驗前,將實驗器材放入超凈臺內,打開超凈臺紫外線滅菌燈,同時起動超凈臺風機,40min后消毒完畢,關閉紫外線燈。無菌操作要求:一切操作都要在火焰周圍進行,瓶口、吸管、注射器等要經過火焰消毒。瓶口要順風斜放在支架上。試劑使用后應立即封閉瓶口。組織培養(yǎng)過程中要注意組織接種量要適宜,適宜的接種量可造就一個有利于細胞生長的微環(huán)境以促進細胞的增值。注意事項4.組織培養(yǎng)的條件控制:溫度PH值:選擇近中性范圍的PH(7.2-7.4)是可取的;適宜的PH主要是靠恒定的二氧化碳和培養(yǎng)液中的緩沖體系來維持的。氣體環(huán)境:在培養(yǎng)環(huán)境中充5%濃度的的二氧化碳氣體,有利于維持培養(yǎng)瓶的PH恒定。滲透壓促生長因子抑制細胞生長因素注意事項將鴨胚或雞胚的心、腎、肝、肺或其它器官的組織塊均勻地接種在培養(yǎng)瓶的底端,并浸沒于培養(yǎng)液中,讓組織塊在模擬體內生理環(huán)境下繼續(xù)生長。實驗結果總結培養(yǎng)過程中組織塊貼壁能否成功的經驗,寫出影響組織正常貼壁的因素。不同的實驗材料(如兩棲類、魚類)和相同實
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