詳細(xì)：選修一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

選修一生物技術(shù)實(shí)踐微生物：一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱。艾滋病病毒大腸桿菌酵母菌草履蟲一、微生物的分離和培養(yǎng)1.培養(yǎng)基（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。氮源無機(jī)鹽PH（2）成分：一般都含有水，碳源、______和_______，還需滿足不同微生物生長對_______、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。（3）培養(yǎng)基的種類一、微生物的分離和培養(yǎng)1.培養(yǎng)基（4）配置培養(yǎng)基的方法：計(jì)算稱重融化______________。

滅菌倒平板2.無菌技術(shù)（1）含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。灼燒滅菌微生物的接種工具(接種環(huán)、接種針、試管口)或其他金屬用具接在火焰的充分燃燒層灼燒高壓蒸汽滅菌100kPa121℃15-30min（通常用于培養(yǎng)基的滅菌）干熱滅菌160－170℃；1－2h能耐高溫的需要保持干燥的物品(通常用于玻璃器皿的滅菌)一、微生物的分離和培養(yǎng)3.微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)（1）平板劃線法：平板劃線法是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。（2）稀釋涂布平板法：

稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。4.統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。②缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。3.統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目的方法(2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

③操作：設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

②計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。二、兩種菌株篩選、鑒別的比較土壤中分解尿素的細(xì)菌分解纖維素的微生物在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細(xì)菌能分解尿素①選擇培養(yǎng)基的成分：①選擇培養(yǎng)基的成分：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈尿素作為唯一氮源纖維素作為唯一碳源②鑒別方法：②鑒別方法：小結(jié)滅菌消毒（1）無菌技術(shù)煮沸消毒巴氏消毒化學(xué)藥劑消毒灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌（2）接種方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法（3）微生物計(jì)數(shù)法：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、活菌計(jì)數(shù)法1.在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件，另一方面需要確保無處不在的其他微生物無法混入。請回答下列相關(guān)問題：(1)培養(yǎng)基能為培養(yǎng)的微生物提供營養(yǎng)。各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有__________、________、________、________；另外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對________、____________、________的要求。(2)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，需進(jìn)行清潔和________(填“消毒”或“滅菌”)；對用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等需進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)。水碳源氮源無機(jī)鹽PH

氧氣特殊營養(yǎng)物質(zhì)消毒滅菌(3)微生物接種的方法很多，其核心都是要防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。微生物接種最常用的方法是______________和__________________。(4)對分離的微生物作進(jìn)一步的鑒定，常需要借助生物化學(xué)的方法。如在以________為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入____________，可用來鑒定分解尿素的細(xì)菌；在以________為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入________，可用來鑒定纖維素分解菌。平板劃線法稀釋涂布平板法尿素酚紅指示劑纖維素剛果紅2.(2014新課標(biāo)全國理綜Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是__________________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107菌株數(shù)＝(C÷V)×M＝38÷0.1×100×1000＝3.8×107(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是______________________________________________。(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落B(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中____________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)___________的利用率。溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)3．(2015云南統(tǒng)一檢測)大腸桿菌是人和許多動(dòng)物腸道中的主要細(xì)菌，若水中大腸桿菌超標(biāo)，說明水源可能被糞便污染。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可用于檢測水中大腸桿菌的數(shù)量?；卮鹣铝袉栴}：(1)伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基含有大腸桿菌生長繁殖必需的_______________________四類營養(yǎng)物質(zhì)，大腸桿菌的代謝產(chǎn)物會(huì)和伊紅、美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)，使菌落呈現(xiàn)黑色。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于______(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。碳源、氮源、水和無機(jī)鹽鑒別(2)某水樣的大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)，需采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的________。一般選擇菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，這樣統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)________(填“大于”“等于”或