第十一講-物證檢驗

血痕檢驗血痕檢驗需要解決的問題送檢檢材是否是血痕如果是血痕，是人血還是動物血若是人血，則測定遺傳標(biāo)記進(jìn)行個人識別同時進(jìn)行其他諸如出血量、出血時間及出血部位推斷等問題血痕檢驗的步驟肉眼檢查預(yù)試驗確證試驗種屬鑒定血痕的個人識別（遺傳標(biāo)記測定以及性別鑒定）其他檢驗（出血部位、出血量、血痕陳舊度等推斷）肉眼檢查

肉眼檢查主要觀察血痕的數(shù)量、分布、位置、大小、形狀、范圍、色澤、它們的相互關(guān)系以及它們與現(xiàn)場其他物品的相互關(guān)系。目的：推斷死亡時間、死亡原因以及案件發(fā)生經(jīng)過等等。預(yù)試驗?zāi)康模阂獜拇罅靠梢裳壑泻Y除不是血痕的檢材。原理：血痕中的血紅蛋白或正鐵血紅素具有過氧化物酶活性，能使過氧化氫分解成水和新生態(tài)氧，后者使加入的化學(xué)物質(zhì)氧化成有色物質(zhì)。方法：聯(lián)苯胺試驗、酚酞試驗、鄰聯(lián)甲苯胺試驗、魯米諾試驗、孔雀綠試驗、氨基比林試驗、愈創(chuàng)木酯試驗。性質(zhì)：篩選試驗。優(yōu)缺點(diǎn)：靈敏度高、特異性差、假陽性率高、直接破壞檢材。聯(lián)苯胺試驗原理：HbH2O2H2O+[O]

聯(lián)苯胺

聯(lián)苯胺藍(lán)

方法：取微量檢材，依次滴加冰醋酸，聯(lián)苯胺無水乙醇飽和溶液，1~2min無藍(lán)色反應(yīng)，再加3%過氧化氫，立即出現(xiàn)深藍(lán)色為陽性反應(yīng)。酚酞試驗原理：

HbH2O2H2O+[O]

[OH]-還原酚酞氧化酚酞（紅色）（無色）（無色）確證試驗?zāi)康模鹤C明檢材是血痕。原理：檢測檢材中是否含有血紅蛋白或其衍生物。若為陽性結(jié)果，則可以認(rèn)定為血痕。方法：氯化血紅素結(jié)晶試驗，血色原結(jié)晶試驗，顯微分光鏡檢查及顯微鏡下查找血細(xì)胞。優(yōu)缺點(diǎn)：靈敏度不高；霉菌生長、細(xì)菌污染、洗滌、日曬后的血痕，確證試驗往往呈陰性反應(yīng)。氯化血紅素結(jié)晶試驗原理：血紅蛋白正鐵血紅素氯化血紅素結(jié)晶氯化鈉+醋酸[Cl]+醋酸鈉（褐色菱形結(jié)晶）

顯微分光鏡檢查原理：有色物質(zhì)能吸收一定波長的光線，在太陽光譜上出現(xiàn)黑色線條，稱為吸收線。血紅蛋白及其衍生物是有色物質(zhì)并且具有很強(qiáng)的選擇性吸收光線的性質(zhì)。種屬鑒定目的：確定血痕是否為人血。原理：通過檢測人的種屬特異性指標(biāo)確證檢材為人血。方法：免疫學(xué)方法（沉淀反應(yīng)、ELISA），生物化學(xué)和分子生物學(xué)方法（血紅蛋白聚丙烯凝膠電泳、人類基因組中種屬特異的DNA序列的PCR檢測）。注意：現(xiàn)場提取的檢材中非人類的生物性斑痕的干擾。抗人血清沉淀素血清試驗原理及操作步驟：免疫——用人的血清免疫家兔，取兔血清；純化——用近緣動物血清吸收兔血清，避免近緣反應(yīng)；檢測——用純化過的兔血清和檢材浸液反應(yīng)。注意：建立陽性對照和陰性對照?？谷搜t蛋白沉淀素血清試驗原理：免疫——用人血紅蛋白免疫家兔，制備兔抗人血紅蛋白血清；檢測——用抗血清和檢材浸液反應(yīng)。血型測定紅細(xì)胞血型測定ABO血型的測定

1、ABO血型抗體測定

2、ABO血型抗原測定（吸收試驗、解離試驗）MN、Rh及其它血型的測定血清型測定紅細(xì)胞酶型測定白細(xì)胞血型（HLA血型）測定

精液檢驗精液的組成固體成分（10%）：

精子、睪丸細(xì)胞、白細(xì)胞、脫落柱狀上皮細(xì)胞、前列腺卵磷脂小體等；精漿（90%）：1、蛋白質(zhì)：人血清共有的蛋白：白蛋白……精漿中特有的蛋白：前列腺特異性抗原P30，β-微精蛋白，β-精漿蛋白，α2-精漿糖蛋白；2、酶類：酸性磷酸酶、乳酸脫氫酶；3、精胺、膽堿等其他有機(jī)物；4、無機(jī)成分：鋅等。新鮮精液檢驗新鮮精液為乳白色粘稠液，有特殊腥臭。正常精子呈蝌蚪狀。精斑檢驗肉眼檢查預(yù)試驗確證試驗種屬鑒定血型檢查肉眼檢查暗色布上呈硬固、灰白色漿糊斑狀；白色布上呈黃白色地圖狀；放大鏡觀察可見黃白色小鱗片；紫外線照射可發(fā)出特殊的紫白色熒光（可提示有精斑存在）。預(yù)試驗碘化碘鉀試驗酸性磷酸酶試驗鋅的檢出乳酸脫氫酶試驗苦味酸結(jié)晶試驗碘化碘鉀試驗又稱Florence試驗。原理：膽堿+Florence試劑褐色針狀結(jié)晶缺點(diǎn)：1、靈敏度不高，僅1:400；2、僅在一定時間內(nèi)可能出現(xiàn)有意義的陽性結(jié)果；3、假陽性率高，特異性低。酸性磷酸酶試驗原理：

酸性磷酸酶[Fe(CN)-4]-磷酸苯二鈉萘酚紅色醌類化合物

氨基安替比林優(yōu)點(diǎn)：含量高，靈敏度高(1:20,000)，適用于微量及降解陳舊檢材。鋅的檢出原理及方法：精液含鋅量是所有人的體液中最高的；Zn+雙硫腙試劑紅色。注意：乳汁中鋅含量也比較高，可先將檢材浸液稀釋后再反應(yīng)。乳酸脫氫酶試驗原理：只有人的精子才含有同工酶LDH-X。方法：淀粉凝焦電泳。苦味酸結(jié)晶試驗又稱巴貝里結(jié)晶試驗（Barberiocrystaltest）原理：精素的分解產(chǎn)物與苦味酸結(jié)合，形成精素苦味酸結(jié)晶（黃色十字形、柱狀、星形結(jié)晶）。特點(diǎn)：只有人類的精液才能形成，可用于鑒定種屬。缺點(diǎn)：肝、脾、胰等器官浸液也可形成同樣結(jié)晶。確證試驗精子的檢出：1、檢材處理：生理鹽水浸出法、氨水浸出法2、染色法：一般采用復(fù)染法。蘇木素-伊紅染色法：頭藍(lán)、尾紅。Baecchi染色法：頭紫紅、尾藍(lán)。3、檢出時限：活體：1.5~2天；尸體：兩周以上。種屬試驗原理及方法：人精液免疫家兔制得兔抗；純化；兔抗與可疑檢材浸液進(jìn)行沉淀反應(yīng)。P30試紙條精斑的血型檢驗原理：