第十一講-物證檢驗(yàn)

血痕檢驗(yàn)血痕檢驗(yàn)需要解決的問題送檢檢材是否是血痕如果是血痕，是人血還是動(dòng)物血若是人血，則測(cè)定遺傳標(biāo)記進(jìn)行個(gè)人識(shí)別同時(shí)進(jìn)行其他諸如出血量、出血時(shí)間及出血部位推斷等問題血痕檢驗(yàn)的步驟肉眼檢查預(yù)試驗(yàn)確證試驗(yàn)種屬鑒定血痕的個(gè)人識(shí)別（遺傳標(biāo)記測(cè)定以及性別鑒定）其他檢驗(yàn)（出血部位、出血量、血痕陳舊度等推斷）肉眼檢查

肉眼檢查主要觀察血痕的數(shù)量、分布、位置、大小、形狀、范圍、色澤、它們的相互關(guān)系以及它們與現(xiàn)場(chǎng)其他物品的相互關(guān)系。目的：推斷死亡時(shí)間、死亡原因以及案件發(fā)生經(jīng)過等等。預(yù)試驗(yàn)?zāi)康模阂獜拇罅靠梢裳壑泻Y除不是血痕的檢材。原理：血痕中的血紅蛋白或正鐵血紅素具有過氧化物酶活性，能使過氧化氫分解成水和新生態(tài)氧，后者使加入的化學(xué)物質(zhì)氧化成有色物質(zhì)。方法：聯(lián)苯胺試驗(yàn)、酚酞試驗(yàn)、鄰聯(lián)甲苯胺試驗(yàn)、魯米諾試驗(yàn)、孔雀綠試驗(yàn)、氨基比林試驗(yàn)、愈創(chuàng)木酯試驗(yàn)。性質(zhì)：篩選試驗(yàn)。優(yōu)缺點(diǎn)：靈敏度高、特異性差、假陽性率高、直接破壞檢材。聯(lián)苯胺試驗(yàn)原理：HbH2O2H2O+[O]

聯(lián)苯胺

聯(lián)苯胺藍(lán)

方法：取微量檢材，依次滴加冰醋酸，聯(lián)苯胺無水乙醇飽和溶液，1~2min無藍(lán)色反應(yīng)，再加3%過氧化氫，立即出現(xiàn)深藍(lán)色為陽性反應(yīng)。酚酞試驗(yàn)原理：

HbH2O2H2O+[O]

[OH]-還原酚酞氧化酚酞（紅色）（無色）（無色）確證試驗(yàn)?zāi)康模鹤C明檢材是血痕。原理：檢測(cè)檢材中是否含有血紅蛋白或其衍生物。若為陽性結(jié)果，則可以認(rèn)定為血痕。方法：氯化血紅素結(jié)晶試驗(yàn)，血色原結(jié)晶試驗(yàn)，顯微分光鏡檢查及顯微鏡下查找血細(xì)胞。優(yōu)缺點(diǎn)：靈敏度不高；霉菌生長(zhǎng)、細(xì)菌污染、洗滌、日曬后的血痕，確證試驗(yàn)往往呈陰性反應(yīng)。氯化血紅素結(jié)晶試驗(yàn)原理：血紅蛋白正鐵血紅素氯化血紅素結(jié)晶氯化鈉+醋酸[Cl]+醋酸鈉（褐色菱形結(jié)晶）

顯微分光鏡檢查原理：有色物質(zhì)能吸收一定波長(zhǎng)的光線，在太陽光譜上出現(xiàn)黑色線條，稱為吸收線。血紅蛋白及其衍生物是有色物質(zhì)并且具有很強(qiáng)的選擇性吸收光線的性質(zhì)。種屬鑒定目的：確定血痕是否為人血。原理：通過檢測(cè)人的種屬特異性指標(biāo)確證檢材為人血。方法：免疫學(xué)方法（沉淀反應(yīng)、ELISA），生物化學(xué)和分子生物學(xué)方法（血紅蛋白聚丙烯凝膠電泳、人類基因組中種屬特異的DNA序列的PCR檢測(cè)）。注意：現(xiàn)場(chǎng)提取的檢材中非人類的生物性斑痕的干擾?？谷搜宄恋硭匮逶囼?yàn)原理及操作步驟：免疫——用人的血清免疫家兔，取兔血清；純化——用近緣動(dòng)物血清吸收兔血清，避免近緣反應(yīng)；檢測(cè)——用純化過的兔血清和檢材浸液反應(yīng)。注意：建立陽性對(duì)照和陰性對(duì)照?？谷搜t蛋白沉淀素血清試驗(yàn)原理：免疫——用人血紅蛋白免疫家兔，制備兔抗人血紅蛋白血清；檢測(cè)——用抗血清和檢材浸液反應(yīng)。血型測(cè)定紅細(xì)胞血型測(cè)定ABO血型的測(cè)定

1、ABO血型抗體測(cè)定

2、ABO血型抗原測(cè)定（吸收試驗(yàn)、解離試驗(yàn)）MN、Rh及其它血型的測(cè)定血清型測(cè)定紅細(xì)胞酶型測(cè)定白細(xì)胞血型（HLA血型）測(cè)定

精液檢驗(yàn)精液的組成固體成分（10%）：

精子、睪丸細(xì)胞、白細(xì)胞、脫落柱狀上皮細(xì)胞、前列腺卵磷脂小體等；精漿（90%）：1、蛋白質(zhì)：人血清共有的蛋白：白蛋白……精漿中特有的蛋白：前列腺特異性抗原P30，β-微精蛋白，β-精漿蛋白，α2-精漿糖蛋白；2、酶類：酸性磷酸酶、乳酸脫氫酶；3、精胺、膽堿等其他有機(jī)物；4、無機(jī)成分：鋅等。新鮮精液檢驗(yàn)新鮮精液為乳白色粘稠液，有特殊腥臭。正常精子呈蝌蚪狀。精斑檢驗(yàn)肉眼檢查預(yù)試驗(yàn)確證試驗(yàn)種屬鑒定血型檢查肉眼檢查暗色布上呈硬固、灰白色漿糊斑狀；白色布上呈黃白色地圖狀；放大鏡觀察可見黃白色小鱗片；紫外線照射可發(fā)出特殊的紫白色熒光（可提示有精斑存在）。預(yù)試驗(yàn)碘化碘鉀試驗(yàn)酸性磷酸酶試驗(yàn)鋅的檢出乳酸脫氫酶試驗(yàn)苦味酸結(jié)晶試驗(yàn)碘化碘鉀試驗(yàn)又稱Florence試驗(yàn)。原理：膽堿+Florence試劑褐色針狀結(jié)晶缺點(diǎn)：1、靈敏度不高，僅1:400；2、僅在一定時(shí)間內(nèi)可能出現(xiàn)有意義的陽性結(jié)果；3、假陽性率高，特異性低。酸性磷酸酶試驗(yàn)原理：

酸性磷酸酶[Fe(CN)-4]-磷酸苯二鈉萘酚紅色醌類化合物

氨基安替比林優(yōu)點(diǎn)：含量高，靈敏度高(1:20,000)，適用于微量及降解陳舊檢材。鋅的檢出原理及方法：精液含鋅量是所有人的體液中最高的；Zn+雙硫腙試劑紅色。注意：乳汁中鋅含量也比較高，可先將檢材浸液稀釋后再反應(yīng)。乳酸脫氫酶試驗(yàn)原理：只有人的精子才含有同工酶LDH-X。方法：淀粉凝焦電泳?？辔端峤Y(jié)晶試驗(yàn)又稱巴貝里結(jié)晶試驗(yàn)（Barberiocrystaltest）原理：精素的分解產(chǎn)物與苦味酸結(jié)合，形成精素苦味酸結(jié)晶（黃色十字形、柱狀、星形結(jié)晶）。特點(diǎn)：只有人類的精液才能形成，可用于鑒定種屬。缺點(diǎn)：肝、脾、胰等器官浸液也可形成同樣結(jié)晶。確證試驗(yàn)精子的檢出：1、檢材處理：生理鹽水浸出法、氨水浸出法2、染色法：一般采用復(fù)染法。蘇木素-伊紅染色法：頭藍(lán)、尾紅。Baecchi染色法：頭紫紅、尾藍(lán)。3、檢出時(shí)限：活體：1.5~2天；尸體：兩周以上。種屬試驗(yàn)原理及方法：人精液免疫家兔制得兔抗；純化；兔抗與可疑檢材浸液進(jìn)行沉淀反應(yīng)。P30試紙條精斑的血型檢驗(yàn)原理：