保健食品毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)優(yōu)秀課件

保健食品毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)第一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日保健食品毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部周宗燦第二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日反應(yīng)停

thalidomide第三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日安全性安全性是首先關(guān)注的問(wèn)題（審批制）保健食品（審批制）：非自愿風(fēng)險(xiǎn)藥品：自愿風(fēng)險(xiǎn)有效性

第四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日一。毒理學(xué)基礎(chǔ)第五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日毒理學(xué)（toxicology）從生物醫(yī)學(xué)角度研究化學(xué)物質(zhì)對(duì)生物機(jī)體的損害作用及其機(jī)制的科學(xué)。任何一種化學(xué)物在一定條件下都可能是對(duì)機(jī)體產(chǎn)生任有害作用。

第六頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日毒理學(xué)描述毒理學(xué)、機(jī)制毒理學(xué)、管理毒理學(xué)（法規(guī)毒理學(xué)）毒作用譜：系統(tǒng)毒性；致突變；致畸；致癌第七頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日劑量軸低30100高

┼————┼——┼——┼————————┼——┼——┼———————————┼──┼─人NOEL閾LOELNOAEL閾LOAELMTDLD50└────┘└────┘└───┘

功能長(zhǎng)期毒性急期毒性

第八頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

100┫%┫**┫○┫┫50┫┫┫*┫○┫○┗┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳┳153060

NOAELLOAELmg/kg

閾毒作用劑量—反應(yīng)關(guān)系第九頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日描述毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則○化學(xué)物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生的作用，可以外推于人?！饘?shí)驗(yàn)動(dòng)物必須暴露于高劑量，這是發(fā)現(xiàn)對(duì)人潛在危害的必需的和可靠的方法。○成年的健康（雄性和雌性未孕）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人可能的暴露途徑是基本的選擇。第十頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日檢測(cè)和評(píng)價(jià)

人擬用劑量100倍↓↓藥物A┕──────────────┘30倍毒性作用↓↓藥物B┕────┘∴毒性B>A

無(wú)毒性毒性作用安全性A>B

作用第十一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日毒性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的基本目的○受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì)○劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究○確定毒作用的靶器官○確定損害的可逆性第十二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物種選擇○對(duì)受試物在代謝、生化和毒理學(xué)特征與人最接近的物種；○選擇自然壽命不太長(zhǎng)的物種；○易于飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作的物種；○經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。常規(guī)選擇物種的方式是利用兩個(gè)物種，一種是嚙齒類(lèi)，另一種是非嚙齒類(lèi)。系統(tǒng)毒性研究最常用的嚙齒類(lèi)是大鼠和小鼠，非嚙齒類(lèi)是狗。第十三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日物種選擇○急性毒性試驗(yàn)常用大鼠、小鼠、狗○亞慢性、慢性毒性試驗(yàn)常用大鼠、狗○皮膚刺激試驗(yàn)和致敏試驗(yàn)常用豚鼠○皮膚刺激試驗(yàn)和眼刺激試驗(yàn)常用兔○遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)多用小鼠○致畸試驗(yàn)常用大鼠、小鼠和兔○致癌試驗(yàn)常用大鼠和小鼠○遲發(fā)性神經(jīng)毒性試驗(yàn)常用母雞第十四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日染毒途徑

毒理學(xué)試驗(yàn)中染毒途徑的選擇，應(yīng)盡可能模擬人在接觸該受試物的方式。最常用的染毒途徑為經(jīng)口、經(jīng)呼吸道、經(jīng)皮途徑。第十五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日溶劑和賦型劑染毒前根據(jù)染毒途徑的不同，應(yīng)將受試物制備成一定的劑型。常用的是制備成水溶液、油溶液或混懸液。對(duì)溶劑和助溶劑的要求是：①所用的溶劑或助溶劑應(yīng)該是無(wú)毒或?qū)嶋H無(wú)毒②與受試物不起反應(yīng)，受試物在溶液中應(yīng)穩(wěn)定；③與受試物的毒動(dòng)學(xué)和毒效學(xué)無(wú)顯著影響；④無(wú)特殊刺激性或氣味。第十六頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日溶劑和賦型劑對(duì)水溶性受試物，體內(nèi)試驗(yàn)首選的溶劑為水（經(jīng)口染毒）和等滲鹽水（胃腸道外染毒）。水不溶性受試物應(yīng)溶于或懸浮于適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中?；鞈乙鹤畛Ｓ玫馁x形劑為0.5%羧甲基纖維素鈉或10%阿拉伯樹(shù)膠。受試物溶液應(yīng)新鮮配制，除非已證明貯存穩(wěn)定。第十七頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日美國(guó)藥劑協(xié)會(huì)（1986）推薦的常用溶劑和賦型劑1。丙酮（Acetone）；2．羧甲基纖維素（Carboxylmethylcellulose，CMC）；3．玉米油（Cornoil）；4．二甲基甲酰胺（N,N-dimethylformamide,DMFO）；5．二甲基亞砜（Dimethylsulfoxide,DMSO）；6．乙醇（Ethanol）7．（Glycerol）甘油；；8．阿拉伯膠（GumArabic）；9．乳糖（Lactose）；10．甲基纖維素（Methylcellulose）11．甲基乙基酮，丁酮（Methylethylketone，MEK）；12．凡士林油（Mineraloil；liquidpetrolatum）；13．橄欖油（Oliveoil）；14．花生油（peanutoil/Arachisoil）15．凡士林（Petrolatum/Vaseline/petroleumJelly）；16．聚乙二醇-400（PolyethyleneGlycol-400，PEG400）；17．生理鹽水（Saline）；18．吐溫80（Tween80）；19．水（Water）（黃色示可用于經(jīng)口）第十八頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日一般推薦的染毒最大容積（1）經(jīng)口20ml/kg（對(duì)空腹動(dòng)物）；（2）經(jīng)皮2ml/kg（根據(jù)體表面積計(jì)算，限于染毒的準(zhǔn)確性）；（3）靜脈1ml/kg（5分鐘以上）；（4）肌肉注射0.5ml/kg（一個(gè)部位）；（5）每眼0.01ml；（6）直腸0.5ml/kg；（7）陰道：大鼠0.2ml,兔1ml；（8）吸入2mg/L；（9）鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。第十九頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日安全系數(shù)·不確定系數(shù)

不確定系數(shù)100倍物種間差異10倍個(gè)體間差異10倍毒效學(xué)毒動(dòng)學(xué)毒效學(xué)毒動(dòng)學(xué)

100.4100.6100.5100.5(2.5)(4.0)(3.2)(3.2)第二十頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日二。保健食品安全性毒理學(xué)

評(píng)價(jià)規(guī)范（2003）第二十一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)規(guī)范

（2003）

食品衛(wèi)生法、保健食品管理辦法的要求保健食品必須符合食品衛(wèi)生要求，對(duì)人體不產(chǎn)生任何急性、亞急性或慢性危害。第一部分：毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序第二部分：毒理學(xué)檢驗(yàn)方法

第二十二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

主題內(nèi)容與適用范圍對(duì)受試物的要求

對(duì)受試物處理的要求保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的四個(gè)階段和內(nèi)容不同保健食品選擇毒性試驗(yàn)的原則要求

保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的目的和結(jié)果判定保健食品毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)考慮的問(wèn)題第一部分：毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序第二十三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

一、主題內(nèi)容與適用范圍本程序規(guī)定了保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)的統(tǒng)一規(guī)程。本程序適用于保健食品的安全性評(píng)價(jià)。第二十四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

二、對(duì)受試物的要求

以單一已知化學(xué)成分為原料的受試物；含有多種原料的配方產(chǎn)品。提供原料來(lái)源、生產(chǎn)工藝、推薦人體攝入量、使用說(shuō)明書(shū)等有關(guān)資料。受試物應(yīng)是符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化產(chǎn)品，其組成成分、比例及純度應(yīng)與實(shí)際產(chǎn)品相同。第二十五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日三、對(duì)受試物處理的要求介質(zhì)的選擇人的可能攝入量較大的受試物處理袋泡茶類(lèi)受試物的處理膨脹系數(shù)較高的受試物處理液體保健食品濃縮含乙醇的保健食品含有人體必需營(yíng)養(yǎng)素等物質(zhì)的保健食品益生菌等微生物類(lèi)保健食品以雞蛋等食品為載體的特殊保健食品第二十六頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]51號(hào)文件1.《關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健食品原料管理的通知（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]51號(hào)）》

對(duì)保健食品涉及的各種原料物質(zhì)的管理與安全性評(píng)價(jià)作了詳細(xì)規(guī)定，將原料分為三類(lèi)：藥食同源（附件1）、可用于保健食品（附件2）、禁用于保健食品（附件3）。第二十七頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日《通知》的主要內(nèi)容申報(bào)保健食品中涉及的物品（或原料）是我國(guó)新研制、新發(fā)現(xiàn)、新引進(jìn)的無(wú)食用習(xí)慣或僅在個(gè)別地區(qū)有食用習(xí)慣的，按照《新資源食品衛(wèi)生管理辦法》的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。申報(bào)保健食品中涉及食品添加劑的，按照《食品添加劑衛(wèi)生管理辦法》的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。申報(bào)保健食品中涉及真菌、益生菌等物品（或原料）的，按照我部印發(fā)的《衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)真菌類(lèi)和益生菌類(lèi)保健食品評(píng)審規(guī)定的通知》（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2001]84號(hào)）執(zhí)行。第二十八頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

丁香、八角茴香、刀豆、小茴香、小薊、山藥、山楂、馬齒莧、烏梢蛇、烏梅、木瓜、火麻仁、代代花、玉竹、甘草、白芷、白果、白扁豆、白扁豆花、龍眼肉（桂圓）、決明子、百合、肉豆蔻、肉桂、余甘子、佛手、杏仁（甜、苦）、沙棘、牡蠣、芡實(shí)、花椒、赤小豆、阿膠、雞內(nèi)金、麥芽、昆布、棗（大棗、酸棗、黑棗）、羅漢果、郁李仁、金銀花、青果、魚(yú)腥草、姜（生姜、干姜）、枳子、枸杞子、梔子、砂仁、胖大海、茯苓、香櫞、香薷、桃仁、桑葉、桑椹、桔紅、桔梗、益智仁、荷葉、萊菔子、蓮子、高良姜、淡竹葉、淡豆豉、菊花、菊苣、黃芥子、黃精、紫蘇、紫蘇籽、葛根、黑芝麻、黑胡椒、槐米、槐花、蒲公英、蜂蜜、榧子、酸棗仁、鮮白茅根、鮮蘆根、蝮蛇、橘皮、薄荷、薏苡仁、薤白、覆盆子、藿香。87附件1既是食品又是藥品的物品名單第二十九頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

人參、人參葉、人參果、三七、土茯苓、大薊、女貞子、山茱萸、川牛膝、川貝母、川芎、馬鹿胎、馬鹿茸、馬鹿骨、丹參、五加皮、五味子、升麻、天門(mén)冬、天麻、太子參、巴戟天、木香、木賊、牛蒡子、牛蒡根、車(chē)前子、車(chē)前草、北沙參、平貝母、玄參、生地黃、生何首烏、白及、白術(shù)、白芍、白豆蔻、石決明、石斛（需提供可使用證明）、地骨皮、當(dāng)歸、竹茹、紅花、紅景天、西洋參、吳茱萸、懷牛膝、杜仲、杜仲葉、沙苑子、牡丹皮、蘆薈、蒼術(shù)、補(bǔ)骨脂、訶子、赤芍、遠(yuǎn)志、麥門(mén)冬、龜甲、佩蘭、側(cè)柏葉、制大黃、制何首烏、刺五加、刺玫果、澤蘭、澤瀉、玫瑰花、玫瑰茄、知母、羅布麻、苦丁茶、金蕎麥、金櫻子、青皮、厚樸、厚樸花、姜黃、枳殼、枳實(shí)、柏子仁、珍珠、絞股藍(lán)、胡蘆巴、茜草、蓽茇、韭菜子、首烏藤、香附、骨碎補(bǔ)、黨參、桑白皮、桑枝、浙貝母、益母草、積雪草、淫羊藿、菟絲子、野菊花、銀杏葉、黃芪、湖北貝母、番瀉葉、蛤蚧、越橘、槐實(shí)、蒲黃、蒺藜、蜂膠、酸角、墨旱蓮、熟大黃、熟地黃、鱉甲。

114附件2可用于保健食品的物品名單第三十頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

八角蓮、八里麻、千金子、土青木香、山莨菪、川烏、廣防己、馬桑葉、馬錢(qián)子、六角蓮、天仙子、巴豆、水銀、長(zhǎng)春花、甘遂、生天南星、生半夏、生白附子、生狼毒、白降丹、石蒜、關(guān)木通、農(nóng)吉痢、夾竹桃、朱砂、米殼（罌粟殼）、紅升丹、紅豆杉、紅茴香、紅粉、羊角拗、羊躑躅、麗江山慈姑、京大戟、昆明山海棠、河豚、鬧羊花、青娘蟲(chóng)、魚(yú)藤、洋地黃、洋金花、牽牛子、砒石（白砒、紅砒、砒霜）、草烏、香加皮（杠柳皮）、駱駝蓬、鬼臼、莽草、鐵棒槌、鈴蘭、雪上一枝蒿、黃花夾竹桃、斑蝥、硫磺、雄黃、雷公藤、顛茄、藜蘆、蟾酥。59附件3保健食品禁用物品名單第三十一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日保健食品原料藥食同源（附件1）可用于保健食品（附件2）？？？？禁用于保健食品（附件3）。第三十二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日以普通食品、衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)和允許用作保健食品的物質(zhì)以外的動(dòng)植物或動(dòng)植物提取物、微生物、化學(xué)合成物為原料生產(chǎn)的保健食品，應(yīng)對(duì)該原料和用該原料生產(chǎn)的保健食品分別進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。

該原料原則上按以下四種情況確定試驗(yàn)內(nèi)容。用該原料生產(chǎn)的保健食品原則上須進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行下一階段的毒性試驗(yàn)。？？？第三十三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日國(guó)內(nèi)外均無(wú)食用歷史的原料或成分:四個(gè)階段的毒性試驗(yàn)。僅在國(guó)外少數(shù)國(guó)家或國(guó)內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。未發(fā)現(xiàn)有毒或毒性甚微以及較大數(shù)量人群有長(zhǎng)期食用歷史，第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時(shí)第三階段毒性試驗(yàn)。國(guó)際組織已對(duì)其進(jìn)行過(guò)系統(tǒng)的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)，先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)。必要時(shí)第三階段毒性試驗(yàn)。在國(guó)外多個(gè)國(guó)家廣泛食用的原料，進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒性試驗(yàn)。不同保健食品選擇毒性試驗(yàn)原則第三十四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日2.益生菌類(lèi)及真菌類(lèi)保健食品評(píng)審規(guī)定

益生菌類(lèi)及真菌類(lèi)保健食品必須安全可靠，即食用安全，無(wú)不良反應(yīng)；生產(chǎn)用菌種的生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定；可用于保健食品的益生菌及真菌類(lèi)菌種名單由衛(wèi)生部公布。第三十五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日菌種來(lái)源及國(guó)內(nèi)外安全食用資料，菌種的安全性評(píng)價(jià)資料(包括毒力試驗(yàn))，對(duì)經(jīng)過(guò)馴化、誘變的菌種，應(yīng)提供馴化、誘變的方法及馴化劑、誘變劑等資料。菌種及其代謝產(chǎn)物必須無(wú)毒無(wú)害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有毒有害物質(zhì)和致敏性物質(zhì)?？股睾驼婢臋z測(cè)。在發(fā)酵過(guò)程中不得加入具有功效成分的動(dòng)植物及其它物質(zhì)。益生菌的主種子傳代不超過(guò)10代，工作種子傳代不得超過(guò)5代。經(jīng)過(guò)基因修飾的菌種不得用于保健食品。益生菌類(lèi)及真菌類(lèi)第三十六頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日可用于保健食品的真菌菌種名單可用于保健食品的益生菌菌種名單釀酒酵母兩岐雙岐桿菌產(chǎn)朊假絲酵母嬰兒雙岐桿菌乳酸克魯維酵母長(zhǎng)雙岐桿菌卡氏酵母短雙岐桿菌蝙蝠蛾擬青霉青春雙岐桿菌蝙蝠蛾被毛孢保加利亞乳桿菌靈芝嗜酸乳桿菌紫芝干酪乳桿菌干酪亞種松杉靈芝嗜熱鏈球菌紅曲霉紫紅曲霉益生菌、真菌菌種名單第三十七頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日《以酶制劑等為原料的保健食品評(píng)審規(guī)定》衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]100號(hào)可用于保健食品的真菌菌種名單可用于保健食品的益生菌菌種名單釀酒酵母兩岐雙岐桿菌產(chǎn)朊假絲酵母嬰兒雙岐桿菌乳酸克魯維酵母長(zhǎng)雙岐桿菌卡氏酵母短雙岐桿菌蝙蝠蛾擬青霉青春雙岐桿菌蝙蝠蛾被毛孢保加利亞乳桿菌靈芝嗜酸乳桿菌紫芝干酪乳桿菌干酪亞種松杉靈芝嗜熱鏈球菌紅曲霉紫紅曲霉第三十八頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日酶制劑①.菌種來(lái)源及衛(wèi)生部認(rèn)定的檢定單位出具的菌種檢定報(bào)告；②.菌種的毒力試驗(yàn)報(bào)告；③.菌種的安全性評(píng)價(jià)報(bào)告；④.國(guó)內(nèi)外該菌種使用于食品生產(chǎn)的文獻(xiàn)資料；⑤.發(fā)酵終產(chǎn)物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（包括純度、雜質(zhì)成分及含量）?！兑悦钢苿┑葹樵系谋＝∈称吩u(píng)審規(guī)定》衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2002]100號(hào)第三十九頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日①.提供明確的產(chǎn)品化學(xué)結(jié)構(gòu)式、物理化學(xué)性質(zhì)，配 體與金屬離子之比、游離元素和總元素之比；②.提供氨基酸螯合物定性、定量的檢測(cè)方法（包括 原料和產(chǎn)品）以及衛(wèi)生部認(rèn)定的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的 驗(yàn)證報(bào)告；③.毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)資料④.國(guó)內(nèi)外該氨基酸螯合物用于食品生產(chǎn)的文獻(xiàn)資料。

氨基酸螯合物第四十頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日4.對(duì)申報(bào)某些保健功能的食品進(jìn)行檢測(cè)的興奮劑主要有七大類(lèi)：雄性激素(類(lèi)固醇)、麻醉劑(可待因、杜冷丁等)、β-2受體阻斷劑(心得安、心得舒等)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑(士的寧、芬氟拉明、麻黃素、咖啡因等)、利尿劑(速尿、利尿酸、安體舒通等)、β-激動(dòng)劑(瘦肉精等)、肽類(lèi)激素(生長(zhǎng)激素、紅細(xì)胞生成素等)。

興奮劑檢測(cè)第四十一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日第二部分：毒理學(xué)評(píng)價(jià)方法四、試驗(yàn)的四個(gè)階段和內(nèi)容第一階段：急性毒性試驗(yàn)第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)，30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)：90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)第四階段：慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）

第四十二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日遺傳毒性試驗(yàn)：Ames試驗(yàn)或V79/HGPRT基因突變?cè)囼?yàn)TK基因突變?cè)囼?yàn)骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)或哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)小鼠精子畸形分析或睪丸染色體畸變分析其它備選遺傳毒性試驗(yàn)：顯性致死試驗(yàn)、果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)、非程序性DNA合成實(shí)驗(yàn)第四十三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求以衛(wèi)生部規(guī)定允許用于保健食品的動(dòng)植物或動(dòng)植物提取物（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［2002］51號(hào)附件2）或微生物（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［2001］84號(hào)附件2和5）為原料生產(chǎn)的保健食品，應(yīng)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)。第四十四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［2002］51號(hào)附件1）以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式與傳統(tǒng)食用方式相同的保健食品，一般不要求進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)。用水提物配制生產(chǎn)的保健食品，如服用量為常規(guī)用量，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。如服用量大于常規(guī)用量時(shí)，需進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。用水提以外的工藝生產(chǎn)的保健食品，服用量為常規(guī)用量時(shí)，應(yīng)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)。如服用量大于常規(guī)用量時(shí)，需增加30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)。第四十五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則要求營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑用已列入營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑名單的營(yíng)養(yǎng)素的化合物為原料生產(chǎn)的保健食品，如其原料來(lái)源、生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量均符合國(guó)家有關(guān)要求，一般不要求進(jìn)行毒性試驗(yàn)。第四十六頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日三。毒理學(xué)試驗(yàn)第四十七頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

各項(xiàng)毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的判定

急性毒性試驗(yàn)如LD50小于人的可能攝入量的100倍，則放棄該受試物用于保健食品。如LD50大于或等于100倍者，則可考慮進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。如動(dòng)物未出現(xiàn)死亡的劑量大于或等于10g/kgBW（涵蓋人體推薦量的100倍），則可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。對(duì)人的可能攝入量較大和其它一些特殊原料的保健食品，按最大耐受量法給予最大劑量動(dòng)物未出現(xiàn)死亡，也可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)。第四十八頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果的判定三項(xiàng)試驗(yàn),體外或體內(nèi)有一項(xiàng)或以上試驗(yàn)陽(yáng)性，放棄該受試物用于保健食品。如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則進(jìn)入下一步的毒性試驗(yàn)。第四十九頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

3.30天喂養(yǎng)試驗(yàn)最大未觀察到有害作用劑量大于或等于人的可能攝入量的100倍，可進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。特殊原料：在最大灌胃劑量組或在飼料中的最大摻入量劑量組未發(fā)現(xiàn)有毒性作用，可進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)[至少大于或等于人的可能攝入量的70倍]。特殊功能的保健食品應(yīng)進(jìn)行具體分析。第五十頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)外觀┐亞慢性、慢性生長(zhǎng)發(fā)育(體重)├毒性試驗(yàn)體液行為│過(guò)程中?血液學(xué)毒性體征┘↓?血清生化學(xué)活殺解剖?

尿分析最終體重┐↓臟器濕重├器官/組織生物學(xué)標(biāo)志臟/體比┘↓?

酶固定/染色?內(nèi)源性成分組織病理學(xué)?

膽汁、尿第五十一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日大鼠·致畸試驗(yàn)雄鼠×雌鼠陰栓

└┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┤（天）孕07←─染毒─→1620

處死檢查活胎、吸收胎、早死胎、晚死胎

┌─────┼─────┐大鼠外觀畸形骨骼畸形內(nèi)臟畸形第五十二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

4.致畸試驗(yàn)結(jié)果的判定

以LD50或30天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計(jì)的受試物各劑量組，如果在任何一個(gè)劑量組觀察到受試物的致畸作用，則應(yīng)放棄該受試物用于保健食品，如果觀察到有胚胎毒性作用，則應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的繁殖試驗(yàn)。第五十三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

其它毒理學(xué)試驗(yàn)

5.90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)最大未觀察到有害作用劑量大于人的可能攝入量的100倍進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。國(guó)內(nèi)外均無(wú)食用歷史的原料或成分：最大未觀察到有害作用劑量小于或等于人的可能攝入量的100倍者表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。國(guó)外少數(shù)國(guó)家或國(guó)內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分：最大未觀察到有害作用劑量大于100倍而小于300倍者，應(yīng)進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)。大于或等于300倍者則不必進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，可進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。第五十四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日其它毒理學(xué)試驗(yàn)

6.慢性毒性：最大未觀察到有害作用劑量小于或等于人的可能攝入量的50倍者，表示毒性較強(qiáng)，應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。未觀察到有害作用劑量大于50倍而小于100倍者，經(jīng)安全性評(píng)價(jià)后，決定該受試物是否可用于保健食品。最大未觀察到有害作用劑量大于或等于100倍者，則可考慮允許用于保健食品。第五十五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日其它毒理學(xué)試驗(yàn)

7.致癌試驗(yàn)根據(jù)致癌試驗(yàn)所得的腫瘤發(fā)生率、潛伏期和多發(fā)性等進(jìn)行致癌試驗(yàn)判定的原則是：腫瘤只發(fā)生在試驗(yàn)組動(dòng)物，對(duì)照組中無(wú)腫瘤發(fā)生。試驗(yàn)組與對(duì)照組動(dòng)物均發(fā)生腫瘤，但試驗(yàn)組發(fā)生率高。試驗(yàn)組動(dòng)物中多發(fā)性腫瘤明顯，對(duì)照組中無(wú)多發(fā)性腫瘤，或只是少數(shù)動(dòng)物有多發(fā)性腫瘤。試驗(yàn)組與對(duì)照組動(dòng)物腫瘤發(fā)生率雖無(wú)明顯差異，但試驗(yàn)組中發(fā)生時(shí)間較早。第五十六頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日安全性評(píng)價(jià)考慮的因素試驗(yàn)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義：生理作用與毒性作用：時(shí)間-毒性效應(yīng)關(guān)系：特殊人群和敏感人群：人的可能攝入量較大的保健食品：含乙醇的保健食品：動(dòng)物年齡對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響安全系數(shù)人體資料綜合評(píng)價(jià)保健食品安全性的重新評(píng)價(jià)：必要時(shí)第五十七頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日四、安全評(píng)價(jià)工作中的有關(guān)問(wèn)題原料的安全性是建立在長(zhǎng)期食用、藥用的經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)的全面的毒理學(xué)研究資料尚不完整，尤其是改變了傳統(tǒng)的食用方式時(shí)。其安全性應(yīng)高度關(guān)注。應(yīng)注重原料的安全評(píng)估，特別是三致和慢性毒性。加強(qiáng)原料中有害成分的鑒定與毒性研究。對(duì)配伍模式進(jìn)行毒性研究。有益作用與有害作用的權(quán)衡與判定。方法學(xué)問(wèn)題第五十八頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日保健食品含有功效成分，采用一套方法難以評(píng)價(jià)結(jié)構(gòu)和功能不同的物質(zhì)，傳統(tǒng)的毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)指標(biāo)有一定局限性，保健食品的安全評(píng)價(jià)應(yīng)引入個(gè)案評(píng)估的原則，了解其作用的機(jī)制將有助于安全評(píng)價(jià)。第五十九頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日安全系數(shù)化學(xué)物：純度清楚，沒(méi)有特別的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，人群暴露量較低，確定對(duì)健康不良影響采用給予動(dòng)物不同劑量水平來(lái)估計(jì)最大未觀察有害作用劑量，從而應(yīng)用適當(dāng)?shù)陌踩禂?shù)確定安全攝入量。方法學(xué)問(wèn)題第六十頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日整體食物：各種化合物的復(fù)雜的混合體，成份和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值變化大，體積大易產(chǎn)生飽腹，給與動(dòng)物的量通常只是人體膳食含量的幾倍，采用的膳食模式是否營(yíng)養(yǎng)均衡，是否引起營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題。因?yàn)榉鞘茉囄锉旧碇苯右鸬牟涣挤磻?yīng)需要避免，因此，采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)試整體食物的潛在不良作用是很困難的。實(shí)質(zhì)等同原則可用于對(duì)其進(jìn)行安全評(píng)價(jià)。方法學(xué)問(wèn)題第六十一頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日

統(tǒng)計(jì)學(xué)意義生物學(xué)意義無(wú)有無(wú)ⅠⅢ有ⅡⅣ毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的

統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義

第Ⅰ和第Ⅳ種情況最為常見(jiàn)?！鸾y(tǒng)計(jì)學(xué)意義→生物學(xué)意義→損害效應(yīng)/非損害效應(yīng)第六十二頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義○第Ⅲ種情況是有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義但無(wú)生物學(xué)意義，此種情況相當(dāng)見(jiàn)。○在判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)意義時(shí)，有無(wú)劑量-反應(yīng)關(guān)系是關(guān)鍵?！鹩薪y(tǒng)計(jì)學(xué)意義但無(wú)生物學(xué)意義的情況，更常見(jiàn)的原因是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不良所致。○第Ⅱ種情況是具有生物學(xué)意義但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能是因?yàn)樵撌录陌l(fā)生是極端罕見(jiàn)的。

第六十三頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義○在評(píng)價(jià)毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，要綜合評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義○一般來(lái)說(shuō)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義是具有生物學(xué)意義的必要條件之一?！鹫_地利用統(tǒng)計(jì)學(xué)假設(shè)檢驗(yàn)的結(jié)果有助于確定實(shí)驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)關(guān)聯(lián)。第六十四頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日判斷生物學(xué)意義的步驟（1）縱向比較，此參數(shù)的改變有無(wú)劑量-反應(yīng)關(guān)系。（2）橫向比較，此參數(shù)的改變是否伴有其它相關(guān)參數(shù)的改變。（3）與歷史性對(duì)照比較，同時(shí)進(jìn)行的陰性對(duì)照應(yīng)在歷史性對(duì)照的均數(shù)±3SD范圍之內(nèi)，否則應(yīng)重新試驗(yàn)。觀察值與對(duì)照組比較，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性（P<0.05），其數(shù)值不在正常參考值范圍之內(nèi)屬于有害作用。第六十五頁(yè)，共七十五頁(yè)，2022年，8月28日統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義○應(yīng)重視在染毒早期可能出現(xiàn)一過(guò)性改變，如有劑量-反應(yīng)關(guān)系可能為機(jī)體的適應(yīng)，應(yīng)分析其是損害作用。否則，可能無(wú)生物學(xué)意義。○如體重改變與對(duì)照組比較差別有顯著性，但改變不超過(guò)