地貧篩查技術(shù)規(guī)范

附件1：地中海貧血產(chǎn)前診斷技術(shù)規(guī)范地中海貧血(以下簡(jiǎn)稱地貧)是一種由珠蛋白基因缺失或突變導(dǎo)致肽鏈合成障礙而引起的溶血性貧血，是我省發(fā)病率最高的人類單基因遺傳病之一。為規(guī)范我省地貧產(chǎn)前診斷技術(shù)的應(yīng)用，特制定本技術(shù)規(guī)范。一、地貧產(chǎn)前篩查（一）基本要求1開(kāi)展地貧產(chǎn)前篩查技術(shù)服務(wù)的醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)（以下簡(jiǎn)稱產(chǎn)前篩查機(jī)構(gòu)）合《廣東省開(kāi)展產(chǎn)前篩查技術(shù)服務(wù)的基本條件》；2、地貧產(chǎn)前篩查機(jī)構(gòu)應(yīng)與具有產(chǎn)前診斷技術(shù)服務(wù)資質(zhì)的醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)（以下簡(jiǎn)稱產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)）建立工作聯(lián)系，并納入產(chǎn)前診斷質(zhì)量控制體系。產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)應(yīng)對(duì)產(chǎn)前篩查機(jī)構(gòu)進(jìn)行技術(shù)指導(dǎo)和質(zhì)量管理。（二）技術(shù)規(guī)范。1、地貧產(chǎn)前初篩。在地貧高發(fā)地區(qū)，凡未做過(guò)地貧篩查的孕婦應(yīng)建議其進(jìn)行地貧篩查。地貧的初步篩查應(yīng)推廣使用血液紅細(xì)胞指數(shù)(MCV,MCH)等適宜技術(shù)。對(duì)紅細(xì)胞指數(shù)下降的，應(yīng)書面建議進(jìn)一步做地貧產(chǎn)前篩查，并按規(guī)定轉(zhuǎn)診。不具備紅細(xì)胞指數(shù)檢查條件的醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)，應(yīng)書面建議當(dāng)事人到有條件的醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)進(jìn)行該項(xiàng)目檢查，或采用其他方法進(jìn)行篩查。2、地貧產(chǎn)前篩查。對(duì)產(chǎn)前檢查和血液紅細(xì)胞指數(shù)初篩發(fā)現(xiàn)的地貧可疑孕婦，應(yīng)采用血紅蛋白（Hb）電泳技術(shù)或/和高效液相色譜(HPLC)技術(shù)作進(jìn)一步篩查，對(duì)檢測(cè)結(jié)果為HbA2降低或臨界值的，則再作血清鐵測(cè)定。Hb提供地貧相關(guān)的產(chǎn)前咨詢及必要的轉(zhuǎn)診服務(wù)。3、產(chǎn)前篩查報(bào)告。產(chǎn)前篩查報(bào)告包括實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果和遺傳咨詢指導(dǎo)意見(jiàn)兩部分。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果應(yīng)包括產(chǎn)前篩查所選用的試驗(yàn)名稱、參考范圍、測(cè)定結(jié)果。遺傳咨詢指導(dǎo)應(yīng)包括是否存在α-或β-地貧的可能性及相應(yīng)的進(jìn)一步檢查建議等。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果應(yīng)由經(jīng)培訓(xùn)的專業(yè)技術(shù)人員或?qū)嶒?yàn)室主管復(fù)核后，才能簽發(fā)。產(chǎn)前篩查報(bào)告應(yīng)當(dāng)由副高以上職稱的產(chǎn)前篩查技術(shù)培訓(xùn)合格的執(zhí)業(yè)醫(yī)師復(fù)核后，才能簽發(fā)。產(chǎn)前篩查報(bào)告由2名以上經(jīng)培訓(xùn)的執(zhí)業(yè)醫(yī)師簽發(fā)。4、產(chǎn)前篩查后高風(fēng)險(xiǎn)對(duì)象的處理原則。指導(dǎo)；是否實(shí)施產(chǎn)前診斷，應(yīng)嚴(yán)格遵循知情選擇原則。處理。對(duì)產(chǎn)前篩查結(jié)果為高風(fēng)險(xiǎn)的孕婦應(yīng)進(jìn)行隨訪。5、產(chǎn)前篩查質(zhì)量控制體系。合《廣東省開(kāi)展產(chǎn)前篩查技術(shù)服務(wù)的基本條件》；部門準(zhǔn)許的臨床生化檢驗(yàn)用正式產(chǎn)品(含國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口試劑產(chǎn)品)。購(gòu)置試劑要記錄如下信息：購(gòu)買日期，批號(hào)，數(shù)量，有效期，驗(yàn)收人，保存條件，存放地點(diǎn)等;質(zhì)量控制:考評(píng)制度。并接受與其建立工作聯(lián)系的產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)的技術(shù)指導(dǎo)和質(zhì)量控制。二、地貧產(chǎn)前診斷（一）基本要求。1術(shù)服務(wù)的基本條件》;21人員應(yīng)接受過(guò)規(guī)范的技術(shù)培訓(xùn)并取得技術(shù)合格證。（二）技術(shù)規(guī)范。1、主要技術(shù)操作及其技術(shù)規(guī)范。實(shí)施單位可根據(jù)自身?xiàng)l件采取以下相應(yīng)技術(shù)：DNADNA從胎兒的羊水細(xì)胞、血細(xì)胞或絨毛膜組織，或從胎兒雙親和先證者的外周血（2-4ml）DNADNA樣品需嚴(yán)格記錄，保證測(cè)試用量和備份保存。α-α-地貧（主要有--SEA、-α3.7和-α4.2三種類型）PCRα-地貧（HbConstantSpring[α2，CD142TAA→CAA],HbQuongSze[α2,CD125CTG→CCG]等六種類型）的分子診斷，推薦采用反向點(diǎn)雜交(RDB)技術(shù)。在進(jìn)行胎兒水腫綜合征高風(fēng)險(xiǎn)胎兒的產(chǎn)前診斷時(shí),有必要，可采用其它分子診斷技術(shù)進(jìn)一步確診。此外，還可采用以下二種非分子診斷的其他技術(shù)：（A）HbHbBart’sHbH含量輔助診斷；（B）用胎兒超聲診斷測(cè)定心胸比值等跟蹤輔助診斷。β-β-地貧的分子診斷,RDB技β-地貧突變：CDs41-42(-TCTT)，IVS-2-654(C>T)，TATAbox-28(A>G)，CD17(A>T)，CDs71-72(+A)，CD26(G>A)，IVS-1-5(G>C),TATAbox-29(A>G),CD43(G>T)和CDs27-28(+C)。對(duì)于有條件的實(shí)驗(yàn)室，也可采用其它具有嚴(yán)格質(zhì)量控制體系的分子診斷技術(shù)進(jìn)行β-地貧的分子診斷。α-地貧基因（-α3.7和-α4.2）也α-地貧類型，-α3.7和-α4.2這二種靜止型地貧基因與東南亞型缺失—SEAHbH病。HbH病高風(fēng)險(xiǎn)家庭的遺傳咨詢和診斷是不可忽視。由于在成人血樣中缺乏可靠的針對(duì)-α3.7和-α4.2PCRDNA分子診斷技術(shù)進(jìn)行產(chǎn)前篩查。其他類型血紅蛋白病的診斷:目前已知的本地區(qū)其他類型血紅蛋白病主要βd-HPFHβ-珠蛋白基因大片段缺失所PCRHb（HbQHbE）α-β-DNA序列分析技術(shù)檢測(cè)樣品的基α-β-地貧的新突變發(fā)現(xiàn)時(shí)，可根據(jù)技術(shù)研究進(jìn)展增補(bǔ)適宜的診斷技術(shù)。2、地貧產(chǎn)前診斷指征和時(shí)機(jī)。(1)地貧產(chǎn)前診斷指征：①曾生育過(guò)重型或中間型α或β地貧患兒的夫婦；ααβα地貧攜帶者；③夫婦雙方均為β地貧攜帶者。(2)產(chǎn)前診斷的時(shí)機(jī):248周～11周進(jìn)16周～2118周24周進(jìn)行。3、醫(yī)學(xué)診斷報(bào)告。驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果應(yīng)包括所采用的技術(shù)、檢測(cè)的范圍、α-β-(βd-HPFH)突變基因型。遺傳咨詢指導(dǎo)應(yīng)包括對(duì)診斷結(jié)果的醫(yī)學(xué)指導(dǎo)意見(jiàn)，以及對(duì)結(jié)果不確定性的解釋等。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果由實(shí)驗(yàn)室操作者填寫并簽名、經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主管復(fù)核后才能發(fā)出。產(chǎn)前診斷報(bào)告由2名以上經(jīng)資格認(rèn)定的執(zhí)業(yè)醫(yī)師簽發(fā)。4、地貧遺傳咨詢。地貧產(chǎn)前診斷須在當(dāng)事人接受遺傳咨詢和知情同意的情況下實(shí)施。對(duì)胎兒確診為重型α-或β-地貧的，應(yīng)由遺傳咨詢醫(yī)師向當(dāng)事人提供遺傳咨詢，在當(dāng)事人知情同意和自主選擇的情況下，可以終止妊?。5、地貧產(chǎn)前診斷隨訪。對(duì)進(jìn)行了產(chǎn)前診斷的孕婦應(yīng)進(jìn)行隨訪。在條件許可時(shí)，應(yīng)盡可能采集到胎兒血樣或組織,用于進(jìn)一步驗(yàn)證產(chǎn)前診斷的結(jié)果。6、質(zhì)量控制體系。貧分子診斷實(shí)驗(yàn)室必須取得相應(yīng)的從業(yè)技術(shù)資質(zhì)；許的臨床生化檢驗(yàn)用正式產(chǎn)品(含國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口試劑產(chǎn)品)。購(gòu)置試劑要記錄如下信息：購(gòu)買日期，批號(hào)，數(shù)量，有效期，驗(yàn)收人，保存條件，存放地點(diǎn)信息：購(gòu)買日期，批號(hào)，數(shù)量，有效期，驗(yàn)收人，保存條件，存放地點(diǎn)等；(3)質(zhì)量控制體系及其制度：分子診斷的操作須在符合規(guī)定的分子診斷實(shí)驗(yàn)PCR擴(kuò)增試驗(yàn)的各項(xiàng)防污染規(guī)定，必要時(shí)，需采用基于微衛(wèi)星分析的分子診