探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化

探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化單細胞真核生物,異養(yǎng)生物既能進行出芽生殖又能進行有性生殖，在氧氣充足的環(huán)境中主要以出芽生殖的方式快速增殖；生長的最適宜溫度在20℃-30℃之間，最簡單的來源是使用食品類商店出售的用于發(fā)面或制酒的高活性干酵母作為菌種酵母菌的生長周期短，增殖速度快，是良好實驗材料?！窘湍妇浚禾骄拷湍妇暮粑绞?有氧呼吸和無氧呼吸)酶C6H12O6+6H2O+6O212H2O+6CO2+能量(大量)C6H12O6酶2C2H5OH(酒精)＋2CO2＋能量(少量)1．酵母菌生長周期短，增殖速度快且世代間不重疊，在含糖的液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個封閉容器內的酵母菌種群，通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。2．養(yǎng)分、氧氣、溫度和代謝廢物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素。3．利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法(抽樣檢測法)，一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)目。一、實驗原理【血球計數(shù)板】：⑴.計數(shù)室規(guī)格：

微生物計數(shù)室1mm1mm⑵.計數(shù)室大小：

⑷.計數(shù)方法:(以25×16為例)⑸.計算公式:(以25×16為例)⑶.使用方法計數(shù)5個中方格共80個小方格的酵母菌數(shù)每mL菌數(shù)＝×400×104×稀釋倍數(shù)80個小方格的菌數(shù)80長：1mm寬：1mm高：0.1mm體積：

mm3

mL10-40.11.取相同試管若干支，分別加入5mL肉湯培養(yǎng)液(或馬鈴薯培養(yǎng)液)，塞上棉塞。2.用高壓鍋進行高壓蒸氣滅菌后，冷卻至室溫，分別標記1、2、3等。3.將酵母菌母液分別加入試管各5mL，搖勻后用血球計數(shù)板計數(shù)起始酵母菌個數(shù)，做好記錄。4.將各試管送進恒溫箱28℃下培養(yǎng)7天。5.每天同一時間各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)(從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，應將試管輕輕振蕩幾次)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。除去培養(yǎng)液中的雜菌防止培養(yǎng)液溫度過高殺死酵母菌二、方法步驟使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻在恒定體積的培養(yǎng)液中培養(yǎng)酵母菌，定期取樣測定培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量，結構如圖。⑴.曲線的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3各階段呈＿＿＿＿型增長，原因是？⑵.曲線的Ⅳ階段種群數(shù)量下降，原因是？培養(yǎng)時間種群數(shù)量S培養(yǎng)液體積是恒定的，即環(huán)境資源是有限的營養(yǎng)物質的消耗，有害代謝產物的積累，PH的降低等造成種群的出生率＜死亡率三、結果分析活菌數(shù)計數(shù)應重復3次，取平均值1.從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，應將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？2.對于壓在小方格界線上的酵母菌，應當怎樣計數(shù)？3.如果一個小方格內酵母菌過多，難以數(shù)清，應當采取怎樣的措施？4.本實驗需要設置對照？如果需要,請討論對照組應怎樣設計和操作，如果不需要，請說明理由。5.血球計數(shù)板使用后，如何清洗？浸泡后流水沖洗四、實驗討論使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角適當稀釋后再計數(shù)不需要，不同采樣時間形成前后自身對照四、實驗討論6.酵母菌能夠作為良好的實驗材料的原因？7.利用血球計數(shù)板對酵母菌進行計數(shù)的方法？具體操作？8.如果想只計數(shù)活菌數(shù)，可用臺盼藍或亞甲基藍染色，被染上藍色的(即死菌)不計數(shù)。為何死亡酵母會被染成藍色？抽樣檢測法----①在計數(shù)室上加蓋蓋玻片；②用吸管吸取一滴酵母菌懸液滴于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸??；③稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室底部，顯微鏡下計數(shù)。生長周期短、增殖速度快、世代間不重疊死酵母的細胞膜失去了選擇透過性，臺盼藍可以通過細胞膜1.種群在理想環(huán)境中，呈“J”型曲線增長（圖中曲線甲）；在有環(huán)境阻力的條件下，呈“S”型曲線增長（圖中曲線乙）。下列有關種群增長曲線的敘述正確的是（）A.K值是環(huán)境的最大容納量，不受