期末復(fù)習(xí)要點(diǎn)總結(jié)-生物材料評(píng)價(jià)

期末復(fù)習(xí)要點(diǎn)總結(jié)-生物材料評(píng)價(jià)一、生物材料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)答：1:評(píng)價(jià)與試驗(yàn)2:動(dòng)物保護(hù)要求3：遺傳毒性、致癌性和生殖毒性試驗(yàn)4:與血液相互作用試驗(yàn)選擇5:體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)6：植入后局部反應(yīng)試驗(yàn)7:環(huán)氧乙烷滅菌殘留量8:生物學(xué)試驗(yàn)參照材料的選擇與定量指南9:潛在降解產(chǎn)物的定性和定量框架10:刺激與致敏試驗(yàn)11:全身毒性試驗(yàn)12:樣品制備與參照樣品13:聚合物降解產(chǎn)物的定性與定量14:陶瓷降解產(chǎn)物的定性與定量15:金屬與合金降解產(chǎn)物的定性與定量16:降解產(chǎn)物與可瀝濾物毒性動(dòng)力學(xué)研究設(shè)計(jì)17:可瀝濾物允許限量的設(shè)計(jì)18:材料的化學(xué)定性（貌似這個(gè)是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)）（1）基本評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞毒性試驗(yàn)、致敏試驗(yàn)、刺激試驗(yàn)、急性毒性試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、熱源試驗(yàn)、遺傳毒性試驗(yàn)、植入試驗(yàn)、血液相容性試驗(yàn)；（2）補(bǔ)充評(píng)價(jià)的生物學(xué)試驗(yàn)：亞急性毒性試驗(yàn)、致癌試驗(yàn)、生殖和發(fā)育毒性試驗(yàn)、體內(nèi)降解試驗(yàn)。二、血液相容性評(píng)價(jià)答：凝血:材料、器械表面與血液接觸數(shù)秒鐘內(nèi)，血漿蛋白首先吸附于材料的表面，隨后血小板在材料表面粘附、聚集、變形，形成細(xì)小血栓，同時(shí)血液內(nèi)一系列凝血因子相繼被激活，形成更大的血栓，最后產(chǎn)生紅血栓和凝血。體外試驗(yàn)：將血液或血液成分離體后、暴露于不同材料，觀(guān)察材料或血液的變化。主要包括：全血和血液凝固實(shí)驗(yàn)測(cè)定，血漿蛋白吸附實(shí)驗(yàn)，血小板粘附實(shí)驗(yàn)和血栓形成實(shí)驗(yàn)半體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：動(dòng)物體流出的血液直接與實(shí)驗(yàn)材料接觸，實(shí)驗(yàn)材料位于動(dòng)物體外，動(dòng)物體內(nèi)流出的血可直接進(jìn)入試驗(yàn)盒或管，在分析血液變化后將其廢棄或通過(guò)動(dòng)物靜脈，將經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)材料的血液流回動(dòng)物體內(nèi)。多采用同位素標(biāo)記血液成分并測(cè)定這些成分粘附在材料表面的變動(dòng)情況來(lái)評(píng)價(jià)材料的血液相容性。體內(nèi)：將材料直接植入動(dòng)物體內(nèi)的心血管體系。溶血：紅細(xì)胞破裂,血紅蛋白逸出稱(chēng)紅細(xì)胞溶解。測(cè)試原理：紅細(xì)胞被溶血?jiǎng)┢茐?，血紅蛋白中的Fe2+被高鐵氰化鉀氧化為Fe3+,形成高鐵血紅蛋白（Hi），與氰化鉀提供的氰根離子結(jié)合生成穩(wěn)定的化合物氰化高鐵血紅蛋白（HiCN），在波長(zhǎng)540nm處有吸收峰，用分光光度計(jì)測(cè)定你該處的吸光度，轉(zhuǎn)化成每升血液中的血紅蛋白濃度，用HiCN參考液進(jìn)行比色法測(cè)定制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)供查閱.溶血率：材料組-陰性對(duì)照組/陽(yáng)性對(duì)照組-陰性對(duì)照組（小于5%合格）陽(yáng)性對(duì)照：蒸餾水；陰性對(duì)照：生理鹽水。三、組織相容性1、MTT（細(xì)胞生長(zhǎng)抑制法）活細(xì)胞線(xiàn)粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶物甲H（Formazan）,并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）或鹽酸-異丙醇溶解細(xì)胞中的紫色結(jié)晶物。酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀在490或570nm處測(cè)定溶液的吸光值OD（opticaldensity）。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶物形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。2、熱原試驗(yàn)：熱原：引入或釋放到機(jī)體內(nèi)后能引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的物質(zhì)。它包括細(xì)菌性熱原、內(nèi)源性高分子熱原、內(nèi)源性低分子熱原及化學(xué)熱原等。家兔熱原試驗(yàn)：取適用的家兔3只，測(cè)定其正常體溫后15分鐘以?xún)?nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量（10ml/kg）并溫?zé)嶂良s38°C的供試品溶液，然后每隔30分鐘按前法測(cè)量其體溫1次，共測(cè)6次，以6次體溫中最高的一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高溫度。如3只家兔中有1只體溫升高了0.6C或0.6C以上，或3只家兔體溫升高均低于0.6C,但體溫升高的總和達(dá)1.3C或1.3C以上，應(yīng)另取5只家兔復(fù)試，檢查方法同上。結(jié)果判斷：在初試的3只家兔中，體溫升高0.6C或0.6C以上的家兔超過(guò)1只；或在復(fù)試的5只家兔中，體溫升高0.6C或0.6C以上的家兔超過(guò)1只；或在初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和超過(guò)3.5C，均判為供試品的熱原檢查不符合規(guī)定在初試的3只家兔中，體溫升高均低于0.6C，并且3只家兔體溫升高總和低于1.3C；或在復(fù)試的5只家兔中，體溫升高0.6C或0.6C以上的家兔不超過(guò)1只，并且初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和為3.5C或3.5C以下，均判為供試品的熱原檢查符合規(guī)定。四、可降解高分子答：性能變化：形貌（TEM、SEM）、結(jié)構(gòu)（SEM、TEM）、分子量（GPC、粘度法）、力學(xué)性能（萬(wàn)能電子試驗(yàn)機(jī)）玻璃化轉(zhuǎn)變溫度（DSC）、分子組成（紅外、核磁）降解影響因素：直鏈（易）支鏈（交聯(lián)）-難柔軟（易）非晶（易）結(jié)晶（難）相對(duì)分子質(zhì)量低（易）脂肪族（易）芳香族（難）親水（容易）疏水難降解分為體內(nèi)降解（酶催化）、體外降解（酸催化、堿催化、酶催化）親水高分子：聚乙二醇、聚丙烯酸、尼龍、聚醚、聚丙烯酰胺疏水高分子：聚碳酸酯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、硅橡膠五、細(xì)胞毒性試驗(yàn)：1、直接法（1）直接接觸法：該法是形態(tài)不規(guī)則的試樣（如金屬粉末、油脂類(lèi)材料）等與細(xì)胞一起放入培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)有溶出物時(shí)試樣周?chē)募?xì)胞就會(huì)受到影響。（2）浸提液：浸出液法:試樣投入培養(yǎng)液或蒸餾水中適當(dāng)條件下進(jìn)行浸泡，浸泡液加在含有細(xì)胞的培養(yǎng)皿或試管中繼續(xù)培養(yǎng)，觀(guān)察溶出物對(duì)細(xì)胞的影響。2、間接法（1）瓊脂覆蓋法：將含有培養(yǎng)液的瓊層平鋪在有單層細(xì)胞的培養(yǎng)皿中，再在固化的瓊脂層上放上試樣進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。當(dāng)溶出物分子量小，易溶于水，毒性發(fā)現(xiàn)早且較強(qiáng)（2）分子濾過(guò)法：在單層細(xì)胞上覆蓋一層微孔濾膜，將試樣材料放在濾膜上，使材料毒性在成份通過(guò)濾膜作用于其下的細(xì)胞。由于濾膜微孔直徑較?。ㄈ?.45um），適合評(píng)價(jià)毒性成份分子量小的材料的相容性.六、提高材料的血液相容性：（1）使材料表面帶上負(fù)電荷的基團(tuán)（2）高分子材料的表面接枝改性（3）制備具有微相分離結(jié)構(gòu)的材料（4）高分子材料的肝素化（5）材料表面?zhèn)蝺?nèi)膜化七、組織相容性影響因素：①材料本身的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)（如微相結(jié)構(gòu)、親水性、疏水性、電荷等）材料中可滲出的化學(xué)成分（如殘留單體、雜質(zhì)、低聚物、添加劑等）降解或代謝產(chǎn)物等。植入材料的幾何形狀也可能引起組織反應(yīng)。八、致突變?cè)囼?yàn)：1、微核試驗(yàn)：用于測(cè)試能干擾細(xì)胞有絲分裂的物質(zhì)的致突變性；微核：真核類(lèi)生物細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu)，是染色體畸變?cè)陂g期細(xì)胞中的一種表現(xiàn)形式。微核往往是各種理化因子，如輻射、化學(xué)藥劑對(duì)分裂細(xì)胞作用而產(chǎn)生的。2、細(xì)菌回復(fù)突