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基因工程及應(yīng)用
隨著社會(huì)的發(fā)展,人們的需求越來(lái)越趨于多樣化,人們希望按照自己的意圖改變物種的基因,以期獲得新的性狀、得到新的生物產(chǎn)品。經(jīng)典遺傳學(xué)主要通過(guò)自然選育來(lái)挑選已發(fā)生自發(fā)突變的新變種;通過(guò)用物化因子(如輻射、藥物處理等)來(lái)進(jìn)行人工誘變,得到所需的性狀;通過(guò)細(xì)胞雜交使得某種突變性狀得以顯現(xiàn),從而尋找新類(lèi)型。但所有這些,都具有相當(dāng)大的偶然性,效率不高,難以真正看到基因。由于經(jīng)典遺傳學(xué)所研究的基因不能離開(kāi)染色體而獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制,所以基因拷貝數(shù)的增加是有限的;由于染色體減數(shù)分裂受同源性的支配,遠(yuǎn)緣雜交難以實(shí)現(xiàn)。人們強(qiáng)烈希望新的育種方式出現(xiàn)。在疾病防治方面,有許多嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的病癥,如遺傳性疾病、心血管病、惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病等,病因還不太清楚。解決這些問(wèn)題,必需依賴(lài)于生命科技甚至整個(gè)科學(xué)技術(shù)的革命.
在上世紀(jì)中下葉,科學(xué)進(jìn)步的機(jī)遇終于到來(lái),這就是分子生物學(xué)理論的創(chuàng)立和突破性進(jìn)展,特別是基因工程(遺傳工程)-----DNA體外重組技術(shù)的出現(xiàn)。一、基因工程的基本內(nèi)容
基因工程,確切地講就是重組DNA技術(shù),指在體外將不同來(lái)源的DNA進(jìn)行剪切和重組,形成雜合DNA或稱(chēng)嵌合DNA分子,然后將其導(dǎo)入特定的宿主細(xì)胞,得到大量擴(kuò)增和表達(dá),使宿主細(xì)胞獲得新的遺傳特性,產(chǎn)生新的基因產(chǎn)物?;蚬こ蹋蚍Q(chēng)遺傳工程,興起于20世紀(jì)70年代。人類(lèi)實(shí)現(xiàn)對(duì)基因進(jìn)行自如地操作、轉(zhuǎn)移和改造的理想,是在核酸限制性?xún)?nèi)切酶、載體質(zhì)粒、連接酶和其它修飾酶被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)以后。在此基礎(chǔ)上,核酸和蛋白質(zhì)序列測(cè)定、基因體外快速突變、DNA的人工合成等,則使得基因工程逐漸成熟和發(fā)展。二、基因工程的基本程序質(zhì)粒:環(huán)狀DNA分子,它的分子量較小,可以自由地進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞,還能獨(dú)立自主地復(fù)制,具有一套與細(xì)胞核染色體相對(duì)獨(dú)立的遺傳信息?;蚬こ痰幕境绦蚴牵海?)獲得目的基因(外源DNA片段)(2)將目的基因連接到載體上,得雜化載體;(3)將雜化載體(環(huán)狀的DNA)引入宿主細(xì)胞(受體細(xì)胞),使目的基因及載體上其它基因得以轉(zhuǎn)錄和翻譯。載體質(zhì)粒外源DNA片段外源DNA插入剪切引入宿主細(xì)胞選出含有重組DNA的細(xì)胞擴(kuò)增abbAAb
例題解析1、
農(nóng)業(yè)上大量使用化肥存在許多負(fù)面影響,“生物固氮”已成為一項(xiàng)重要研究課題,實(shí)驗(yàn)證明,生物固氮是某些微生物(如根瘤菌、藍(lán)藻等)將空氣中的N2固定為NH3的過(guò)程。(1)與人工合成NH3所需的高溫、高壓條件相比,生物固氮的順利進(jìn)行是因?yàn)楦鼍?、藍(lán)藻體內(nèi)含有特定的
,這類(lèi)物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是
。(2)人們正在著力研究轉(zhuǎn)基因固氮植物(如固氮水稻、固氮小麥等),某科學(xué)家將根瘤菌、細(xì)胞中的固氮基因,通過(guò)基因工程方法轉(zhuǎn)移到水稻植株細(xì)胞中,經(jīng)檢測(cè),轉(zhuǎn)基因水稻具備了固氮功能。據(jù)上述材料分析:①固氮基因已經(jīng)整合到水稻細(xì)胞的
中。②寫(xiě)出水稻細(xì)胞中固氮基因得到表達(dá)的反應(yīng)式。酶蛋白質(zhì)DNA
轉(zhuǎn)錄翻譯
DNA(固氮基因)RNA蛋白質(zhì)2、干擾素是治療癌癥的重要物質(zhì),人血液中每升只能提取0.05μg干擾素,因而其價(jià)格昂貴,平民百姓用不起。但美國(guó)有一家公司用遺傳工程方法合成了價(jià)格低廉、藥性一樣的干擾素,其具體做法是:(1)從人的淋巴細(xì)胞中提取能指導(dǎo)干擾素合成的
,并使之與一種叫做質(zhì)粒的DNA結(jié)合,然后移植到酵母菌內(nèi),從而用酵母菌來(lái)
。(2)酵母菌能用
方式繁殖,速度很快,所以,能在較短的時(shí)間內(nèi)大量生產(chǎn)
。利用這種方法不僅產(chǎn)量高,并且成本也較低。基因產(chǎn)生干擾素出芽干擾素3、細(xì)菌通常是具有雙鏈環(huán)狀DNA的單細(xì)胞生物?,F(xiàn)有甲、乙兩種細(xì)菌,基因型分別是abd和ABD,通過(guò)基因工程使甲細(xì)菌后代產(chǎn)生出乙細(xì)菌B基因所控制的產(chǎn)物,具體過(guò)程如圖所示,試據(jù)圖回答。(1)從細(xì)胞的結(jié)構(gòu)看,細(xì)菌屬于
生物。(2)圖中剪切DNA的“剪刀”和粘接DNA的“膠水”,其實(shí)是兩種不同的酶,它們都只能在DNA的一定位置進(jìn)行剪切和粘接,說(shuō)明它們具有
的特點(diǎn)。(3)新細(xì)菌與甲、乙細(xì)菌的表現(xiàn)都不同,從變異來(lái)源看,這是人工條件下的一種
。(4)假如B基因是來(lái)自人體細(xì)胞,則甲子代也可產(chǎn)生出相應(yīng)的人體物質(zhì),這說(shuō)明在翻譯過(guò)程中,細(xì)菌和人類(lèi)共套
。(5)在DNA分子中“拼接”上某個(gè)基因或“切割”掉某個(gè)基因,并不影響各基因的功能,這說(shuō)明基因具有
原核專(zhuān)一性基因重組遺傳密碼相對(duì)的獨(dú)立性4、“人類(lèi)基因組計(jì)劃”的研究工作已經(jīng)歷時(shí)10年,投資近百億美元。一開(kāi)始它是一項(xiàng)“國(guó)際參與,免費(fèi)分享”的國(guó)際合作研究項(xiàng)目,現(xiàn)在由于其潛在的巨大經(jīng)濟(jì)價(jià)值,使得它還未完成時(shí),爭(zhēng)搶就已經(jīng)開(kāi)始,而且愈演愈烈的趨勢(shì)。起步本已較晚的我國(guó)生物科技人員還面臨著經(jīng)費(fèi)嚴(yán)重不足等巨大困難,但是他們說(shuō):“我們的民族已經(jīng)在信息產(chǎn)業(yè)的上游-----軟件和硬件上受制于人,我們?cè)僖膊荒茏屛覀兊淖訉O后代在這個(gè)領(lǐng)域付出代價(jià)!”當(dāng)該課題組的楊煥明、汪鍵在沒(méi)有研究經(jīng)費(fèi)的情況下找袁隆平幫忙時(shí),袁隆平爽快地道:“拿合同來(lái)”。(1)從細(xì)胞學(xué)上講,基因的載體是
其排列特點(diǎn)是
。(2)文中的“基因序列”指
,因?yàn)樗砜刂粕顒?dòng)的全套
,所以基因序列的測(cè)定對(duì)于探索生命奧秘意義重大:(3)“編碼基因”一詞中的“編碼”,是指為生命活動(dòng)的體現(xiàn)者
編碼。(4)文中袁隆平是我國(guó)的
專(zhuān)家,他使用的方法主要是
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