第06章 免疫沉淀試驗(yàn)

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)

第六章免疫沉淀試驗(yàn)

秦雪目錄第一節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的基本原理第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)第三節(jié)凝膠內(nèi)免疫沉淀試驗(yàn)第四節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的臨床應(yīng)用第五節(jié)臨床常用免疫沉淀試驗(yàn)試劑方法特點(diǎn)第六節(jié)影響免疫沉淀試驗(yàn)的主要因素第一節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的基本原理一二三免疫沉淀試驗(yàn)的特點(diǎn)免疫沉淀試驗(yàn)的分類

基本原理

第一節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的基本原理一、基本原理：沉淀反應(yīng)將可溶性抗原與相應(yīng)抗體置于溫度、酸堿度適宜的一定電解質(zhì)溶液中，兩者按適當(dāng)比例形成肉眼可見的沉淀線或沉淀環(huán)，并根據(jù)所形成的沉淀物計(jì)算待測(cè)抗原或抗體的含量。

二、免疫沉淀試驗(yàn)的分類

液相沉淀試驗(yàn)

凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)

環(huán)狀免疫沉淀試驗(yàn)絮狀免疫沉淀試驗(yàn)透射免疫比濁試驗(yàn)散射免疫比濁試驗(yàn)免疫擴(kuò)散試驗(yàn)免疫電泳技術(shù)

第一節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的基本原理三、免疫沉淀試驗(yàn)的特點(diǎn)1.階段性免疫沉淀試驗(yàn)分兩個(gè)階段，第一階段為抗原抗體特異性結(jié)合，形成不可見的可溶性免疫復(fù)合物；第二階段則形成可見的免疫復(fù)合物。2.特異性免疫沉淀試驗(yàn)為抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的過(guò)程，因此具有特異性。3.抗原性質(zhì)參與免疫沉淀試驗(yàn)的抗原必須為可溶性抗原。4.抗體的選擇多克隆抗體與抗原多個(gè)表位結(jié)合，易形成沉淀，故非常適用于免疫沉淀試驗(yàn)；單克隆抗體只與抗原一個(gè)表位結(jié)合，不易形成交聯(lián)。若抗原表面有兩個(gè)以上相同的表位，單克隆抗體也可用于免疫沉淀試驗(yàn)。第一節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的基本原理第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)一二免疫濁度測(cè)定

絮狀免疫沉淀試驗(yàn)液相免疫沉淀試驗(yàn)（liquidphaseimmunoprecipitationtest）是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在含有電解質(zhì)的液相介質(zhì)中反應(yīng)，形成肉眼可見的沉淀物。根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法和所形成的免疫復(fù)合物呈現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象的不同，可將液相免疫沉淀試驗(yàn)分為環(huán)狀免疫沉淀試驗(yàn)、絮狀免疫沉淀試驗(yàn)和免疫濁度測(cè)定。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)一、絮狀沉淀試驗(yàn)（flocculation）是可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異結(jié)合，在電解質(zhì)存在的條件下，形成肉眼可見的絮狀沉淀物。此方法受抗原抗體比例的影響非常明顯，常用來(lái)作測(cè)定抗原抗體反應(yīng)的最適比例。有抗原稀釋法、抗體稀釋法和方陣滴定法三種操作方法。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)二、免疫濁度測(cè)定（immunoturbidimetry）原理：可溶性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合，兩者在比例合適和增濁劑作用下，可快速形成較大的免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度；當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過(guò)量且濃度固定時(shí)形成的免疫復(fù)合物隨抗原量增加而增加，反應(yīng)液的濁度也隨之增加，即待測(cè)抗原量與反應(yīng)液的濁度成正相關(guān)；與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，即可計(jì)算出待測(cè)抗原的含量。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)（一）透射免疫比濁試驗(yàn)1.原理可溶性抗原與相應(yīng)抗體在一定緩沖液中結(jié)合形成免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液濁度發(fā)生改變，當(dāng)一定波長(zhǎng)的光線通過(guò)反應(yīng)液時(shí)，被其中的免疫復(fù)合物反射、吸收而引起透射光減少，可用吸光度表示，吸光度與免疫復(fù)合物的含量成正比，在保持抗體過(guò)量的條件下，吸光度與抗原量成正比。2.方法學(xué)評(píng)價(jià)（1）優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確性較好、能用全自動(dòng)或半自動(dòng)儀器進(jìn)行測(cè)試、敏感度比單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)高5倍～10倍。（2）缺點(diǎn)：1）抗體用量大；2）耗時(shí)長(zhǎng)；3）抗原或抗體極度過(guò)剩時(shí)易導(dǎo)致免疫復(fù)合物分離；4）不宜用于藥物半抗原的檢測(cè)。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)（二）散射免疫比濁試驗(yàn)1．原理利用抗原抗體在液相中特異性結(jié)合后產(chǎn)生一定大小的免疫復(fù)合物，當(dāng)一定波長(zhǎng)的光通過(guò)該反應(yīng)液遇到免疫復(fù)合物時(shí)光線發(fā)生散射現(xiàn)象，散射光的強(qiáng)度與免疫復(fù)合物的含量和散射夾角成正比，與入射光波長(zhǎng)成反比。當(dāng)散射夾角和入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，散射光的強(qiáng)度與免疫復(fù)合物的含量成正比，當(dāng)反應(yīng)體系中保持抗體過(guò)量時(shí)，形成的免疫復(fù)合物含量又與抗原含量成正比。應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)檢測(cè)散射光強(qiáng)度即可計(jì)算出待測(cè)標(biāo)本中的抗原含量。根據(jù)散射光檢測(cè)時(shí)間及檢測(cè)方式的不同，散射免疫比濁試驗(yàn)又分為終點(diǎn)散射比濁試驗(yàn)和速率散射比濁試驗(yàn)兩種。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)2.終點(diǎn)散射比濁試驗(yàn)所謂“終點(diǎn)”是指在抗原抗體反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)測(cè)定散射光強(qiáng)度。在抗原抗體反應(yīng)的第一階段，溶液中產(chǎn)生的散射光信號(hào)波動(dòng)較大，計(jì)算出的結(jié)果會(huì)產(chǎn)生較大的誤差。散射免疫比濁試驗(yàn)是避開了抗原抗體反應(yīng)的不穩(wěn)定階段，在抗原抗體反應(yīng)的最佳時(shí)段讀數(shù)，將誤差降到最低，且必須在免疫復(fù)合物相互聚合形成絮狀沉淀前完成測(cè)定，否則光散射值降低，得出偏低的結(jié)果。終點(diǎn)散射比濁試驗(yàn)是在免疫反應(yīng)進(jìn)行到一定時(shí)間時(shí)測(cè)量其濁度，故亦稱定時(shí)散射比濁試驗(yàn)。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)2.終點(diǎn)散射比濁試驗(yàn)終點(diǎn)散射比濁試驗(yàn)是在抗原抗體反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)測(cè)定散射光強(qiáng)度。其檢測(cè)敏感度較高，達(dá)μg/L水平，高于透射免疫比濁試驗(yàn)，但低于速率散射比濁試驗(yàn)，可用自動(dòng)化分析；在抗原抗體反應(yīng)的第一階段，反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)，不合快速檢測(cè)，計(jì)算時(shí)需減去本底值，在微量測(cè)定時(shí)，本底的干擾會(huì)影響準(zhǔn)確測(cè)定。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)3.速率散射比濁試驗(yàn)所謂“速率”是指單位時(shí)間內(nèi)抗原與抗體反應(yīng)的速度或免疫復(fù)合物形成的量，而不是免疫復(fù)合物累積產(chǎn)生的量?？乖c抗體混合后瞬間即發(fā)生反應(yīng)，在抗體過(guò)量的情況下，抗原抗體反應(yīng)速度由慢到快，在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物不斷增多，隨后逐漸減慢，在此變化過(guò)程中，在某一時(shí)間點(diǎn)抗原抗體反應(yīng)速率最快，單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物含量達(dá)到最大值，散射光強(qiáng)度變化亦最大，此即為速率峰。速率峰的峰值與抗原濃度成正相關(guān)。選取速率最大，且與被測(cè)抗原濃度變化呈線性關(guān)系的速率峰值，制作劑量-反應(yīng)曲線，即可計(jì)算出被測(cè)抗原的濃度。速率散射比濁試驗(yàn)具有速度快、靈敏度和精密度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、檢測(cè)范圍寬、自動(dòng)化程度高、節(jié)省試劑等優(yōu)點(diǎn)；但儀器試劑比較貴、對(duì)抗體的質(zhì)量要求較高。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)（三）膠乳增強(qiáng)免疫濁度測(cè)定將抗體吸附在大小合適、均勻一致的膠乳顆粒上，當(dāng)遇到相應(yīng)抗原時(shí)，使膠乳顆粒發(fā)生凝集。單個(gè)膠乳顆粒在入射光波長(zhǎng)范圍內(nèi)不阻礙光線透過(guò)，兩個(gè)或兩個(gè)以上膠乳顆粒凝聚時(shí)透射光減少，減少的程度與膠乳顆粒凝聚程度成正比，同時(shí)與待測(cè)抗原含量成正比。通過(guò)檢測(cè)光強(qiáng)度變化即可計(jì)算出待測(cè)樣品中抗原的含量。第二節(jié)液相免疫沉淀試驗(yàn)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)一二三免疫電泳技術(shù)雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)

單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)?zāi)z內(nèi)沉淀試驗(yàn)（gelphaseprecipitation）利用可溶性抗原和相應(yīng)抗體在凝膠中擴(kuò)散，形成濃度梯度，在抗原抗體相遇并且濃度比例適當(dāng)?shù)奈恢眯纬扇庋劭梢姷某恋砭€或沉淀環(huán)。凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)可分為：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散試驗(yàn)雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)一、單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)：先將一定量的抗體混于瓊脂凝膠中，使待測(cè)的抗原溶液在瓊脂內(nèi)由局部向周圍自由擴(kuò)散，在一定區(qū)域內(nèi)形成可見的沉淀環(huán)，環(huán)的直徑或面積的大小與抗原含量呈正相關(guān)。根據(jù)試驗(yàn)形式可分為試管法和平板法兩種，試管法因沉淀環(huán)不易觀察及定量，目前較少應(yīng)用。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)一、單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）傾注平板→打孔→加樣→放置37℃→24～48h觀察沉淀環(huán)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)一、單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）抗原量與環(huán)直徑關(guān)系的兩種計(jì)算方法1.Mancini曲線：大分子抗原（IgM）長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)散＞48h常數(shù)K＝C∕d2普通坐標(biāo)紙曲線（C為抗原濃度，d為沉淀環(huán)直徑）第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)2.Fahey曲線：小分子抗（IgG,IgA）擴(kuò)散時(shí)間較短24h常數(shù)K＝logC∕d半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙曲線（C為抗原濃度，d為沉淀環(huán)直徑)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)一、單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）抗原量與環(huán)直徑關(guān)系的兩種計(jì)算方法二、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)將抗原和抗體加在同一瓊脂板對(duì)應(yīng)孔中，各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在濃度比例恰當(dāng)處形成沉淀線，觀察沉淀線的位置、形狀及對(duì)比關(guān)系，可對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定性分析。根據(jù)試驗(yàn)形式可分為試管法和平板法。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)二、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）平板法是鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一。基本步驟是：打孔→在各對(duì)應(yīng)孔中加入抗原或抗體→濕盒37℃18h～24h→觀察沉淀線。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)二、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（平板法）

應(yīng)用：

1.判斷抗原或抗體的存在以及估計(jì)相對(duì)含量

2.分析抗原或抗體相對(duì)分子量

3.分析抗原的性質(zhì)第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)4.抗體效價(jià)的滴定5.鑒定抗原或抗體純度第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)三、免疫電泳技術(shù)免疫電泳技術(shù)（immunoelectrophoresistechnique）是電泳分析與免疫沉淀試驗(yàn)相結(jié)合的產(chǎn)物，是直流電場(chǎng)作用下的凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)，是將抗原抗體反應(yīng)的高度特異性與電泳技術(shù)的高分辨率及快速、微量等特性相結(jié)合的一種免疫化學(xué)技術(shù)。優(yōu)點(diǎn)：①加快了沉淀反應(yīng)的速度；②抗原抗體的擴(kuò)散方向固定集中，提高了靈敏度；③可先利用蛋白組分所帶電荷的不同而將其進(jìn)行分離，再分別與抗體反應(yīng)。分類：對(duì)流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳、交叉免疫電泳和自動(dòng)化免疫電泳等多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)

雙向免疫擴(kuò)散+電泳技術(shù)（負(fù)極）抗原等電點(diǎn)低，帶較強(qiáng)的負(fù)電荷，分子量小，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)（正極）抗體等電點(diǎn)偏高，帶負(fù)電荷較少，且分子量較大，在電滲作用下，抗體移向負(fù)極抗原抗體濃度最適比處形成沉淀線比雙向免疫擴(kuò)散法靈敏度提高8倍～16倍

第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（一）對(duì)流免疫電泳

原理：（一）對(duì)流免疫電泳結(jié)果分析：1.無(wú)沉淀線出現(xiàn)說(shuō)明無(wú)相應(yīng)的抗原2.沉淀線出現(xiàn)于抗原抗體孔中間，說(shuō)明兩者比例適合3.沉淀線接近抗原孔，表明抗體濃度＞抗原，反之，則是抗體濃度＜抗原濃度對(duì)流免疫電泳結(jié)果圖第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（二）火箭免疫電泳單向免疫擴(kuò)散與電泳相結(jié)合的定量檢測(cè)技術(shù)原理：將抗體混合于瓊脂中，電泳時(shí)，抗體不移動(dòng)，抗原由負(fù)極向正極泳動(dòng)，并隨抗原濃度的減少，抗原泳動(dòng)的基底區(qū)也逐漸變窄，抗原抗體免疫復(fù)合物形成的沉淀線也越來(lái)越窄，形成一個(gè)火箭狀的不溶性復(fù)合物沉淀峰。當(dāng)瓊脂中的抗體濃度保持不變時(shí)，沉淀峰的高度與抗原量呈正比例關(guān)系，用已知濃度標(biāo)準(zhǔn)抗原作對(duì)照，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可根據(jù)沉淀峰的高度從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出待測(cè)抗原的濃度。反之，固定抗原的濃度，便可檢測(cè)抗體的含量（稱為反向火箭電泳）。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（二）火箭免疫電泳結(jié)果判斷：抗體濃度不變→沉淀峰高度與抗原量呈正相關(guān)抗原濃度不變→沉淀峰高度與抗體量呈正相關(guān)（反向火箭電泳）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，就可根據(jù)沉淀峰的高度在標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出待測(cè)樣品濃度。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（二）火箭免疫電泳①②③④為標(biāo)準(zhǔn)抗原；⑤⑥為標(biāo)本第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（三）免疫電泳區(qū)帶電泳＋雙向擴(kuò)散基本原理：先將蛋白質(zhì)抗原在凝膠中作區(qū)帶電泳，根據(jù)其所帶電荷、分子量和構(gòu)型不同分成不可見的若干區(qū)帶，然后，沿電泳方向挖一與之平行的抗體槽，加入相應(yīng)抗血清，進(jìn)行雙向擴(kuò)散，兩者比例適合處形成弧形沉淀線。通過(guò)對(duì)沉淀線的數(shù)量、位置和形態(tài)與已知標(biāo)準(zhǔn)抗原抗體生成的沉淀線比較，即可對(duì)待測(cè)樣品中所含成分的種類和性質(zhì)進(jìn)行分析。應(yīng)用：分析純化抗原和抗體的成分。正常異常免疫球蛋白的識(shí)別與鑒定。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)免疫電泳流程圖第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（三）免疫電泳免疫電泳結(jié)果示意圖第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（四）免疫固定電泳區(qū)帶電泳+沉淀反應(yīng)原理：先將血清蛋白質(zhì)在瓊脂糖凝膠介質(zhì)上經(jīng)區(qū)帶電泳分離，再將固定劑和各型免疫球蛋白及輕鏈抗血清加在凝膠表面的泳道上，經(jīng)孵育后，固定劑和抗血清在凝膠內(nèi)滲透并擴(kuò)散，抗原抗體直接發(fā)生沉淀反應(yīng)，洗脫游離的抗體，形成的抗原抗體復(fù)合物則保留在凝膠中。經(jīng)漂洗和染色，參考泳道和抗原抗體沉淀區(qū)帶被著色，根據(jù)電泳移動(dòng)距離分離單克隆組分，可對(duì)各類免疫球蛋白及其輕鏈進(jìn)行分型。最大的優(yōu)勢(shì)：分辨率強(qiáng)，敏感度高，操作周期短，結(jié)果易分析。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（四）免疫固定電泳左圖為IgGκ型，中圖為IgGλ型，右為正常

第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（四）免疫固定電泳應(yīng)用：用于鑒定遷移率相近的蛋白和M蛋白，免疫球蛋白輕鏈，尿液、腦脊液等微量蛋白，游離輕鏈，補(bǔ)體裂解產(chǎn)物等，目前已作為常規(guī)檢測(cè)。臨床最常用于M蛋白的鑒定。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（五）交叉免疫電泳區(qū)帶電泳+火箭免疫電泳定量檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用：適用于比較各種蛋白組分，定性分析蛋白質(zhì)遺傳多態(tài)性、微小異質(zhì)性、裂解產(chǎn)物和不正常片段等。第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)（六）自動(dòng)化免疫電泳電泳系統(tǒng)（自動(dòng)化電泳儀）光密度掃描系統(tǒng)+優(yōu)點(diǎn)：分辨率高、重復(fù)性好第三節(jié)凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)第四節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的臨床應(yīng)用1.經(jīng)典的沉淀反應(yīng)均可用于抗原抗體性質(zhì)、效價(jià)、純度及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度的分析2.免疫濁度法目前主要用于蛋白質(zhì)的測(cè)定，如血液中的免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、κ輕鏈、λ輕鏈，補(bǔ)體C3、C4，血漿蛋白，C-反應(yīng)蛋白，類風(fēng)濕因子等；尿及腦脊液微量蛋白和半抗原（激素、毒物、治療性藥物等；還可用于血漿藥物濃度的測(cè)定

第四節(jié)免疫沉淀試驗(yàn)的臨床應(yīng)用3.對(duì)流免疫電泳與火箭免疫電泳技術(shù)因存在電滲作用，目前已不推薦使用4.免疫電泳擴(kuò)散時(shí)間長(zhǎng)，影響因素多，結(jié)果較難分析5.免疫固定電泳技術(shù)因分辨力強(qiáng)，敏感度高，結(jié)果易于分析，現(xiàn)常用于鑒定遷移率相近的蛋白和M蛋白，免疫球蛋白輕鏈，尿液、腦脊液等微量蛋白，游離輕鏈，補(bǔ)體裂解產(chǎn)物等，臨床最常用于M蛋白的鑒定與分型，并已列入臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)工作第五節(jié)臨床常用免疫沉淀試驗(yàn)試劑方法特點(diǎn)一、在全自動(dòng)生化分析儀中的應(yīng)用（一）單試劑單波長(zhǎng)法（二）單試劑雙波長(zhǎng)法（三）雙試劑單波長(zhǎng)法（四）雙試劑雙波長(zhǎng)法二、在血液凝固分析儀中的應(yīng)用三、在半自動(dòng)電泳儀中的應(yīng)用四、在特種蛋白免疫分析儀中的應(yīng)用第六節(jié)影響免疫沉淀試驗(yàn)的主要因素一二反應(yīng)環(huán)境因素

抗原抗體自身因素一、抗原抗體自身因素（一）抗原因素1.抗原的理化性狀參與免疫沉淀試驗(yàn)的抗原必須為可溶性抗原，否則無(wú)法形成肉眼可見的沉淀現(xiàn)象2.抗原表位與種類天然抗原常為多價(jià)，參與免疫沉淀試驗(yàn)的抗原表面相同表位越多，越容易與相應(yīng)抗體相互交聯(lián)成立體網(wǎng)格狀聚集體，出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物第六節(jié)影響免疫沉淀試驗(yàn)的主要因素（二）抗體因素1.抗體的來(lái)源家兔等大多數(shù)動(dòng)物的免疫血清較人和馬的免疫血清具有更寬的等價(jià)帶，與相應(yīng)可溶性抗原結(jié)合更易出現(xiàn)可見的沉淀物。而單克隆抗體一般不適合用于免疫沉淀試驗(yàn)，大多數(shù)情況下都是用多克隆抗體。2.抗體的質(zhì)量用于免疫沉淀試驗(yàn)的抗