實(shí)驗(yàn)反應(yīng)和反應(yīng)

實(shí)驗(yàn)反應(yīng)和反應(yīng)第一頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日一、多糖的顯示——PAS反應(yīng)（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ǘ?shí)驗(yàn)原理（三）實(shí)驗(yàn)用品（四）實(shí)驗(yàn)方法（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)果（六）注意事項(xiàng)（七）作業(yè)第二頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

通過(guò)PAS反應(yīng)，了解糖原顯示的基本原理、方法以及糖原在細(xì)胞中的分布。第三頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（二）實(shí)驗(yàn)原理PAS反應(yīng)是顯示多糖的最經(jīng)典、也是最直接的細(xì)胞化學(xué)方法。用具有強(qiáng)氧化作用的過(guò)碘酸處理使多糖中葡萄糖的乙二醇基氧化成兩個(gè)游離的醛基，醛基與Schiff試劑結(jié)合可形成紫紅色的化合物，顏色深淺與多糖含量成正比。單糖易被抽提掉，多糖包括糖原、粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂、淀粉和纖維素。第四頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日

堿性品紅為紅色，與能產(chǎn)生SO2的試劑作用后（如偏重亞硫酸鈉與鹽酸作用，還原出SO2），成為無(wú)色的Schiff試劑,再與醛基結(jié)合呈紫紅色。第五頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日第六頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日第七頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（三）實(shí)驗(yàn)用品1.材料：馬鈴薯塊莖2.試劑：0.5%高碘酸、schiff試劑、亞硫酸水、70％酒精3.器材：顯微鏡、刀片、鑷子、載玻片、蓋玻片、水浴鍋第八頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（四）實(shí)驗(yàn)方法1、取馬鈴薯塊莖切成薄片，浸入過(guò)碘酸溶液10分鐘；2、用70％的酒精沖洗1次；3、將薄片放入Schiff試劑中20－25分鐘；4、在新配亞硫酸水中洗3次，每次1min；5、蒸餾水洗片刻；6、將薄片放在載玻片上吸去水分，加上蓋玻片，鏡下觀察。第九頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日PAS反應(yīng)結(jié)果（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)果馬鈴薯塊莖組織細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)到紫紅色或深紅色淀粉顆粒。

第十頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（六）注意事項(xiàng)

按上述操作，細(xì)胞中水溶性糖類(lèi)已喪失，被染色的是不溶性的碳水化合物。第十一頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（七）作業(yè)

1、繪制實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并描述。第十二頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ǘ?shí)驗(yàn)原理（三）實(shí)驗(yàn)用品（四）實(shí)驗(yàn)方法（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)果（六）注意事項(xiàng)（七）作業(yè)二、DNA的顯示——Feulgen反應(yīng)第十三頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日1.了解Feulgen染色反應(yīng)原理；2.掌握Feulgen染色的方法，觀察染色結(jié)果。（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡谑捻?yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（二）實(shí)驗(yàn)原理

根據(jù)DNA經(jīng)鹽酸水解后，打開(kāi)了嘌呤堿基和脫氧核糖連接的鍵，在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。這些醛基就在原位與Schiff試劑結(jié)合，形成紫紅色的化合物。所以凡有DNA的部位，就呈現(xiàn)為紫紅色。第十五頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日?qǐng)DFeulgen反應(yīng)的染色原理第十六頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日DNA染色后，除形成紫紅色化合物外，必然有多余的A和B分子，B分子很容易被氧化轉(zhuǎn)變?yōu)锳有色分子，從而造成偽差。因此必須迅速地多次用現(xiàn)配的SO2水清洗，使A分子轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)色的B分子，消除染色的偽差。第十七頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日Feulgen反應(yīng)是特異性顯示DNA的最經(jīng)典方法，即可進(jìn)行DNA定位顯示，又可用顯微分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析。Feulgen反應(yīng)對(duì)組織中DNA的檢測(cè)具有高度專(zhuān)一性。組織中除DNA外還有多糖、RNA和其他自由醛基可以被鹽酸酸解掉。第十八頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（三）實(shí)驗(yàn)用品1.材料洋蔥鱗莖內(nèi)表皮或根尖、小麥根尖2.試劑

1mol/LHCl、Schiff試劑、亞硫酸水溶液(漂白液)3.器材顯微鏡、刀片、鑷子、載玻片、蓋玻片、水浴鍋第十九頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（四）實(shí)驗(yàn)方法①取小麥根尖和洋蔥內(nèi)表皮（綠豆大?。┙腩A(yù)熱至60℃的1NHCl中水解，時(shí)間10min。②蒸餾水洗后，轉(zhuǎn)入Schiff液中避光染30min，待根尖變?yōu)樯罴t色；③在新配亞硫酸水中洗3次，每次1min；④自來(lái)水洗5min，在載玻片上切下深紅色根尖備用；⑤制片鏡下觀察，根尖鑷子搗碎壓片。第二十頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)果第二十一頁(yè)，共二十四頁(yè)，2022年，8月28日蠶豆根尖細(xì)胞Feulgen反應(yīng)細(xì)胞核（紫紅色）核仁（