第三章藥物的雜質(zhì)檢查

第三章藥物的雜質(zhì)檢查1主要內(nèi)容藥物的純度、雜質(zhì)及其分類、檢查一般雜質(zhì)的檢查方法特殊雜質(zhì)的檢查方法21）評(píng)價(jià)：綜合考慮藥物的外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含量測定。

——綜合評(píng)定藥物的純度。1.藥物的純度:指藥物純凈的程度。是反映藥品質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。一、藥物的純度要求第一節(jié)概述雜質(zhì)檢查是藥物純度評(píng)價(jià)的一項(xiàng)重要內(nèi)容。32）藥物純度與試劑純度a.藥物純度—主要從用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮,只有合格品和不合格品.b.化學(xué)試劑的純度--是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定,不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用.共同點(diǎn)：均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類和限量.不同點(diǎn)：4例如：硫酸鋇（BaSO4）試劑規(guī)格

對(duì)可溶性鋇鹽不做檢查。

檢查：氯化物、鐵、灼燒失重等藥用規(guī)格

如存在可溶性鋇鹽則導(dǎo)致醫(yī)療事故。

檢查：酸溶性鋇鹽、重金屬、砷鹽等

化學(xué)試劑不能代替藥品使用5是指藥物中存在的：①無治療作用②影響藥物的穩(wěn)定性和療效,③對(duì)人體健康有害的微量物質(zhì)。2.藥物的雜質(zhì)

為保證藥品質(zhì)量,確保用藥安全、有效,必須檢查雜質(zhì),控制藥物純度。6

了解藥物中雜質(zhì)的來源與種類可以有針對(duì)性地制訂雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的方法和限度.二、雜質(zhì)的來源與種類71.生產(chǎn)過程中引入原料不純合成工藝中未反應(yīng)完全的原料、中間體、副產(chǎn)物等。提取分離過程中引入。合成工藝中使用的設(shè)備、器皿可能引入重金屬、以及使用溶劑,有機(jī)溶劑。2.貯藏過程中引入保管不善或貯存時(shí)間過長包裝不當(dāng)（一）雜質(zhì)的來源89例：

阿斯匹林合成工藝儲(chǔ)藏過程10制劑過程中可能產(chǎn)生新物質(zhì)如：

制備過程中加熱滅菌鹽酸普魯卡因注射劑

進(jìn)一步脫羧轉(zhuǎn)化對(duì)氨基苯甲酸苯胺引起毒性反應(yīng)11按來源可分為2類一般雜質(zhì)指在自然界中分布廣泛,在多種藥物的生產(chǎn)或貯存過程中容易引入的雜質(zhì)。Cl-、重金屬等。特殊雜質(zhì)指在該藥物的生產(chǎn)或貯存過程中,根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件,有可能引入的雜質(zhì)。（二）雜質(zhì)的種類12信號(hào)雜質(zhì)：本身一般無害,但含量多少反映藥物純度水平,指示生產(chǎn)工藝是否合理.如：氯化物、硫酸鹽等。有害雜質(zhì)：對(duì)人體有毒害的雜質(zhì).在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制,以保證用藥安全.如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等。

按毒性可分為13a具有立體異構(gòu)體的藥物生物活性有很大差異。如：左旋腎上腺素升壓作用是右旋體的12倍。VA的全反式構(gòu)型具有較強(qiáng)活性。B藥物的晶型不同,其理化常數(shù),溶解性穩(wěn)定性、體內(nèi)的吸收和療效也有差異。如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑,有A、B、C三種晶型.其中C晶型的驅(qū)蟲率90%,B晶型的驅(qū)蟲率40~60%,A晶型的驅(qū)蟲率小于20%。無效或低效雜質(zhì)14三、雜質(zhì)的限量檢查1.雜質(zhì)限量:在不影響藥物療效、穩(wěn)定性及不發(fā)生毒性的前提下,藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。百分表示(%)百萬分表示(ppm)限量表示方法藥物中雜質(zhì)的檢查多采用限量檢查152.雜質(zhì)檢查方法對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行定量測定限量檢查比較法靈敏度法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法16操作:平行試驗(yàn)比較兩比色管的顏色或濁度,判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定.管2（對(duì)照管）管1（樣品管）取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液,與一定量供試品配成的供試品溶液在相同條件下處理,比較反應(yīng)結(jié)果,判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定。標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法17例：葡萄糖中氯化物檢查供試品（0.60g）+AgNO3白色渾濁NaCl對(duì)照液+AgNO3白色渾濁（6ml，10μg/ml）渾濁程度：供試品＞對(duì)照液

氯化物含量不合格

供試品＜對(duì)照液氯化物含量不合格

18在供試品溶液中加入試劑,在試驗(yàn)條件下反應(yīng),不得出現(xiàn)正反應(yīng)。

既以檢測條件下反應(yīng)靈敏度控制雜質(zhì)限量。例：蒸餾水中氯化物的檢查

5滴1mL0.2mg/50mL4μg/mL靈敏度法19比較法取一定量供試品,在規(guī)定條件下測定待檢雜質(zhì)吸光度,與規(guī)定限量比較,判斷供試品中雜質(zhì)限量。20例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查

供試品液(2.0mg/ml)鹽酸溶液樣品

(0.05mol/L)A310nm規(guī)定：A310nm≯0.0521寫成：3.限量計(jì)算公式22若用ppm表示雜質(zhì)限量，則：注意:①單位是否統(tǒng)一

②供試品是否有稀釋

③表示方法%或ppm23例1.對(duì)乙酰氨基酚中氯化物的檢查對(duì)照品溶液:標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10gCl-/ml)方法：取5.0ml對(duì)照品溶液同法操作比較,濁度不得更大。計(jì)算：氯化物限量是多少(%)？24規(guī)定：含重金屬≯百萬分之十(10ppm)計(jì)算：應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(10gPb/ml)多少ml？方法：例2.谷氨酸鈉中重金屬的檢查25取腎上腺素0.2g,置100ml容量瓶中,加鹽酸溶液(9→2000)溶解并稀釋至刻度,搖勻,310nm處測得的A≯0.05,腎上腺酮的=435,求其限量。例3.腎上腺素中酮體的檢查26一、氯化物檢查法第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查1.原理Cl-+Ag+H+AgCl反應(yīng)介質(zhì):稀硝酸反應(yīng)試劑:硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液:10μg/mlNaCl溶液靈敏度范圍:50～80μg/50ml272．操作方法(對(duì)照法)樣品管對(duì)照管葡萄糖中氯化物檢查1.0mL用水稀釋至50mL6.0mL(濃度：10gCl－/ml)0.60g0.010%28暗處放置5min(避免AgCl分解)黑色的背景上自上而下的觀察3.結(jié)果觀察方法294．注意事項(xiàng)及討論平行試驗(yàn)加稀硝酸的目的氯化物的最適檢測濃度范圍

供試品溶液有色時(shí)的處理方法干擾物的排除有機(jī)藥物中氯化物的檢查30為了保證樣品管與對(duì)照管的反應(yīng)條件一致,要求樣品管與對(duì)照管要平行操作—平行試驗(yàn)。①

平行試驗(yàn)②

加稀硝酸的目的加速氯化銀混濁的生成,產(chǎn)生較好的乳濁;

避免產(chǎn)生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀。

50ml供試液含稀硝酸10ml為宜。過多會(huì)增大氯化銀的溶解度,使?jié)岫冉档汀?1③氯化物的最適檢測濃度范圍

50ml供試液中含0.05～0.08mg的Cl-,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液(10gCl-/ml)5.0～8.0ml時(shí),所顯渾濁梯度明顯。

根據(jù)限量取用適宜的供試品量,使氯化物的濃度在適宜的范圍內(nèi)。32

④供試品溶液有色時(shí)的處理方法a.內(nèi)消色法如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查.33向供試品溶液中加入某種試劑,使溶液顏色褪去后再依法檢查。例：高錳酸鉀中氯化物的檢查因溶液呈紫色,加入適量乙醇,使顏色消失后再檢查。b.外消色法34

⑤干擾物的排除a.碘化物中氯化物的檢查

Cl－的氧化電位高(1.35)不能被氧化為Cl2I-的氧化電位低(0.53)35b.碘中氯化物的檢查反應(yīng)原理:

根據(jù)氨中溶解度不同

AgCl(溶解)＞AgBr(微溶)＞AgI(不溶)36Cl－的氧化電位高(1.35)不能被氧化為Cl2Br-的氧化電位低(1.08)c.

溴化物中氯化物的檢查37

⑥有機(jī)藥物中氯化物的檢查

a溶于水的有機(jī)藥物——直接檢查。b不溶于水的有機(jī)藥物——38

c溶于稀乙醇或丙酮的有機(jī)藥物

—用該溶劑溶解后依法檢查。例：三氯叔丁醇。d雜質(zhì)中鹵素原子連接于苯環(huán)上

—先進(jìn)行有機(jī)破壞,使分解后再檢查。39

硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性溶液中生成硫酸鋇的白色渾濁液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較。

1.原理二、硫酸鹽檢查法40

2.操作法2ml40mld.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O

樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度范圍：0.1mg～0.5mgSO42-/50ml加鹽酸目的：防止碳酸鋇或磷酸鋇的生成BaCl2的濃度：濃度為25%時(shí)呈現(xiàn)的渾濁度較穩(wěn)定3.討論41第一法硫氰酸鹽法(CH.PUSP)1.原理

鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子,與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所呈的顏色進(jìn)行比較。

三、鐵鹽檢查法42

2.操作4ml25ml稀HCl30%硫氰酸銨3ml過硫酸銨50mgH2O50mlH2O

樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液433.討論2)最佳比色濃度

a.儀器分析線性范圍5～90gFe3+/50mlb.目視比色濃度范圍10～50gFe3+/50ml標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液——硫酸鐵銨(含硫酸)

濃度10gFe3+/ml3)過硫酸銨氧化Fe2+→Fe3+防止硫氰酸鐵還原或分解腿色44

重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬。如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等。

重金屬存在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性。

1.重金屬的概念四、重金屬檢查法鉛易在體內(nèi)積蓄中毒,以Pb為代表。45方法第一法:硫代乙酰胺法

適用于溶于水、稀酸、乙醇的藥物,最常用。第二法:熾灼后檢查法

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物。第三法:硫化鈉法

適用于難溶于稀酸但能溶于堿性溶液藥物(巴比妥類、磺胺類)。第四法:微孔濾膜法

適用于重金屬限量低(2-5g)藥物。46五、砷鹽檢查法(一)古蔡氏法

(二)白田道夫法

(三)Ag-DDC法

(四)奇列氏法(次磷酸法)47九、熾灼殘?jiān)鼨z查法定義：有機(jī)物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物加熱分解后，高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性的無機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。目的：用于檢查有機(jī)藥物或無機(jī)藥物中存在的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)。48方法:取供試品,緩慢熾灼至完全炭化,加硫酸濕潤,低溫加熱至硫酸蒸汽除盡后,于高溫(700℃-800℃)熾灼至完全灰化,放冷,精密稱定。限量一般控制在0.1%-0.2%,取樣量為1-2g49注意1.遺留的熾灼殘?jiān)糇鲋亟饘贆z查時(shí)，熾灼溫度必須控制在500℃-600℃。2.熾灼至恒重的第二次稱重應(yīng)在繼續(xù)熾灼30分鐘后進(jìn)行。3.含氟藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。50

概念:指藥品在規(guī)定的條件下,經(jīng)干燥后所減失的量,以百分率表示。

十、干燥失重干燥失重的內(nèi)容物主要指水分,也包括其它揮發(fā)性物質(zhì).恒重:供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下的重量。511.干燥失重的內(nèi)容物包括

A.藥物表面吸附水

B.藥物結(jié)晶水

C.揮發(fā)性成分

D.硫酸鹽灰分選擇題52中國藥典采用的測定法常壓干燥法干燥劑干燥法減壓干燥法

熱分析法53

在程序控制溫度的情況下,測定物質(zhì)的物理、化學(xué)變化與溫度關(guān)系的一類儀器分析方法。

熱分析法(一)熱重分析法(二)差示熱分析法(三)差示掃描量熱法54

測量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度變化的熱分析技術(shù),可計(jì)算出樣品在相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率.(一)熱重分析法

(thermogravimetric,TGA)TGA的特點(diǎn)分析樣品少,適用于貴重藥材或在空氣中容易氧化藥物干燥失重測定。b.靈敏度高,可達(dá)1g以下c.測定速度快d.可用于判斷結(jié)晶水或吸附水,并推斷結(jié)晶水含量。55

供試品TGA熱重曲線W1.測定曲線上平臺(tái)之間的質(zhì)量差值計(jì)算出樣品相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率56W結(jié)晶水失重臺(tái)階2.可用于藥物結(jié)晶水與吸附水的區(qū)分57

測量供試品和惰性參比物(常用石英砂、煅制MgO)之間的溫度差與溫度(或時(shí)間)關(guān)系的熱分析技術(shù)。(二)差示熱分析法(differentialthermalanalysis,DTA)58·

·

·

樣品參比加熱爐至信號(hào)放大器加熱器導(dǎo)線爐溫控制器⑴熱差曲線的直線

⑶吸熱峰⑵放熱峰⑶⑴⑵T(℃)△T熱差曲線示意圖差示熱分析儀主要結(jié)構(gòu)簡圖59

供試品發(fā)生放熱反應(yīng)溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰差示熱分析法(DTA)曲線60

DTA用途(1)熔點(diǎn)測定熔程T△T=061

DTA用途(2)定性和純度檢定——根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對(duì)供試品進(jìn)行純度判別△T=0T供試品對(duì)照品62

測量保持供試品和惰性參比物的溫度相同,系統(tǒng)所需輸給供試品或參比物的能量差隨溫度(或時(shí)間)變化的熱分析技術(shù)。(三)差示掃描量熱法(differentialscanningcalorimetry,DSC)1、功率補(bǔ)停型（dQ/dt）2、熱流型（△T/T）63DSC用途：熔點(diǎn)測定、純度測定晶型鑒別——峰在橫軸上位置、形狀、數(shù)目與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)64

不同純度苯甲酸的DSC曲線97.2%98.6%標(biāo)準(zhǔn)品供試品的熔點(diǎn)隨著所含雜質(zhì)量的增加而降低，其DSC曲線也會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的變化。

65應(yīng)用熱分析法檢查藥物純度時(shí)，有以下幾個(gè)前提：①藥品純度在98%以上；②雜質(zhì)不與主成分反應(yīng)；③雜質(zhì)不與主成分形成共晶或共熔體；④雜質(zhì)與熔融樣品有化學(xué)相似性；⑤藥物在熔融過程中化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定；⑥如有多晶現(xiàn)象必須全部轉(zhuǎn)化為某一晶形。

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物質(zhì)的晶型不同，在差示掃描量熱曲線上熔化吸熱峰的位置也各異，據(jù)此可以鑒別、檢查這些多晶型的存在。

67溫度(℃)508011014017020023026029015.000.007.50鹽酸舍曲林晶型Ⅰ的DSC曲線mcal/sec219℃出現(xiàn)吸熱熔融峰

225℃出現(xiàn)放熱峰

246℃晶型Ⅲ吸熱熔融

68溫度(℃)50801101401702002302602905.000.002.50mcal/sec鹽酸舍曲林晶型Ⅲ的DSC曲線69十一、水分測定法藥物中的水分存在形式---結(jié)晶水、吸附水水分測定方法甲苯法費(fèi)休式水分測定法原理：

H2O+I2+SO2+CH30H+3RN→[RHN]SO4CH3+2[RHN]I

70卡爾費(fèi)休水份儀卡爾費(fèi)休水份儀71十二、有機(jī)溶劑殘留量測定法中國藥典規(guī)定采用氣相色譜法固定相：直徑為0.25mm～0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球。載氣：氮?dú)鈾z測器：氫火焰離子化檢測器系統(tǒng)實(shí)用性實(shí)驗(yàn)：1.理論塔板數(shù)應(yīng)大于10002.內(nèi)標(biāo)法：分離度應(yīng)大于1.5；RSD不大于5%3.外標(biāo)法：RSD不大于10%72方法：1.溶液直接進(jìn)樣法（1）內(nèi)標(biāo)法（2）外標(biāo)法2.頂空進(jìn)樣法：適用于揮發(fā)性大的組分優(yōu)點(diǎn)（1）省去樣品提取、純化過程（2）避免不揮發(fā)組分污染色譜系統(tǒng)

73

第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)是指在該藥物生產(chǎn)和儲(chǔ)藏過程中,根據(jù)其生產(chǎn)方法、工藝條件及藥物本身結(jié)構(gòu)性質(zhì)可能引入的特有雜質(zhì)。

阿司匹林——水楊酸鹽酸普魯卡因——對(duì)氨基苯甲酸74特殊雜質(zhì)的檢查法一、色譜分析法二、光譜分析法三、化學(xué)分析法四、物理分析法75

根據(jù)藥物與雜質(zhì)對(duì)吸附劑的吸附或?qū)φ归_劑的解析能力不同(Rf值的差異),加以分離和檢查。薄層色譜法(TLC)（1）TLC法特點(diǎn):本法靈敏、簡便、快速；不需特殊的設(shè)備、費(fèi)用低分離和鑒定同步進(jìn)行.一、色譜分析法76（2）薄層色譜法應(yīng)用

——適用于雜質(zhì)已知并有雜質(zhì)對(duì)照品的情況。方法根據(jù)雜質(zhì)限量,取供試品溶液和一定濃度的雜質(zhì)對(duì)照品溶液,分別點(diǎn)于同一薄層板上展開,定位后進(jìn)行檢查。1)雜質(zhì)對(duì)照品法77——適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定或無雜質(zhì)對(duì)照品的情況。2)供試品自身對(duì)照法方法：將供試品按限量稀釋至一定濃度，與供試品溶液分別點(diǎn)于同一薄板上，展開,定位后進(jìn)行檢查。僅限于雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色相同或相近的情況.78例：雙氫青蒿素中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試品溶液B：取供試品加氯仿制成每1ml中含20mg的溶液。對(duì)照品溶液A：精密量取供試品溶液適量，加氯仿稀釋至每1ml中含0.4mg的溶液。AB展開劑：苯：乙酸乙酯（8：2）顯色劑：2%香草醛判斷:供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)≯3個(gè),且供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色≯對(duì)照液主斑點(diǎn)顏色.79供試液:3mg/ml對(duì)照液:60g/ml(供試液稀釋50倍)判斷:供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)≯3個(gè),且供試液的雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色≯對(duì)照液主斑點(diǎn)顏色.例：氫化可的松中“其他甾體”檢查803)標(biāo)準(zhǔn)藥物對(duì)照法——選用質(zhì)量符合規(guī)定的與供試品相同的藥物作為對(duì)照品。方法：用與供試品相同的藥物作為對(duì)照品，與供試品溶液分別點(diǎn)于同一薄板上，展開,定位后進(jìn)行檢查。81

根據(jù)供試品與雜質(zhì)的對(duì)照品保留時(shí)間相同測定各雜質(zhì)峰面積。高效液相色譜法(HPLC)特點(diǎn):

分離效能高、應(yīng)用范圍廣，能準(zhǔn)確、快速、分離分析同時(shí)進(jìn)行.821.加校正因子的內(nèi)標(biāo)法用于有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí),雜質(zhì)的含量測定。Cx=f·————AxA’S/C’S832.外標(biāo)法測定法用于有雜質(zhì)對(duì)照品或雜質(zhì)對(duì)照品易制備時(shí),雜質(zhì)的含量測定CX＝————CR·AXAR843.加校正因子的主成分自身對(duì)照法用于沒有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)雜質(zhì)的限量檢查方法：將供式品溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)臐舛?，作為?duì)照溶液。分別進(jìn)樣。計(jì)算供式品溶液色譜圖上各雜質(zhì)峰面積及其總，將雜質(zhì)峰面積乘以相應(yīng)的校正因子后與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，不得超過限量。854.不加校正因子的主成分自身對(duì)照法用于沒有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)雜質(zhì)的限量檢查.前提雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子基本相同.方法：將供式品溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)臐舛?，作為?duì)照溶液。分別進(jìn)樣，計(jì)算供式品溶液色譜圖上各雜質(zhì)峰面積及其總和，與對(duì)照溶液主成分峰面積比較，不得超過限量。特點(diǎn)：1.不需雜質(zhì)對(duì)照品2.同時(shí)控制各個(gè)雜質(zhì)及其總量的限度。86例如：尼群地平中有關(guān)物質(zhì)的檢查

避光操作。取本品,用甲醇制成每lml中含1mg的溶液作為供試品溶液；精密量取4m1,置100m1量瓶中。加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液，照高效液相色譜法測定。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的總合不得大于對(duì)照溶液主峰面積。875.峰面積歸一化法：用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)。方法：取供試品溶液，進(jìn)樣，經(jīng)高效液相色譜分離后，測定各雜質(zhì)及其總和占總峰面積的百分率，不得超過限量。88特點(diǎn)：1.不需雜質(zhì)對(duì)照品，簡便易行。

2.記錄保留時(shí)間應(yīng)為主峰的二倍。3.雜質(zhì)與藥物的吸收程度不一致時(shí)，誤差較大。89氣相色譜法(GC)檢查方法:同高效液相色譜法?！糜谒幬镏袚]發(fā)性雜質(zhì)的檢查,如藥物中殘留溶劑、農(nóng)藥殘留量等。901.紫外分光光度法

腎上腺素腎上腺酮——利用藥物和待檢雜質(zhì)對(duì)光選擇吸收性質(zhì)的差異進(jìn)行。

例1:腎上腺素腺酮的檢查二、光譜分析法91

例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查

92

通過測定藥物中所含待檢元素的原子蒸氣，吸收發(fā)自光源的該元素特定波長光的程度，以求出供試藥物中待檢元素含量的方法。優(yōu)點(diǎn):靈敏度高專屬性強(qiáng)主要用于金屬元素的測定。

2．原子吸收分光光度法93某些多晶型藥物由于其晶型結(jié)構(gòu)不同，一些化學(xué)鍵的鍵長、鍵角等發(fā)生不同程度的變化，從而導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征峰的頻率、峰形和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異。

3．紅外分光光度法主要用于藥物中無效或低效晶型的檢查94951、酸堿性的差異例：苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查甲基橙不得顯紅色二、化學(xué)分析法2、雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀

例：間苯二酚中鄰苯二酚檢查.3、雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色例：阿司匹林中游離水楊酸的測定96臭味及揮發(fā)性差異顏色差異溶解行為差異旋光性質(zhì)的差異吸附或分配性質(zhì)的差異對(duì)光吸收性質(zhì)的差異四、物理分析法972.雜質(zhì)無揮發(fā)性：

利用藥物在室溫或加熱揮發(fā)后,遺留殘?jiān)谝欢囟燃訜嶂梁阒?其重量不得超過規(guī)定.例：乙醇中不揮發(fā)物的檢查.(一)嗅味及揮發(fā)性差異

1.雜質(zhì)有特殊氣味：

乙醇中的雜醇油（異臭）98

藥物自身無色,生產(chǎn)中引入有色的有關(guān)物質(zhì)或分解產(chǎn)物.例：磺胺嘧啶原料藥顏色檢查

——磺胺苯環(huán)上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物。(二)顏色差異(三)溶解行為的差異根據(jù)藥物與雜質(zhì)溶解度的差異例：葡萄糖中糊精的檢查991.藥物有旋光度而雜質(zhì)沒有.例:黃體酮在乙醇中比旋度+186---+198(四)旋光性質(zhì)的差異2.雜質(zhì)有旋光度而藥物沒有.例:硫酸阿托品中莨菪堿的檢查,供試品水溶液50mg/mL不得過-0.4°100第一法硫代乙酰胺法1.原理

1012.操作方法樣品管對(duì)照管1023討論①

標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度②

硫代乙酰胺試液③

溶液的pH④

供試品溶液有顏色時(shí)的處理⑤

干擾物的排除方法103①

標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度適宜目視比色的濃度范圍：Pb2+標(biāo)準(zhǔn)溶液10g/ml1~2ml②

硫代乙酰胺試液

H2S試液：惡臭和毒性；不穩(wěn)定；易被空氣氧化而析出硫；濃度難以控制，改用硫代乙酰胺為顯色劑（95版藥典）104pH在3.0~3.5時(shí),呈色較完全。酸度增大,呈色變淺甚至不呈色。

③

溶液的pH④

供試品溶液有顏色時(shí)的處理a.外消色法稀焦糖溶液調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié)b.內(nèi)消色法105干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,產(chǎn)生混濁影響檢查。a.供試品中微量高價(jià)Fe3+存在如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查。排除：加入抗壞血酸,使Fe3+還原為Fe2+

⑤

干擾物的排除方法1061.原理

供試品先熾灼破壞后,使有機(jī)結(jié)合的重金屬游離,再按第一法檢查。第二法灼燒后檢查

2.操作

緩緩熾灼放冷H2SO40.5-1.0ml供試品炭化

加熱

HNO3500-600℃H2SO4

除盡放冷完全灰化

蒸干HCl2ml水15ml

中性按第一法檢查蒸干氨試液注意：做空白試驗(yàn)107a.HNO3處理后,必須蒸干除盡NO。3.討論b.熾灼溫度嚴(yán)格控制：500-600℃c.含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí)改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃(瑪瑙)蒸發(fā)皿。如：鹽酸氟奮乃靜中重金屬檢查108

1.原理

在堿性介質(zhì)中,以Na2S為顯色劑,使Pb2+與S2-作用生成PbS

的混懸液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較,不得更深。第三法硫化鈉法

適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查。

如：磺胺類與巴比妥類藥物109取供試品適量,加NaOH試液5ml和水20ml使溶解后,置納氏比色管中,加Na2S試液5滴,搖勻,與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較。2.方法3.討論Na2S對(duì)玻璃有腐蝕性,久置產(chǎn)生絮狀物,應(yīng)臨用新配。110第四法微孔濾膜法當(dāng)重金屬含量低(2-5g)時(shí),在比色管中難于目視觀察,采用本法。

1.原理同第一法

使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上(鉛斑)提高檢查的靈敏度。111SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr銻斑

Zn+HCl(一)古蔡氏法（Gutzeit）1122.裝置

檢砷瓶A導(dǎo)氣管B具孔塞CABC1133操作④加鋅粒2g,立即將裝妥的導(dǎo)氣管B密塞與A瓶,置25-40℃水浴中,反應(yīng)45分鐘,取出溴化汞試紙,比較砷斑。①導(dǎo)氣管B中裝入醋酸鉛棉球②再于旋塞C的平面上放一片溴化汞試紙③樣品、對(duì)照品分別置于檢砷瓶中,加鹽酸5ml、水21ml,再加2.5%碘化鉀試液5ml、0.3%酸性氯化亞錫試液5滴,室溫放置10分鐘。1143.討論1)試劑的作用a.KI的作用——還原劑：As5+→As3+五價(jià)砷生成AsH3的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢,加入

KI使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng),以增大AsH3的生成速度。115將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷(As5+→As3+)b.酸性SnCl2的作用

①還原劑(表現(xiàn)在3方面)116將KI被氧化生成的I2再還原為I-進(jìn)而促進(jìn)AsH3不斷生成穩(wěn)定的絡(luò)離子117H2阻礙酸與鋅粒反應(yīng)SnCl2SnCl2與Zn粒表面形成Zn-Sn齊

—去極化,使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生。118c.PbAc2棉花的作用

——排除硫化物的干擾(1mgS2-)

d.HgBr2試紙的作用：與AsH3作用生成砷斑.

1192)

反應(yīng)最佳條件a.Zn粒的大小及用量

大?。耗芡ㄟ^1號(hào)篩（850~2000m）

用量：約2g.b.標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml(1g/ml)

120a.供試品是硫化物,亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽排除方法：加入濃硝酸處理3)

干擾物的排除121Fe3+能消耗還原劑(KI、SnCl2),并能氧化砷化氫。排除方法：先加酸性SnCl2試液使Fe3+→Fe2+b.供試品是鐵鹽(Fe3+)122排除方法：進(jìn)行有機(jī)破壞酸破壞法：加稀硫酸與溴化鉀。堿破壞法：

1.加入氫氧化鈣小火灼燒使炭化，再于500-600C熾濁至完全灰化。

2.加入無水碳酸鈉堿融。c.共價(jià)鍵結(jié)合的砷化物1234)古蔡氏法特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：靈敏度