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第四章一、選擇題(每小題4分,共60分)1.PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同,它們是()①PCR過程常用的引物是人工合成的DNA單鏈②PCR過程不需要DNA聚合酶③PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的④PCR過程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制A.③④ B.①②C.①③ D.②④解析:PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同。第一,PCR過程常用的引物是人工合成的DNA單鏈,其長度通常為20~30個脫氧核苷酸。第二,PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的。答案:C2.下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,正確的有幾項()①在蛋白質(zhì)的提取和分離實驗中,凝膠色譜法可將不同相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)分離出來②在PCR中,引物的結(jié)構(gòu)和長度決定DNA子鏈從5′端向3′端延伸③在蛋白質(zhì)的提取和分離實驗中,透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)④在多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中,TaqDNA聚合酶只能特異性地復(fù)制整個DNA的部分序列A.1 B.2C.3 D.4解析:DNA復(fù)制時,DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸,和引物的結(jié)構(gòu)和長短沒有關(guān)系,故②錯誤。答案:C3.在玫瑰精油的提取中,為什么要進(jìn)行冷凝回流()A.將芳香油變成液態(tài)便于回收 B.操作方便C.防止容器受熱不均而炸裂 D.提高出油率解析:冷凝回流的目的是將芳香油變成液態(tài)便于回收,從而收集玫瑰精油。答案:A4.下列不屬于橘皮精油抽取中應(yīng)注意的事項是()A.橘皮在石灰水中浸泡時間為10小時以上B.橘皮要浸透,從而壓榨時不會滑脫C.壓榨液的黏稠度要高,從而提高出油率D.為了使橘皮油與水分離,可加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉,并調(diào)節(jié)pH至7~8解析:需要將橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,可以提高出油率,而非黏稠度越高,出油率越高。答案:C5.在植物有效成分的提取過程中,常用萃取法、蒸餾法和壓榨法,下列關(guān)于這三種方法敘述錯誤的是()A.蒸餾法的實驗原理是利用水將芳香油溶解下來,再把水蒸發(fā)掉,剩余的就是芳香油B.壓榨法的實驗原理是通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油C.萃取法的實驗原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油D.蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油解析:蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來,適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油。壓榨法通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油,適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取。萃取法使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油,它的適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶液中。答案:A6.下列說法中正確的是()A.乳濁液經(jīng)分液漏斗分離后的油層中不含水B.加入無水硫酸鈉的目的是避免玫瑰油的揮發(fā)C.無水硫酸鈉具有吸水的功能D.氯化鈉能使水和油充分混合解析:乳濁液經(jīng)分液漏斗分離后的油層中還含有水,加入無水硫酸鈉的目的就是吸收其中的水,放置過夜后,再過濾除去固體的硫酸鈉就可以得到玫瑰油了。無水硫酸鈉不與芳香油發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。氯化鈉能使水和油分開,利于水、油的分層。答案:C7.在玫瑰精油提取過程中,依次用到清水、氯化鈉、無水硫酸鈉,它們的作用分別是()A.溶解、萃取、除水 B.蒸餾、萃取、除顆粒雜質(zhì)C.蒸餾、油水分層、除水 D.溶解、油水分層、除水解析:在提取玫瑰精油的過程中,加入清水共沸,可以通過水分子向原料細(xì)胞中滲透,使植物中的芳香油成分向水中擴(kuò)散,并隨水分子蒸餾出來;加入氯化鈉的目的是使油水乳濁液分層,便于分液;加無水硫酸鈉可以除去芳香油中的水分,提高產(chǎn)品純度。答案:C8.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如圖所示,下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是()A.若將樣品以2000r/min的速度離心10min,分子戊在沉淀中,則丙也一定在沉淀中B.若用凝膠色譜法分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最快C.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子丙保留在袋內(nèi),則乙也一定保留在袋內(nèi)D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子丁形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)答案:A9.以下關(guān)于選用紙層析法鑒定制取的胡蘿卜素粗品的操作錯誤的是()A.在18cm×30cm濾紙下端距底邊2cm處做一基線,在基線上取A、BB.用最細(xì)的注射器針頭分別吸取0.1~0.4mL溶解在石油醚中的標(biāo)準(zhǔn)樣品和提取樣品,在A、D和B、C點上點樣C.每次點樣后,可用吹風(fēng)機(jī)將溶劑吹干,注意保持濾紙干燥,待干后,將濾紙卷成圓桶狀D.將濾紙置于裝有3解析:應(yīng)將濾紙置于裝有1答案:D10.萃取劑是萃取過程中必不可少的,其選擇也是至關(guān)重要的,一般不考慮()A.萃取劑與萃取物的溶劑互不相溶B.萃取物在萃取劑中的溶解度要大于在原溶液中的溶解度C.萃取劑的沸點,以便其從產(chǎn)品中完全除去,不會影響產(chǎn)品的質(zhì)量D.萃取劑可分為水溶性和水不溶性兩種解析:根據(jù)產(chǎn)品生產(chǎn)需要選擇適合的萃取劑。答案:D11.下圖為科研人員分別用六種不同的提取溶劑(編號為1~6)按相同的提取步驟進(jìn)行提取類胡蘿卜素的含量圖,下列敘述錯誤的是()A.使用有機(jī)溶劑為提取劑,是因為類胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑B.相同的提取步驟是為了確保單一變量C.實驗課題為探究六種溶劑系統(tǒng)對枸杞中類胡蘿卜素提取的影響D.實驗結(jié)論為不同溶劑對不同品種的類胡蘿卜素的提取量影響不同解析:從圖中看,自變量為六種溶劑,因變量為類胡蘿卜素的提取量,結(jié)論應(yīng)為不同溶劑對同一品種(枸杞)的類胡蘿卜素的提取量影響不同。答案:D12.PCR技術(shù)可擴(kuò)增DNA分子,電泳技術(shù)是將待測樣品放在光滑的凝膠薄膜上,并加上直流電場,利用分子所帶電荷不同可分離和分析氨基酸及核苷酸片段等有機(jī)物。下圖中甲是把含有21個氨基酸的多肽進(jìn)行水解,將氨基酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果。圖乙是通過提取某小孩B和四位待測男性(F1~F4)的DNA進(jìn)行擴(kuò)增后,進(jìn)行電泳所得到的一組DNA指紋圖譜。請據(jù)圖回答,多肽由幾種氨基酸組成,B的父親是四位男性中的()A.7和F4 B.4和F3C.6和F3 D.5和F2答案:A13.下圖是用于蒸餾的裝置圖,下列有關(guān)說法中,不正確的是()A.此裝置的安裝順序是自下而上,自左而右B.該裝置可用于玫瑰精油的提取和胡蘿卜素的提取,且用法相同C.中間部分的作用是冷凝,若用于玫瑰精油的提取,冷卻后形成油水混合物D.若用于玫瑰精油的提取,則冷凝后的混合物中,可加入氯化鈉使其分層解析:根據(jù)玫瑰精油和胡蘿卜素的溶解特點,玫瑰精油適于用蒸餾法提取,而胡蘿卜素,則宜用萃取法提取。答案:B14.下列關(guān)于凝膠色譜法的說法正確的是()A.是根據(jù)蛋白質(zhì)對其他分子的親和力來分離蛋白質(zhì)的B.凝膠是一些微小的無孔的球體,小球體都是由多糖類化合物構(gòu)成的C.相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)的路程較長,但移動速度較快D.相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快解析:凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。所用的凝膠實際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成的,在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程越長,移動速度較慢;而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。答案:D15.在PCR實驗操作中,下列說法不正確的是()A.在微量離心管中添加各種試劑時,只需一個槍頭B.離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止液體外溢C.用手輕彈離心管壁的目的是使反應(yīng)液充分混合D.離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果解析:在微量離心管中添加各種試劑時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須更換,確保實驗的準(zhǔn)確性;離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止實驗中脫落或液體外溢;離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果。答案:A二、非選擇題(共40分)16.(8分)DNA分子雜交技術(shù)在基因診斷和環(huán)境監(jiān)測等方面具有廣泛的應(yīng)用。以基因診斷為例:首先從測試者的血液或組織細(xì)胞中提取DNA,用限制性內(nèi)切酶將DNA切割成小片段后分離,再使用特別的“探針”去尋找基因。如用β-球蛋白的DNA可以檢測出鐮刀型細(xì)胞貧血癥,用苯丙氨酸羥化酶的基因探針可以檢測出苯丙酮尿癥。分析并回答:(1)限制性內(nèi)切酶能識別特定的脫氧核苷酸序列,將DNA樣品切成特定的小片段。這主要體現(xiàn)了酶的作用具有________的特點。(2)樣品DNA經(jīng)PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增,可以獲得大量的DNA克隆分子。其原理是利用DNA的半保留復(fù)制,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖),在很短的時間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍,甚至幾十億倍,使實驗所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。①圖中A過程表示________,加熱至94℃的目的是使DNA分子中的鍵斷裂。這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過________②若相同長度的DNA分子片段中,(A+T)/(G+C)的比值越________,其分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性越強。③分析比較PCR技術(shù)與人體細(xì)胞內(nèi)DNA分子復(fù)制的過程,可知二者的必需條件中,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少還應(yīng)有的三個條件是________________________________________________________________。④若DNA樣品中有腺嘌呤20個,該片段擴(kuò)增n次,需向試管內(nèi)至少加入________個腺嘌呤脫氧核苷酸。答案:(1)專一性(2)①DNA解旋解旋酶②大③一定的溫度、適宜的pH、緩沖液環(huán)境④(2n-1)×2017.(10分)如圖所示,比較提取玫瑰精油的水蒸氣蒸餾裝置和提取胡蘿卜素的裝置,回答有關(guān)問題:(1)A裝置中提取物最后存在于________中,B裝置提取物存在于________中。(2)兩個裝置的差別是由于提取的方法不同,歸根到底是由于提取物的分子結(jié)構(gòu)不同、理化性質(zhì)不同。A裝置中的提取物一般具有________,B裝置中提取物在石油醚等有機(jī)溶劑中有較高的________。(3)B裝置需避免明火加熱,其原因是__________________;在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置的作用是______________________________________________________。解析:(1)A裝置是蒸餾過程,提取物隨水蒸氣蒸發(fā)后由于冷凝管的冷凝作用最后進(jìn)入接收瓶,而B裝置是萃取,提取物最終溶解在燒瓶內(nèi)的有機(jī)溶劑中。(2)A裝置提取物必須具揮發(fā)性才能隨水蒸氣進(jìn)入接收瓶,B裝置提取物只有在有機(jī)溶劑中有高溶解度才能萃取出來。(3)如果萃取液是有機(jī)溶劑,需要隔水加熱,目的是防止有機(jī)溶劑燃燒或爆炸,冷凝回流裝置的作用是防止加熱時有機(jī)溶劑揮發(fā)。答案:(1)接收瓶(錐形瓶)燒瓶(2)揮發(fā)性溶解度(3)有機(jī)溶劑是易燃物,直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸防止加熱時有機(jī)溶劑揮發(fā)18.(8分)近十年來,PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實驗室里的一種常規(guī)手段,其原理是利用DNA半保留復(fù)制,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如下圖所示),在很短的時間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍,使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(1)加熱使DNA雙鏈打開,這一步是打開________鍵,稱為________,細(xì)胞中DNA的氫鍵是在________的作用下使此鍵斷裂。(2)當(dāng)溫度降低時,引物與模板末端結(jié)合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最終合成2條DNA分子,此過程中原料是________,遵循的原則是________________________________________________________________。(3)PCR技術(shù)的必要條件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少還需要三個條件,即:液體環(huán)境、適宜的________和________。(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制,若將一個用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中,以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制四次后,則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA總數(shù)的比例為________。解析:本題考查DNA復(fù)制的過程及特點以及PCR技術(shù)的基本條件。運用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時,首先要解螺旋,然后以親代DNA為模板,合成引物。在引物的引導(dǎo)下,利用DNA聚合酶的酶促反應(yīng)按5′→3′方向復(fù)制出互補DNA。答案:(1)氫解旋解旋酶(2)脫氧核苷酸堿基互補配對原則(3)溫度酸堿度(4)1/819.(8分)圍繞提取玫瑰精油的實驗流程,回答以下問題:(1)圖中A過程是____________,這一過程中重要的實驗儀器是________、________。(2)流程中操作③是________,目的是_____________________________________。(3)為確保玫瑰精油的提取,應(yīng)選擇鮮玫瑰花與清水的質(zhì)量比值是________。采用________分離油層。(4)玫瑰精油的提取可以用有機(jī)溶劑萃取嗎?________。為什么?________________________________。解析:水蒸氣蒸餾是常用的方法,原理是水和芳香油沸點不同,利用水蒸氣將揮發(fā)性強的芳香油攜帶出來,形成油水混合物,再冷卻分離。根據(jù)原料放置的位置,可分為水中蒸餾、水上蒸餾、水汽蒸餾。蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油。蒸餾過程中需要蒸餾燒瓶、冷凝管等;流程中①加入氯化鈉,使油水分層;②操作是加入無水硫酸鈉,以吸收多余的水分;③操作是過濾,除去固體硫酸鈉。為確保玫瑰精油的提取,應(yīng)使鮮玫瑰花與清水的質(zhì)量比值為1∶4。采用分液漏斗分離油層。玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,可以用有機(jī)溶劑萃取。答案:(1)水蒸氣蒸餾蒸餾燒瓶冷凝管(2)過濾除去固體硫酸鈉(3)1∶4分液漏斗(4)可以玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,
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