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認(rèn)證類型：個(gè)人認(rèn)證

認(rèn)證主體：黃**（實(shí)名認(rèn)證）

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IP屬地：上海 上傳時(shí)間：2023-02-05 格式：DOCX 頁數(shù)：9 大小：18.46KB 積分：20 舉報(bào) 版權(quán)申訴

11試驗(yàn)一大型海藻種類形態(tài)觀看〔4學(xué)時(shí)第八周〕一、試驗(yàn)?zāi)康牧私夂Ｑ笤孱?大型海藻與微藻的形態(tài)與分類。二、試驗(yàn)材料及用具1、試驗(yàn)材料：大型海藻標(biāo)本〔學(xué)院標(biāo)本室〕；海帶孢子體〔可用干海帶泡發(fā)〕，江籬〔海洋學(xué)院四周打撈〕；〔取一局部凍存于-20冰箱，作為葉綠素提取試驗(yàn)的材料〕2、試驗(yàn)器材：顯微鏡、膠頭滴管〔每瓶藻一支〕、蓋玻片、載玻片、刀片〔做海藻切片〕。4、試劑：70%乙醇〔每組一瓶〕三、試驗(yàn)步驟1、大型海藻標(biāo)本觀看；將標(biāo)本館的拉丁文名抄錄下來，網(wǎng)上檢索圖片和分類。2、海帶的外部形態(tài)觀看：藻體明顯分為固著器、柄部和葉片，在葉片中心有兩條平行縱走的淺溝，孢子體幼齡期葉面平滑，小海帶期葉片消滅凹凸現(xiàn)象，大海帶期葉面則平直寬厚。3、海帶的內(nèi)部構(gòu)造：①用徒手切片的方法，取一小塊孢子體進(jìn)展橫切片，在顯微鏡下觀看：孢子體的柄和葉均分為表層、皮層和髓部。②同樣取一小塊孢子體進(jìn)展縱切片，在顯微鏡下觀看：表皮層由1-2層排列嚴(yán)密的小細(xì)胞組成，外皮層細(xì)胞間分布1-2層粘液腔，其腔內(nèi)有分泌細(xì)胞，髓絲細(xì)胞一端膨大為喇叭花，分生細(xì)胞位于葉片與柄之間。4、江蘺的內(nèi)部構(gòu)造觀看：①江蘺的縱切面。②江蘺的橫切面。③江蘺囊果橫切面。5、紫菜的形態(tài)與構(gòu)造：干紫菜先用水浸泡散開，再進(jìn)展觀看。固著器：由根絲集合而成。葉狀體：由一層或兩層細(xì)胞構(gòu)成。柄：葉狀體基部與固著器之間的局部。四、作業(yè)：1、繪制大型海藻圖：選5個(gè)標(biāo)本，注明拉丁文名，簡要說明其生物學(xué)特性〔利用拉丁文名進(jìn)展網(wǎng)上檢索〕。2、繪出海帶和江籬的內(nèi)部構(gòu)造，紫菜的外形。1：江籬與海帶的內(nèi)部構(gòu)造藻體橫切面觀；藻體縱切面觀；1表皮；2髓部細(xì)胞3表皮細(xì)胞2.海帶構(gòu)造A.海帶孢子體橫切面；B.髓部，C.示喇叭絲；皮層局部橫切面，示粘液腔道形成的時(shí)期；Dco皮層；e分泌細(xì)胞；hg藻絲；mems分泌腔；v.b.f結(jié)合的喇叭絲試驗(yàn)二微型海藻形態(tài)觀看和培育〔4學(xué)時(shí)，第九周〕一、試驗(yàn)?zāi)康挠^看幾種重要經(jīng)濟(jì)微藻的形態(tài)特征，幾種把握單細(xì)胞微藻的試驗(yàn)室培育方法，細(xì)胞生長曲線觀看。二、試驗(yàn)材料及用具1、試驗(yàn)材料：小球藻、扁藻、等鞭金藻、角毛藻、骨條藻、繭形藻、池塘水樣等微藻。2、試驗(yàn)儀器：電爐、恒溫枯燥箱、滅菌鍋、pH計(jì)、可見分光光度計(jì)、血球計(jì)數(shù)板3、試驗(yàn)器材：500ml〔每組5個(gè)〕；0.45m的濾膜〔一個(gè)〕；抽濾裝置(或針管)；玻棒、500ml燒杯、50ml容量瓶〔每組一個(gè)〕；250ml〔2〕、牛皮紙、細(xì)綿繩4、試劑：蒸餾水、消毒海水、各種試劑〔見培育基配方〕，微藻培育母液三、試驗(yàn)步驟1、微藻形態(tài)觀看：分別取各種微藻水樣置于載玻片上，蓋上蓋玻片，于顯微鏡下觀看。先用10倍鏡觀看，然后轉(zhuǎn)換物鏡轉(zhuǎn)換器用40倍觀看。2、培育基母液配制〔配方見附2〕：〔提前配好，有興趣的同學(xué)可與試驗(yàn)教師王教師聯(lián)系好時(shí)間，學(xué)習(xí)配制〕1000倍培育基母液〔強(qiáng)調(diào)維生素母液的配制方法〕1。3、培育微藻的容器、工具及用水的消毒〔提前預(yù)備〕：培育微藻所用的容器、工具應(yīng)用洗刷干凈后晾干，放置恒溫枯燥箱中加熱，120℃1加熱煮沸消毒海水冷卻至室溫后備用。4、配制微藻培育液。依據(jù)母液配制比例把母液參加消毒海水，配制培育液〔例如，1000倍母液，則每升消毒海水中參加1毫升母液，搖擺均勻，就成了培育液〕。5、接種：取兩種微藻，各按1/3～1/5接種〔即把1份藻種參加3～5液中〕。6、培育、治理。將接種好的微藻置于適宜的條件下培育，每天搖擺1-27、藻細(xì)胞密度計(jì)數(shù)〔方法見附3〕。分光光度計(jì)測定吸光值或血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)藻細(xì)胞密度。不同種類的微藻所選用的波長不一樣，一般綠藻720-750420。8、本試驗(yàn)承受分光光度計(jì)每2天測定一次，培育時(shí)間為橫坐標(biāo)，OD四、作業(yè)：1、繪制觀看到的微藻的形態(tài)圖。2、通過哪些具體措施使培育基無菌？3、為何配制母液？配制培育基時(shí)，為何要等消毒海水冷卻后再加母液？4、EDTA5OD值為縱坐標(biāo)，作圖。6、計(jì)算每瓶藻的培育6天的生長速率，公式如下：K=〔lnN2–lnN1〕/〔t2-t1〕〔1〕T=0.6931/K〔2〕其中：K為相對生長速率；t1、t2為對應(yīng)的培育時(shí)間；N1和N2t1、t2OD；T平均倍增時(shí)間。t1就是剛放入培育箱的那天，計(jì)算培育6天后〔即t2-t1=6,lnN1、lnN2分別為培育第一天和第六天的OD值的自然對數(shù)〕的K1天到最終1天的K值，分別以表格的形式表示。附1：單細(xì)胞微藻的培育基配方〔一〕3試劑名稱重量試劑名稱重量〔mg〕NaNO3100mgKH2PO410mgFeSO42.5mgMnSO40.25mgNa2-EDTA10mg維生素B16μg維生素B120.05μg自然海水1000ml〔二〕F/2(+Si1.A液500ml1000NaNO337.5g;NaH2PO42.5g2.B液500ml1000Fe-EDTA2.5g(FeCl31.6g+EDTA0.9g)3.C500ml1000Na2SiO3.9H2O10g4.D500ml1000鹽酸硫銨素(VB1)5mg(試劑50mg/ml100μl)BiotinVH0.025mg(試劑0.1mg/ml取250μl)VB120.025mg(試劑0.25mg/ml100μl)先用維生素分別用純水溶解混合，稀HCl將pH調(diào)到4.5~5.0，最終15.E液500ml1000CuSO4.5H2O0.0098mgZnSO4.7H2O0.022mgCaCl2.6H2O0.01mgMgCl2.4H2O0.180mgNa2MoO4.2H2O0.0063mg1000ml(1升)F/2(+Si1000ml(1升)過濾滅菌海水+1mlA液+1mlB1mlD1mlE液(+1mlC3：單細(xì)胞藻類的定量方法〔一〕重量測定法：濕重法；干重法〔二〕個(gè)體計(jì)數(shù)法：水滴計(jì)數(shù)法；血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法；血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)方法：放大3.血球計(jì)數(shù)板攪拌：由于藻類細(xì)胞在培育液中分布不均勻，所以在取產(chǎn)前必需進(jìn)展攪拌，攪拌后馬上取樣。固定、稀釋：運(yùn)動(dòng)細(xì)胞需加碘液殺死才能計(jì)數(shù)。如細(xì)胞濃度過大，計(jì)數(shù)困難，需把水樣稀釋到適宜的程度。計(jì)數(shù)板與蓋玻片洗凈擦干――蓋好蓋玻片――搖蕩藻液――吸取藻液〔干的平口微吸管〕――快速把吸管放在計(jì)數(shù)板上的蓋玻片邊緣處，輕壓橡皮頭，使藻液流入計(jì)數(shù)板內(nèi)――1分鐘后低倍鏡下計(jì)數(shù)－計(jì)數(shù)任何對角兩大格〔加蓋玻片后每一大格即形成一個(gè)體積為0.1立方毫米的空間〕，然后取其平均值。每個(gè)樣品須重復(fù)計(jì)數(shù)兩次。1毫升水體藻細(xì)胞＝計(jì)算平均值×10,000×藻稀釋倍數(shù)魯哥氏液〔Lugol”sSolution〕6克的碘化鉀溶于20毫升水中，待完全溶解后參加4克碘，搖蕩，待碘完80〔三〕分光光度計(jì)定量法微藻的細(xì)胞密度在某一范圍內(nèi)與分光光度計(jì)在特定波長下的 OD值的大小成正比關(guān)系，因此，可用分光光度計(jì)直接定量。測定步驟：預(yù)熱分光光度計(jì)約20min，選擇波長〔綠藻門720-750，硅藻420〕，用培育液作為參比，調(diào)零。分別測定待測藻液的OD值。以培育時(shí)間為橫坐標(biāo)，相對應(yīng)藻液的OD值為縱坐標(biāo)，作圖。試驗(yàn)三藻類細(xì)胞葉綠素的提取和細(xì)胞色素的觀看〔4學(xué)時(shí)，第十一周〕注：第十周連續(xù)培育微藻一、試驗(yàn)?zāi)康陌盐沾笮秃臀⑿秃Ｔ迦~綠素測定方法。觀看比較不同門藻類的葉綠素的吸取光譜。葉綠素含量是衡量大型海藻生長狀態(tài)的指標(biāo)之一。浮游植物葉綠素含量，可用來初步估量浮游植物的光合作用力量，并進(jìn)展估量水域初級生產(chǎn)力。同樣也適用于試驗(yàn)室單種培育試驗(yàn)的定量方面。二、試驗(yàn)材料及用具1、試驗(yàn)材料：海帶、江籬2、試驗(yàn)器材：研缽〔每組一套〕、15ml刻度試管〔每組2支，盡量使用玻璃試管〕、剪刀、分光光度計(jì)、天平、葉綠素?zé)晒庥^看箱〔一端帶光源的紙箱〕、臺式離心機(jī)〔不用控溫〕、膠頭滴管〔每組2支〕、10ml〔2〕4、試劑：90%丙酮〔分析純〕、MgCO3三、試驗(yàn)步驟1、取樣：清洗海帶和江籬，剪取藻體0.05g左右(記錄準(zhǔn)確的重量)。22－3ml901MgCO3，研磨，在弱光下研磨1到2min，再用5ml的90％丙酮把杵上和研磨管內(nèi)的東西洗入15ml的有螺旋蓋的離心管內(nèi)，靜置于暗處10min，使色素充分被提取。3、離心〔2023g，5min〕或靜置，使固液分別。4、測定：留神移取將上清液放入玻璃試管內(nèi)，在分光光度計(jì)上，1cm比色皿分別讀取750nm、663nm、645nm、630nm波長的吸光度，并以90％的丙酮作校正吸光度測定。6、計(jì)算：分別從 663、645、630nm時(shí)的光密度值，減去750nm時(shí)的光密度值，再除以液槽光程〔厘米〕，即為D663、D645、D63090％丙酮中的含量。Chla〔μg/ml〕=11.64*