生理實驗十一 血液組成、紅細胞比容和紅細胞脆性試驗以及瘤胃微生物觀察及對飼料成分的消化分析

實驗十一血液組成、紅細胞比容和紅細胞脆性試驗（實驗）以及瘤胃微生物觀察及對飼料成分的消化分析（示教）

血液組成和紅細胞比容測定

目的：了解血液的組成，區(qū)別血漿、血清、血細胞及纖維蛋白，測定紅細胞比容。原理：血液是一種廣義的結(jié)締組織，它是由液態(tài)的血漿和懸浮于其中的血細胞所組成?？鼓闆r下離心，由于血細胞比重略大于血漿，將出現(xiàn)分層，上部為血漿。下部壓緊的血細胞占全血的體積比稱為紅細胞壓積（packedcellvolum,簡稱PCV），又叫比容。若不加抗凝劑，血液凝固會析出血清。實驗對象：家兔實驗用品：注射器、溫（Wintrobe）氏比容管、吸管、離心機、抗凝劑（肝素鈉等）。步驟：1）家兔以烏拉坦（1g/kg，i.v.）麻醉、背位固定2）頸總動脈插管（用0.1％肝素溶液濕潤），放血入肝素抗凝燒杯內(nèi)3）吸取10ml抗凝血徐徐注入溫氏管，定容至刻度“0”,3000r/min離心30min。取出，讀取血細胞柱刻度；再次離心5min,若刻度不變，即為血細胞壓積值。4）觀察比容管中血液，上層為血漿，下層為紅細胞，中間一白色薄層為白細胞和血小板。5）讀數(shù)，計算紅細胞比容（％）

結(jié)果：男：40～50％女：37～48％選做：6）取新鮮血置試管中，靜置片刻?？梢姕啙岬难?yōu)橐粭l血凝塊，周圍有清亮的血清析出。為加速此過程，可先離心幾分鐘或略加溫。7）取新鮮血置小燒杯中，立即用小竹刷攪動。取出竹刷，用自來水沖洗，可見上面纏繞的白色有韌性的纖維蛋白。脫纖維蛋白血不再凝固。紅細胞滲透脆性目的：學(xué)習(xí)滲透脆性實驗方法，進一步理解紅細胞生理特性和血漿滲透壓的理論知識。原理：紅細胞在低滲溶液中，會因過多水分進入紅細胞而膨脹，甚至破裂，血紅蛋白釋出，稱為溶血。紅細胞膜對低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱紅細胞的滲透脆性（osmoticfragility）。將血液滴入不同濃度的低滲溶液中，可檢查紅細胞膜對于低滲溶液抵抗力的大小。開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲溶液濃度為該血液紅細胞的最小抵抗力，即最大脆性；出現(xiàn)完全溶血時的低滲溶液濃度則為該血液紅細胞的最大抵抗力，即最小脆性。材料和方法：材料：家兔、兔手術(shù)臺、哺乳動物手術(shù)器械一套、動脈夾、細塑料管（或動脈插管）、注射器和針頭、20%氨基甲酸乙酯溶液、10ml小試管、試管架、滴管、1ml吸管、1%NaCl液、蒸餾水。方法：溶液配制取小試管10個，編號后排列于試管架上，按表6.1-1要求向各試管內(nèi)加入不同體積的1%NaCl溶液和蒸餾水，配制出10種不同濃度的NaCl的低滲溶液：見下表試管號123456789101%NaCl(ml)0.900.650.600.550.50.450.400.350.300.25蒸餾水（ml）0.10.350.400.450.50.550.60.650.700.75NaCl溶液濃度（%）0.90.650.600.550.50.450.400.350.300.25加抗凝血用滴管吸取抗凝血，在各試管中各加1滴，搖勻，靜置1～2h。結(jié)果判斷根據(jù)各管中液體顏色和混濁度的不同，判斷紅細胞脆性。未發(fā)生溶血的試管（－）：液體下層為混濁紅色，上層為無色，表明無紅細胞破裂。部分溶血的試管（±）：液體下層為混濁紅色，上層出現(xiàn)透明紅色，表明部分紅細胞已破裂，稱為不完全溶血。全部溶血的試管（＋）：液體完全變成透明紅色，表明紅細胞完全破裂，稱為完全溶血。結(jié)果：記錄紅細胞滲透脆性的范圍，報告該血樣的紅細胞最小滲透抵抗力和最大滲透抵抗力。注意事項：配制不同濃度的低滲溶液時，小試管應(yīng)干燥。加抗凝血量要準確一致。混勻時，用手指堵住試管口，輕輕傾倒1～2次，減少機械震動，避免人為的溶血?？鼓齽┳詈糜酶嗡?，其他抗凝劑可改變?nèi)芤旱臐B透壓。討論：紅細胞的形態(tài)與生