高中生物高考高考沖刺 2023年高考全國(guó)生物模擬試題分章匯編

2023年高考全國(guó)生物試題分章匯編目次必修Ⅰ《分子與細(xì)胞》 ⑥無(wú)機(jī)環(huán)境【解析】（1）根據(jù)題干可級(jí)之間的能量流動(dòng)效率10%～20%；2、每個(gè)種群只處于一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)。戊占有能量最多，應(yīng)屬于第一營(yíng)養(yǎng)級(jí)；乙和丙能量值處于同一數(shù)量級(jí)并且二者之和（）介于戊能量值的10%～20%（%），故乙和丙應(yīng)同屬于第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)；甲能量值介于第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)的10%～20%（%），應(yīng)屬于第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)；丁能量值介于第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)的10%～20%（%），應(yīng)屬于第四營(yíng)養(yǎng)級(jí)。（2）根據(jù)（1）的：甲乙種間關(guān)系是捕食；題干已聲明所列數(shù)據(jù)不包括分解者，而戊屬于第一營(yíng)養(yǎng)級(jí)，為生產(chǎn)者，因此其余生物包括丁在內(nèi)均為消費(fèi)者。（3）物質(zhì)循環(huán)、能量流動(dòng)、信息傳遞是生態(tài)系統(tǒng)的三大主要功能；碳以CO2的形式在生物群落與無(wú)機(jī)環(huán)境之間循環(huán)往復(fù)。（江蘇卷）26.（7分）機(jī)場(chǎng)飛行跑道及場(chǎng)內(nèi)小路多是大片草地，有多種動(dòng)物棲息。右圖是某機(jī)場(chǎng)生態(tài)系統(tǒng)食物網(wǎng)的主要部分。請(qǐng)回答問(wèn)題：（1）此食物網(wǎng)中，小型猛禽分別處于營(yíng)養(yǎng)級(jí)。（2）機(jī)場(chǎng)內(nèi)的小鳥初遇稻草人十分驚恐，這種反應(yīng)屬于反射。（3）工作人員根據(jù)生態(tài)系統(tǒng)中信息傳遞的特點(diǎn)，釋放訓(xùn)練過(guò)的獵鷹來(lái)驅(qū)趕小鳥。（4）為了進(jìn)機(jī)場(chǎng)先鏟除原有雜草，而后引種了蟲和鳥都不愛(ài)吃的“驅(qū)鳥草”，機(jī)場(chǎng)內(nèi)小鳥大為減少。以后“驅(qū)鳥草”逐漸被雜草“扼殺”，這種生物群落的變化過(guò)程屬于演替。（5）為了解機(jī)場(chǎng)內(nèi)蝸牛密人員各自隨機(jī)布設(shè)樣方如下圖所示（圖中陰影帶為水泥小路，其他處為草地），其中最合理的是（填序號(hào)）。調(diào)查中某個(gè)樣方內(nèi)蝸牛分布示意圖如下，改樣方的蝸牛數(shù)應(yīng)記為。【答案】（7分）（1）第三、第四、第五（2）條件（3）行為（4）次生（5）①6或7【解析】本題考查了生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能，以及群落演替、用五點(diǎn)取樣法調(diào)查蝸牛的種群密度，及條件反射的概念等知識(shí)點(diǎn)，屬容易題。（1）在該機(jī)場(chǎng)生態(tài)系統(tǒng)食物網(wǎng)中物在不同食物鏈中所處的營(yíng)養(yǎng)級(jí)不同，如：在“草→昆蟲→小型猛禽”在中位于“第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)”；而在“草→昆蟲→雜食性小鳥→小型猛禽”中位于“第四營(yíng)養(yǎng)級(jí)”；而在“草→昆蟲→雜食性小鳥→蛇→小型猛禽”中位于“第五營(yíng)養(yǎng)級(jí)”。所以本題填第三、第四、第五。（2）機(jī)場(chǎng)內(nèi)的小鳥初遇稻草人十分恐怖，是后天學(xué)習(xí)或生活經(jīng)驗(yàn)中形成的條件反射活動(dòng)，故填條件反射。（3）本題中利用了訓(xùn)練的獵鷹能驅(qū)趕小鳥這種動(dòng)物的特殊行為來(lái)驅(qū)趕機(jī)場(chǎng)小鳥，所以屬于生態(tài)系統(tǒng)的行為信息。（4）在本題中雖然人為鏟除雜草，種上“驅(qū)蟲草”后其又被雜草取代，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體，屬于次生演替。（5）根據(jù)種群密度則;隨機(jī)取樣，避免人為因素的干擾，故①取樣最合理；根據(jù)樣方的計(jì)數(shù)原則：其數(shù)目為統(tǒng)計(jì)樣方內(nèi)所有個(gè)體數(shù)和相鄰兩邊及其頂角的個(gè)體數(shù)”原則；在本樣方內(nèi)共6只蝸牛，內(nèi)+左上=7；內(nèi)+左下=7；內(nèi)+右下=7；內(nèi)+右上=6，故本題答案填6或7。第六章生態(tài)環(huán)境的保護(hù)（江蘇卷）17.下列關(guān)于生物多樣性的敘述，錯(cuò)誤的是A.生態(tài)系統(tǒng)中捕食者的存在可以促進(jìn)物種多樣性的提高B.把沼澤地改造成人造林是增加生物多樣性的重要手段C.花費(fèi)大量人力物力保護(hù)無(wú)經(jīng)濟(jì)價(jià)值的物種是為人類生存發(fā)展保留空間D.農(nóng)田是具有高度目的性的人工生態(tài)系統(tǒng)，清除雜草與保護(hù)生物多樣性的原則不矛盾【答案】B【解析】捕食者往往捕食個(gè)體數(shù)量其它物種的生存阻力減小,可以促進(jìn)物種多樣性的提高，A項(xiàng)正確；把沼澤地改造成人造林是降低生物多樣性，故B錯(cuò)誤；無(wú)經(jīng)濟(jì)價(jià)值的物種還有間接價(jià)值和潛在價(jià)值，保護(hù)生物多樣性才能實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展，故C項(xiàng)正確；農(nóng)田人工生態(tài)系統(tǒng)運(yùn)行的目的不是為維持自身的平衡，而是為滿足人類的需要。清除雜草是為了使能量盡可能流向?qū)θ祟愑幸娴霓r(nóng)作物，故D正確。生物實(shí)驗(yàn)（2023重慶卷）1.下列與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的敘述，正確的是A．人的口腔上皮細(xì)胞經(jīng)處理后被甲基綠染色，其細(xì)胞核呈綠色B．剪取大蒜根尖分生區(qū)，經(jīng)染色在光鏡下可見(jiàn)有絲分裂各時(shí)期C．葉綠體色素在層析液中的溶解度越高，在濾紙上擴(kuò)散就越慢D．在光鏡的高倍鏡下觀察新鮮菠菜葉裝片，可見(jiàn)葉綠體的結(jié)構(gòu)【答案】A【解析】甲基綠可將D，DNA主要分布于細(xì)胞核中，A正確；在光鏡下不一定能觀察到有絲分裂所有時(shí)期，B錯(cuò)誤；葉綠體色素在層析液中溶解度越大，擴(kuò)散速度越快，C錯(cuò)誤；光鏡下只能觀察到葉綠體的形狀不能看到其結(jié)構(gòu)，D錯(cuò)誤。（2023山東卷）4.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的描述，正確的是 A．鑒定待測(cè)質(zhì)時(shí)，先加NaOH溶液，振蕩后再加CuS04溶液

B．制作細(xì)胞的有絲分裂裝片時(shí)，洋蔥根尖解離后直接用龍膽紫溶液染色

C．低溫誘導(dǎo)染色體加倍實(shí)驗(yàn)中，將大蒜根尖制成裝片后再進(jìn)行低溫處理

D．探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí)，將酶與底物溶液在室溫下混合后于不同溫度下保溫【答案】A【解析】鑒定蛋白質(zhì)用雙縮脲試劑，aOH溶液），振蕩后加B液（CuS04溶液）；制作細(xì)胞有絲分裂裝片時(shí)，解離后應(yīng)先在清水中漂洗，防止解離過(guò)度，再用龍膽紫溶液染色；低溫誘導(dǎo)染色體加倍實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)先低溫處理使染色體數(shù)目加倍然后再制片，先制片會(huì)殺死細(xì)胞，無(wú)法誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍；探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí)，酶與底物應(yīng)該先在預(yù)設(shè)溫度下保溫后再混合，保證反應(yīng)開(kāi)始的時(shí)候便達(dá)到預(yù)設(shè)溫度。（四川卷）4.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)方法或檢測(cè)試劑的敘述，正確的是A．用改良苯酚品紅染色觀察低溫誘導(dǎo)的植物染色體數(shù)目變化B．用健那綠和吡羅紅染色觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布C．用紙層析法提取菠菜綠葉中的色素和鑒定胡蘿卜素提取粗品D．用標(biāo)志重捕法調(diào)查田鼠種群密度及農(nóng)田土壤小動(dòng)物的豐富度【答案】A【解析】A.改良苯酚品紅染液是染色的優(yōu)良試劑，故A正確。B.健那綠染液是對(duì)活細(xì)胞中線粒體進(jìn)行染色的專一性染劑，故B錯(cuò)。C.紙層析法是對(duì)葉綠體中色素進(jìn)行分離的方法,故C錯(cuò)。D.標(biāo)志重捕法是用來(lái)調(diào)查活動(dòng)能力比較強(qiáng)，活動(dòng)范圍比較大的動(dòng)物種群密度的方法，土壤小動(dòng)物豐富度的調(diào)查用取樣器取樣法，故D錯(cuò)。（北京卷）5.在25℃的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成的是A.光合色素的提取與分離B.用斐林（本尼迪特）試劑鑒定還原糖C.大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)D.制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基【答案】A【解析】A項(xiàng)，該實(shí)驗(yàn)的操作在常，技術(shù)難度要求不高；B項(xiàng)使用斐林試劑鑒定可溶性還原糖實(shí)驗(yàn)中需要進(jìn)行50～65℃水浴加熱；C項(xiàng)大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)則需要無(wú)菌且溫度與大鼠體溫(37℃左右)接近的恒溫箱進(jìn)行培養(yǎng)；D項(xiàng)制備固體培養(yǎng)基需要對(duì)其進(jìn)行滅菌處理常使用高壓蒸汽滅菌，所以25℃不合適。（江蘇卷）22.關(guān)于生物組織中還原糖的鑒定，下列敘述正確的是A.量取2mL斐林試劑時(shí)應(yīng)優(yōu)先選用5mL量筒而不用10mL量筒B.隔水加熱時(shí)，試管中液體的液面應(yīng)低于燒杯中水的液面C.在組織樣液中加入斐林試劑后試管內(nèi)液體呈現(xiàn)無(wú)色，加熱后變成磚紅色D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)將剩余的斐林試劑裝入棕色瓶，以便長(zhǎng)期保存?zhèn)溆谩敬鸢浮緼B【解析】用5mL量斐林試劑比用10mL量筒更精確，A正確；隔水加熱時(shí)試管中液體的液面低于燒杯中水的液面，才能保證試管內(nèi)液體受熱均勻，B正確；在組織樣液中加入斐林試劑后試管內(nèi)液體為藍(lán)色，C錯(cuò)誤；斐林試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用，D錯(cuò)誤。（課標(biāo)Ⅰ卷）4.下列關(guān)于植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.與白色花瓣相比，采用紅色花瓣有利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察B.用黑藻葉片進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，葉綠體的存在會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察C.用紫色洋蔥鱗片葉外表皮不同部位觀察到的質(zhì)壁分離程度可能不同D.紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的液泡中有色素，有利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察【答案】B【解析】紅色花瓣細(xì)色，比白色花瓣更便于觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象，A項(xiàng)正確；黑藻葉片的葉肉細(xì)胞中液泡呈無(wú)色，葉綠體的存在使原生質(zhì)層呈綠色，有利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察，B項(xiàng)錯(cuò)誤；紫色洋蔥鱗片葉外表皮不同部位細(xì)胞的細(xì)胞液濃度不一定都相同，用相同濃度的外界溶液進(jìn)行質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)時(shí)觀察到的質(zhì)壁分離程度可能不同，C項(xiàng)正確；紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的液泡含有色素，呈紫色，有利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察，D項(xiàng)正確。（江蘇卷）15.在“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”實(shí)驗(yàn)中，對(duì)紫色洋蔥鱗片葉外表皮臨時(shí)裝片進(jìn)行了三次觀察（如下圖所示）。下列有關(guān)敘述正確的是A.第一次觀察時(shí)容易看到紫色大液泡和較大的無(wú)色細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)區(qū)域B.第二次觀察時(shí)可以發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)壁分離首先發(fā)生在細(xì)胞的角隅處C.吸水紙的主要作用是吸除滴管滴加的多余液體，以免污染鏡頭D.為了節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間，通?？梢允÷缘谝淮物@微觀察步驟【答案】B【解析】第一次觀察時(shí)由于未滴入蔗還沒(méi)有發(fā)生質(zhì)壁分離，只能看到紫色大液泡,故A錯(cuò)誤；第二次觀察時(shí)滴入少量的蔗糖溶液，細(xì)胞開(kāi)始發(fā)生質(zhì)壁分離，可以發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)壁分離首先發(fā)生在細(xì)胞的角隅處，故B正確；吸水紙的主要作用是吸引蔗糖溶液從蓋玻片的一側(cè)流到另一側(cè)，使全部洋蔥鱗片葉浸潤(rùn)在蔗糖溶液中，C錯(cuò)誤；第一次顯微鏡觀察是為了獲得實(shí)驗(yàn)前的形象，以便于和實(shí)驗(yàn)中的現(xiàn)象變化作對(duì)比，因此不可省略，故D錯(cuò)誤。選修Ⅰ《生物技術(shù)實(shí)踐》專題1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用（廣東卷）4、下列敘述錯(cuò)誤的是（）A、醋酸菌在無(wú)氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸B、酵母菌在無(wú)氧條件下利用葡萄糖汁產(chǎn)生酒精C、泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵D、腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶【答案】A【解析】醋酸桿菌釀醋時(shí)需要持續(xù)通氣，即利用醋酸桿菌的有氧呼吸，不是無(wú)氧呼吸，故A錯(cuò)。（2023山東卷）35.（12分）【生物技術(shù)實(shí)踐】玉米是重要的糧食作物，經(jīng)深加工可生產(chǎn)酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（1）玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充物可被酵母菌利用發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)酵母菌時(shí)，該水解產(chǎn)物為酵母菌的生長(zhǎng)提供________。發(fā)酵過(guò)程中檢測(cè)酵母菌數(shù)量可采用_______法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)。（2）玉米胚芽油不易揮發(fā)，宜選用_______法或________法從玉米胚芽中提取。（3）玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)化成果糖。利用________技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用，從而降低生產(chǎn)成本。（4）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增葡萄糖異需用耐高溫的_______催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán)，每次循環(huán)包括變性、_______和_______三步?！敬鸢浮?1)碳源；顯微鏡直接計(jì)數(shù)(2)壓榨；萃?。ㄗ?兩空可顛倒)(3)固定化酶(4)(Taq)DNA聚合酶；(低溫)復(fù)性(或退火)；(中溫)延伸【解析】本題考查了微生物培養(yǎng)技術(shù)中培養(yǎng)基的配方、微生物計(jì)數(shù)、植物成分的提取、固定化酶和PCR技術(shù)的條件等內(nèi)容。難度系數(shù)較小。（1）培養(yǎng)酵母菌時(shí)，玉米秸稈中的纖維素的水解產(chǎn)物為酵母菌的生長(zhǎng)提供碳源。檢測(cè)酵母菌數(shù)量可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)。（2）玉米胚芽油不易揮發(fā)，宜選用壓榨法或萃取法從玉米胚芽中提取。（3）利用固定化酶技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用，從而降低生產(chǎn)成本。（4）利用P葡萄糖異構(gòu)酶基因時(shí)，需用耐高溫的（Taq）DNA聚合酶催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán)，每次循環(huán)包括變性、（低溫）復(fù)性（或退火）；（中溫）延伸三步。（海南卷）30[生物—選修1：生物技術(shù)實(shí)踐]（15分）已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)測(cè)定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等?；卮鹣嚓P(guān)問(wèn)題：⑴請(qǐng)完善下列實(shí)驗(yàn)步驟。①標(biāo)準(zhǔn)管的制備：用和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。②樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管。③將每個(gè)分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。⑵右圖表示的是泡菜中趨勢(shì)。⑶泡菜制作過(guò)程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是（填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”）?！敬鸢浮浚?）①不同濃度亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液②不同泡制天數(shù)的泡菜濾液③樣品管一致（2）亞硝酸鹽含量（3）乳酸菌【解析】（1）在量測(cè)定中，用不同濃度亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管；用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管；將每個(gè)樣品管分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺相近的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉的含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。（2）據(jù)圖可知，該圖表示亞硝酸鹽的含量隨發(fā)酵時(shí)間的變化曲線。（3）制泡菜時(shí)使用的微生物是乳酸菌專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（上海卷）26．圖8表示四種微生物培養(yǎng)物（①～④）在添加利福平前后的細(xì)胞內(nèi)RNA含量。由此可以判斷古細(xì)菌和酵母菌可能是A．①②B．①④C．②③D．③④【答案】B【解析】利福NA的合成，使DNA和蛋白的合成停止，只能作用于細(xì)菌。而古細(xì)菌是一類很特殊的細(xì)菌，核糖體對(duì)氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核細(xì)胞的相似，其復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯接近真核生物；利福平也對(duì)酵母菌等真核生物無(wú)效，所以加利福平前后，古細(xì)菌和酵母菌中的RNA變化不大。（課標(biāo)Ⅱ卷）39．[生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)踐]（15分）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）該小組采用法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。（2）該小組采用平板劃線法分離。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是。（3）示意圖A和B中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。（4）該小組將種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高的利用率。【答案】（1）檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格×107（2）灼燒；將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（3）B⑷、溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)【解析】（1）為了確定培否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù)：（2）接種時(shí)接種環(huán)需在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線，這樣做的目的是：通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。（3）由題圖可知B圖為平板劃線法接種的結(jié)果（菌落相對(duì)均勻分布）。（4）震蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng)；另外震蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。（課標(biāo)Ⅰ卷）39.[生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)]（15分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題:（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將分解成。（2）在含纖維素的剛果紅（CR）時(shí)，CR可與纖維素形成色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。（3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）：酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-+++注：“+”表示有，“－”表示無(wú)。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是；培養(yǎng)基乙（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是；【答案】（1）纖維二糖葡萄糖（2）紅色透明圈（3）不能液體離單菌落不能乙培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌【解析】（1）纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，如下圖：纖維素纖維素纖維素酶纖維二糖葡萄糖葡萄糖苷酶（2）剛果紅與纖維素形成紅色維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。（3）分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基位固體培養(yǎng)基，且需以纖維素為唯一碳源。（四川卷）10.有機(jī)農(nóng)藥除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的有碳源、水、________四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是__________。（2）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組基常需添加生長(zhǎng)素和_______，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成_________保存?zhèn)溆?。?）純化菌株時(shí)，通常使用的_______。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有________。（4）為探究苯磺隆的降解種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是________，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？_______?！敬鸢浮浚?）氮源和無(wú)機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖（2）細(xì)胞分裂素母液（3）接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)。不合理，缺少空白對(duì)照【解析】（1）微生的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括：碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。使用選擇培養(yǎng)基是因?yàn)樗窃试S特定的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)又能抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。（2）植物組織培養(yǎng)常需要添加的植物激素有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。MS培養(yǎng)基的成份一般先分別配制成母液備用。（3）平板劃線法接種時(shí)常使。第二區(qū)域只有第一條線無(wú)菌落，而其他的劃線卻有菌落，很可能是因?yàn)榻迎h(huán)在灼燒后末冷卻，第一次劃線時(shí)將菌種燙死，而后接種環(huán)冷卻，能正常劃線，也可能是第一次劃線時(shí)劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始，使接種環(huán)上無(wú)菌種。（4）題中實(shí)驗(yàn)養(yǎng)液過(guò)濾后離心上清液，加入蛋白酶處理后，測(cè)得其對(duì)苯磺隆的降解率。意為假設(shè)菌種能產(chǎn)生降解苯磺隆的蛋白質(zhì)類酶，若用蛋白酶處理后，可使該酶分解，苯磺隆降解率下降，則假設(shè)成立。但由于缺乏空白對(duì)照，不能比較蛋白酶是處理是否降低苯磺隆降解率，該實(shí)驗(yàn)不能得出相應(yīng)結(jié)論。（江蘇卷）30.（8分）為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開(kāi)展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該 。（2）為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是 。（3）右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是 。（填序號(hào)）①安全閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、安全閥、壓力表③安全閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、安全閥、溫度表（4）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是 。（5）為增加β取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是；研磨時(shí)（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是。 【答案】（8分）（1）干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）用牛皮紙（報(bào)紙）包扎器皿（2）抑制細(xì)菌（放線菌）生長(zhǎng)（3）①（4）接種環(huán)溫度過(guò)高，菌被殺死（5）有助于研磨充分不需要β-胡蘿卜素較耐酸【解析】本題考查的是微生物的培養(yǎng)與分離。（1）滅菌常用方法有高干熱滅菌、灼燒滅菌等，培養(yǎng)皿常用高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌。將培養(yǎng)皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報(bào)紙包扎避免滅菌后的再次污染。（2）青霉素能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌的繁殖期起殺菌作用，因此添加青霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。（3）乙連接軟管為排（放）氣閥，甲為安全閥，丙是壓力表。（4）三塊平板有兩塊平板明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；而其中一塊未見(jiàn)菌落，說(shuō)明菌株死亡。因此，應(yīng)在接種過(guò)程中接種環(huán)灼燒后未冷卻或未足夠冷卻，使菌株因溫度過(guò)高被殺死。（5）石英砂有助于研磨充分。CaCO3用于中和酸性物質(zhì)，β-胡蘿卜素較耐酸，因此不需添加。（大綱卷）4.某同學(xué)在=1\*GB3①、=2\*GB3②、=3\*GB3③三種條件下培養(yǎng)大腸桿菌，這三種條件是：=1\*GB3①以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，不斷補(bǔ)充培養(yǎng)基，及時(shí)去除代謝產(chǎn)物=2\*GB3②以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，不補(bǔ)充培養(yǎng)基，不去除代謝產(chǎn)物=3\*GB3③以葡萄糖和乳糖為碳源的培養(yǎng)基，不補(bǔ)充培養(yǎng)基，不去除代謝產(chǎn)物根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果繪制的一段時(shí)間內(nèi)菌體數(shù)的對(duì)數(shù)隨時(shí)間變化的趨勢(shì)圖如下：假設(shè)三種培養(yǎng)基中初始總糖量相等，則=1\*GB3①、=2\*GB3②、=3\*GB3③三種條件依次對(duì)應(yīng)的趨勢(shì)圖是A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲 C.丙、甲、乙 D.丙、乙、甲【答案】C【解析】以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基基，不除去代謝產(chǎn)物，隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和次級(jí)代謝產(chǎn)物的積累，大腸桿菌的生長(zhǎng)環(huán)境不斷惡化，生存阻力增大，因此種群數(shù)量達(dá)到穩(wěn)定期后會(huì)出現(xiàn)衰亡期，故甲圖對(duì)應(yīng)②，反之丙圖則對(duì)應(yīng)①；若培養(yǎng)基里加入葡萄糖和乳糖，大腸桿菌先利用葡萄糖，葡萄糖消耗完以后，大腸桿菌會(huì)經(jīng)過(guò)短期的調(diào)整，誘導(dǎo)合成乳糖苷酶，接著繼續(xù)分解利用乳糖，最后衰亡，因此乙圖對(duì)應(yīng)③，故選C答案。（上海卷）（六）分析有關(guān)微生物的資料，回答問(wèn)題并完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案。（10分）脂肪酶具有廣泛的應(yīng)用前景。為獲得高產(chǎn)脂肪酶的菌株，并將之用于產(chǎn)業(yè)化，進(jìn)行如下的系列實(shí)驗(yàn)。53．欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細(xì)菌，應(yīng)選擇下列固體培養(yǎng)基（僅列出了碳氮源）中的______。A．蛋白胨、檸檬酸鐵銨B．橄欖油、硫酸銨C．乳糖、酵母膏D．葡萄糖、蛋白胨【答案】C【解析】分離篩選出能分泌脂肪酶的細(xì)菌，有要在培養(yǎng)基中加入該特定的碳氮源，而分泌脂肪酶的細(xì)菌能在乳糖、酵母膏生長(zhǎng)。54．進(jìn)一步調(diào)查適合于產(chǎn)脂肪酶菌株生長(zhǎng)的碳氮源。根據(jù)表2的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，選擇理想的碳源為_(kāi)__________________?！敬鸢浮空崽恰窘馕觥繐?jù)表可知，當(dāng)碳源為蔗糖時(shí)，酶活性最高，產(chǎn)脂肪酶菌株生長(zhǎng)的理想碳源為蔗糖。55．補(bǔ)全表3中的實(shí)驗(yàn)方案，以確定所選碳源的最佳濃度（設(shè)濃度梯度的差值為%）?！敬鸢浮棵富钚?%%%%第1組/////第2組/////第3組/////平均值/////【解析】題目給定濃度為%，要求設(shè)濃度梯度的差值為%，要根據(jù)這一點(diǎn)來(lái)設(shè)定。56．利用相似方法探得理想氮源的最佳濃度，再進(jìn)一步確定碳氮源濃度的最佳組合。以a和b分別代表碳源和氮源的濃度，假設(shè)酶活a1＞a2＞a3；b2＞b3＞b4，據(jù)此形成下列四種方案，其中最佳的是____。方案一：a1和b2組合。方案二：將每一種a的濃度分別與b2、b3、b4組合，根據(jù)酶活取其中的最佳組合。方案三：a1和b2組合，a2和b3組合，根據(jù)酶活取其中的最佳組合。方案四：a1分別與每種氮源濃度組合，b2分別與每種碳源濃度組合，根據(jù)酶活取其中的最佳組合?！敬鸢浮糠桨付窘馕觥款}目的要求是確定碳氮源濃度的最佳組合，所以在有碳源，又要有氮源。a和b組合后，就是看出碳源在何種濃度、氮源在何種濃度下生長(zhǎng)最合適。57．如果脂肪酶的產(chǎn)業(yè)化固定化處理時(shí)不受損失，且在多次重復(fù)使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活，則應(yīng)選擇圖17中的_________固定化工藝?！敬鸢浮緾【解析】由于需要其活性在固定化處理時(shí)不受損失，且在多次重復(fù)使用后仍能維持穩(wěn)定的酶活性，圖中只有C組。專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)專題4酶的研究與應(yīng)用專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)專題6植物有效成分的提取選修Ⅲ《現(xiàn)代生物技術(shù)》專題1基因工程（天津卷）4.為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過(guò)分子檢測(cè)的是A.攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選B.產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素－8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選C.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定三體綜合征的診斷【答案】B【解析】可通過(guò)將受體菌接種在含鏈中篩選攜帶鏈霉素抗性基因的受體菌，A錯(cuò)誤；抗人白細(xì)胞介素的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)通過(guò)抗原-抗體雜交技術(shù)篩選產(chǎn)生，B正確；在棉花田中人工放入害蟲可檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的抗蟲效果，C錯(cuò)誤；可利用顯微鏡檢測(cè)21三體綜合征，D錯(cuò)誤。（廣東卷）25利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖14所示，下列敘述正確的是（）A、過(guò)程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B、過(guò)程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C、過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D、過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞【答案】AD【解析】過(guò)程①是以RNA為模板過(guò)程，即逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，故A正確；過(guò)程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因，在PCR過(guò)程中，不需要解旋酶，是通過(guò)控制溫度來(lái)達(dá)到解旋的目的，故B錯(cuò)；利用氯化鈣處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，故C錯(cuò)；檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA中，可以采用DNA分子雜交技術(shù)，故D正確（課標(biāo)Ⅱ卷）40．[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題](15分)植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列問(wèn)題：（1）理論上，基因組文庫(kù)含有生物的基因；而cDNA文庫(kù)中含有生物的基因。（2）若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹谐鏊璧哪秃祷?。?）將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通法將其導(dǎo)入植物的體細(xì)胞中，經(jīng)過(guò)一系列的過(guò)程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的是否得到提高。（4）假如用得到的耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了（填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”）?！敬鸢浮浚?）全部部分（2）篩選（3）乙表達(dá)產(chǎn)物耐旱性（4）同源染色體的一條上【解析】（1）基因文庫(kù)包括基因NA文庫(kù)，基因組文庫(kù)包含生物基因組的所全部基因，cDNA文庫(kù)是以mRNA反轉(zhuǎn)錄后構(gòu)建的，只含有已經(jīng)表達(dá)的基因（并不是所有基因都會(huì)表達(dá)），即部分基因。（2）從基因文庫(kù)中獲取目的基因需要進(jìn)行篩選。（3）要提高植物乙的耐旱用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細(xì)胞中。要檢測(cè)目的基因（耐旱基因）是否表達(dá)應(yīng)該用抗原抗體雜交檢測(cè)目的基因（耐旱基因）的表達(dá)產(chǎn)物（即耐旱的相關(guān)蛋白質(zhì)）；個(gè)體水平檢測(cè)可以通過(guò)田間實(shí)驗(yàn)，觀察檢測(cè)其耐旱性情況。（4）如果耐旱基因色體的兩條上，則子代將全部表現(xiàn)耐旱，不會(huì)出現(xiàn)性狀分離。[或“如果耐旱基因整合到同源染色體的一條上，則轉(zhuǎn)基因植株的基因型可以用A_表示（A表示耐旱基因，_表示另一條染色體上沒(méi)有相應(yīng)的基因），A_自交后代基因型為AA∶A_∶__=1∶2∶1，所以耐旱∶不耐旱=3∶1，與題意相符（天津卷）8.（12分）嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開(kāi)展了以下試驗(yàn)：Ⅰ.利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，選用基因組DNA作模板。右圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。b含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入和不同限制酶的識(shí)別序列。大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)?。?溫度對(duì)BglB酶活性的影響據(jù)圖1、2可溫30分鐘后，BglB酶會(huì)；為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好控制在（單選）?！妗妗妗姊?利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性在PCR擴(kuò)增bglB基因的過(guò)程中，加入誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過(guò)篩選，可獲得能表達(dá)出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR過(guò)程中（多選）。僅針對(duì)bglB基因進(jìn)行誘變基因產(chǎn)生了定向突變基因可快速累積突變基因突變不會(huì)導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變【答案】（1）嗜熱土壤芽孢桿菌（2）NdeⅠBamHⅠ（3）轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶（4）失活B（5）A、C【解析】（1）bglB基因存在于嗜熱土壤芽孢桿菌基因組中，故應(yīng)以該菌的基因組DNA為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增。（2）目的基因與質(zhì)粒進(jìn)行重組時(shí)因插入到啟動(dòng)子和終止子之間，且應(yīng)靠近啟動(dòng)子和終止子，結(jié)合示意圖可知，應(yīng)在擴(kuò)增的bglB基因兩端分別引入NdeⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識(shí)別序列。（3）該基因表達(dá)載體中含有bglB基因，其可表達(dá)產(chǎn)生β-葡萄糖苷酶，其可分解纖維素，這樣大腸桿菌就獲得了分解纖維素的能力。（4）由圖2可知，BglB溫30分鐘后，該酶就會(huì)失活；由圖1可知，當(dāng)溫度為60℃～70℃時(shí)，酶活性較高，而由圖2可知70℃時(shí)保溫30分鐘，酶活性開(kāi)始減弱，而60℃保溫30分鐘后酶活性基本不發(fā)生變化，由此可知為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好應(yīng)控制在60℃，故選B。（5）在bglB基因擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行誘變處理，相比于誘變劑直接處理嗜熱土壤芽孢桿菌，針對(duì)性更強(qiáng)；基因突變是不定向的；由于PCR過(guò)程基因擴(kuò)增即DNA復(fù)制快速進(jìn)行，發(fā)生突變后可進(jìn)行快速積累，進(jìn)而便于篩選；基因突變可能導(dǎo)致氨基酸數(shù)目的改變，如突變后的密碼子變?yōu)榻K止密碼子，可導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成提前終止，進(jìn)而導(dǎo)致氨基酸數(shù)目變少。（2023重慶卷）4.題4圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是A．②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C．④的染色體上若含抗蟲基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲性狀D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異【答案】D【解析】構(gòu)建載體需要限制酶和，A錯(cuò)誤；③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到④的染色體上，B錯(cuò)誤；染色體上含有目的基因，但目的基因也可能不能轉(zhuǎn)錄或者不能翻譯，或者表達(dá)的蛋白質(zhì)不具有生物活性，C錯(cuò)誤；植株表現(xiàn)出抗蟲性狀，說(shuō)明含有目的基因，屬于基因重組，為可遺傳變異，D正確。（江蘇卷）23.下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是A.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D.抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)【答案】ABC【解析】限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別6個(gè)核苷酸序列，但也有識(shí)別序列由4、5或8個(gè)核苷酸組成的，A錯(cuò)誤；PCR中耐高溫的DNA聚合酶只是在延伸階段發(fā)揮催化作用，B項(xiàng)錯(cuò)誤；載體質(zhì)粒上抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇，不是抗生素合成基因，C錯(cuò)誤；目的基因?qū)肓耸荏w細(xì)胞不一定就都能正常表達(dá)，D正確。（2023山東卷）36.（12分）【現(xiàn)代生物科技專題】人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基________切割后，通過(guò)DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用_________技術(shù)。（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要經(jīng)過(guò)__________，才具備受精能力。（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)的方法是__________。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的__________。（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到__________，說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。36.【答案】（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）；DNA分子雜交（或核酸探針）（2）超數(shù)排卵；獲能（處理）

（3）顯微注射法；性別鑒定；全能性

（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）【解析】（1）用割質(zhì)粒和含有htPA基因的DNA片段可產(chǎn)生相同的黏性末端，便于構(gòu)建基因表達(dá)載體；通常采用DNA分子雜交技術(shù)來(lái)檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA。為獲得更多的卵母細(xì)胞，通常對(duì)供體母羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵；采集的精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理才具備受精能力。通常用顯微注射法體導(dǎo)入動(dòng)物的受精卵；為了獲得母羊，移植前需要對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定；早期胚胎細(xì)胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體。ht—PA基因的表達(dá)產(chǎn)物為人組織纖溶酶原激活物，若在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測(cè)到人組織纖溶酶原激活物，說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。（海南卷）31[生物—選修3：現(xiàn)代生物科技專題]（15分）下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：⑴獲得A有兩以A的mRNA為模板，在酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的序列，再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。⑵利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有、、4種脫氧核苷酸三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成。⑶由A和載體B拼接形成的C通常稱為。⑷在基因工程中，常用Ca2＋處理D，其目的是?！敬鸢浮浚?）逆轉(zhuǎn)錄酶合酶氨基酸脫氧核苷酸（2）引物（目的基因或A基因）模板（3）基因表達(dá)載體（4）使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子【解析】（1）利用逆轉(zhuǎn)錄法合成程是：以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成雙鏈DNA分子；根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過(guò)程是：根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)DNA中脫氧核苷酸的排列順序，通過(guò)化學(xué)方法合成。（2）PCR過(guò)程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。（3）目的基因和運(yùn)載體結(jié)合，形成基因表達(dá)載體。（4）有利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí)，需要先用Ca2+處理，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于吸收重組DNA分子（上海卷）（九）回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問(wèn)題。（9分）pIJ702是一種常用質(zhì)粒（圖20），其中tsr為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列。67．質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠_______鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu)?！敬鸢浮繗洹窘馕觥緿NA的兩個(gè)鏈間是通過(guò)堿基對(duì)間的氫鍵連在一起，形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。68．以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換pIJ702上（1kb=1000對(duì)堿基）的SacⅠ/SphⅠ片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長(zhǎng)度列在表4中。由此判斷目的基因內(nèi)部是否含有BglⅡ切割位點(diǎn)，并說(shuō)明判斷依據(jù)________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________?！敬鸢浮亢?，據(jù)表4和題意，pI的一個(gè)BglⅡ位點(diǎn)被目的基因置換后，pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀，故目的基因中必然含有一個(gè)BglⅡ位點(diǎn)【解析】含有，據(jù)表4和題意，p原的一個(gè)BglⅡ位點(diǎn)被目的基因置換后，pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀，故目的基因中必然含有一個(gè)BglⅡ位點(diǎn)69．已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ區(qū)域長(zhǎng)度為，若用ClaⅠ和PstⅠ聯(lián)合酶切pZHZ8，則參照表4數(shù)據(jù)可斷定酶切產(chǎn)物中最小片段的長(zhǎng)度為_(kāi)________kb?！敬鸢浮俊窘馕觥繐?jù)表中數(shù)據(jù)可知，重組質(zhì)中含有兩個(gè)ClaⅠ和PstⅠ的酶切位點(diǎn)，因?yàn)閜IJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ區(qū)域長(zhǎng)度為，而只用ClaⅠ切割后片段為和，而只用PstⅠ切割后片段為和，因此聯(lián)合酶切pZHZ8后，其最小片段為（—）=.70．不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況如表5所示。若要篩選接納了pIJ702或pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞，所需的硫鏈絲菌素最小濃度應(yīng)為_(kāi)____μg／mL（填寫表格中給定濃度）；含有重組質(zhì)粒pZHZ8的菌落呈______色?！敬鸢浮?白【解析】硫鏈絲菌素5μg／mL時(shí)，不生長(zhǎng)，而低于5μg／mL時(shí)能生長(zhǎng)，所以最小濃度為5μg／mL。mel是黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落，而含有重組質(zhì)粒pZHZ8的菌落的沒(méi)有mel，所以不白色的菌落。71．上述目的基因來(lái)源于原核生物，其蛋白質(zhì)編碼序列（即編碼從起始密碼子到終止密碼子之間的序列）經(jīng)測(cè)定為基，試判斷對(duì)這段序列的測(cè)定是否存在錯(cuò)誤：_____，并說(shuō)明依據(jù)____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________?！敬鸢浮垮e(cuò)誤因?yàn)樵松餂Q定每個(gè)氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼，所以基因的編碼堿基序列為3的整數(shù)倍【解析】原核生物的編碼區(qū)是連續(xù)每個(gè)氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼，所以基因的編碼堿基序列為3的整數(shù)倍，而基因中1265對(duì)堿基轉(zhuǎn)錄成的mRNA含有從起始密碼到終止密碼有1265個(gè)堿基，不能被3整除，故測(cè)序錯(cuò)誤。專題2細(xì)胞工程（浙江卷）3.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀【答案】B【解析】連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)生改變；一個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群才為一個(gè)克隆；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞可能是不同細(xì)胞分裂形成的，其性狀可能不同。（課標(biāo)Ⅰ卷）40.[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]（15分）某研究者用抗免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。回答下列問(wèn)題：（1）制備融合所胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是小鼠，理由是。（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是。（3）雜交瘤細(xì)胞中有個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是條。（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是?！敬鸢浮浚?）四YY小鼠的抗體效價(jià)最高（2）B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%（3）1100（4）不能無(wú)限增殖【解析】（1）據(jù)圖分射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上，小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。（2）融合體系中除了未雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。（3）雜交瘤細(xì)鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)細(xì)胞核。小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目40條）和骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目60條）融合后，染色體可達(dá)100條。（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的。（江蘇卷）29.（9分）為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱為。（2）在愈傷組織懸浮培養(yǎng)、蔗糖濃度和pH的變化如右圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的原因有；培養(yǎng)液中蔗糖的作用是、。（3）多倍體愈傷組織細(xì)胞謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)處理，會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目，壓片前常采用纖維素酶和酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞（2n）經(jīng)誘導(dǎo)處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞，合理的解釋是、。（4）為了更好地產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù)，其原理與酵母細(xì)胞固定化類似。下列說(shuō)法正確的有（填序號(hào)）。①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋②必須在光照條件下培養(yǎng)③培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢【答案】（9分）（1）脫分化（2）蔗糖濃度下降，pH降低提供能源調(diào)節(jié)滲透壓（3）秋水仙素（低溫）果膠經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期（4）①③④【解析】本題考查的是植物組織培養(yǎng)、染色體變異及細(xì)胞固定化。（1）外植體在人工、無(wú)菌條件下，經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。（2）由圖蔗糖知外植體離體培養(yǎng)過(guò)程中需要消耗蔗糖，12天后蔗糖濃度變化不大；pH下降會(huì)影響酶的活性，愈傷組織細(xì)胞對(duì)物質(zhì)的合成小于分解，細(xì)胞干重下降。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，蔗糖既能維持一定的滲透壓，又能提供植物細(xì)胞生命活動(dòng)必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（能量）。（3）一定濃度的秋都可抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向兩極，從而使細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍。植物細(xì)胞間的成分主要是纖維素和果膠，可通過(guò)纖維素酶、果膠酶破壞細(xì)胞間的物質(zhì)，從而使愈傷組織細(xì)胞分離。在培養(yǎng)過(guò)程中，各個(gè)細(xì)胞所處時(shí)期不同，在用秋水仙素或低溫處理后，一定時(shí)間內(nèi)不同時(shí)期細(xì)胞分裂次數(shù)不同，從而會(huì)出現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細(xì)胞，4n的細(xì)胞在有絲分裂后期著絲點(diǎn)分裂染色體數(shù)目加倍至8n；8n的細(xì)胞在有絲分裂中期能清晰看出8n條染色體。（4）為了更好地獲得次應(yīng)選用生長(zhǎng)旺盛的愈傷組織。愈傷組織不能進(jìn)行光合作用，因此要通入無(wú)菌空氣確保其正常的生命活動(dòng)。細(xì)胞的固定通常使用包埋法，由于包埋材料的影響，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴(kuò)散都受到一定的限制，所以固定化細(xì)胞生長(zhǎng)速度慢。（廣東卷）2鐵皮石斛是我國(guó)名貴中藥，生物堿是其有效成分之一，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖（簡(jiǎn)稱PLBs，類似愈傷組織）生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下：在固體培養(yǎng)基上，PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時(shí)間的變化如圖17所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

⑴選用新生營(yíng)養(yǎng)芽為外植體的原因是，誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過(guò)程稱。⑵與黑暗條件下相比，PLBs在光照條件下生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在，，。⑶脫落酸（ABA）能提，但會(huì)抑制PLBs的生長(zhǎng)。若采用液體培養(yǎng)，推測(cè)添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開(kāi)展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測(cè)，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案是探討了以下問(wèn)題：①ABA的濃度梯度設(shè)置設(shè)4個(gè)ABA處理組，1個(gè)空白對(duì)照組，3次重復(fù)。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無(wú)菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基后按比例加入。②實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣：實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，將樣品（PLBs）稱重（g/瓶）后再測(cè)定生物堿含量。如初始（第0天）數(shù)據(jù)已知，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需測(cè)定的樣品數(shù)為。③依所測(cè)定數(shù)據(jù)確定適度和培養(yǎng)時(shí)間：當(dāng)某3個(gè)樣品（重復(fù)樣）的時(shí)，其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。【答案】（1）低，容易誘導(dǎo)形成PLBs（2分）；細(xì)胞的脫分化（2分）（2）生長(zhǎng)起始快（2分），快速生長(zhǎng)時(shí)間較長(zhǎng)（2分）；PLBs產(chǎn)量較高（2分）；（3）①滅菌、冷卻（2分）；