WS/T 121-1999血清載脂蛋白A1及載脂蛋白B免疫透射比濁測定法

C50中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T121-1999血清載脂蛋白A1及載脂蛋白B免疫透射比濁測定法Cuidelinesfortheimmuno-turbidimetricdeterminationofserumapolipoproteinAiandapolipoproteinB1999-12-09發(fā)布2000-05-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部了發(fā)布

中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準血清載脂蛋白A，及載脂蛋白B免疫透射比濁測定法WS/T121-1999中國標準出版社出版北京復(fù)興門外三里河北街16號郵政編碼:100045電活：68522112中國標準出版社秦皇島印刷廠印刷新華書店北京發(fā)行所發(fā)行各地新華書店經(jīng)售版權(quán)專有不得翻印開本880×12301/16印張1/2字數(shù)9干字2000年6月第一版2000年6月第一次印刷印數(shù)1-1000書號：155066·2-12871標目411-59

WS/T121-1999本標準以衛(wèi)生部醫(yī)政司編寫的《全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版(1997)》中所列載脂蛋白A，和載脂蛋白B測定方法為基礎(chǔ)，并參考美國國家臨床實驗室標準委員會批準的“載脂蛋白免疫測定法”準則(NCCLS文件1/L.A15-A,1997)而制定。本標準從2000年5月1日起實施。本標準由衛(wèi)生部醫(yī)政司提出。本標準由衛(wèi)生部北京老年醫(yī)學研究所負責起草。本標準主要起草人：李健齋、王托、國漢邦、唐蔚青。本標準由衛(wèi)生部委托衛(wèi)生部臨床檢驗中心負責解釋

中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準血清載脂蛋白A及載脂蛋白BWS/T121-1999免疫透射比濁測定法Guidelinesfortheimmuno-turbidimetricdeterminationofserumapolipoproteinA.andapolipoproteinB范田本標準規(guī)定了測定血清載脂蛋白A,和載脂蛋白B的免疫透射比濁測定法。本標準適用于臨床與基礎(chǔ)醫(yī)學實驗室做載脂蛋白A，和載脂蛋白B免疫透射比濁測定，亦可作為生產(chǎn)廠商生產(chǎn)載脂蛋白A，和載脂蛋白B免疫透射比濁測定試劑盒的標準。2測定原理本法血清中的載脂蛋白A或載脂蛋白B分別與試劑中的特異性羊（或免)抗人載脂蛋白A，或抗人載脂蛋白B抗體相結(jié)合，形成不溶性免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液產(chǎn)生混濁，濁度高低反映血清樣品中載脂蛋白A，或載脂蛋白B含量，后者可由校準血清所作劑量-響應(yīng)曲線算出、免免疫原及抗血清的制備3.1免疫原(抗原)的制備3.1.1從混合新鮮人血清中提取免疫原。3.1.2提取抗原用的人血清必須包括人群樣品中載脂蛋白A，、載脂蛋白B的各種抗原決定位點，包括各種表型的位點變化3.1.3載脂蛋白A，從超速離心制備的人血清高密度脂蛋白提取，用凝膠過濾、離子交換層析或高效液相色譜技術(shù)提純，所得純載脂蛋白A，不得含有高密度脂蛋白中的其他載脂蛋白，特別是載脂蛋白A，，應(yīng)達到免疫純3.1.4載脂蛋白B抗原用超速離心法制備密度在1.030～1.050g/ml.部分的低密度脂蛋白3.1.5載脂蛋白八，及載脂蛋白B抗原必須新鮮制備，在一20℃以下冰凍保存。在存中有潛在的設(shè)失抗原位點的危險。避免反復(fù)凍融。?。禾峒兊妮d脂蛋白B分子不可逆地聚合.喪失抗原決定位點.故只能用純低密度脂蛋白作免疫原.3.2抗血清的制備3.2.1用于免疫比濁測定的載脂蛋白A，、載脂蛋白B抗體為免抗人或羊抗人血清（多克隆抗體）3.2.2抗血清特異性：應(yīng)用雙相免疫電泳和免疫印跡法監(jiān)定抗血清，要與人血清主要蛋白質(zhì)及其他載脂蛋白無交叉反應(yīng)3.2.3抗血清效價：用瓊脂雙向擴散法測定，中間孔加正常人血清（載脂蛋白A，或載脂蛋白B濃度1g/L左右)0.01mL，環(huán)繞四周的孔中分別加不同稀釋度(如1：2,1：4,1·8,1：16,1：32,1：64…)的抗血清0.01ml。載脂蛋白A,抗血清效價應(yīng)不低于16,載脂蛋白B抗血清效價應(yīng)不低于