MDQ型毛細(xì)管電泳在相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用課件

P/ACEMDQ型毛細(xì)管電泳

在相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用

一、簡(jiǎn)介毛細(xì)管電泳(capillaryelectrophoresis，CE）又稱高效毛細(xì)管電泳(HPCE)。是以毛細(xì)管為分離通道，以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離分析技術(shù)，在八十年代得以迅速發(fā)展。目前，在生命科學(xué)、藥物分析、以及從小分子、離子到單細(xì)胞分析的一系列領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。毛細(xì)管電泳的發(fā)展過程六十年代中期：瑞典科學(xué)家Hjerten首先提出了毛細(xì)管區(qū)帶電泳（CZE）的方法，被看作毛細(xì)管電泳的起點(diǎn)。1979年：Mikkers等用200μmID的聚四氟乙烯管為分離通道，獲得了很高的分離效率。1981年：Jorgenson和Lukacs用75μmID的熔融毛細(xì)管做CZE，在30KV電壓下產(chǎn)生了4×105片/m的效率，成為毛細(xì)管電泳發(fā)展史上的里程碑。1984年：Terabe運(yùn)用含SDS膠束的緩沖液分離了中性分子，從而建立了膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳。1987年，Hjerten建立了毛細(xì)管等電聚焦；Cohen和Karger提出了毛細(xì)管凝膠電泳。1988~89年：商品化的毛細(xì)管電泳儀推出，毛細(xì)管電泳法迅速發(fā)展起來。

CE分離原理示意圖

在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子在電場(chǎng)作用下以不同的速度定向遷移的現(xiàn)象叫電泳。單位電場(chǎng)下的電泳速度稱為淌度。CE所用的石英毛細(xì)管柱，在pH>3的情況下，其內(nèi)表面帶負(fù)電，和溶液接觸時(shí)形成雙電層。在高電壓的作用下，雙電層中的水合陽(yáng)離子引起流體整體向負(fù)極方向遷移的現(xiàn)象叫電滲。電滲是毛細(xì)管中的溶劑因軸向直流電場(chǎng)的作用而發(fā)生的定向流動(dòng)。各種粒子在毛細(xì)管內(nèi)電解質(zhì)中的遷移速度等于電泳和電滲流（EOF）兩種速度的矢量和。正離子的運(yùn)動(dòng)方向和電滲流一致，故最先流出；中性粒子的電泳的電泳流速為零，故其遷移速度等于電滲流速度；負(fù)離子的運(yùn)動(dòng)方向和電滲流方向相反，但因電滲流速度一般都大于電泳速度，故它將在中性粒子之后流出。各種粒子因遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。三、毛細(xì)管電泳儀的構(gòu)造

四：毛細(xì)管電泳的分離模式：

毛細(xì)管區(qū)帶電泳(CZE);毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜(MEKC);毛細(xì)管凝膠電泳(CGE);毛細(xì)管等電聚焦(CIEF);毛細(xì)管等速電泳(CITP)；

親和毛細(xì)管電泳(ACE)；

毛細(xì)管電色譜(CEC)；非水相毛細(xì)管電泳（NACE）。五：分離模式的選擇

CE可以分離離子到中性分子、從小分子到生物大分子的一系列物質(zhì)。之所以能分離如此廣泛的物質(zhì)，在于其靈活多樣的分離體系。對(duì)不同性質(zhì)的物質(zhì)，應(yīng)選擇相應(yīng)的分離體系：分離對(duì)象與模式的選擇MEKCCECCIEFMEKCCITPCGECGECGECGEMEKCCITPCZECZECZECZECZECZE病毒/細(xì)菌多肽/蛋白核酸糖類小分子離子毛細(xì)管電泳的高分離效率七、毛細(xì)管電泳的應(yīng)用

蛋白質(zhì)/多肽/氨基酸糖類/糖蛋白核酸/核苷酸天然產(chǎn)物合成藥物手性物質(zhì)無機(jī)/有機(jī)離子病毒/細(xì)菌水溶液中的分子間相互作用不同分子量蛋白的分離4種堿性蛋白的分離4種堿性蛋白的電泳分離圖。A：涂層管；B：未涂層管。1：細(xì)胞色素，2：溶菌酶，3：胰蛋白酶原，4：α-胰凝乳蛋白酶原DNA、核酸的分離DNA片段電泳遷移時(shí)間圖單糖的分離藥材中的生物堿成分分析1苦參堿2槐定堿3槐果堿4lehmannine5sophoramine6氧化苦參堿7氧化槐果堿8金雀花堿9苦豆堿10蝙蝠葛堿11東莨菪堿藥材中黃酮化合物的分析對(duì)照品樣品OG：木蝴蝶素A－7－O-葡萄苷酸B：黃芩素WG：漢黃芩素－7－O-葡萄苷酸BG：黃芩苷W：漢黃