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植物細(xì)胞制藥概述植物細(xì)胞中藥用成分植物細(xì)胞制藥技術(shù)及工藝植物藥物次生代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)基因植株或植物細(xì)胞
第一節(jié)概述一、發(fā)展史十九世紀(jì)上半葉,SchleidenandSchwann提出了細(xì)胞學(xué)說。單細(xì)胞觀點(diǎn)離體培養(yǎng)1934年White建立了第一個無性繁殖系,之后重點(diǎn)是植物細(xì)胞的培養(yǎng)及營養(yǎng)素60年代分離出植物的原生質(zhì)體70年代,優(yōu)化細(xì)胞生長和研究次級代謝產(chǎn)物80年代后植物細(xì)胞基因工程基本概念植物細(xì)胞制藥植物細(xì)胞制藥是指在無菌和人工控制的營養(yǎng)及環(huán)境條件下利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來控制培養(yǎng)植物細(xì)胞、組織、器官以獲得某些有用的次級代謝產(chǎn)物的技術(shù)植物細(xì)胞的分化和脫分化細(xì)胞分化(differentiation):細(xì)胞在生長發(fā)育過程中其形態(tài)、結(jié)構(gòu)生理功能等方面發(fā)生某些差異變化的復(fù)雜過程,在這個過程中會呈現(xiàn)極性現(xiàn)象、細(xì)胞不均等分裂位置效應(yīng)等各種現(xiàn)象。脫分化(dedifferentiation):脫分化又稱去分化。是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過程。
一個已分化的細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性,形成完整植株,首先要經(jīng)歷脫分化過程形成分生細(xì)胞或分生細(xì)胞團(tuán),然后再經(jīng)歷再分化過程形成胚胎或器官發(fā)育為完整的植株。愈傷組織(calluscell)是在一定條件下,在植物的傷口或外植體的切口部位長出的蓬松的細(xì)胞團(tuán),它既是一種組織,又是一種脫分化的細(xì)胞,具有再分化能力;既可以用于次級代謝物的生產(chǎn)和生物轉(zhuǎn)化,又可以再生成為植株。毛狀根(hairyroot)是植株或其組織、器官、細(xì)胞受到發(fā)根農(nóng)桿菌感染后發(fā)生病理變化而形成的類似頭發(fā)一樣眾多而細(xì)長的根組織。生長快速,易于培養(yǎng),遺傳上穩(wěn)定且易于操作,能改變植物的次生代謝。初生代謝產(chǎn)物和次生代謝產(chǎn)物初生代謝產(chǎn)物包括糖和淀粉、脂肪和脂肪酸、氨基酸和蛋白質(zhì)、核苷和核苷酸等。它們不僅滿足了植物本身的生活活動需要,而且可以作為工業(yè)生產(chǎn)的原料。次生代謝產(chǎn)物包括酚類、黃酮類、香豆素、木質(zhì)素、生物堿、有機(jī)酸、糖苷、皂苷等等。它不是生命體的主要組成,但在保持植物生命的抗逆性、抗病并和抗蟲性以及擔(dān)當(dāng)信號分子方面起著重要作用。植物細(xì)胞制藥的優(yōu)勢及發(fā)展優(yōu)勢:不受氣候、土壤等外界條件影響培養(yǎng)物無污染產(chǎn)物的產(chǎn)率高生產(chǎn)周期快節(jié)約天然資源應(yīng)用展望用細(xì)胞培養(yǎng)方法生產(chǎn)藥用次級代謝產(chǎn)物探索藥用成分的生物合成路線利用植物培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)基因植物第二節(jié)植物細(xì)胞中的藥用成分1細(xì)胞后含物:儲藏物質(zhì)或廢棄物質(zhì),分布于液泡內(nèi)。如生物堿、糖苷類、揮發(fā)油、有機(jī)酸2生物活性物質(zhì):對細(xì)胞內(nèi)生化代謝和生理活動起著調(diào)節(jié)作用。酶類、維生素、植物激素、抗生素和植物激素第三節(jié)植物細(xì)胞制藥技術(shù)植物細(xì)胞培養(yǎng)特點(diǎn):
對數(shù)期,細(xì)胞重量增加;穩(wěn)定期,次生代謝產(chǎn)物積累的最多;植物細(xì)胞很少以單一細(xì)胞生長,往往以非均相集合體的細(xì)胞團(tuán)形式懸浮生長;植物細(xì)胞多為好氣性,細(xì)胞壁骨架脆弱,在攪拌時注意避免造成細(xì)胞破碎和損傷。
植物材料的準(zhǔn)備—滅菌培養(yǎng)基組成—無機(jī)鹽、碳源、植物生長調(diào)節(jié)劑、氮源、維生素培養(yǎng)方法
單細(xì)胞培養(yǎng)法單倍體細(xì)胞培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng)毛狀根誘導(dǎo)和培養(yǎng)植物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器轉(zhuǎn)基因植物一、轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)(planttransgenetictechnology)是指把從動物、植物或微生物中分離到的目的基因,通過各種方法轉(zhuǎn)移到植物基因組中,使之穩(wěn)定遺傳并賦予植物新的性狀,如抗蟲、抗病、抗逆、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)等。植物受體目的基因轉(zhuǎn)化方法選擇和鑒定1、植物受體外植體(explant):植物的外植體是指用于遺傳操作的植物的某一器官或部分,通過離體組織培養(yǎng)可以再生成完整的新植株,在轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中用于作為外源基因轉(zhuǎn)入的受體。因?yàn)楦鞣N植物本身的特點(diǎn),用于作為外植體的植物部分有很大差異。自轉(zhuǎn)基因工作以來,人們采用過:幼花穗,幼葉、子葉節(jié),葉盤,幼芽生長點(diǎn),成熟種子胚,未成熟種子幼胚,花粉及小胞子及來源于植物幼嫩組織的原生質(zhì)體等大部分植物的器官。幾種受體系統(tǒng)原生質(zhì)體受體系統(tǒng):指去除細(xì)胞壁后的“裸露”細(xì)胞,具有全能性。愈傷組織受體系統(tǒng):外植體經(jīng)組織培養(yǎng)所產(chǎn)生的愈傷組織種質(zhì)系統(tǒng):以植物的生殖細(xì)胞如花粉粒、卵細(xì)胞為受體細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化。胚狀體再生系統(tǒng):最理想的受體系統(tǒng),體細(xì)胞胚是具有卵細(xì)胞特性的胚性細(xì)胞發(fā)育而來。直接分化芽受體系統(tǒng):由未分化的細(xì)胞直接分化形成。2、外源基因的制備轉(zhuǎn)基因的基因來源可以是植物,也可以是動物或微生物。為了獲得高水平的表達(dá)效果,要將目的基因進(jìn)行重組改造,以適應(yīng)植物轉(zhuǎn)基因工作的需要。通常是將分離出的目的基因整合到某個載體上,轉(zhuǎn)化大腸桿菌或農(nóng)桿菌。高效表達(dá)載體的構(gòu)建,啟動子、增強(qiáng)序列的選擇、載體和菌種的不同,都對轉(zhuǎn)基因的最后結(jié)果產(chǎn)生重要影響3、篩選植物轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)過程中,都要對經(jīng)過遺傳轉(zhuǎn)化的群體進(jìn)行篩選,使轉(zhuǎn)入外源基因的組織或細(xì)胞在選擇壓力下正常生長發(fā)育,而抑制未轉(zhuǎn)化部分的生長,直到死亡。選擇的基本原理是使未轉(zhuǎn)化的組織或細(xì)胞,在含有選擇劑的培養(yǎng)基上新陳代謝受阻而停止生長,最后死亡。選擇劑通常為抗生素或殺草劑。選擇過程一般為3-4個周期,每個周期為3-4周。轉(zhuǎn)基因植物的篩選和鑒定方法檢測基因功能來劃分調(diào)控基因檢測法選擇標(biāo)記基因檢測法報告基因檢測法目的基因檢測法檢測基因功能來劃分檢測的不同階段區(qū)分整合水平表達(dá)水平轉(zhuǎn)錄水平翻譯水平4、鑒定1)分子生物學(xué)鑒定:提供轉(zhuǎn)基因后的植物組織或再生植株外源基因存在與否、基因拷貝數(shù)及表達(dá)水平等PCRSouthernhybridyzationNorthernhybridyzationELISAWesternimmunoblot
2)生物學(xué)功能鑒定:是對導(dǎo)入的外源基因應(yīng)當(dāng)表達(dá)的生物學(xué)功能的檢測。轉(zhuǎn)化植株生物學(xué)功能的測定以轉(zhuǎn)入外源基因預(yù)期的功能來設(shè)計檢測方法,對獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行評價3)遺傳學(xué)鑒定遺傳穩(wěn)定性轉(zhuǎn)化植株后代的分離比例二.外源基因?qū)胫参锏闹饕椒ǎㄒ唬┺D(zhuǎn)化體系需要滿足的條件受體組織可以離體再生或擴(kuò)繁;有效的轉(zhuǎn)入基因的方法;篩選轉(zhuǎn)化組織的選擇系統(tǒng);獲得可育轉(zhuǎn)化植株頻率;簡單、有效、可重復(fù)、不依賴基因型以及成本低;離體組織培養(yǎng)的時間短,以減少體細(xì)胞變異和不育株比例(二)常用的轉(zhuǎn)化方法:載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法,基因直接導(dǎo)入法種質(zhì)系統(tǒng)法1載體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法即將目的基因插入到農(nóng)桿菌的質(zhì)?;虿《镜腄NA等載體分子上,隨著載體DNA的轉(zhuǎn)移而將目的基因?qū)氲街参锘蚪M中。農(nóng)桿菌介導(dǎo)和病毒介導(dǎo)法就屬于這種方法。根瘤毛狀根農(nóng)桿菌介導(dǎo)法早在上世紀(jì)初Smith等人就發(fā)現(xiàn)作為自然存在的遺傳工程,土壤中生存的根癌農(nóng)桿菌可以將外源基因轉(zhuǎn)入植物而導(dǎo)致根腫瘤的生成。農(nóng)桿菌的致病基因在酸性條件和酚類誘導(dǎo)物(如乙酰丁香酮)的存在下,微生物DNA分子的一部分可以轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞并插入到植物基因組中。1977年Chilton等人證明根癌農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的一部分轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞,整合進(jìn)植物基因組使植物產(chǎn)生腫瘤。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入植物的DNA片段稱為轉(zhuǎn)移DNA(T-DNA)。基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的一般操作中間載體的表達(dá)構(gòu)建(T-DNA克隆至大腸桿菌載體)植物表達(dá)載體的構(gòu)建(中間載體加啟動子)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌,與Ti質(zhì)粒發(fā)生同源重組農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)染受體植物
以根瘤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化雙子葉植物葉片為例1.將表面消毒的葉片切成小塊2.小塊在過夜培養(yǎng)并稀釋到一定濃度的根癌農(nóng)桿菌液中浸泡幾分鐘,以便讓根癌農(nóng)桿菌感染葉片切塊的傷口。3.從菌液中撈出小塊,培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。4.在含頭孢霉素選擇培養(yǎng)基中篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),轉(zhuǎn)化的細(xì)胞分化出芽。5.將芽轉(zhuǎn)入含有抗生素的生根培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)生根。6.將完整的轉(zhuǎn)基因植株移栽到土壤中。特點(diǎn):轉(zhuǎn)入的基因經(jīng)常是單拷貝表達(dá)水平高可以轉(zhuǎn)入大的DNA片段(可達(dá)150kb)不需貴重儀器沒有必要對植物組織制造傷口超聲波予處理植物組織,可以提高轉(zhuǎn)化效率單子葉植物需要加入外源酚類物質(zhì),才能激活Vir區(qū)的基因,達(dá)到轉(zhuǎn)基因的目的2基因直接導(dǎo)入法通過物理或化學(xué)的方法直接將外源目的基因?qū)胫参锏幕蚪M中。物理方法包括基因槍轉(zhuǎn)化法、電激轉(zhuǎn)化法、超聲波法、顯微注射法和激光微束法等;化學(xué)方法有PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化方法和脂質(zhì)體法等。生物彈或粒子槍(BiolisticsorParticlegun)基因轉(zhuǎn)化技術(shù)基本原理:將外源基因附在重金屬如鎢或金顆粒上,然后在一個真空的小室中采用高壓將帶有基因的金屬顆粒轟擊進(jìn)入植物組織或細(xì)胞,少數(shù)基因?qū)⒄偷交蚪M中,獲得表達(dá)并可能傳遞給后代。在真空的小室中,依靠火藥爆發(fā)、氦氣、二氧化碳或放電,使金屬顆粒獲得高速目前以美國伯樂公司(Bio-Rad)的PDH1000型基因槍應(yīng)用最為廣泛
優(yōu)點(diǎn):操作容易;一次轟擊可以轉(zhuǎn)化大量細(xì)胞;幾乎任何植物組織或細(xì)胞都可以使用基因槍進(jìn)行轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)入組織的深度可以用轟擊壓力和空間距離來控制缺點(diǎn):轉(zhuǎn)入的基因拷貝數(shù)是隨機(jī)的;此外還容易將較大片段的基因斷裂成小片段?;驑屴D(zhuǎn)化成本高;嵌合體比率大;遺傳穩(wěn)定性差還可能發(fā)生共抑制現(xiàn)象(co-suppression)原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化途徑1982年Krens等人首次用PEG處理煙草原生質(zhì)體獲得了轉(zhuǎn)化植株,開拓了用PEG進(jìn)行植物轉(zhuǎn)化的新途徑采用機(jī)械或酶處理技術(shù)可以從未成熟胚、幼穗、葉肉、葉盤和花藥等植物組織分離原生質(zhì)體,然后用于遺傳轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)此法轉(zhuǎn)入外源基因比較容易,但原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)是相當(dāng)困難的,所以,此方法的應(yīng)用只限于少數(shù)實(shí)驗(yàn)室3種質(zhì)系統(tǒng)法
以植物自身的種質(zhì)細(xì)胞為媒介,特別是植物的生殖系統(tǒng)的細(xì)胞(花粉、卵細(xì)胞、子房和幼胚等)以及細(xì)胞的結(jié)構(gòu),將外源DNA導(dǎo)入完整植物細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)遺傳轉(zhuǎn)化的技術(shù)稱為種質(zhì)轉(zhuǎn)化系統(tǒng)(germlinetransformation),該技術(shù)也稱為生物媒體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)或整株活體轉(zhuǎn)化(inplantatransformation)。這包括花粉管通道法、生殖細(xì)胞浸染法、胚囊和子房注射法等?;ǚ酃芡ǖ婪ㄖ饕硎牵涸谑诜酆笙蜃臃孔⑸浜康幕虻腄NA溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源DNA導(dǎo)入受精卵細(xì)胞,并進(jìn)一步地被整合到受體細(xì)胞的基因組中,隨著受精卵的發(fā)育而成為帶轉(zhuǎn)基因的新個體。
早在70年代末,上海生物化學(xué)所的周光宇等科學(xué)家將從植物提取的總DNA在開花前后加到受體植物的柱頭上,在受精的同時,外源DNA經(jīng)過花粉管與花粉一起進(jìn)入合子。在新的合子中攜帶有外源DNA。20余年來,我國科學(xué)工作者通過花粉管通道技術(shù)創(chuàng)造了一大批新型育種材料,有些并獲得了新的商業(yè)品種花粉管通道法是一個不依賴于組織培養(yǎng)的將外源基因轉(zhuǎn)入受體的簡便技術(shù),易于為廣大育種人員進(jìn)行操作缺少分子水平上的機(jī)理研究報告及證據(jù),目前爭議較大基本程序包括:外源DNA(基因)的制備;根據(jù)受體植物的受精過程及時間,確定導(dǎo)入外源DNA(基因)的時間及方法;將外源DNA(基因)導(dǎo)入受體植物;轉(zhuǎn)基因植株目標(biāo)性狀鑒定及分子檢測。
轉(zhuǎn)化率:一般在10-2~10-1之間優(yōu)點(diǎn):不依賴組織培養(yǎng)人工再生植株,技術(shù)簡單。不需要裝備精良的實(shí)驗(yàn)室,易于掌握。受體材料為植株整體,操作簡便。導(dǎo)入的DNA分子整合效率較高。特別適合于難以建立有效再生系統(tǒng)的植物。5、擬南芥菜(Arabidopsis)的轉(zhuǎn)化方法在擬南芥菜的開花盛期,將花序倒浸于含有目的基因的農(nóng)桿菌液中,真空條件下處理數(shù)秒鐘,然后將處理過的植株移到正常生長條件下,讓植株結(jié)實(shí)。其中有一部分種子被轉(zhuǎn)化。將收獲的種子用適當(dāng)?shù)暮Y選劑如抗生素、殺草劑等進(jìn)行篩選,即可獲得陽性轉(zhuǎn)化植株盡管轉(zhuǎn)化效率不高,但操作容易,重復(fù)性好,已經(jīng)在很多實(shí)驗(yàn)室廣為采用最近幾年,更將擬南芥菜的轉(zhuǎn)化方法發(fā)展為用農(nóng)桿菌液直接噴在開花期的花序上,同樣可以獲得轉(zhuǎn)化植株三、基因轉(zhuǎn)植物的篩選和鑒定方法1、選擇標(biāo)記基因檢測法標(biāo)記基因(markergene):是指其編碼產(chǎn)物能夠使轉(zhuǎn)化的細(xì)胞、組織具有對抗生素或除草劑的抗性,或者使轉(zhuǎn)化細(xì)胞、組織具有代謝的優(yōu)越性。特征:編碼一種不存在于正常植物細(xì)胞中的產(chǎn)物例如酶和蛋白質(zhì)等;
基因較小,易構(gòu)成嵌合基因;
能在轉(zhuǎn)化體中得到充分表達(dá);
容易檢測,并能定量分析。常用的選擇標(biāo)記基因主要有兩大類編碼抗生素的抗性基因:如新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因nptⅡ,潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因hpt,二氫葉酸還原酶基因dhfr
編碼除草劑抗性基因:如草丁膦乙酰轉(zhuǎn)移酶基因bar、5-烯醇丙酮酰草酸-3-磷酸合成酶基因epsps。2報告基因檢測法
報告基因(reportergene)是用來檢測轉(zhuǎn)基因效率的酶的基因,它的產(chǎn)物的酶活性必須容易快速地測定。是常用來判斷外源基因是否已經(jīng)成功地導(dǎo)入受體細(xì)胞、組織或器官,并檢測其表達(dá)活性的一類特殊用途的基因。
理想的植物報告基因應(yīng)具備以下的特征:編碼的產(chǎn)物是唯一的,并且對受體細(xì)胞無毒。表達(dá)產(chǎn)物及產(chǎn)物的類似功能在未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞內(nèi)不存在,即無背景。產(chǎn)物表達(dá)水平穩(wěn)定,便于檢測等。轉(zhuǎn)基因植物常用的報告基因主要有:β-葡萄糖醛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶(β-glucuronidase,gus)基因(gus)
酶與底物發(fā)生作用,分光光度法胭脂堿合成酶(nopalinesynthase,nos)基因(nos)章魚堿合成酶(octopinesynthase,ocs)基因(ocs)
紙電泳分離被檢植物組織抽提物,電泳遷移率及染色比較熒光素酶(luciferase,luc)基因(luc)綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因(gfp)等。
氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(Chloramphenicolacetyltransferase,CAT)基因這是植物轉(zhuǎn)基因研究早期使用的標(biāo)記基因,因?yàn)镃AT活性的檢測費(fèi)時,又需要放射性試劑,現(xiàn)在很少使用。葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因來源于大腸桿菌,是轉(zhuǎn)基因研究以來應(yīng)用最為廣泛的一個標(biāo)記基因。葡糖醛酸酶催化一些熒光和組織化學(xué)反應(yīng)底物(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸酯)的水解反應(yīng),生成非常容易觀察的蘭色產(chǎn)物熒光素酶(Luciferase,Luc)基因
來源于火蠅的熒光素酶基因在ATP存在下催化D-熒光素的氧化反應(yīng)生成氧化熒光素和黃-綠色光。這是一種對植物組織沒有傷害的檢測方法。缺點(diǎn)是觀察所需的設(shè)備昂貴,熒光素酶檢測底物對有些植物組織的滲透能力不強(qiáng),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?;ㄇ嗨兀ˋnthocyanins,Ant)基因是來自于玉米、大麥和其它植物的與花青素合成有關(guān)的植物基因如C1,B,RandAnt.轉(zhuǎn)入這些基因后,可以在植物組織上生成紅色的花青素斑點(diǎn)。此基因不需任何底物就可以檢測,但使用局限性大,僅限于少數(shù)植物。綠色熒光蛋白(Greenfluorescentprotein,GFP)基因綠色熒光蛋白是海洋生物水母體內(nèi)的一種發(fā)光蛋白,經(jīng)過改造后用于做植物的標(biāo)記基因,基因產(chǎn)物在蘭色光或紫色光下可見綠色熒光,是最新發(fā)展起來的標(biāo)記基因。因?yàn)樗鼛缀蹩朔松鲜鰩追N標(biāo)記基因的所有局限性,因而盡管出現(xiàn)時間很短,已為普遍應(yīng)用到轉(zhuǎn)基因工作的各個方面。篩選和鑒定工作步驟篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞
對轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定
進(jìn)行性狀鑒定及外源基因的表達(dá)調(diào)控研究
遺傳學(xué)分析
四、作為生物反應(yīng)器的轉(zhuǎn)基因植物抗性基因工程植物品質(zhì)改良基因工程有特殊療效的保健食品、功能性食品以及治療性食品。轉(zhuǎn)基因植物作為生物反應(yīng)器可以生產(chǎn)細(xì)胞素、激素、單克隆抗體、營養(yǎng)蛋白、酶、疫苗、各種生長因子及其它一些藥物與采用微生物發(fā)酵及動物細(xì)胞生產(chǎn)上述產(chǎn)品,轉(zhuǎn)基因植物具有以下優(yōu)點(diǎn):植物細(xì)胞易于培養(yǎng),操作簡便,設(shè)備簡單;生產(chǎn)成本低、易于后期提純加工;安全性好,不容易被病毒或其它病原菌污染;轉(zhuǎn)基因植物及其種子易于儲存、運(yùn)輸;可以大規(guī)模生產(chǎn)。轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)疫苗已經(jīng)用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)乙肝疫苗、腸毒素B亞單位疫苗、鏈球菌表面蛋白疫苗和一些獸用疫苗等一大批產(chǎn)品用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)出的疫苗根據(jù)需要有的要經(jīng)過提純加工后使用,也可以直接用來做食品疫苗或家畜食用的飼料疫苗
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