第四章-免疫效應(yīng)分子

醫(yī)學免疫學

第四章免疫效應(yīng)分子泰州市中醫(yī)院腎病科教研室內(nèi)容提要概述免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)抗體的異質(zhì)性五類免疫球蛋白的生物學特性免疫球蛋白基因及抗體的多樣性人工制備抗體一、概述

抗體antibodyAb是B細胞識別抗原后增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，主要存在于血清等體液中，能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白，具有免疫功能

概念

具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體類似的球蛋白抗體和免疫球蛋白的關(guān)系:抗體都是免疫球蛋白，并非所有免疫球蛋白都具有抗體活性類型

分泌型（secretedIg,sIg）膜型（membraneIg,mIg）理化性質(zhì)

屬球蛋白，在電泳圖譜上大部分抗體活性在球蛋白，具有異質(zhì)性二、Ig的結(jié)構(gòu)(IgG為例)重鏈與輕鏈可變區(qū)和恒定區(qū)鉸鏈區(qū)功能區(qū)其它成分水解片段基本結(jié)構(gòu)*由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈通過二硫鍵連接而成的四肽鏈分子重鏈與輕鏈*重鏈（heavychain,H鏈）約450-550氨基酸

1）根據(jù)重鏈恒定區(qū)抗原特異性不同，可將重鏈分為5種：、、、、。其相應(yīng)Ig為IgG、IgM、IgA、IgD、IgE

*輕鏈（lightchain,L鏈）約214個氨基酸

1）根據(jù)輕鏈恒定區(qū)抗原性不同，分為和兩種。一個天然的Ig分子上輕鏈類型是相同的

2）在不同種屬的動物與鏈的比例不同：人：2：1

小鼠：20：1

可變區(qū)和恒定區(qū)

1.可變區(qū)（variableregion，V區(qū)）：位于Ig分子N端，占輕鏈1/2和重鏈1/4或1/5；不同抗體其IgV區(qū)氨基酸組成和排列有較大差異，并決定抗體與抗原結(jié)合的特異性*超變區(qū)（hypervariableregion,HVR）：在VL和VH中，某些特定位置的氨基酸殘基的排列順序高度可變，此為HVR。輕、重鏈各有3個HVR*互補決定區(qū)（complementarity-determiningregion,CDR）：超變區(qū)乃抗體與抗原（表位）特異性結(jié)合的位置，此為CDR*骨架區(qū)（frameworkregion,FR）：V區(qū)中非HVR部位的氨基酸組成和排列相對保守，此為FR。VH和VL各有4個FR2.恒定區(qū)（constantregion,C區(qū))：位于Ig分子的C端，占輕鏈1/2和重鏈3/4（IgA、IgD）或4/5（IgM、IgE）。在同一種屬中，同一類重鏈和同一類輕鏈C區(qū)氨基酸的組成或排列比較恒定。介導Ig多種生物學功能超變區(qū)（HVR）輕鏈：24-34、50-56、89-97重鏈：31-35、50-65、95-102框架區(qū)（FR）鉸鏈區(qū)位于CH1和CH2之間可轉(zhuǎn)動的區(qū)，含豐富的脯氨酸，易伸展彎曲，有利于IgV區(qū)與抗原互補性結(jié)合；有利于暴露補體結(jié)合位點；對蛋白酶敏感其它成分

J鏈（joiningchain）分泌片（secretorypiece,sp）水解片段功能區(qū)Flexibilityofimmunoglobulins

Ｊ鏈和分泌片SIgAＪ鏈joiningchain由漿細胞合成的富含半胱氨酸的酸性糖蛋白，主要作用是在羧基端連接Ｉg單體為雙聚體或五聚體，起穩(wěn)定多聚體結(jié)構(gòu)及參與體內(nèi)轉(zhuǎn)運的作用分泌片secretorypiece,SP分泌片是由粘膜上皮細胞合成，并在IgA二聚體形成后通過二硫鍵以共價鍵方式連接在C區(qū)C端上。一般認為SIgA可能以膜結(jié)合蛋白形式存在于粘膜表面，分泌片選擇性地介導IgA二聚體的裝配和轉(zhuǎn)運，并有穩(wěn)定SIgA的結(jié)構(gòu)，避免蛋白酶的消化水解

免疫球蛋白的水解片段

木瓜蛋白酶(papain)水解IgG：得到兩個相同的Fab段和一個Fc段

胃蛋白酶(pepsin)裂解IgG：得到一個具有雙價活性的F（ab’）2段和若干個小分子多肽碎片（pFc’）免疫球蛋白的功能區(qū)Ig的多肽鏈分子可折疊成若干個由鏈內(nèi)二硫鍵連接的球形結(jié)構(gòu)。每個球形結(jié)構(gòu)約由110個氨基酸組成，具有一定的生理功能，故稱為功能區(qū)（domain）VH和VL：與抗原特異性結(jié)合的部位CL和CH1：某些同種異型（allotype）遺傳標記IgG的CH2、IgM的CH3：補體C1q結(jié)合點激活補體經(jīng)典途徑IgG的CH3：結(jié)合單核/巨噬細胞表面FcR不同生物學效應(yīng)免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)域

Ig的輕、重鏈每隔110個氨基酸殘基即由鏈內(nèi)二硫鍵連接成一個能行使特定功能的球形結(jié)構(gòu)----結(jié)構(gòu)域，其二級結(jié)構(gòu)是由幾股多肽鏈折疊形成的兩個反向平行的β片層。兩個反向平行的β片層中心的兩個半胱氨酸殘基由一個鏈內(nèi)二硫鍵垂直連接，有穩(wěn)定功能區(qū)的作用，形成一個β桶狀結(jié)構(gòu)三、免疫球蛋白的異質(zhì)性不同抗原表位刺激所產(chǎn)生不同的抗體分子，其識別抗原的特異性不同（V區(qū)不同）同一抗原表位誘生的不同類型的抗體，其識別抗原的特異性相同（C區(qū)不同）免疫球蛋白有不同種類免疫球蛋白同時可作為抗原，其具有不同的抗原特異性免疫球蛋白具有異質(zhì)性免疫球蛋白的免疫原性免疫球蛋白的不同結(jié)構(gòu)區(qū)其免疫原性不同：同種型（isotype）：種屬特異性標志同種異型（allotype）：個體特異性標志獨特型（idiotope）：免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)Ig的類型類（class）：根據(jù)CH抗原特異性的不同分為五大類

γμαδεIgGIgMIgAIgDIgE

亞類：IgG1-G4；IgA1-A2；IgM1-M2型（type）：根據(jù)CL抗原性的不同分為兩個型：κ型和λ型亞型：κ型有亞型Ig的血清型同種型（isotype）指同一種屬所有個體的Ig分子共有的抗原特異性標志，位于IgC區(qū)同種異型（allotype）指同一種屬不同個體間Ig分子所具有的不同的抗原特異性標志獨特型（idiotype）指同一個體不同B細胞克隆產(chǎn)生的Ig分子所特有的抗原特異性標志，獨特型由若干個抗原決定簇組成，又稱為獨特位（idiotope），主要存在于V區(qū)同種型(isotype):

同一物種內(nèi)所有個體共同具有的Ig抗原特異性結(jié)構(gòu)同種型Ig的抗原決定簇存在于CH、CL據(jù)CH的不同，Ig分類、亞類據(jù)CL的不同，Ig分型、亞型Ig同種型同種異型（allotype)：

同一物種內(nèi)不同個體間的Ig免疫原性的差別Ig同種異型獨特型（idotype)：同一個體內(nèi)不同B細胞克隆產(chǎn)生的Ig其超變區(qū)各自具備獨特的抗原決定簇結(jié)構(gòu)Ig獨特型四、免疫球蛋白的功能V區(qū)的功能特異性結(jié)合抗原

抗體結(jié)合相應(yīng)抗原分子，中和作用，發(fā)揮免疫效應(yīng)（生理與病理）

BCR特異性識別并結(jié)合抗原分子，介導體液免疫應(yīng)答C區(qū)的功能

激活補體

IgM、IgG1~3

激活補體經(jīng)典途徑凝聚的IgA或IgG4

激活補體旁路途徑與細胞表面FcR結(jié)合

1）調(diào)理作用（opsonization)；

IgFc段與吞噬細胞表面FcR結(jié)合促吞噬

2）抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用（Ab-dependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)3)介導I型超敏反應(yīng)

穿過胎盤和粘膜

IgG通過胎盤；sIgA穿過粘膜C區(qū)的功能VH和VL:識別和結(jié)合抗原CH和CL:同種異型的遺傳標志CH2:補體C1q結(jié)合位點，IgG可通過胎盤CH3/CH4:與多種細胞表面的FcR結(jié)合(免疫調(diào)理,I型超敏反應(yīng))各功能區(qū)的作用抗體的中和作用調(diào)理作用ADCC效應(yīng)antibody—dependent

cell—mediatedcytotoxicity：表達受體的細胞通過識別抗體的Fc段直接殺傷被抗體包被的靶細胞五、五類Ig的特性和功能

ImmunoglobulinIsotypesAreDistributedToDifferentPartsOfTheBody

IgM–Blood

IgG–Tissues

IgA–Mucosa

IgE-Surfaces性質(zhì)IgGIgAIgMIgDIgE沉降系數(shù)（S）76.6---1418--1978Mr(Χ104)1.51.6—4.4791.852電泳位置γα-α1γα-βαγ1β1γ1γ1含糖量%38121312輕鏈κ：λ2：15：43：11：61：1重鏈γαμδε輕鏈Χ1052．32．32．32．32．3重鏈Χ1055.0556.36.577.5抗原結(jié)合價221022血清含量（mg/ml）8---161.4—140.4--20.03—0.47—45ng/ml占血清免疫球蛋白%8013610.002占血清蛋白%185.51.6微量微量合成速度每天mg/kg26275.70.40.002半壽期（d）235.85.12.82.3產(chǎn)生順序23145IgG的特性和功能血清中的主要抗體成分（75-80%）；半壽期長（20-23天）出生后3個月開始合成，3-5歲接近成人水平多數(shù)抗菌、抗病毒、抗毒素抗體均屬IgG類是唯一能通過胎盤的Ig，發(fā)揮自然被動免疫功能具有活化補體經(jīng)典途徑的能力（IgG3>IgG1>IgG2）具有調(diào)理作用、ADCC作用和結(jié)合SPA等參與Ⅱ型、Ⅲ型超敏反應(yīng)，某些自身免疫病的抗體也屬IgGIgM的特性和功能五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白（macroglobulin）個體發(fā)育中最先出現(xiàn)的Ig，胚胎晚期即能產(chǎn)生，臍帶血IgM增高提示胎內(nèi)感染（如風疹病毒、巨細胞病毒感染等）抗原初次刺激機體時，是體內(nèi)最先產(chǎn)生的Ig；血清IgM升高說明有近期感染有強大激活補體能力和調(diào)理作用，在機體早期免疫防御中具有重要作用天然血型抗體是IgM未成熟B細胞僅表達mIgM，記憶B細胞mIgM消失IgA的特性和功能分為單體的血清型和二聚體的分泌型IgA分泌型IgA主要由黏膜相關(guān)淋巴組織產(chǎn)生，存在于唾液、淚液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和黏膜表面，是機體黏膜局部抗感染免疫的重要因素初乳中的sIgA可對嬰幼兒發(fā)揮自然被動免疫作用調(diào)理吞噬、中和毒素sIgA的合成和主要作用部位在黏膜IgD的特性和功能血清中含量低（1%），其生物學作用尚不清楚mIgD可作為B細胞分化成熟標記，成熟B細胞同時表達mIgM和mIgDmIgMmIgD成熟B細胞活化B細胞未成熟B細胞IgE的特性和功能是血清中含量最低的Ig主要由呼吸道、胃腸道粘膜固有層的漿細胞產(chǎn)生屬嗜細胞抗體，可與肥大細胞、嗜堿粒細胞表面FcεR結(jié)合，介導I型超敏反應(yīng)六、人工制備抗體多克隆抗體單克隆抗體基因工程抗體

克?。河梢粋€始祖細胞分化、增殖所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相同的細胞群多克隆抗體（polyclonalantibody,PcAb）單克隆抗體（monoclonalantibody,McAb）多克隆抗體

（polyclonalantibody）

用含多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)免疫動物，刺激多個B細胞克隆所獲得的免疫血清（含多種抗體的混合物），此為多克隆抗體

來源廣泛，制備容易；特異性不高帶有多個表位抗原針對不同表位的B細胞克隆增殖多種抗體的混合物（多克隆抗體）刺激小鼠單克隆抗體

monoclonalantibody,mAb由一個克隆細胞產(chǎn)生、只作用于某一抗原決定基的均一抗體。結(jié)構(gòu)高度均一，其抗原結(jié)合部位和同種型均相同，純度高、特異性強、效價高、無交叉反應(yīng)借助小鼠B細胞雜交瘤（hybridoma）技術(shù)，所制備的高度均一（屬同一類、亞類、型別）、單一特異性（僅針對特定抗定抗原表位）的抗體純度高、特異性強、可大量生產(chǎn)

單克隆和多克隆抗體的比較和用途特異性敏感性均一性McAbPcAb低差無高強有1、用于免疫學檢測，輔助臨床診斷2、McAb用于親和層析，分離微量可溶性抗原3、標記的McAb用于基礎(chǔ)研究，了解細胞分化等4、制備生物導彈用于腫瘤、移植等的臨床治療應(yīng)用：臨床檢測、抑制器官移植排斥、治療自身免疫疾病、生物導彈等基因工程抗體又稱重組抗體借助DNA重組技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，按人們的意愿在基因水平上對Ig進行切割、拼接或修篩，重新組裝成為新型抗體分子基因工程抗體種類人源抗體的生產(chǎn)過程第二節(jié)補體系統(tǒng)

補體系統(tǒng)是天然免疫（Innateimmunity）的重要組成部分

天然免疫系統(tǒng)分子：

主要：補體系統(tǒng)，急性期蛋白，細胞因子；其它：胃酸、蛋白溶解酶（淚，唾液、血漿、組織液中），乳酸和脂肪酸（汗液）等。JulesBodet(1870-1961),DiscovererofComplement1894Bordet發(fā)現(xiàn)綿羊抗霍亂血清能夠溶解霍亂弧菌，加熱56°C30min阻止其活性；加入新鮮非免疫血清可恢復其活性。Ehrlich在同時獨立發(fā)現(xiàn)了類似現(xiàn)象，將其命名為補體（Complement）補體系統(tǒng)各成分的發(fā)現(xiàn)Ferrata等（1907）將新鮮血清在水中透析，可產(chǎn)生不溶性沉淀（優(yōu)球蛋白成分）和水溶性的上清液（假球蛋白成分），分別使用這兩部分都不能產(chǎn)生溶細胞效應(yīng)，如兩部分同時使用，而且只有當優(yōu)球蛋白部分先與細胞結(jié)合后，再加入假球蛋白部分才產(chǎn)生溶細胞活性。這一研究表明補體不是單一成分，至少有兩種，后來把存在優(yōu)球蛋白部分的補體，命名為C1，另一部分為C2Ritz等（1912）發(fā)現(xiàn)眼鏡蛇毒可使新鮮的血清喪失溶細胞活性，這一失活現(xiàn)象并非由C1和C2引起的，于是確定了補體的第三種成分——C3。Gorder等(1926)從用氨處理的新鮮血清喪失溶細胞活性的實驗中，發(fā)現(xiàn)了補體的第四種成分——C4。進入60年代后，由于蛋白質(zhì)分離分析技術(shù)的發(fā)展，逐步地分離純化了補體的各種成分，并證明C1包括C1q、C1r、C1S三種成分；C3包括C3、C5、C6、C7和C9等6種成分。至今已了解到補體系統(tǒng)由20多種成分組成，是一個極為復雜的酶體系

第一節(jié)概述一.基本概念

(一)補體系統(tǒng)（complementsystem)

的概念：

是由存在于人和脊椎動物血清及組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶樣活性的蛋白質(zhì)，以及其調(diào)節(jié)蛋白和相關(guān)膜蛋白（受體）共同組成的系統(tǒng)。

在機體的免疫系統(tǒng)中擔負抗感染和免疫調(diào)節(jié)作用,并參與免疫病理反應(yīng)。(二)補體系統(tǒng)的組成

1.補體系統(tǒng)組成：按功能分三組：（1）固有成分：C1(C1q，C1r，C1s)－C9、

B、D、P因子、MBL、絲氨酸蛋白酶。（2）調(diào)節(jié)分子：a.可溶性調(diào)節(jié)因子；

b.膜結(jié)合性調(diào)節(jié)分子。（3）受體成分：C1qR，CR1，CR2，

CR3，C3aR.，C5aR等。

2.補體成分命名：

固有成分：用C后加阿拉伯數(shù)字表示，如：C1,C4,C2等；其他成分：用英文大寫字母表示。如：

B因子、D因子、P因子、

H因子等；裂解片段：小片段用a表示---如：C3a；大片段用b表示---如：C3b。酶活性成分：符號上劃一橫線，如：

C3bBb。滅活補體片段：符號前加i表示，如：iC3b。

二、一般性質(zhì)：

A.主要產(chǎn)生細胞為肝細胞和巨噬細胞；

B.多數(shù)組分為糖蛋白；

C.血清中各成分含量不等，C3含量最多，

D因子最少；

D.正常生理情況下，以非活化形式存在；

E.性質(zhì)不穩(wěn)定：加熱56℃，30min失活。第二節(jié)補體固有成份一、補體固有成份的組成、命名1參與經(jīng)典途徑活化的補體固有成份按其發(fā)現(xiàn)的先后分別命名為C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8和C9，其中C1由C1q、C1r和C1s三個亞基組成。2參與旁路途徑活化的補體固有成份由B、D、P因子和C3、C5~C9組成。3MBL途徑成份：

MBL(mannose-bindinglectin,MBL)，MASP（MBL-Associatedserumproteinase),C4,C2,C3,C5-C9二、生成部位和理化特征

1、補體固有成份是由肝細胞、巨噬細胞、腸粘膜上皮細胞和脾細胞等合成的糖蛋白，含量約占血清球蛋白總量的10%，其中C3含量最高、D因子含量最低。

2、固有成份間的分子量差異較大，其中C1q最大、D因子最小。

3、對熱不穩(wěn)定，56°C、30min即被滅活，0~10°C條件下活性只能保持3~4d。

4、多種理化因素如射線、機械振蕩、酒精、膽汁和某些添加劑等均可破壞補體三、補體的結(jié)構(gòu)和功能1、C1分子的結(jié)構(gòu)和功能C1q為18條肽鏈組成的膠原蛋白樣分子，3條肽鏈一組形成6個亞單位。

C1r，C1s均為單鏈血清蛋白酶。

在鈣鎂離子參與下，一分子C1q與2分子C1r和2分子C1s形成復合物。C1是經(jīng)典途徑活化的始動分子。C1q分子的C端球形結(jié)構(gòu)是與Ig上的補體結(jié)合位點相結(jié)合的部位，它的啟動可使C1r構(gòu)型改變，成為具有活性的C1r并誘導C1s的活化，成為具有酯酶活性的C1s,在Mg++存在下可啟動補體活化的經(jīng)典途徑。C1qNC蛋白酶活性區(qū)SSC1rC1rNCSSC1sC1r、C1s分子結(jié)構(gòu)（二）C4的分子結(jié)構(gòu)、裂解片段和功能,

C4為3肽鏈結(jié)構(gòu)，分別為、、鏈。

C4是C1（C1S)的作用底物之一

C4C4aC4b

Ｃ４結(jié)構(gòu)圖chain

chain參與C3和C5轉(zhuǎn)化酶的形成過敏毒素（三）C3

C3為2肽鏈結(jié)構(gòu)，分別為、鏈。三條激活途徑的匯合點，起樞紐作用C3為血清中含量最高的補體成分

C3

C3aC3bＣ３結(jié)構(gòu)圖參與C3和C5轉(zhuǎn)化酶的形成過敏毒素（四）B因子及其功能B因子為存在于血清的單鏈糖蛋白。D因子Ba（234aa）Bb（505aa）NC蛋白酶活性區(qū)C3bC3bBb（C3轉(zhuǎn)化酶）（五）C5C5為2肽鏈結(jié)構(gòu)，分別為、鏈。SSC5轉(zhuǎn)換酶C5aC5b過敏毒素參與攻膜復合體的形成（六）C9,穿孔素(Perforin)C9和穿孔素結(jié)構(gòu)類似，均為單鏈結(jié)構(gòu),N端以親水性氨基酸為主，C端均以疏水性氨基酸為主。被活化后形成管狀結(jié)構(gòu)的多聚體，由10個以上的單體分子組成，可通過其疏水性的C末端插入細胞膜，導致細胞溶解。NC凝血酶親水區(qū)疏水區(qū)

第三節(jié)、補體系統(tǒng)的激活

------三條途徑：

經(jīng)典途徑（classicalpathway）旁路途徑（alternativepathway）

MBL途徑（MBLpathway）

（甘露糖結(jié)合凝集素）

(一)

經(jīng)典（傳統(tǒng)）激活途徑：激活劑：Ag-Ab復合物(IgG、IgM)

參與成分：C1~C9

激活過程（三個階段）：識別階段活化階段膜攻擊階段幾個特點：

1抗原抗體特異結(jié)合活化

2反應(yīng)順序為C1qrs-C4-C2-C3-C5-C6-C7-C8-C93產(chǎn)生3個轉(zhuǎn)化酶：C1酶,C3轉(zhuǎn)化酶，C5轉(zhuǎn)化酶

4產(chǎn)生3個過敏毒素（Anaphylatoxin），C3a,C4a,C5a

經(jīng)典激活途徑的特點是從C1開始的，主要是通過抗原-抗體復合物中的抗體分子結(jié)合C1的亞成分C1q觸發(fā)此途徑的。復合物中的抗體各類中只有IgG和IgM的特異結(jié)合部位：Cr2和可與C1q結(jié)合。C1q有6個部位可與抗體結(jié)合，但只需有2個部位與抗體分子結(jié)合即足以活化C1。因此IgM只需1個分子，而IgG需2個以上的分子。IgG各亞類固定C1q的能力是不同的，順序是IgG3﹥IgG1﹥IgG2，IgG4無固定補體的能力。除抗原-抗體復合物能經(jīng)經(jīng)典途徑激活補體外，核酸，粘多糖、肝素、魚精蛋白以及某些RNA腫瘤病毒胞膜蛋白等可與C1q結(jié)合，產(chǎn)生激活補體效應(yīng)；纖溶酶及組織蛋白酶可激活相當數(shù)量的C1r和C1s，然后沿經(jīng)典途徑激活補體其他成分。A.識別階段抗原-抗體復合物（EA）形成后，便結(jié)合C1中的C1q，進而激活C1r和C1s，使C1變成有酶活性的C1

。Ag-Ab復合物

C1q

C1r活化

C1s活化B.活化階段

C3轉(zhuǎn)化酶和C5轉(zhuǎn)化酶的形成活化的C1s依次酶解C4和C2，產(chǎn)生的C4b和C2b結(jié)合為C4b2b，具有酶活性，稱為C3轉(zhuǎn)化酶。它可以裂解C3，并與裂解片段C3b結(jié)合形成C4b2b3b，它可以裂解C5，至此，完成了經(jīng)典激活途徑的激活階段。

C.膜攻擊階段---膜攻擊復合體（C5b6789n）形成

C5aC4b2b3bC5C5b+C6+C7

C5b67+C8C5b678+C9

C5b6789n(膜攻擊復合體)細胞裂解C5b活性極不穩(wěn)定，但與C6成分結(jié)合后形成牢固的復合物。再與C7結(jié)合形成更大的三分子復合物C567時，就脫離了C3b，并插入靶細胞脂質(zhì)雙層膜中。C567無酶活性，其分子排列方式有助于吸附C8，形成的C5678能使該復合體產(chǎn)生透膜的能力，并在膜上形成微小的穿膜孔道，細胞內(nèi)的離子和水分開始緩緩流出。復合體中的C8具有攻擊膜的功能，C9是C8的促進因子，所以隨著結(jié)合的C9數(shù)目的增加，孔道的孔徑逐漸增大，最后可結(jié)合12~15個C9分子。C5678

(9)n復合物的結(jié)構(gòu)外觀像指環(huán)一樣扣在膜上，形成一個類似漏斗樣結(jié)構(gòu)。多聚體C9插入靶細胞內(nèi)形成一個外徑約為100mm的圓柱體，其內(nèi)徑約為11nm，下端為3~5nm的小孔道。管道內(nèi)面由許多親水氨基酸殘基和碳水化合所組成，管道外表面與雙層磷脂膜接觸的由疏水氨基酸殘基組成。補體活化的經(jīng)典途徑IgM/IgG-Ag復合物C1q:r:sC4C4b+C2C4aC2aC4b2bC3C3bC3aCa++Mg++Ca++（C3轉(zhuǎn)化酶）C4b2b3b（C5轉(zhuǎn)化酶）識別活化C5C5b-C6,7,8,9nC5a細胞溶解攻擊(二)

旁路（替代）激活途徑

不經(jīng)對C1、C4、C2的激活而由C3、B因子參與的激活過程稱為補體激活的旁路（替代）途徑(alternativepathway)，也稱備解素途徑(properdinpathway)。

激活劑：酵母、細菌的多糖成分（LPS）,凝聚的IgA、IgE等。參與成分：B、D、P因子、C3、C5~C9幾個特點：1、它是非特異性的，無須通過特異免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗原-抗體復合物來激活。在病原微生物侵入機體時便被激活，產(chǎn)生溶菌作用。這無疑是快速、有效的，特別是對免疫力低下的個體，提供了一個高效的抗病原微生物感染的手段。

2、具有一個利用C3b的正向反饋調(diào)節(jié)。在旁路激活途徑中，C3b既是C3的裂解產(chǎn)物，也是C3轉(zhuǎn)化酶（C3bBb）的組成成分，加速了C3的活化，也提高了溶細胞的效應(yīng)。

3、必須提供一個吸附或結(jié)合補體C3b成分的載體表面。如病原微生物的細胞壁、細胞的細胞膜、甚至凝聚的IgA或IgG4等，結(jié)合后才使C3b穩(wěn)定并沿旁路途徑繼續(xù)被激活。在炎癥部位的蛋白水解酶可緩慢地裂解C3，但一旦產(chǎn)生游離于液相的C3b便一瞬間被水解滅活，終止了補體系統(tǒng)的級聯(lián)反應(yīng)，因此對自身機體不會造成損害。C3b可以自行轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)而結(jié)合在細胞表面，若結(jié)合的是自身細胞，則隨即被自身細胞產(chǎn)生的調(diào)節(jié)蛋白迅速滅活。

于是只有在無調(diào)節(jié)蛋白存在的微生物表面結(jié)合，這種結(jié)合又進一步地與B因子結(jié)合，再在其他因子的作用下形成穩(wěn)定的C3轉(zhuǎn)化酶和C5轉(zhuǎn)化酶。致使補體激活的級聯(lián)反應(yīng)繼續(xù)發(fā)展下去，最終導致溶菌效應(yīng)。

補體膜攻擊單位結(jié)構(gòu)

MACs造成的細胞膜損傷C7C6C8C5bC9多聚體C5b+C6+C7+C8+C9=MACs終末途徑經(jīng)典和旁路途徑的主要區(qū)別比較項目經(jīng)典途徑旁路途徑激活物補體固有成份所需離子C3轉(zhuǎn)化酶C5轉(zhuǎn)化酶生物學作用IgM/IgG1~3與抗原形成的免疫復合物細菌脂多糖、肽聚糖、酵母多糖和凝聚的IgG4/IgA等C1~C9C3、B、D、P因子和C5~C9Ca++、Mg++Mg++C4b2bC3bBb(P)C4b2b3bC3bnBb(P)在特異性體液免疫的效應(yīng)階段起作用參與非特異性免疫，在感染早期起作用（三）、

MBL（甘露糖結(jié)合凝集素）激活途徑

激活劑：MBL(mannose-bindinglectin)MBL復合物：

MBLMASP-1（MBL-associatedserineprotease-1）

MASP-2

細菌多糖經(jīng)MBL（Mannosebindinglectin）和MASP（MBL相關(guān)的絲氨酸蛋白酶）活化C4和C2

無C1的參與PathwaysofcomplementactivationCLASSICALPATHWAYALTERNATIVEPATHWAYactivationofC5LYTICATTACKPATHWAYantibodydependentLECTINPATHWAYantibodyindependentActivationofC3andgenerationofC5convertase第四節(jié)補體激活過程的調(diào)節(jié)補體系統(tǒng)的激活是有序而嚴密的。激活過程中的酶促放大、級聯(lián)反應(yīng)以及C3b的正反饋調(diào)節(jié)，可以使補體有效物質(zhì)如同“滾雪球”般大量產(chǎn)生，反應(yīng)的迅速猶如“雪崩”，這就保證快速、有效地殺滅侵入的病原微生物。補體系統(tǒng)的激活必需在適度調(diào)節(jié)的情況下進行，才能發(fā)揮正常的生理學作用。補體激活失控，則大量補體無益消耗，導致機體感染能力下降，而且會使機體發(fā)生劇烈炎癥反應(yīng)或造成自身組織細胞的損傷。在正常情況下，上述情形并不經(jīng)常發(fā)生，這主要是由于：

（1）補體系統(tǒng)不會被輕易的激活。在經(jīng)典激活途徑中依賴抗原-抗體復合物的生成，尤其是在膜表面的生成；替代途徑中的C3轉(zhuǎn)化酶只有在具有特定的生物特性的膜上才是穩(wěn)定的。（2）激活是以級聯(lián)反應(yīng)方式進行的，而級聯(lián)反應(yīng)是一環(huán)扣一環(huán)，環(huán)越多制約因素也越多，在任何一環(huán)出現(xiàn)問題，都可能終止級聯(lián)反應(yīng)的進行。這就提供了多途徑的控制效應(yīng)。（3）補體系統(tǒng)激活過程中生成的產(chǎn)物極不穩(wěn)定、極易衰變。如C4b只有結(jié)合在膜上才穩(wěn)定，大量（約有90%）未能結(jié)合在膜上的C4b因上而失活。C2只有結(jié)合在C4b上才會被C裂解，裂解C2b只有結(jié)合在C4b上，才具有C轉(zhuǎn)化酶的活性。C2和C4自身極易衰變，這就限制了C3的裂解和C5轉(zhuǎn)化酶的形成，也影響了級聯(lián)反應(yīng)的繼發(fā)效應(yīng)。（4）體內(nèi)還存在多種可溶性的和膜結(jié)合的補體調(diào)節(jié)因子，在它們的配合和控制下，補體系統(tǒng)的激活或抑制處于精細的平衡狀態(tài)。補體活化途徑的調(diào)節(jié)主要包括（一）補體自身衰變的調(diào)節(jié)（二）可溶性補體調(diào)節(jié)因子的作用（三）膜補體調(diào)節(jié)蛋白和補體受體的作用（一）補體自身衰變的調(diào)節(jié)補體系統(tǒng)激活過程中生成的產(chǎn)物極不穩(wěn)定、極易衰變。1C1抑制分子（C1inhibitor,C1INH)

結(jié)合活化的C1rC1s，使其失去正常酶解底物C4和C2的功能（二）可溶性調(diào)節(jié)分子的作用C1IHN缺陷引起血管神經(jīng)性水腫2C4bp的抑制作用（C4BindingProtein)

結(jié)合C4b，抑制C4b與C2的結(jié)合，防止C3轉(zhuǎn)化酶的組裝。促進I因子對C4b的蛋白水解3H因子的作用（factorH)能與C3b結(jié)合，抑制旁路途徑C3轉(zhuǎn)化酶（C3bBb）作為I因子的輔助因子（Cofactor）水解C3b為iC3b和C3f4I因子的抑制作用（FactorI）

裂解C3b為iC3b和C3f,繼而裂解iC3b為C3c和C3dg

裂解C4b為C4c和C4dC3dC3gproteases5Ｓ蛋白的作用

結(jié)合Ｃ5b67,阻止膜攻擊復合物的形成6過敏毒素滅活劑血清羧肽酶N滅活C4a、C3a、C5a，喪失過敏毒素活性（三）膜結(jié)合性調(diào)節(jié)分子的作用1、膜輔因子蛋白(MembraneCofactorProtein,MCP,CD46)

單鏈膜蛋白結(jié)構(gòu)，與C3b,C4b結(jié)合，抑制補體的活化。分布于大部分細胞，但紅細胞缺少。

I因子的輔助因子，促進C3b,C4b滅活，抑制補體活化，比H因子強50倍2、DAF(DecayAcceleratingFactor,CD55)

促衰變因子單鏈膜蛋白結(jié)合C3b,C4b，促進C3和C5轉(zhuǎn)化酶衰變。抑制補體的活化分布于機體大部分細胞，DAF缺陷導致陣發(fā)性血紅蛋白尿DAF作用機理3、同源性限制因子(HRF)的作用又稱C8結(jié)合蛋白，結(jié)合C8,阻斷Ｃ９的聚合

第六節(jié)、補體的生物學功能

主要包括：MAC的生物效應(yīng)；活化補體片段的生物效應(yīng)。

(一)MAC介導的生物學效應(yīng)

---細胞裂解作用補體系統(tǒng)活化膜攻擊復合物MAC

溶解靶細胞（如：奈氏細菌等G陰性菌，異型紅細胞等）。實際意義：A.抗感染；

B.自身免疫病。(二)補體活化片段介導的生物學作用

1.調(diào)理作用

Ag（顆粒性）-Ab復合C3b、

C4b、iC3b

結(jié)合于吞噬細胞CR

吞噬免疫復合物。實際意義：抗感染。

2.免疫復合物清除作用

Ag-Ab復合物（可溶性）

C3b或C4b

與血細胞（如紅細胞、血小板）CR結(jié)合

吞噬清除。實際意義：

a.清除免疫復合物，如抗病毒感染；

b.引起免疫性疾病，如免疫復合物沉積，引起腎小球腎炎。

3.炎癥介質(zhì)作用

A.過敏毒素作用：過敏毒素（anaphylatoxin）：

C5a、C3a和C4aC5a、C3a

肥大細胞和嗜堿性粒細胞（C5aR、C3aR)

釋放活性介質(zhì)(如；組胺、白三烯及前列腺素等)

過敏反應(yīng)性病理變化。

B.趨化作用：趨化因子（chemotaxin）：C5a、C3a、C4a和C5b67C5a、C3a

吞噬細胞向感染部位聚集炎癥反應(yīng)。

C.激肽樣作用：

C2a、C4a

能增強血管的通透性炎性滲出、水腫。實際意義：

a.抗感染及清除異物；

b.引起變態(tài)反應(yīng)性疾病及炎性損傷。

4.免疫調(diào)節(jié)作用

A.C3b

促吞噬細胞生成；

B.C3b

與B細胞表面CR1結(jié)合

促B細胞增殖分化。本章提要補體系統(tǒng)包括30余種可溶性和膜蛋白，是體內(nèi)重要效應(yīng)系統(tǒng)和效應(yīng)放大系統(tǒng)；補體各固有成分可分別經(jīng)經(jīng)典、旁路、MBL途徑活化，通過共同的末端途徑，最終形成MAC參與特異性和非特異性免疫；補體活化過程中還產(chǎn)生多種活性片段，發(fā)揮廣泛的生物學作用；可溶性蛋白和膜蛋白調(diào)控補體的活化；補體活化也可導致病理性免疫損傷。

思考題

1.補體系統(tǒng)的概念及其組成。

2.比較補體三條激活途徑的異同。

3.試述補體激活的調(diào)節(jié)機制。

4.補體系統(tǒng)具有哪些生物學作用？第三節(jié)細胞因子（Cytokines）第一節(jié)細胞因子的概述

一、細胞因子的概念機體的免疫細胞和非免疫細胞能合成和分泌小分子的多肽類因子，它們能調(diào)節(jié)多種細胞生理功能，稱為細胞因子（Cytokines）。細胞因子包括淋巴細胞產(chǎn)生的淋巴因子（lymphokines）和單核巨噬細胞產(chǎn)生的單核因子（monokines）等。研究細胞因子有助于闡明分子水平的免疫調(diào)節(jié)機制，有助于疾病的預防、診斷和治療，特別是利用細胞因子治療腫瘤、感染、造血功能障礙以及自身免疫病等已收到初步療效，具有非常廣闊的應(yīng)用前景。二、細胞因子的種類

白細胞介素（interleukin，IL）將介導白細胞間相互作用的一些細胞因子命名白細胞介素（IL）。許多IL不僅介導白細胞相互作用，還參與其它細胞的相互作用，如：造血干細胞，血管內(nèi)皮細胞，纖維母細胞，神經(jīng)細胞，成骨和破骨細胞的相互作用。目前已發(fā)現(xiàn)IL-1，IL-2，IL-3……18，有38種。

白細胞介素的主要作用是：促使T和B細胞增殖和分化增強NK細胞以及單核細胞的殺傷活性刺激造血細胞參與炎癥反應(yīng)誘導抗體的產(chǎn)生促進血小板的生成等

集落刺激因子

（colonystimulatingfactor，CSF）一些細胞因子可刺激不同的造血干細胞在半固體培養(yǎng)基中形成細胞集落，被稱為集落刺激因子（CSF），按其作用范圍分為：粒細胞CSF（G-CSF），巨噬細胞CSF（M-CSF），粒細胞和巨噬細胞CSF（GM-CSF）和多集落刺激因子（multi-CSF，IL-3）等。

集落刺激因子廣義上，凡是刺激造血細胞的細胞因子都可以統(tǒng)稱為CSF，如刺激紅細胞的紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)，刺激造血干細胞的干細胞因子(stemcellfactor,SCF)，刺激胚胎干細胞的白血病抑制因子(leukemiainhibitoryfactor,LIF)

干擾素（interferon，IFN）IFN是最先發(fā)現(xiàn)的細胞因子，早在1957年，Issacs等人發(fā)現(xiàn)病毒感染的細胞產(chǎn)生一種因子，可抵抗病毒的感染，干擾病毒的復制，因而命名為干擾素。根據(jù)其來源和結(jié)構(gòu)，可將IFN分為IFN-α，IFN-β，IFN-γ它們分別由白細胞，纖維細胞和活化T細胞產(chǎn)生。

干擾素的結(jié)構(gòu)（interferon,IFN）IFN-γ40kD

IFN-α19kD

IFN-β23kD

干擾素IFN除有抗病毒作用外，還有抗腫瘤，免疫調(diào)節(jié)，控制細胞增殖及引起發(fā)熱等作用。

腫瘤壞死因子

（tumornecrosisfactor,TNF）

TNF是一類能直接造成腫瘤細胞死亡的細胞因子，分為兩種：TNF-α和TNF-β，前者由單核巨噬細胞產(chǎn)生，又稱惡液質(zhì)素(cachectin)，后者由活化的T細胞產(chǎn)生，又稱淋巴毒素(lymphotoxin)。

淋巴因子

（lymphokine）由活化的淋巴細胞產(chǎn)生的細胞因子，都可稱為淋巴因子。如IL-2,3,4,5,6,9,10,11,12,13,TNF-α，IFN-β等均為淋巴因子。

單核因子

（monokine）由單核巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子統(tǒng)稱單核因子。如IL-1,6,8,TNF-α，IFN-α等均為單核因子。三、細胞因子的作用特點作用特點：天然細胞因子是由細胞產(chǎn)生的正常的靜息或休止狀態(tài)的細胞必須經(jīng)過激活后，才能合成分泌細胞因子，細胞被激活后6-8h出現(xiàn)，24-72小時達到最高。細胞因子的產(chǎn)生和作用具有多向性單一刺激如抗原，絲裂原，病毒感染等可使同一種細胞分泌多種因子，而一種細胞因子可由多種不同類型的細胞產(chǎn)生。

作用特點：細胞因子的合成和分泌是一種自我調(diào)控的過程。

細胞因子是低分子量分泌型蛋白質(zhì)（15-30KD之間）。

細胞因子需與靶細胞上的高親和力受體特異結(jié)合后，才發(fā)揮生物學效應(yīng)。細胞因子具有極強的生物學效應(yīng)，在pmol(10-12M)水平就能發(fā)揮顯著的生物學效應(yīng)。

作用特點：單一細胞因子具有多種生物學活性，多種細胞因子也常具有某些相同的生物學活性。

主要參與免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)。

以非特異性方式發(fā)揮生物學作用且不受MHC限制。

某種細胞因子對靶細胞作用的強弱取決于細胞因子的局部濃度，靶細胞的類型，和同時發(fā)揮作用的其它因素。

作用特點：天然細胞因子大多是在近距離發(fā)揮局部作用。

細胞因子的作用并不是孤立存在的，它們之間通過合成分泌的相互調(diào)節(jié)，受體表達的相互調(diào)控，生物學效應(yīng)的相互影響而組成細胞因子網(wǎng)絡(luò)。

第二節(jié)細胞因子的結(jié)構(gòu)及其受體

細胞因子的結(jié)構(gòu)不同細胞因子之間在結(jié)構(gòu)上有很大差異，多數(shù)細胞因子為小分子多肽，分子量不超過60KD。絕大多數(shù)因子帶有糖基，糖基多與細胞因子的生物活性無關(guān)，可能起延長細胞因子體內(nèi)半衰期的作用。

GM-CSFEPOIFN-β細胞因子的受體

細胞因子都是通過與靶細胞表面高親合力的特異性受體結(jié)合，結(jié)合后才能發(fā)揮其生物學效應(yīng)的。

作為膜表面受體分為3個功能區(qū)，膜外區(qū)跨膜區(qū)膜內(nèi)區(qū)

細胞因子的受體

按細胞因子受體膜外區(qū)的氨基酸序列的不同，可將其主要分為三個受體家族：造血生長因子受體家族Ig超家族干擾素受體超家族干擾素受體IFNAR1andIFNAR2干擾素受體由α和β亞單位組成，干擾素與其受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用。干擾素與受體結(jié)合后，激活信號通路中的酶和蛋白，啟動抗病毒基因的轉(zhuǎn)錄和表達。STAT:信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子ISRE:干擾素刺激反應(yīng)元件干擾素激活的信號通路依賴dsRNA的蛋白激酶（PKR）

抑制病毒蛋白翻譯2’-5’腺苷酸合成酶（2’-5’AS）

降解病毒核酸MxA蛋白

通過干擾病毒核衣殼的轉(zhuǎn)運而抑制病毒的復制干擾素的抗病毒機理第三節(jié)細胞因子的生物學活性細胞因子具有廣泛的生物學活性，能促進靶細胞的增殖和分化，增強抗感染和細胞殺傷效應(yīng)，促進或抑制其它細胞因子和膜分子的表達，促進炎癥過程，影響細胞代謝等。

一、免疫細胞的調(diào)節(jié)劑細胞因子是傳遞這種調(diào)節(jié)信號必不可少的信息分子，許多免疫細胞可以通過分泌細胞因子產(chǎn)生調(diào)節(jié)單核巨噬細胞的功能和自身調(diào)節(jié)功能。

二、免疫效應(yīng)分子在免疫細胞針對抗原行使免疫效應(yīng)功能時，細胞因子是其中重要效應(yīng)分子之一。與抗體和補體的免疫效應(yīng)分子相比，細胞因子的免疫效應(yīng)功能特點是作用強，持續(xù)時間短，主要為非抗原特異性作用，參與細胞免疫功能。在抗腫瘤，抗細胞內(nèi)寄生感染，移植排斥等功能中起重要作用。例如：TNF–α和INF-β可直接造成腫瘤細胞的凋零（apoptosis），使瘤細胞DNA斷裂，細胞萎縮死亡。干擾素α、β、γ可干擾各種病毒在細胞內(nèi)的復制，從而防止病毒擴散。白血病抑制因子(LIF)可直接作用于某些髓性白血病細胞，使其分化為單核細胞，喪失惡性增殖特性。三、造血細胞刺激劑可明顯刺激造血細胞集落的大小和數(shù)量。

四、炎癥反應(yīng)的促進劑炎癥是機體對外來刺激產(chǎn)生的一種病理反應(yīng)過程，癥狀表現(xiàn)為局部的紅腫熱痛，病理檢查可發(fā)現(xiàn)有大量炎癥細胞，如粒細胞，巨噬細胞的局部浸潤和組織壞死，在這一過程中，一些細胞因子起到重要的促進作用。如IL-1，IL-6，IL-8，TNF-α等可促進炎癥細胞的聚集、活化和炎癥介質(zhì)的釋放，可直接刺激發(fā)熱中樞引起全身發(fā)燒，加重炎癥。正常人肺泡大葉性肺炎

中性粒細胞滲出肺炎五、其它生物學活性許多細胞因子除參與免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)效應(yīng)功能外，還參與非免疫系統(tǒng)的一些功能。例如，IL-8具有促進新生血管形成的作用，M-CSF可降低血膽固醇。IL-1刺激破骨細胞，致骨細胞的生長等。第四節(jié)細胞因子的臨床意義

一、細胞因子與疾病細胞因子及其受體的缺陷細胞因子表達過高可溶性細胞因子受體水平升高細胞因子及其受體的缺陷如人類免疫缺陷病毒（HIV）感染并破壞TH后，可導致TM細胞產(chǎn)生的各種細胞因子缺陷，免疫功能全面下降，從而表現(xiàn)出獲得性免疫缺陷綜合癥（AIDS）的一系列癥狀。

細胞因子表達過高在炎癥，自身免疫病，變態(tài)反應(yīng)，休克等疾病時，某些細胞因子的表達量可成百上千倍地增加，而這些細胞因子均可促進炎癥過程，使病情加重，應(yīng)用細胞因子的抑制劑有可能治療這類炎癥性細胞因子水平升高的疾病。

可溶性細胞因子受體水平升高細胞因子受體從細胞膜上脫落下來，存在于體液和血清中，使可溶性細胞因子受體水平升高。這類分子可能結(jié)合細胞因子，使其不再與膜表面受體結(jié)合，因而封閉了細胞因子的功能。

二、細胞因子與治療

（cytokinetherapy）目前利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)重組細胞因子，作為生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑（BRM）治療腫瘤，造血障礙，感染等已收到良好療效，成為新一代的藥物。

細胞因子補充和添加療法IFN：IFN主要用于治療病毒性感染和腫瘤。對病毒性肝炎，皰疹性角膜炎，帶狀皰疹，慢性宮頸炎等有較好療效。IL-2：目前多將IL-2與其他藥物合用治療實體腫瘤，對腎細胞瘤，黑色素瘤，非何杰金淋巴瘤，結(jié)腸直腸癌有較顯著的療效。

TNF：局部應(yīng)用，全身應(yīng)用副作用嚴重。

CSF：用于各種粒細胞低下患者，如化療后的輔助治療。

細胞因子阻斷和拮抗療法其基本原理是抑制細胞因子的產(chǎn)生和阻斷細胞因子與其相應(yīng)受體的結(jié)合及受體的信號傳導過程，使細胞因子的病理性作用難以發(fā)揮，該療法適用于自身免疫疾病，移植排斥反應(yīng)，感染性休克等的治療。

細胞因子合成抑制劑：環(huán)孢素（CsA）和他克莫司（FK506）的廣泛應(yīng)用推動了各種器官移植的迅速發(fā)展。該類藥物能夠抑制免疫系統(tǒng)的活躍。IC50SP-7:8.90μgFY-7:3.22μgSP-7：SLSPGLP

(No.26)

FY-7：FSAPVRY

(No.35)受體結(jié)合抑制實驗三、細胞因子的檢測細胞因子檢測是判斷機體免疫功能的一個重要指標，在疾病的診斷，病程觀察，療效判斷及細胞因子治療監(jiān)測方面有重要意義。

目前的檢測方法：依賴性細胞株一些腫瘤細胞株必須依賴于細胞因子方能在體外增殖，因而可利用這些依賴細胞檢測相應(yīng)的細胞因子。功能檢測利用一些細胞因子的功能，建立相應(yīng)的活性測定方法。免疫測定利用抗原抗體反應(yīng)的原理，制備出抗細胞因子的單克隆抗體或多克隆抗體，可進行免疫檢測。

目前的檢測方法：功能測定與抗體抑制所用的抗細胞因子抗體必須是具有中和活性的抗體。分子雜交技術(shù)制備出細胞因子的基因探針，通過分子雜交技術(shù)檢測細胞內(nèi)細胞因子mRNA的表達。多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）首先將細胞因子產(chǎn)生細胞的RNA提取出來，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，以cDNA為模板，在細胞因子引物的引導下，即可進行PCR擴增。

免疫學相關(guān)的生物高技術(shù)細胞因子制品

體細胞治療

基因治療細胞因子制品細胞因子是一組多肽或低分子量蛋白質(zhì)，包括干擾素（IFN）、白細胞介素（IL）、腫瘤壞死因子（TNF）、集落刺激因子（CSF）、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）等。它們與靶細胞特異受體結(jié)合，調(diào)整細胞增殖、分化和功能活性，在神經(jīng)內(nèi)分泌、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中起重要作用。干擾素（IFN）

IFN分α、β、γ三型，并有多種亞型，進入臨床的重組產(chǎn)品已有11個。IFN對病毒有直接殺傷作用，影響癌基因表達，抑制癌細胞分裂、增殖和轉(zhuǎn)移。治療毛細胞白血病、原發(fā)性血小板增多癥和慢性