模塊六中藥中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)

模塊六中藥中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)第一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日2掌握大黃、虎杖中蒽醌的提取分離原理及技術(shù)；熟悉茜草中蒽醌的提取分離原理及技術(shù)；了解番瀉葉中蒽醌的提取分離原理及技術(shù)。知識要求學(xué)習(xí)目標(biāo)1掌握中藥中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離原理及操作。熟練進行薄荷中的揮發(fā)油和青蒿中的青蒿素的提取分離操作；能進行當(dāng)歸、丁香中揮發(fā)油的提取分離操作。能力要求3熟練進行大黃、虎杖中蒽醌的提取分離操作，能進行番瀉葉、茜草中蒽醌的提取分離操作。第二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日教學(xué)內(nèi)容學(xué)習(xí)提示中藥中蒽醌類化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)及提取分離知識任務(wù)一實訓(xùn)大黃中蒽醌類成分的提取分離技術(shù)

大黃中蒽醌的提取分離及鑒定

第三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日學(xué)習(xí)提示蒽醌的結(jié)構(gòu)與分類一二蒽醌類化學(xué)成分的理化性質(zhì)蒽醌的提取、分離與檢識一第四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日醌類化合物

含義:具有醌式結(jié)構(gòu)的一類化學(xué)成分的總稱。

主要包括:苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌。第五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日分子內(nèi)具有不飽和環(huán)二酮結(jié)構(gòu)（醌式結(jié)構(gòu)）或容易轉(zhuǎn)變成這樣結(jié)構(gòu)的天然有機化合物。

分布:

高等植物---五十多科一百多屬低等植物---藻類、菌類、地衣、動物及細菌存在部位：根、枝、心材及葉中，也可存在于莖、種子、果實中，近年在花的色素中也分離出了醌類化合物。概述第六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日醌類成分容易被還原為二元酚類衍生物，后者再被氧化又容易轉(zhuǎn)變?yōu)轷?，所以它們起到了電子傳?dǎo)的作用，加之它們是新陳代謝的產(chǎn)物，容易參與生物的生化反應(yīng)，從而促進或干擾了某些生化反應(yīng)，從而表現(xiàn)出多種生物活性（抗菌、抗癌、抗病毒、凝血、生物氧化反應(yīng)中輔酶）。概述第七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日生物活性（一）瀉下作用如：大黃中主要瀉下成分為——二蒽酮類成分（二）抗菌作用大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素等具有此作用（三）其它作用抑制大鼠乳癌及艾氏腹水癌有明顯作用對cAMP磷酸二酯酶有顯著的抑制作用第八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日藥用大黃原植物第九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日一、結(jié)構(gòu)類型

天然醌類主要有四種類型

苯醌

萘醌

菲醌

蒽醌

其中蒽醌及其衍生物的類型較多naphthoquinones

phenanthraquinonesanthraquinonesbenzoquinones第十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日對苯醌（para-）鄰苯醌（

ortho-）天然苯醌類化合物多為黃色或橙黃色結(jié)晶體。1.苯醌類（benzoquinones）第十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日[O][O]第十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日泛醌類(ubiquinones)生物氧化反應(yīng)的一類輔酶，稱為輔酶Q類，其中輔酶Q10(n=10)已用于治療心臟病、高血壓及癌癥。苯醌類第十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日2，6-二甲氧基苯醌鳳眼草抗菌作用

信筒子醌白花酸藤果驅(qū)腸內(nèi)寄生蟲苯醌類第十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日2.萘醌類（naphthoquinones）1113101234567812345678α(1,4)β(1,2)amphi(2,6)124567891031第十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

α-萘醌類是黃色結(jié)晶，可升華，微溶于水，能溶于乙醇和乙醚。

天然萘醌衍生物多為橙黃色或橙紅色結(jié)晶，個別為紫色結(jié)晶。

許多萘醌類有很明顯的生物活性。萘醌類第十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日三色柿醌橙紅色針晶麻風(fēng)病胡桃醌抗癌拉帕醌抗癌萘醌類第十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日苜宿中的維生素K1是黃色粘稠狀油，熔點-20℃，加熱至100-200℃以上即被分解。

生物活性是興奮或促進能合成凝血酶原的信使RNA形成，可促進血液凝固。維生素K1萘醌類第十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日紫草素第十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日天然菲醌衍生物主要包括鄰醌及對醌兩大類。3.菲醌類(phenanthraquinones)

唇形科植物丹參具有活血化瘀、消炎抗菌、抗腫瘤、擴張血管等多種作用，近幾十年來，中日學(xué)者深入研究，從中得到了幾十種菲醌衍生物。第二十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日丹參酮ⅡA有增加冠流量的作用，由其制得的丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液已投入生產(chǎn)，臨床上可治療冠心病、心梗等。丹參酮ⅡA丹參新醌丙菲醌類第二十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日具有菲醌母核的化合物，于生物合成上可能來源于二萜類，故常稱其為二萜醌類成分。

由于其生理活性多樣、顯著，有抗腫瘤活性，近年來成為各國學(xué)者研究的焦點。由于植物親源關(guān)系，唇形科鼠尾草植物含二萜醌類成分較多，故報道較多。

菲醌成分是一類醌性色素，多為橙色、紅色、棕紅色結(jié)晶，也有黃色結(jié)晶。在提取分離中不需要顯色，可直接根據(jù)色帶收集。菲醌類第二十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

4.蒽醌類(anthraquinones)123456789101，4，5，8---α位2，3，6，7—β位

9，10—meso位蒽醌類成分包括蒽醌衍生物及其不同還原程度的產(chǎn)物，如：氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮、二蒽酮。第二十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日分布生物活性定義蒽醌是以蒽的中位羰基衍生物為基本母核的一類化合物。天然蒽醌以9,10-蒽醌最為常見，由于整個分子形成一共軛體系，C9、C10又處于最高氧化水平，比較穩(wěn)定。大部分蒽醌存在于高等植物中，如蓼科、鼠李科、茜草科、豆科、玄參科、紫葳科和馬鞭草科等，其它主要存在于真菌及地衣類中，在動物及細菌中偶有發(fā)現(xiàn)。蒽醌類化合物具有瀉下、抑菌、利尿、止血、抗癌等作用，實驗研究表明，蒽醌苷的瀉下作用大于蒽醌苷元，而蒽醌苷元的抑菌作用大于蒽醌苷。蒽醌存在形式多和糖結(jié)合成苷或以游離態(tài)存在。第二十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日[H][O][H][O]蒽醌氧化蒽酚蒽酮蒽酚蒽醌類第二十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

（1）蒽醌衍生物

天然蒽醌有1，2-蒽醌、1，4-蒽醌、9，10-蒽醌，但由于C9、C10位氧化產(chǎn)物較為穩(wěn)定，故9，10-蒽醌最為常見。

多數(shù)蒽醌母核上有不同數(shù)目的羥基取代，其中以二元羥基為多。蒽醌類第二十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日分類：

①

大黃素型（Emodin）羥基分布于兩側(cè)苯環(huán)上，多呈棕黃色。大黃素蒽醌類第二十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日②茜草素型(Alizarin)

羥基分布于一側(cè)苯環(huán)上，多呈橙色-橙紅色。茜草素蒽醌類第二十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（2）蒽酚和蒽酮衍生物

蒽醌在酸性條件下還原生成蒽酚及互變異構(gòu)體蒽酮。Sn,Hcl還原蒽酚蒽酮蒽醌類第二十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

（1）蒽酚及蒽酮類一般只在存于新鮮植物中，存放期間易被氧化，生成蒽醌類。

（2）蒽酚的中位羥基與糖縮合成苷后，則難以被氧化，較穩(wěn)定，因為形成的苷只有被水解除去糖才易被氧化而轉(zhuǎn)變?yōu)檩祯苌?。而苷的水解是需要一定條件的。

（3）羥基蒽酚抑菌作用較強，可治療疥癬之類皮膚病。蒽醌類第三十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

①中位

(meso-)

連接：番瀉苷A

SennosideA（3）二蒽酮類：

蒽醌類第三十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日C10-C10,鍵容易水解而斷裂，生成較穩(wěn)定的蒽酮游離，繼而氧化成蒽醌類化合物。

一般隨著植物原料儲存時間延長，二蒽酮類含量下降，單蒽酮類含量上升。水解[O]大黃酸蒽醌類第三十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日②α-位連接二蒽酮類：C1-C1,或C4-C4,

金絲桃素

蒽醌類第三十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)與分類結(jié)構(gòu)類型活性成分主要來源作用與用途

蒽醌

大黃素茜草素蓼科多年生草本植物掌葉大黃（heumpalmatumL.）、唐古持大黃(RheumtanguticumMaxim.exBalf.)、藥用大黃(RheumofficinaleBaill)的干燥根及根莖。茜草科植物茜草RubiacordifoliaL.的干燥根及根莖具有清熱瀉下、活血化瘀等多種作用。涼血、止血，祛瘀，通經(jīng)。第三十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日蒽酚

柯椏素鼠李科植物長葉凍綠RhamnuscrenataSieb.etZucc的根或根皮。清熱解毒，殺蟲利濕。蒽酮

大黃酚蒽酮蓼科多年生草本植物掌葉大黃（heumpalmatumL.)、唐古持大黃(RheumtanguticumMaxim.exBalf.)、藥用大黃(RheumofficinaleBaill)的干燥根及根莖。具有清熱瀉下、活血化瘀等多種作用。蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)與分類第三十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日二蒽酮番瀉苷A豆科植物狹葉番瀉CassiaangustifoliaVahl或尖葉番瀉CassiaacutifoliaDelile的干燥小葉。瀉熱行滯，通便，利水。二蒽醌醌茜素鼠李科植物翼核果VentilagoleiocarpaBenth.的干燥莖。補益氣血，祛風(fēng)活絡(luò)。蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)與分類第三十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日1．性狀：

醌類衍生物是一類醌類色素，故多為有色晶體。隨著酚-OH等助色團引入越多，顏色越深。苯醌、萘醌、菲醌---多以游離狀態(tài)存在，多為完好結(jié)晶。蒽醌游離形式—多為完好結(jié)晶結(jié)合成苷---難得到完好結(jié)晶，呈粉末狀物。一般具有熒光，并在不同PH時顯示不同顏色二、理化性質(zhì)第三十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日2.升華性游離的醌類多具有升華性，蒽醌衍生物在常壓下加熱即能升華。如：大黃酚與大黃酚甲醚的升華溫度在124C

蘆薈大黃素185C

大黃素206C

大黃酸210C

一般升華溫度隨酸度的增強而升高第三十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日3.溶解度

H2OMeOHEtOHEt2OCHCl3游離醌—++++成苷+（熱）++——第三十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日4.酸堿性

Ar-OH的存在——顯酸性——用于堿提酸沉分子中Ar-OH的數(shù)目、位置不同則酸性強弱有差異(1)溶于5%NaHCO3

第四十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日溶于5%Na2CO3

溶于5%NaOH

(2)第四十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

(3)一般酸性隨羥基的增多而增強，但是，處于鄰位的二羥基蒽醌其酸性比只有一個羥基蒽醌的酸性還弱，這是由于相鄰酚羥基締合的影響。如茜草素(pKa18.2,pKa211.9).第四十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

以游離蒽醌類衍生物為例，酸性強弱將按下列順序排列：

含-COOH

>

2個以上-OH

>

1個-OH>

2個-OH

>

1個-OH

5%NaHCO3

5%Na2CO3

1%NaOH

5%NaOH

————————可用于提取分離——————————第四十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日堿性由于羰基氧原子能夠接受質(zhì)子，顯微弱的堿性可和強酸形成烊鹽——溶于濃硫酸生成紅色烊鹽。第四十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日5.顯色反應(yīng)（1）Feigl反應(yīng)原理第四十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日在這個反應(yīng)中醌類在反應(yīng)前后并無變化，只起傳遞電子的作用。范圍：醌類衍生物

第四十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日試驗步驟：第四十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（2）無色亞甲藍顯色試驗苯醌、萘醌（顯藍色）——區(qū)別于蒽醌第四十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（3）堿性條件下的顯色反應(yīng)羥基醌類在堿性溶液中發(fā)生顏色改變，會使顏色加深。多呈橙、紅、紫紅色及藍色。第四十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日反應(yīng)機理如下：第五十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日藥粉

酸水熱提

酸水液

乙醚

萃取

萃取液

加5%NaOH

堿水液（顯紅色）

醚層（變?yōu)闊o色）

這是羥基蒽醌及具有游離酚羥基蒽醌苷類一個很重要的鑒別反應(yīng)。第五十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（4）與活性次甲基試劑反應(yīng)（Kesting-Craven法）對于醌環(huán)尚未完全取代的苯醌或萘醌，可在氨的堿性環(huán)境中與活性次甲基試劑（乙酰醋酸酯、丙二酸酯、丙二腈等）的溶液反應(yīng)，生成蘭綠或蘭紫色

第五十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日與活性次甲級試劑的反應(yīng)機理（1）（2）蒽醌類無此反應(yīng)。萘醌苯環(huán)上有羥基取代時，此反應(yīng)受抑制。第五十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（5）與金屬離子反應(yīng)醋酸鎂反應(yīng)羥基蒽醌和0.5%醋酸鎂的甲醇或乙醇液生成穩(wěn)定的橙紅色或紫色絡(luò)合物。

生成的顏色隨分子中羥基的位置而有所不同。因此此反應(yīng)不僅作為蒽醌的一般定性檢查，而且可以提供羥基取代位置的線索，有利于結(jié)構(gòu)的推測。第五十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日第五十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日羥基蒽醌乙醇液

點于濾紙上

干燥

噴0.5%醋酸鎂甲醇液

90

℃加熱5min

顯色

第五十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日醋酸鎂反應(yīng):若母核只有a-OH或一個b-OH或兩個OH不在同一環(huán)

顯橙黃-橙色若一個a-OH，鄰-OH顯蘭、蘭紫色間--OH橙紅、紅色對--OH紫紅、紫色顏色反應(yīng)第五十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（6）對亞硝基二甲苯胺反應(yīng)用于鑒定蒽酮類化合物可與對亞硝基二甲苯胺的吡啶溶液反應(yīng)呈現(xiàn)不同的顏色第五十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

（三）蒽醌類化合物的提取與分離

蒽醌的提取與分離提取方法分離方法堿溶酸沉法蒽醌苷和游離蒽醌的分離利用PH梯度萃取法分離有機溶劑提取法利用色譜法分離游離蒽醌的分離蒽醌苷的分離第五十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日有機溶劑三、提取分離-----提取1.有機溶劑提取法2.堿提取酸沉淀法用于提取含酸性基團（Ar-OH、-COOH)的化合物。3.水蒸氣蒸餾法適用于小分子的苯醌及萘醌類化合物。提取液濃縮結(jié)晶甲醇、乙醇、氯仿等濃縮液游離形式蒽醌成分可用不同極性溶劑依次提取，溶劑極性由小到大，在提取過程中可得到初步分離。如極性較小的蒽醌如大黃酚、大黃素甲醚可石油醚提出，而極性較大的多羥基蒽醌則需乙醇提出。第六十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日分離1.游離蒽醌與蒽醌苷的分離根據(jù)它們的溶解性不同分離。

苷元------極性小，難溶于水，易溶于乙醚、氯仿等有機溶劑。

苷------極性大，溶于水，難溶于乙醚、氯仿等有機溶劑。因此根據(jù)極性用氯仿萃取游離蒽醌用正丁醇萃取蒽醌苷第六十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日2.游離蒽醌的分離：

常采用梯度PH萃取法。A．由于蒽醌羥基位置、數(shù)目及羧基的有無，其酸度大小是有區(qū)別的，可分別溶于不同堿性的水液，故可采用梯度PH萃取法。此法為分離游離蒽衍生物的經(jīng)典方法，也為常用方法。

5%NaHCO3液含-COOH及兩個以上β-酚OH

5%Na2CO3液含一個β-酚OH蒽醌類

1%NaOH液含兩個a-酚OH蒽醌類

5%NaOH液含一個a-酚OH蒽醌類第六十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日三、提取分離（二）游離羥基蒽醌的分離B .層析法吸附劑——硅膠、聚酰胺不易用氧化鋁，尤其不易用堿性氧化鋁---因為羥基蒽醌能與氧化鋁形成牢固螯合物，難以洗脫。第六十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日3．蒽醌苷類的分離：

層析前用鉛鹽法或溶劑法處理，得較純總苷后再進一步分離。

溶劑法是用中等極性的有機溶劑如乙酸乙酯、正丁醇等，從除去游離蒽醌衍生物的水溶液中，將蒽醌苷萃取出來，再作進一步分離。第六十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日虎杖浸膏的水溶液氯仿回流氯仿液（含大黃素等游離蒽醌脂溶成分）水液EtOAc萃取

EtOAc液（含大黃素苷等蒽醌苷極性成分）溶劑法：第六十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日第六十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日鉛鹽法：中藥粉90%乙醇加熱提取提取液濃縮濃縮液氯仿（或乙醚、苯）萃取氯仿液（游離蒽醌）水層加Pb(OAc)2液，過濾濾液沉淀水洗，懸浮于水中，通H2S脫鉛過濾沉淀（Pb2S）濾液蒽醌苷第六十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日蒽醌苷的分離方法過去：硅膠、聚酰胺柱層析。近年：葡聚糖凝膠柱層析、反相硅膠柱層析近年高效液相色譜和制備型中、低壓液相色譜儀也已廣泛地應(yīng)用于蒽醌苷類的分離，大大提高分離效率和實際應(yīng)用價值。第六十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日應(yīng)用葡聚糖凝膠柱層析分離大黃蒽醌苷類：

將大黃的70%甲醇提取液加到凝膠柱上，并用70%甲醇洗脫，分段收集，依次先后得到二蒽酮苷（番瀉苷B、A、D、C），蒽醌二葡萄糖苷（大黃酸、蘆薈大黃素，大黃酚的二葡萄糖苷）、蒽醌單糖苷（蘆薈大黃素、大黃素、大黃素甲醚及大黃酚的葡萄糖苷）、游離苷元（大黃酸、大黃酚、大黃素甲醚、蘆薈大黃素及大黃素）。第六十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日蒽醌類化合物的提取分離原料↓甲醇、乙醇提取醇提物（游離苷元、苷）↓有機溶劑萃取或回流↓↓有機溶劑層（游離蒽醌） 水溶液或殘渣（苷）↓ ↓梯度萃取分離法（酸性差異） 有機溶劑純化（乙酸乙酯、↓正丁醇萃?。┥V法分離（用于難分離成分）色譜法分離：葡聚糖凝膠吸附色譜：硅膠，不能用氧化鋁（分子篩）反相硅膠柱色譜（絡(luò)和反應(yīng)）聚酰胺色譜：游離羥基蒽醌適用第七十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

（四）蒽醌的層析檢識1.紙層析游離羥基蒽醌類的紙層析一般在中性溶劑系統(tǒng)中進行,可用水、乙醇、丙酮等與石油醚、苯等混合，使達到飽和后取極性小的有機溶劑層進行展開。幾種蒽醌類化合物紙層析的比移值

Rf值展開劑種類丙酮:石油醚:水(1:1:3)混合液的上層石油醚(36~60℃):97%甲醇(1:1)混合液大黃酚0.980.98大黃素甲醚0.980.98大黃素0.560.30蘆薈大黃素0.260.07大黃酸0.000.00幾種蒽醌苷類紙層析的比移值種類大黃酚葡萄糖苷大黃素甲醚葡萄糖苷大黃素葡萄糖苷蘆薈大黃素葡萄糖苷大黃酸葡萄糖苷Rf值0.790.790.260.060.00第七十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日可用

（四）蒽醌的層析檢識2.薄層層析蒽醌及其苷的薄層層析，一般用硅膠或硅膠G制板，亦可采用聚酰胺制板。展開劑對蒽醌苷類可選用極性較大的溶劑系統(tǒng)，幾種羥基蒽醌薄層層析的比移值

Rf值層析條件蒽醌名稱硅膠板苯：乙酸乙酯：醋酸（75:24:1〕聚酰胺板甲醇：苯（4:1）大黃酚0.760.53大黃素甲醚0.750.42大黃素0.520.18蘆薈大黃素0.360.53大黃酸0.240.03大黃素酸0.180.00第七十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

1.紫外光譜蒽醌類的紫外吸收特征蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)測定第七十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

1.紫外光譜（3）蒽醌類的紫外吸收特征羥基蒽醌類有五個主要吸收帶第Ⅰ峰——230nm左右（母核的強吸收峰）第Ⅱ峰——240~260nm（苯樣結(jié)構(gòu)引起）第Ⅲ峰——262~295nm（醌樣結(jié)構(gòu)引起）第Ⅳ峰——305~389nm（苯樣結(jié)構(gòu)引起）第Ⅴ峰——>400nm（醌樣結(jié)構(gòu)中>C=O引起）-OH取代將影響相應(yīng)的吸收帶向紅位移第七十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

波譜學(xué)方法2.醌類化合物的紅外光譜（IR）羥基蒽醌類化合物的紅外區(qū)域有：

VC=O1675~1653cm-1

（羰基的伸縮振動）

V-OH3600~3130cm-1

（羥基的伸縮振動）

V芳環(huán)

1600~1480cm-1

（苯核的骨架振動）母核上無取代：

兩個>C=O只給出一個吸收峰1675

芳環(huán)上引入一個-OH時，給出兩個>C=O吸收峰：

1675~1647（游離>C=O）

1637~1608（締合>C=O）第七十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日羰基的共振頻率與α羥基的數(shù)目有關(guān)第七十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日9,10-蒽醌類化合物的MS碎片離子為相繼失去兩分子的一氧化碳及相應(yīng)的雙電荷離子峰。第七十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

任務(wù)一大黃中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)一二三大黃中蒽醌類化合物的提取分離技術(shù)必備知識五四六相關(guān)知識鏈接及拓展課堂互動目標(biāo)測試第七十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日一學(xué)習(xí)目標(biāo)2掌握大黃中蒽醌類化合物的提取、分離技術(shù)。熟悉大黃中蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)。了解大黃中蒽醌類化合物的提取分離新進展。知識要求3能力要求1掌握大黃中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)。

熟練進行大黃中蒽醌類化合物的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會大黃中大蒽醌類化合物的色譜鑒定技術(shù)。學(xué)習(xí)目的第七十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日二大黃中游離蒽醌的提取分離技術(shù)大黃為蓼科多年生草本植物掌葉大黃(RheumpalmatumL.)、（植物拉丁名按藥典要求輸入）唐古持大黃(RheumtanguticumMaxim.exBalf.)、藥用大黃(RheumofficinaleBaill)的干燥根及根莖。具有清熱瀉下、活血化瘀等多種作用。第八十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日酸水解成游離狀態(tài)，再提取。第八十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（二）大黃中主要有效成分的提取分離（一）大黃中的主要有效成分及結(jié)構(gòu)三必備知識第八十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（一）大黃中主要有效成分及結(jié)構(gòu)

大黃中化學(xué)成分復(fù)雜，主要以蒽醌衍生物為主。主要有游離蒽醌、蒽醌苷、二蒽酮苷，此外還含鞣質(zhì)等。游離蒽醌主要有大黃酚、大黃素、大黃素甲醚、蘆薈大黃素、大黃酸。R1R2大黃酚CH3H大黃素CH3OH大黃素甲醚CH3OCH3蘆薈大黃素HCH2OH大黃酸HCOOH第八十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日這些游離羥基蒽醌都為親脂性成分，難溶于水，易溶于苯、乙醚、氯仿等親脂性有機溶劑，有升華性，且都有蒽醌的顯色反應(yīng)。蒽醌苷是上述游離蒽醌的葡萄糖苷。大黃中的二蒽酮苷主要是番瀉苷A、B、C、D，其中番瀉苷A的含量最多。從大黃中提取分離羥基蒽醌類是根據(jù)大黃中的羥基蒽醌苷經(jīng)酸水解成游離蒽醌苷元，苷元可溶于氯仿而被提出的原理。再利用各羥基蒽醌類化合物酸性不同，采用pH梯度萃取法分離而得各單體苷元。（二）大黃中主要有效成分的提取分離第八十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日四知識鏈接與拓展回流及連續(xù)回流提取法優(yōu)缺點

提取的適用范圍溶劑的選擇萃取法萃取劑的選擇萃取技術(shù)的操作基本原則儀器的選擇操作過程第八十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（1）常用溶劑有機溶劑。（2）儀器裝置回流加熱裝置。（3）操作過程將藥材粗粉裝于圓底燒瓶中→加入適量溶劑→水浴中加熱回流提取1h→過濾（殘渣重復(fù)提取2次，合并提取液）→提取液。（4）提取范圍不適用于對熱不穩(wěn)定及易分解的成分的提取。（5）提取優(yōu)缺點提取效率比冷浸法高。但裝置較復(fù)雜。回流提取法連續(xù)回流提取法（1）常用溶劑有機溶劑。（2）儀器裝置連續(xù)回流提取裝置（3）操作過程將藥材裝于濾紙袋，放入提取器內(nèi)→連接裝置→水浴加熱回流提取適當(dāng)時間→提取液。（4）提取范圍受熱時間較長，不適用對熱不穩(wěn)定成分的提取。（5）提取優(yōu)缺點溶劑用量少，提取效率高。但裝置設(shè)備要求高第八十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

連續(xù)回流提取裝置

1-索氏提取器2-蒸氣上升管3-虹吸管

4-圓底燒瓶5-冷凝管第八十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日般來說，天然藥物化學(xué)成分在常溫下多半是固體物質(zhì)，常具有結(jié)晶的通性，因此，可根據(jù)溶解度得不同，用結(jié)晶法來達到分離、純化、精制的目的。結(jié)晶法是實驗室常用的成分純化方法。但并不能利用結(jié)晶法直接進行提取液的分離和純化，因為過多的雜質(zhì)會干擾結(jié)晶的形成，甚至有時少量的雜質(zhì)也會阻礙結(jié)晶的析出，因此，結(jié)晶前應(yīng)盡可能地除去雜質(zhì)。

基本原理

“萃取法”，是在提取液中加入一種與其不相混溶的溶劑，充分振搖以增加相互接觸的機會，使原提取液中的某種成分逐漸轉(zhuǎn)溶到加入的溶劑中，而其它成分仍留在原提取液中。如此反復(fù)多次，將所需成分萃取出來的分離方法。

兩相溶劑萃取法是利用混合物中各種成分在兩種互不相溶（或微溶）的溶劑相中分配系數(shù)的差異而達到分離的目的。根據(jù)分配定律，在一定的溫度和壓力下，某物質(zhì)溶解在兩種互不相溶的溶劑中，當(dāng)達到動態(tài)平衡時，該物質(zhì)在兩種溶劑相中的濃度之比為一常數(shù)，稱為分配系數(shù)（K），可用下式表示：K

＝Cu／CLK:表示分配系數(shù)；Cu:表示溶質(zhì)在上相溶劑中的濃度；CL:表示溶質(zhì)在下相溶劑中的濃度。萃取法第八十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

①少量萃取一般在分液漏斗中進行；工業(yè)生產(chǎn)中；②中量萃取可在較大的下口瓶中進行；③大量萃取，多在密閉萃取缸內(nèi)進行。萃取技術(shù)的操作及溶劑的選擇儀器的選擇萃取溶劑的選擇萃取的操作過程①有機溶劑作萃取劑:a從水提液中萃取親脂性成分，一般選用苯、氯仿或乙醚等親脂性有機溶劑；b從水提液中萃取中等極性成分，一般選用醋酸乙酯、丁醇等弱親脂性有機溶劑或在氯仿、乙醚中加入適量乙醇以增大其親水性。②用于pH梯度萃取法的萃取劑：a分離某有機溶劑中酸性強弱不同的苷元，可依次選用pH由低到高的堿液b分離堿性強弱不同的游離生物堿，可用pH由高至低的酸性緩沖溶液作萃取劑順次萃取?；旌蟽上嗳軇駬u——靜置——萃取。萃取劑的用量萃取溶劑第一次用量一般為水提液的l/2~1/3，以后的用量可適當(dāng)減少為水提液的1/4~l/6。遵循少量多次的原則。第八十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日萃取中乳化現(xiàn)象的處理避免乳化的發(fā)生破乳的方法a.較長時間放置。b.輕度乳化可用一金屬絲在乳化層中攪動使之破壞。c.將乳化層抽濾。d.將乳化層加熱或冷凍。e.分出乳化層（有時乳化層就是所需要的成分），再用新溶劑萃取。f.若因兩種溶劑能部分互溶而發(fā)生乳化，可加入少量電解質(zhì)（如氯化鈉），利用鹽析作用加以破壞。在兩相比重相差很小時，也可加入食鹽增加水相的密度。g.滴加數(shù)滴表面活性更強的低級醇類如乙醇、戊醇，把原來的表面活性物質(zhì)頂替，達破乳目的。1．操作過程中，可采用旋轉(zhuǎn)混合；

2．改用氯仿—乙醚混合溶劑萃??；3．或加大有機溶劑量。第九十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日般來說，天然藥物化學(xué)成分在常溫下多半是固體物質(zhì)，常具有結(jié)晶的通性，因此，可根據(jù)（一）從大黃中提取分離羥基蒽醌類還可采用下列方法用80%乙醇室溫滲漉提取，回收溶劑，得浸膏后依次以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到的石油醚部分和三氯甲烷部分再分別上硅膠色譜柱以石油醚-乙酸乙酯（95∶5）和（90∶10）洗脫，分離得到大黃素甲醚、大黃酚及大黃素、蘆薈大黃素單體。工藝流程如下：

知識拓展

第九十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（二）從大黃中提取分離總蒽醌類可采用下列方法工藝二：工藝一：第九十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日工藝三：第九十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日五課堂互動

用前述知識說明大黃中5種游離羥基蒽醌化合物的酸性與結(jié)構(gòu)的關(guān)系。并分析生產(chǎn)工藝中用pH梯度萃取分離5種游離羥基蒽醌化合物的原因。第九十四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

任務(wù)二虎杖中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)一二三虎杖中蒽醌類化合物的提取分離技術(shù)必備知識五四六相關(guān)知識鏈接及拓展課堂互動目標(biāo)測試第九十五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日一學(xué)習(xí)目標(biāo)2掌握虎杖黃中蒽醌類化合物的提取、分離技術(shù)。熟悉決虎杖中蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)。了解決虎杖中蒽醌類化合物的提取分離新進展。知識要求3能力要求1掌握虎杖中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)。

熟練進行虎杖中蒽醌類化合物的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會決明子中大蒽醌類化合物的色譜鑒定技術(shù)。學(xué)習(xí)目的第九十六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日二虎杖中游離蒽醌的提取分離技術(shù)虎杖為蓼科植物虎杖（PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.）的根和根莖，具有祛風(fēng)利濕，散瘀定痛，止咳化痰，用于關(guān)節(jié)痹痛，濕熱黃疸，經(jīng)閉，癥瘕，水火燙傷，跌撲損傷，癰腫瘡毒，咳嗽痰多。

第九十七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

流程說明：大黃酚和大黃素-6-甲醚兩者分離較為困難。上述的薄層層析條件下在幾乎同一位置出現(xiàn)斑點。進一步分離可用磷酸氫鈣柱層析，以石油醚展開，先被洗脫下來的黃色帶，以甲醇重結(jié)晶可得大黃酚。后被洗脫下來黃色帶以甲醇重結(jié)晶可得到大黃素-6-甲醚。

第九十八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（二）虎杖中主要有效成分的提取分離（一）虎杖中的主要有效成分及結(jié)構(gòu)三必備知識第九十九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（一）虎杖中主要有效成分及結(jié)構(gòu)虎杖中的成分主要含蒽醌的大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等游離蒽醌，大黃素-6-甲醚-8-O-D-葡萄糖苷、大黃素-8-O-D-葡萄糖苷等。尚含非蒽醌成分，主要是白藜蘆醇葡萄糖苷，又稱虎杖苷、云杉新苷。

第一百頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日虎杖中主要有效成分的提取分離采用溶劑提取法對虎杖中總游離蒽醌進行提取，pH梯度萃取法對游離蒽醌各成分進行分離。根據(jù)各成分結(jié)構(gòu)、性質(zhì)不同，采用不同堿度的堿水液對總游離蒽醌乙醚液進行萃取而達到分離目的。堿水與乙醚萃取的時候，要注意防止乳化。第一百零一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日五課堂互動

中藥虎杖中所含蒽醌類成分屬于何種結(jié)構(gòu)類型？在各成分分離時采用何種方法進行操作？注意什么？第一百零二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

任務(wù)三茜草中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)一二三茜草中蒽醌類化合物的提取分離技術(shù)必備知識五四六相關(guān)知識鏈接及拓展課堂互動目標(biāo)測試第一百零三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日一學(xué)習(xí)目標(biāo)2掌握茜草中蒽醌類化合物的提取、分離技術(shù)。熟悉茜草中蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)。了解茜草中蒽醌類化合物的提取分離新進展。知識要求3能力要求1掌握茜草中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)。

熟練進行茜草中蒽醌類化合物的提取、分離及鑒定操作。學(xué)會茜草中大蒽醌類化合物的色譜鑒定技術(shù)。學(xué)習(xí)目的第一百零四頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日二茜草中游離蒽醌的提取分離技術(shù)本品為茜草科植物茜草RubiacordifoliaL.的干燥根及根莖。春、秋兩季挖，除去泥沙，干燥。主產(chǎn)陜西、河北、河南、山東等地。以陜西、河北、河南最大，品質(zhì)最佳。有涼血，止血，祛瘀，通經(jīng)之功效。主治吐血，血，崩漏，外傷出血，經(jīng)閉瘀阻，關(guān)節(jié)麻痹，跌撲腫痛。第一百零五頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

用不同濃度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同極性溶劑萃取，

再使用色譜法分離。茜草中主要化學(xué)成分提取分離方法：結(jié)晶Ⅰ：1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌結(jié)晶Ⅱ：1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷結(jié)晶Ⅲ：1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃木糖（1→2）-β-（6’-O-乙?；┻拎咸烟擒战Y(jié)晶Ⅳ：1,2-二羥基蒽醌-2-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷結(jié)晶Ⅴ：1,3-二羥基-2-羥甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷流程說明：采用溶劑提取法進行提取，系統(tǒng)溶劑法進行粗分，得到不同極性部分。對各極性部分應(yīng)用色譜法如硅膠色譜法、反相柱色譜法進行分離。第一百零六頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（二）茜草中主要有效成分的提取分離（一）茜草中的主要有效成分及結(jié)構(gòu)三必備知識第一百零七頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（一）茜草中主要有效成分及結(jié)構(gòu)茜草中含有羥基蒽醌及其苷、還原萘醌以及β-谷甾醇、胡羅卜苷和環(huán)己肽類化合物.蒽醌類有茜草素（alizarin）、羥基茜草素（purpurin）、1、3、6-三羥基-2-甲基蒽醌、1-羥基蒽醌、1，2，4-三羥基蒽醌、1、3、6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、1，2-二羥基蒽醌-2-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷、1，3-二羥基-2-羥甲基-3-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷等。

R1R2R3R4R5化合物1OHCH3OHHOH1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌化合物2OHHHHH1-羥基蒽醌化合物3OHOHHOHH1,2,4-三羥基蒽醌化合物4OHCH3OHHO-Glu1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷化合物5OHCH2OHO-Glu(1→6)xylHH1,2-二羥基蒽醌-2-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷化合物6HCH3O-(O-6’-AC)Glu2→1xylHOH1,3-二羥基-2-羥甲基-3-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷第一百零八頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

茜草素（alizarin）分子式C14H8O4，相對分子量240.2。斜方橙色針狀結(jié)晶（升華或無水乙醇）。熔點290℃，沸點430℃，升華溫度110℃。

羥基茜草素（purpurine）分子式量C14H8O5，相對分子質(zhì)量256。3.1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌，橙黃色針色（CH3OH），熔點242℃，具有升華性，與NaOH反應(yīng)呈粉色，與MgAc2反應(yīng)呈橙色。

1-羥基蒽醌橙黃色針晶（CHCl3-石油醚），熔點134～137℃，與NaOH和MgAc2反應(yīng)陽性。1,2,4-三羥基蒽醌紅色針晶（CHCl3-CHOH），熔點257～259℃，與NaOH和MgAc2反應(yīng)陽性。1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷黃色針晶（CH3OH-C5H5N），熔點278～279℃，與NaOH、MgAc2和Molish反應(yīng)均呈陽性。1,2-二羥基蒽醌-2-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷黃色針晶（CH3OH），熔點268～269℃，與NaOH、MgAc2和Molish反應(yīng)均呈陽性。1,3-二羥基-2-羥甲基蒽醌-3-OD-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷黃色針晶（CH3OH-C5H5N），熔點210～212℃，與NaOH、MgAc2和Molish反應(yīng)均呈陽性。化合物Ⅳ為黃色針晶（C5H5N），熔點284～285℃，與NaOH反應(yīng)呈粉紅色，與MgAc2反應(yīng)呈橙色，與Molish反應(yīng)陽性。

第一百零九頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日（一）從茜草中提取分離羥基蒽醌類化合物還可采用下列方法

知識拓展

工藝一：第一百一十頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日工藝二：Ⅰ1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌Ⅳ1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Ⅴ1,2-二羥基蒽醌-2-O-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷Ⅵ1,3-二羥基-2-羥甲基蒽醌-3-β-D-吡喃木糖（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷Ⅶ1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-β-L-吡喃木糖（1→2）-β-D-（6’-O-乙酰基）吡喃葡萄糖苷第一百一十一頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日五課堂互動

茜草中蒽醌類化合物結(jié)構(gòu)與大黃素類成分結(jié)構(gòu)有何不同？在分離茜草中蒽醌成分時常采用什么方法？為什么？簡述其原理及操作過程。第一百一十二頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日

任務(wù)四番瀉葉中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)一二三番瀉葉中蒽醌類化合物的提取分離技術(shù)必備知識五四六相關(guān)知識鏈接及拓展課堂互動目標(biāo)測試第一百一十三頁，共一百二十二頁，2022年，8月28日一學(xué)習(xí)目標(biāo)2掌握番瀉葉中蒽醌類化合物的提取、分離技術(shù)。熟悉番瀉葉中蒽醌類化合物的結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)。了解番瀉葉中蒽醌類化合物的提取分離新進展。知識要求3能力要求1掌握番瀉葉中蒽醌類化學(xué)成分的提取分離技術(shù)。

熟練