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儲存注意事項:儲存于陰涼、通風的地方;遠離火種、熱源。避免光照。室溫不超過30°C,相對濕度不超過80%。包裝必須密封,切勿受潮。應與易(可)燃物、還原劑、堿類、醇類、食用化學品分開存放,切忌混儲,儲區(qū)應備有合適的材料收容泄漏物。操作注意事項:盡量在通風櫥操作,加強通風,避免粉塵擴散。遠離易燃、可燃物,避免與還原劑、堿類、醇類接觸,防止包裝及容器損壞。EDTA(PH)組分濃度:mol/LEDTA(MW:)配制量:500ml配制方法:稱取93gNa2EDTA?2H2O置于500ml藍蓋瓶中。加入400ml的去離子水,置于磁力攪拌器上充分攪拌。用NaOH調節(jié)調節(jié)pH值至(約需加入20g固體NaOH),當pH接近時,EDTA方可完全溶解,加入去離子水定容至1L。高溫高壓滅菌后,室溫保存半年。5MNaCl組份濃度:5mol/LNaCl(MW:配制量:1L配制方法:準確稱取氯化鈉,置于1L的藍蓋瓶中。用去離子水溶解并稀釋至1L。高溫高壓滅菌后,常溫保存。CaCl2組份濃度:LCaCl2(MW:配制量:50ml配制方法:準確稱取氯化鈣g于50ml的conicaltube中。2?用去離子水溶解并稀釋至500ml,用口m濾膜過濾除菌濾膜過濾除菌到進口的conicaltube。3?貯存于4C。50%甘油組分濃度:50%(V/V)glycerol配制量:100ml配制方法:量取下列試劑,置于250ml藍蓋瓶中:100%glycerol50ml加入50ml去離子水,充分攪拌溶解。3?高溫高壓滅菌,4C保存。使用時,到超凈臺分裝。Amp-氨芐青霉素(鈉鹽)放置:置于4°C冰箱配方及配法:配成200mg/ml的1000*溶液儲存(40g溶于200ml蒸餾水中),溶解后在超凈臺用注射器過濾滅菌分裝,置于-20°C冰箱第二層,以1*的終濃度(200ug/ml)加入培養(yǎng)基。Kan-卡那霉素(硫酸根)放置:置于試劑柜配方及配法:配成20mg/ml的1000*溶液儲存(4g溶于200ml蒸餾水中),溶解后在超凈臺用注射器過濾滅菌分裝,置于-20°C冰箱第二層,以1*的終濃度(20ug/ml)加入培養(yǎng)基。DTT(二硫蘇糖醇)放置:置于-20°C冰箱頂層配方及配法:1MDTT的配制:溶解IPTG于50mL水中,溶解后分裝成1。5ml管,置于-20°C冰箱第二層使用濃度為1-10MmPMSF(苯甲基磺酰氟)放置:試劑柜PMSF的配制:分子量保存室溫保存,配成PMSF溶液后需-20°C保存。配制溶解的PMSF于足量的異丙醇中,定容到50ml。分成小份貯存于一20C。工作濃度1mM注意:有毒,對呼吸道粘膜、眼睛和皮膚有很強的危害性,配制時請在通風櫥進行,并穿實驗服及戴一次性手套。10XTEBuffer(pH)組份濃度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配置方法量取下列溶液,置于1L藍蓋瓶中。Tris-HClBuffer()100mLEDTA()20mL向藍蓋瓶中加入約800mL的去離子水,均勻混合。將溶液定容至1L,高溫高壓滅菌。室溫保存半年。注意:此為貯存液,使用時稀釋100倍,用于PCR純化和質粒提取后產物保存。PIPES(PH)配制量:10ml(MW:)配制方法:稱取,加入到15ml塑料離心管內。加8ml的水,攪拌溶解。用5MKOH調PH至4.濾膜過濾,-20C保存。Tris-HCl()組份濃度:mol/LTris-HCl配制量:1L配制方法:1?稱取的Tris-base(MW:)置于1L藍蓋瓶中。加入約800mL的去離子水,充分攪拌溶解。用濃鹽酸調pH值至。將溶液定容至1L。高溫高壓滅菌后,室溫保存半年。Tris-HCl()組分濃度:mol/LTris-HCL配制量:1L配制方法:稱取121g的Tris-base(MW:)于1L藍蓋瓶中,加入900ml的去離子水,充分攪拌均勻,用濃鹽酸調pH值至,每升約需40-50ml濃鹽酸,用水調整終體積至1L。如需其他PH的Tris,根據(jù)所要求的pH(25°C下)加一定量的濃鹽酸。高溫高壓滅菌后,室溫保存半年。注意:測PH時需使用溫度補償電極,因為溫度變化對Tris的PH有很大影響。濃鹽酸的體積(ml)14213846566676pH10%SDS組份濃度:10%(W/V)SDS配制量:500mL配置方法1?稱量50g高純度的SDS置于500mL藍蓋瓶中,加入約400mL的去離子水,68C加熱溶解。2.滴加數(shù)滴濃鹽酸調節(jié)pH值至。3?將溶液定容至500mL后,室溫保存。注意:SDS為固體粉末狀,吸入會對肺造成損害,應在通風櫥中稱取SDS。溶解時,SDS易產生氣泡,不要劇烈攪拌。30%APS(過硫酸銨)組份濃度:30%(W/V)APS配制量:1mL配制方法:準確稱取APS。加入的去離子水溶解。3?貯存于4C。注意:30%的過硫酸胺溶液在4C保存時間可使用2周左右,超過期限會失去催化作用。10XSDSRunningBuffer配制量:1L配制方法:稱量下列試劑,置于1L藍蓋瓶中。Tris20g;Glycine144g;10%SDS100ml加入約700ml的去離子水攪拌溶解。定容至1L,混勻,室溫保存。50XTAEBuffer()組分濃度:2MTris-base,100mMEDTA,1M冰乙酸配制量:1L配制方法:1、稱取下列試劑,置于1L藍蓋瓶中:Tris-base;EDTA200ml2、加入約600ml的去離子水,充分攪拌溶解,再加入的冰乙酸,混合均勻。3、加去離子水將溶液定容至1L。4、高溫高壓滅菌后,室溫保存半年。6XDNALoadingBuffer(Agarose)組分濃度:%(W/V)溴酚藍%(W/V)xylenecyanolFF,60%glycerol,60mMEDTA配制量:50ml配制方法:1?稱取下列試劑,置于50ml離心管中:溴酚蘭
向離心管中30ml去離子水,加熱充分溶解。加入15ml甘油,最終用去離子水定容至50ml,混勻,室溫保存。4?使用時,分裝1ml—管,加入,4°C保存。5Xloadingbuffer(蛋白)1.稱量下列試劑置于10ml塑料離心管中。1
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