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階段評估檢測(八)3)(301001.(14)(2023·全國卷Ⅲ)圖(a)中的三個DNAEcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列與切割位點,圖(b)為某種表達載體的示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的)。依據(jù)基因工程的有關學問,答復以下問題:經(jīng)BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達載體被 酶切后的產(chǎn)物連接,理由是 。假設某人利用圖(b)所示的表達載體獲得了甲乙丙三種含有目的基因的重組子如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有 ,不能表達的緣由是。DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有 和 ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是 ?!窘忸}指南】(1)圖示信息:圖(a)中三種酶的識別序列,圖(b)中終止子、啟動子、圖(c)中目的基因的插入位置。(2)關鍵學問:只有兩種限制性核酸內(nèi)切酶剪切時識別的序列一樣時,才能被DNA連接酶連常表達。【解析】此題主要考察限制性核酸內(nèi)切酶和DNA(1)BamHⅠ和Sau3AⅠ的共同識別序列是—GATC—,二者切割形成的黏性末端一樣,可以被DNA在基因表達載體中,啟動子應位于目的基因的前端,終止子應位于目的基因的后端,這樣目的基因才能順當?shù)剞D(zhuǎn)錄并完成翻譯過程,即順當表達,圖中所示甲、丙均不符。常見的DNA連接酶有TDNAE·coliDNATDNA4 4末端,又能連接平末端。答案:(1)Sau3AⅠ兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有一樣的黏性末端甲和丙甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄(其他合理答案亦可)E·coliDNATDNA4TDNA4【加固訓練】(2023·海南高考)基因工程又稱為DNA在基因工程中,獵取目的基因主要有兩大途徑,即 和從 中分別。cDNAcDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少,其緣由是 。在基因表達載體中啟動子是 聚合酶識別并結(jié)合的部位假設承受原核生物作為基因表達載體的受體細胞,最常用的原核生物是 。將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有和 顆粒。細胞的方法。在基因工程中,獵取目的基因主要有兩大途徑,既可在核苷酸序列的狀況下人工合成,也可用限制酶對生物材料的DNAcDNA文庫是由mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得的,其中只含有葉細胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因。在基因表達載體中,啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的部位。假設承受原核生物作為基因表達載體的受體細胞,最常用的原核生物是大腸桿菌。將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉顆粒。答案:(1)人工合成生物材料(其他合理答案亦可)cDNA基因(其他合理答案亦可)RNA大腸桿菌(或細菌)(4)金粉鎢粉2.(12分)(2023·撫州模擬)現(xiàn)代生物工程技術(shù)推動了醫(yī)藥學、免疫學等領域的進展,依據(jù)現(xiàn)代生物工程技術(shù)的相關學問和原理答復以下問題:利用基因工程技術(shù)實現(xiàn)胰島素的批量生產(chǎn)是目前糖尿病治療的思路,該過程中的關鍵操作環(huán)節(jié)是 ,該環(huán)節(jié)目的是使胰島素基因 ,同時,使其能夠表達和發(fā)揮作用。單克隆抗體的制備中,將經(jīng)抗原免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進展融合,再用特定的選擇性培育基進展篩選獲得雜交瘤細胞后還需進展 培育和抗體陽性檢測經(jīng)過屢次篩選就能獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細胞最終獲得的雜交瘤細胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的緣由是 。在胚胎工程中胚胎移植前通過 技術(shù)可獲得較多胚胎移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理根底是 。(1)基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達載體在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代,且在下一代能夠表達和發(fā)揮作用。單克隆抗體的制備過程中,獲得的雜交瘤細胞還需要進展克隆化培育和抗體陽性檢測,經(jīng)過屢次篩選后獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細胞體的緣由是其由一種BB淋巴細胞只能分泌一種特異性抗體。利用胚胎分割技術(shù)可以獲得多個一樣的胚胎;由于受體子宮對外來胚胎根本不發(fā)生排斥反響,因此移植后的胚胎能在受體子宮中存活。答案:(1)基因表達載體的構(gòu)建在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代克隆化每一種B胚胎分割受體子宮對外來胚胎根本不發(fā)生排斥反響3.(12分)干擾素是治療癌癥的重要藥物,它必需從血液中提取,由于每升人血液中只能提取0.5μg,所以價格昂貴。美國加利福尼亞的某生物制品公司用以以下圖的方式生產(chǎn)干擾素。試答復相關問題:假設要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛乳汁中含有人干擾素,構(gòu)建的基因表達載體必需包括:乳腺蛋白基因的啟動子人干擾素基因終止子 和復制原點等將基因表達載體導入受精卵最有效的方法是 。通常狀況下對供體和受體母牛選擇后要用激素進展 并用激素對供體母牛做 處理。為了實現(xiàn)干擾素的批量生產(chǎn),早期胚胎進展移植之前要進展質(zhì)量檢測,并要求早期胚胎細胞中的性染色體組成為 選擇發(fā)育良好的囊胚或 胚進展移植為了提高胚胎利用效率,可在這兩個階段進展胚胎分割胚胎分割可以看作動物 (填“有性或“無性”)生殖的方法之一。近年來,關于胚胎干細胞的爭論越來越多。胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性,如以下圖的細胞A和細胞B分別是 細胞細胞可以從這些細胞中獲得胚胎干細胞?!窘馕觥?1)基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點。將目的基因?qū)雱游锛毎淖钣行У姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)。胚胎移植過程中要留意對供、受體母牛進展同期發(fā)情處理,同時要用促性腺激素對供體母牛進展超數(shù)排卵處理,以獲得更多的后代。XX性生殖的方法之一。通常從早期胚胎的內(nèi)細胞團或胎兒的原始性腺中獲得胚胎干細胞。答案:(1)標記基因顯微注射技術(shù)同期發(fā)情處理超數(shù)排卵XX桑椹無性內(nèi)細胞團原始性腺4.(12分)(2023·海南高考)甜蛋白是一種高甜度的特別蛋白質(zhì)。為了改善黃瓜的品質(zhì),科問題:用農(nóng)桿菌感染時,應優(yōu)先選用黃瓜 填“受傷的”或“完好的)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培育,選用這種葉片的理由是 。假設在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白則說明該重組質(zhì)粒中 已轉(zhuǎn)移到植物細胞中且能夠表達用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交覺察子代中含甜蛋白個體數(shù)與不含甜蛋白個體數(shù)之比為1∶1,則說明甜蛋白基因已經(jīng)整合到 (填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組”)中。假設某種轉(zhuǎn)基因作物由于受到病毒感染而減產(chǎn)假設要以該轉(zhuǎn)基因作物為材料獲得脫毒苗,應選用 作為外植體進展組織培育。4個步驟,即目的基因獵取、重組表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。因此,基因工程的含義可概括為 。【解析】(1)受傷的雙子葉植物如黃瓜葉片能分泌大量的酚類物質(zhì),吸引農(nóng)桿菌向傷口處轉(zhuǎn)移。一般黃瓜原來沒有甜蛋白,假設在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到甜蛋白,說明甜蛋白基因已經(jīng)轉(zhuǎn)其基因型可看作Aa(不含甜蛋白基因看作a),與一般黃瓜(aa)雜交,后代性狀分別比為1∶1;假設甜蛋白基因整合到線粒體或葉綠體基因組中,其遺傳具有母系遺傳的特點,要么后代全有此性狀(轉(zhuǎn)基因黃瓜作母本)要么后代都沒有此性狀(轉(zhuǎn)基因黃瓜作父本)。植物的根尖或莖尖沒有或很少有病毒,取這些部位的材料進展植物組織培育可以獲得脫毒苗。基因工程的含義是利用體外重組技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù),將一生物的特定基因轉(zhuǎn)移到另一種生物的基因組中,使后者表達出的遺傳特性,從而制造出的生物類型和生物產(chǎn)品。答案:(1)受傷的葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質(zhì),可吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞(2)甜蛋白基因核基因組(3)莖尖(4)依據(jù)人們的愿望進展設計,并通過體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賜予生物的遺傳特性,制造出符合人們需要的生物類型5.(14分)(2023·全國卷Ⅱ)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達(L1)基因連接GFP5L1-GFPP0,構(gòu)建了真核表達載體P1,其局部構(gòu)造和酶切位點的示意圖如下,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不一樣。答復以下問題:據(jù)圖推斷該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時使用了兩種限制酶這兩種酶是 。使用這兩種酶進展酶切是為了保證 ,也是為了保證 。將P1轉(zhuǎn)入體外培育的牛皮膚細胞后,假設在該細胞中觀看到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了 和 過程。為了獲得含有甲的牛,該團隊需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的 移入牛的 中、體外培育、胚胎移植等。為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中,某同學用PCR方法進展鑒定,在鑒定時應分別以該牛不同組織細胞中的 (填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。【解析】(1P0(L1-GFPE1和E4兩種酶切割,并且把目的基因插入啟動子和終止子之間,從而使其能在受體細胞中表達。(2)在牛皮膚細胞中觀看到了綠色熒光說明基因已表達,而基因的表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程。由(4)題意可知,獲得含有L1-GFP融合基因(甲)的牛為克隆牛,需要用核移植技術(shù),馬上能夠產(chǎn)生綠色熒光細胞的細胞核移入去核卵母細胞中。檢測甲是否存在于牛的不同組織細胞中,可以承受PCR技術(shù)擴增,再用DNA分子雜交技術(shù)來檢測,PCRDNA,并不是RNA。答案:(1)E1和E4甲的完整甲與載體正確連接轉(zhuǎn)錄翻譯細胞核去核卵母細胞(4DNA6.(10分)(2023·延邊模擬)Ⅱ型糖尿病病因簡潔,多數(shù)是胰島素拮抗引起機體對胰島素的素單克隆抗體制備的問題:首先需要將人胰島素注射到安康成熟小鼠體內(nèi),其目的是獵取 細胞;再將該細胞與 相融合,以制取雜交瘤細胞;其中誘導融合的常用生物誘導因素是 。細胞融合試驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有 等兩兩融合的細胞。細胞融合過程表達了細胞膜具有 的特性。為檢驗得到的雜交瘤細胞能否分泌胰島素抗體可用 與從雜交瘤細胞培育液中提取的抗體雜交。在體外條件下,當培育的小鼠雜交瘤細胞到達確定密度時,需進展 培育以得到更多數(shù)量的細胞。細胞融合技術(shù)的優(yōu)點是 ?!窘馕觥?1)為了獲得能分泌抗人胰島素抗體的B細胞,應領先將人的胰島素作為抗原注射到小鼠體內(nèi);雜交瘤細胞是由能分泌抗人胰島素抗體的B細胞與骨髓瘤細胞誘導融合形成的(2)假設只考慮B細胞相互融合形成的細(3)檢測雜交瘤細胞產(chǎn)生的胰島素抗體可以用抗原抗體雜交法(4)動物答案:(1)能分泌抗人胰島素抗體的B小鼠骨髓瘤細胞滅活的病毒B人胰島素傳代突破了有性雜交的局限,使遠緣雜交成為可能7.(12分)生態(tài)農(nóng)業(yè)是指運用生態(tài)學原理,在環(huán)境與經(jīng)濟協(xié)調(diào)進展的思想指導下,應用現(xiàn)代(農(nóng)戶養(yǎng)豬,豬糞發(fā)酵產(chǎn)沼氣,沼氣發(fā)電或做燃氣供家用,沼渣培育果林)生產(chǎn)模式。請答復以下問題:該農(nóng)業(yè)生產(chǎn)體系實現(xiàn)了 和物質(zhì)循環(huán)再生利用充分利用了生態(tài)系統(tǒng)中的能量和物質(zhì)。同碳元素一樣,氮元素在生物群落和無機環(huán)境之間也是不斷循環(huán)的,生產(chǎn)中還要往農(nóng)田不斷施加氮肥,這與物質(zhì)循環(huán)沖突嗎? ,為什么? 。在生態(tài)農(nóng)業(yè)體系中,農(nóng)作物也會患病有害動物的破壞,對有害動物進展防控的技術(shù)有多種。利用性引誘劑誘殺某種害蟲的雄性個體,破壞害蟲種群正常的 ,降低其種群密度,這種防治方法屬于 ,利用了生態(tài)系統(tǒng)的 功能?!窘馕觥?1)“桑基魚塘”和“豬沼果”的生態(tài)模式下,豬的糞便、蠶沙、蠶蛹中的能量被實現(xiàn)了對能量的多級利用和物質(zhì)循環(huán)再生利用,充分利用了生態(tài)系統(tǒng)中的能量和物質(zhì)。(2)同碳元素一樣,氮元素在生物群落和無機環(huán)境之間也是不斷循環(huán)的,生產(chǎn)中還要往農(nóng)田不斷施加氮肥,這與物質(zhì)循環(huán)不沖突,由于農(nóng)田土壤中的氮含量往往缺乏以使農(nóng)作物高產(chǎn),加氮肥(或農(nóng)產(chǎn)品源源不斷地自農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)輸出,其中的氮元素并不能都歸還土壤,所以需要施加氮肥)。(3)性外激素多是由雌蟲分泌并釋放,能引誘雄蟲前來交配。性引誘劑就是仿照雌蟲分泌的法屬于生物防治,利用了生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞功能。答案:(1)對能量的多級利用(2)不沖突農(nóng)田土壤中的氮含量往往缺乏以使農(nóng)作物高產(chǎn),加氮肥(或農(nóng)產(chǎn)品源源不斷地自農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)輸出,其中的氮元素并不能都歸還土壤,所以需要施加氮肥)(3)性別比例生物防治信息傳遞8.(14分)(2023·涼山州模擬)“今又生”是我國為數(shù)不多的首創(chuàng)基因治療藥物之一,其本質(zhì)是利用腺病毒和人P53基因(抑癌基因)拼裝得到重組病毒。人的P53DNA5中,無遺傳毒性;載體經(jīng)基因工程改造后,只對細胞實施一次感染,不能復制,不能污染。請答復以下問題:在“今又生”的生產(chǎn)中,為了獲得更高的安全性能,在載體一般應具備的條件中,科學家選擇性地放棄了一般載體都應當具有的 。檢測P53基因的表達產(chǎn)物,還可以承受 技術(shù)。假設要獵取人類基因組中抑癌基因P53,可以實行的方法通常包括 和通過化學方法人工合成。目的基因的大量擴增則可以承受 ,該技術(shù)中需使用的一種特別的酶是 。在爭論中假設要獲得

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