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文檔簡介
關(guān)于體液細胞學(xué)及檢驗規(guī)范化第1頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二內(nèi)容尿液細胞學(xué)檢測腦脊液、漿膜腔積液細胞學(xué)檢測糞便、前列腺、精液細胞學(xué)檢測第2頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二尿液細胞學(xué)檢測
----尿液沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化一、材料與器材
(一)留置標(biāo)本的容器1.收集和運送尿液容器2.用于離心尿液的離心管3.用于尿沉渣分析的玻片第3頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二一、材料與器材
(二)尿沉渣檢測尿沉渣的量(三)離心機:水平式離心機相對離心力(RCF)應(yīng)在400×g左右。
離心機轉(zhuǎn)速與RCF的換算公式為:
r/min=1000×[G/(11.18×半徑]1/2第4頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
不同直徑不同轉(zhuǎn)數(shù)離心半徑為20cm時,1338r/min(1350r/min)離心半徑為16cm時,1495r/min(1500r/min)離心半徑為10cm時,1892r/min(1900r/min)
第5頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二一、材料與器材(四)顯微鏡尿沉渣檢查(五)自動化設(shè)備(六)計算機數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)第6頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二二、標(biāo)本的收集及運送(一)標(biāo)本的收集(二)標(biāo)本的運送(三)標(biāo)本的標(biāo)記(四)標(biāo)本的接收第7頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二三、尿沉渣檢驗的操作步驟(一)離心(二)鏡檢沉渣取1滴充液到專用尿沉渣檢測板里,計數(shù)1μl計算區(qū)內(nèi)的管型或細胞數(shù)報告。尿結(jié)晶、細菌、寄生蟲等以每一高倍視野-、±、+、++、+++報告。第8頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第9頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二顯微鏡觀察尿結(jié)晶、細菌、寄生蟲等報告方式-±
++++++結(jié)晶01-4個/HP5-9個/HP10個/HP寄生蟲卵01個/HP5-9個/HP10個/HP細菌真菌0數(shù)個視野散在各個視野可見數(shù)量多或聚集成團無數(shù)第10頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二三、尿沉渣檢驗的操作步驟(三)尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括:
1.細胞:紅細胞、白細胞、吞噬細胞、上皮細胞、腫瘤細胞
2.管型:透明管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、細菌管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型
3.結(jié)晶:磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶
4.細菌、寄生蟲(或卵)、酵母菌、精子、粘液。
5.臨床醫(yī)生特殊要求的其他成分。第11頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二三、尿沉渣檢驗的操作步驟(四)有條件的實驗應(yīng)開展各種尿液有形成分的染色檢查,以便于有形成分的進一步鑒別;具備多種類顯微鏡進行尿沉渣分析的實驗室,建議配置相差顯微鏡、暗視野顯微鏡,提高尿沉渣的鑒別能力。第12頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第13頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第14頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第15頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第16頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第17頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第18頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第19頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第20頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第21頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第22頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第23頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第24頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
標(biāo)準(zhǔn)流程新鮮尿液混勻,取10ml放在離心試管內(nèi),以400g的速度離心5分離心后將上清棄去,沉渣量約0.2ml,輕搖使沉渣混合均勻。取一滴置于載物片上,用18×18mm蓋玻片覆蓋標(biāo)本。顯微鏡下觀察。先以10倍物鏡觀察全片,注意有無管型等較大成分存在,再換40倍物鏡觀察有形成分的種類和數(shù)量。觀察10個視野并記錄所見倒的細胞和管型數(shù)量,以最低值至最高值的方式報告。結(jié)晶等有價值的病理發(fā)現(xiàn)應(yīng)如實報告。第25頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二腦脊液細胞學(xué)檢測第26頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二標(biāo)本采集一般由腰穿刺術(shù)取得CSF分別收集于3-4只無菌試管內(nèi),每管1~2ml,第一管作細菌學(xué)檢查,第二管作化學(xué)或免疫學(xué)檢查,第三管作常規(guī)檢查.標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。第27頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二顯微鏡檢查
細胞總數(shù)計數(shù)方法:
取混勻的CSF滴入計數(shù)池,沉淀片刻,低倍鏡計數(shù)10個大方格內(nèi)的紅、白細胞數(shù),總和×106即得每升CSF的細胞總數(shù)。如果細胞數(shù)較多,可計數(shù)1個大方格的細胞數(shù)乘以10,再乘106。第28頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二白細胞計數(shù)及直接分類方法:
非血性CSF:1.取小試管1只,內(nèi)放冰醋酸1-2滴,轉(zhuǎn)動后傾去,滴入混勻的CSF3-4滴,3-5分鐘后混勻充入計數(shù)池,同上計數(shù)。第29頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二白細胞計數(shù)及直接分類方法:
2.計數(shù)后直接換成高倍鏡根據(jù)細胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細胞和多核細胞共100個,以百分率表示。細胞數(shù)少于100時直接寫出單核、多核細胞的具體個數(shù)。第30頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二白細胞計數(shù)及直接分類方法:
血性CSF:用1%冰醋酸稀釋CSF后進行計數(shù),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。細胞總數(shù)-白細胞數(shù)=紅細胞數(shù)第31頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二注意事項
(1)腦脊液細胞計數(shù)應(yīng)及時進行,一般應(yīng)在1小時內(nèi)進行。(2)細胞計數(shù)時,須注意把紅細胞或淋巴細胞與新型隱球菌相區(qū)別第32頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第33頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二臨床意義:1.正常腦脊液中無紅細胞,白細胞:成人(0-8)×106/L,兒童(0-15)×106/L新生兒(0-30)×106/L主要是淋巴及大單核細胞,兩者7:3第34頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二臨床意義2.化腦白細胞數(shù)明顯增加,通常>1000×106/L,以多核為主;3.結(jié)腦白細胞數(shù)中度增加,一般<500×106/L,以早期以多核為主,很快過渡到后期則以單個核細胞為主.第35頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二臨床意義:4.病腦白細胞數(shù)僅輕度增加,以淋巴細胞為主.5.腦寄生蟲?。杭毎麛?shù)可增加,以E為主。6.出血性疾?。憾酁榧t細胞7.腫瘤:細胞數(shù)正?;蜉p度增加,以L為主.第36頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第37頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
漿膜腔脊基液細胞學(xué)檢測
第38頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
漿膜腔積液分類和發(fā)生機理
漏出液(exudate):為非炎癥性積液,大分子物質(zhì)及有形成分少
滲出液(transudate):為炎癥性積液血管通透性增加,大分子物質(zhì)及有形成分多
第39頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
滲出液與漏出液的鑒別診斷第40頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二漿膜腔穿刺液的采集和保存標(biāo)本由臨床醫(yī)師采集送驗標(biāo)本最好留取中段液體于消毒容器試管常規(guī)及細胞學(xué)檢查約留取2毫升生化檢驗留2毫升厭氧菌培養(yǎng)留1毫升如查結(jié)核桿菌則約需10毫升。第41頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二漿膜腔穿刺液的采集和保存為防止出現(xiàn)凝塊,細胞變性、細菌破壞自溶等,應(yīng)即時送檢及檢驗。常規(guī)及細胞學(xué)檢查可用EDTA·K2抗凝。生化檢查標(biāo)本可用肝素抗凝。加留1管不加任何抗凝劑用以觀察有無凝固現(xiàn)象。第42頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二漿膜腔積液細胞學(xué)檢查----顯微鏡檢查
第43頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二1.細胞計數(shù)及分類:細胞總數(shù)計數(shù)方法:低倍鏡計數(shù)10個大方格內(nèi)的紅、白細胞數(shù)總和×106即得每升漿膜腔積液的細胞總數(shù)如果細胞數(shù)較多,可計數(shù)1個大方格的細胞數(shù)乘以10,再乘以106第44頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第45頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二1.細胞計數(shù)及分類:白細胞計數(shù)漏出液<100×106/L滲出液>500×106/L第46頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二1.細胞計數(shù)及分類:(1)直接分類法a.非血性胸腹水:高倍鏡根據(jù)細胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細胞和多核細胞共100個,以百分率表示。細胞數(shù)少于100時,直接寫出單核、多核細胞的具體個數(shù)。第47頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二1.細胞計數(shù)及分類:b.血性胸腹水:用1%冰醋酸稀釋后進行計數(shù),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)細胞總數(shù)-白細胞數(shù)=紅細胞數(shù)胸腹水白細胞校正數(shù)=胸腹水白細胞測定值-出血增加的白細胞數(shù)出血增加的白細胞數(shù)=外周血白細胞數(shù)*腦脊液紅細胞數(shù)/外周血紅細胞數(shù)第48頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
1.細胞計數(shù)及分類:
(2)染色分類法離心沉淀,瑞氏染色,油鏡分類漏出液:主要為淋巴和間皮細胞滲出液:各種細胞增多的臨床意義不同第49頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第50頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二2.細胞分類的臨床意義正常漿膜腔積液無紅細胞白細胞:(0-8)×106/L,主要是淋巴細胞第51頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二2.細胞分類的臨床意義(1)紅細胞:多見于惡性腫瘤、結(jié)核或穿刺出血(2)中性分葉核粒細胞:常見于化膿性滲出液和早期漿膜結(jié)核(3)淋巴細胞:主要提示慢性疾病,如結(jié)核、梅毒、腫瘤等第52頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二2.細胞分類的臨床意義(4)嗜酸性粒細胞:見于變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲病、多次穿刺刺激等所致的滲出液。(5)間皮細胞:表示漿膜刺激或受損。第53頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二2.細胞分類的臨床意義(6)狼瘡細胞:偶見于SLE患者的漿膜液。(7)癌細胞:大量形態(tài)不規(guī)則、胞體大小不等、核偏大并可見核仁及胞質(zhì)染色較深的細胞。第54頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第55頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第56頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二
常規(guī)操作流程
觀察外觀混勻計數(shù)細胞分類第57頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二糞便檢查一、直接涂片法1.用生理鹽水將糞便涂成薄片2.制成涂片后,覆蓋片3.蟲卵報告方式未找到注明“未找到蟲卵”;找到幾種報告幾種4.紅細胞、白細胞報告方式:細胞數(shù)/HP第58頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義1.細胞(1)白細胞(膿細胞):
正常糞便中不見或偶見。細菌性痢疾,可見大量白細胞第59頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第60頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義(2)紅細胞:細菌性痢疾時紅細胞少于白細胞,散在分布,形態(tài)正常。阿米巴痢疾時紅細胞多于白細胞,多成堆存在并有殘碎現(xiàn)象。第61頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第62頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義(3)巨噬細胞:
為一種吞噬較大異物的單核細胞;胞體較中性粒細胞為大,圓形、卵圓形或不規(guī)則形,核形多不規(guī)則,含有吞噬顆粒及細胞碎屑。見于細菌性痢疾和直腸炎癥第63頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第64頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義(4)腸粘膜上皮細胞:
為柱狀上皮細胞,結(jié)腸炎癥、偽膜性腸炎時糞便中大量存在。(5)腫瘤細胞:
乙狀結(jié)腸癌、直腸癌時糞便可能發(fā)現(xiàn)成堆的癌細胞。第65頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第66頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義2.食物殘渣正常糞便中偶見淀粉顆粒和脂肪小滴等未及充分消化的食物殘渣。第67頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義(1)淀粉顆粒:
腹瀉者、慢性胰腺炎糞便中可在糞便中大量出現(xiàn)。(2)脂肪小滴:
急、慢性胰腺炎及胰頭癌時,糞便中脂肪小滴增多第68頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第69頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義(3)肌肉纖維:
腸蠕動亢進、腹瀉時可見。(4)植物細胞及植物纖維:植物細胞形態(tài)多種,有圓形、長圓形、雙層細胞壁第70頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第71頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二直接涂片鏡檢臨床意義3.寄生蟲和寄生蟲卵第72頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二前列腺液細胞學(xué)檢查標(biāo)本采集與處理
前列腺標(biāo)本一般由臨床醫(yī)生行前列腺按摩術(shù)后獲得,可直接涂于玻片上或收集在潔凈的試管中,并立即送檢。
第73頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二前列腺液細胞學(xué)檢查檢查方法:
1.濕片法檢查,特殊情況可用涂片染色檢查。濕片法操作簡便、快速,臨床常用。
2.涂片染色檢查可清晰辨認細胞結(jié)構(gòu),適合于檢查炎癥細胞和癌細胞,有助于前列腺炎和惡性腫瘤的診斷及鑒別診斷。第74頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二前列腺液細胞學(xué)檢查檢查內(nèi)容及報告方式1.卵磷脂小體(lecithinbodies)
高倍視野中卵磷脂小體數(shù)量(百分數(shù))2.RBC正常偶見RBC(<5/HP)。增多見于前列腺炎、結(jié)核、結(jié)石或腫瘤、按摩用力過重。3.白細胞正常前列腺液白細胞<10/HP,前列腺炎時白細胞增多并成堆分布。第75頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二第76頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二前列腺液細胞學(xué)檢查第77頁,共84頁,2023年,2月20日,星期二精液顯微鏡檢查1精子活力分析1)精子活動率檢查精子活動率(%)=活動精子數(shù)/(活動精子數(shù)+不活動精子數(shù))*10
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