干細胞標記物

關于干細胞標記物第1頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三干細胞：是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。包括：胚胎干細胞生殖干細胞成體干細胞按分化潛能分為：全能干細胞多能干細胞專能（單能）干細胞第2頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三干細胞的標志物分類：細胞表面的特殊標志細胞內特異基因的表達細胞內特殊物質的表達其他特性第3頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三細胞表面分子第4頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三第5頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三第6頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三第7頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三第8頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三細胞表面分子分類：

細胞膜受體白細胞分化抗原粘附分子細胞因子受體結合促分裂素的分子主要組織相容性復合體抗原B細胞識別抗原的膜免疫球蛋白免疫球蛋白Fc段受體其它受體和分子。

第9頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三受體：（receptor）是一種能夠識別和選擇性結合某種配體（信號分子）的大分子物質受體與配體間的作用具有三個主要特征：①特異性；②飽和性；③高度的親和力。

第10頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三白細胞分化抗原：是白細胞（還包括血小板、血管內皮細胞等）在分化成熟為不同譜系（lin-eage）和分化不同階段以及活化過程中，出現(xiàn)或消失的細胞表面標記

第11頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三粘附分子:

是一類能介導細胞間及細胞與細胞外基質粘附的分子，多為糖蛋白。

第12頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三粘附分子分類:粘合素超家族粘附分子（纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、纖維蛋白原、膠原蛋白、等）免疫求蛋白超家族粘附分子（ICAM、VCAM、和CD31等）鈣粘連素超家族粘附分子選擇素家族粘附分子其它粘附分子。

第13頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三干細胞表面分子功能：參與干細胞的分化調控維持干細胞的自我更新和多能性

參與機體重要的生理和病理過程

第14頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三“通用的”干細胞標記：ABCG2/Bcrp1

（St.JudeChildren'sResearchHospital

）多能干細胞標記：干細胞因子

Oct-4

波形蛋白鹼性磷酸酶

第15頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

鑒定干細胞的常用方法：

細胞形態(tài)和結構

細胞功能

細胞表面的特殊標志細胞內特異基因的表達

第16頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三胚胎干細胞的常用標志：

Oct-4

SSEAs

TRA-1-60和TRA-1-81第17頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

Oct-4：Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4）

屬POU轉錄因子一員

第18頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三SSEAs

（特異性胚胎抗原）：人EC、ES：SSEA-3（+）、SSEA-4（+），SSEA-1（-）鼠ES：SSEA-1（+），SSEA-3（-）、SSEA-4（-）

TRA（腫瘤排斥抗原）：人ES（+）鼠ES（-）第19頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三第20頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三胚胎干細胞的檢測：

形態(tài)特性：ES具有與早期胚胎細胞相似的形態(tài)特點。生長特性

干細胞特殊標記：SSEAs,TRA-1-60,TRA-1-80（AKP+,SSEA+,Oct-4+顯示ES的未分化狀態(tài)，并且Oct-4和SSEA-4是人類ES的特性）

端粒酶活性高

AKP

SSEA核型不被Hoechst33342和Rhodamine123染色分化能力

第21頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三人胚胎干細胞特性

胚胎干細胞

生殖干細胞

SSEA-1－

＋

SSEA-3＋

＋

SSEA-4＋

＋

TRA-1-60＋

＋

TRA-1-81＋

＋

AKP＋

＋

Oct-4＋

？

端粒酶活性

＋

＋

滋養(yǎng)細胞

＋

＋

滋養(yǎng)細胞

培養(yǎng)條件

＋無血清培養(yǎng)

LIF+bFGF+bFGF+Forskolin

第22頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

造血干細胞的標志物

Lin：lineagesurfaceantigen胸腺抗原-1（Thy-1、CD90）干細胞抗原（stemcellantigen-1,Sca-1）Kit

CD34

CD133ABCG2CD45KDR/VEGFR-2其它：

CD38

，WGA（絲裂原）

第23頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三系表面抗原(lineagesurfaceantigen,Lin)當造血干細胞分化為各系的祖細胞和成熟細胞時，會出現(xiàn)各系細胞的專一標志，即系表面抗原如：淋巴系：CD19、CD7粒系：CD11、CD13、CD15、CD16紅系：CD36、CD47、CD51、CD59、CD71；單核系：CD14巨核系：CD31、CD41、CD42、CD61、CD107B淋巴系：CD19、CD20、CD21、CD22T/NK系：CD2、CD7、CD11、CD25、CD26檢測造血祖細胞時，可選擇其中3-5個代表各系的抗原。

第24頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

胸腺抗原-1（Thy-1、CD90）為GPI（糖磷脂酰肌醇glycophosphatidylinositol,GPI）連結的膜分子，主要分布在胸腺T細胞、NK細胞和神經(jīng)元。Thy-1是用來鑒別造血干細胞的種系特異性標志物.Thy-1在CD34陽性細胞中表達最高，是比CD34更早期的造血干/祖細胞表面標志,并且當造血干細胞開始表達其分化細胞類型(如CD45RA，CD38，和CD71)時，他的表達開始下降

.小鼠造血干細胞表達底水平Thy-1。表型為Thy-1Low的細胞群能完全重建受致死量照射宿主的淋巴造血系統(tǒng)。

第25頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

干細胞抗原（stemcellantigen-1,Sca-1）Sca-1是18kDa磷脂酰肌醇錨定蛋白，屬Ly-6(一種胞漿膜蛋白）抗原家族成員。Sca-1被廣泛認為和Ly-6半抗原一起，是小鼠HSC標志分子，它在多能HSCs上表達。一種抗Sca-1抗體經(jīng)常和一些細胞表面標志分子表達的陰性選擇一起用來鑒定和分離小鼠HSCs。

Sca-1+HSCs可在成年骨髓、胎兒肝臟、成年動物流動的外周血和脾臟中被找到。Sca-1在幾種非造血組織中也被發(fā)現(xiàn)?？捎脕砀患疕SCs之外的祖細胞。有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1+細胞群中，可分離純人造血干細胞。

第26頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三Kit：原癌基因c-kit表達產(chǎn)物（又叫干細胞因子受體SCF-R,CD117）,表達于幾乎所有小鼠造血干細胞。

C-kit可編碼一種穿膜酪氨酸激酶受體分子。存在于造血干細胞膜上，它的配體分子是造血干細胞因子（stemcellfactor,SCF）。

人類60%-75%的CD34+造血細胞同時表達c-kit分子。kit+細胞占骨髓細胞的1%-4%，其中50%-70%的kit+骨髓細胞表達CD34+。小鼠多能干細胞表面分子標志可視為Thy-1Io、WGA+、c-kit+、Lin-。一個c-kit+Thy-1LowScal+Lin-的細胞便可重建小鼠的整個血液系統(tǒng)，一個這樣的細胞可產(chǎn)生105個子細胞。

第27頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

胸腺及骨髓中c-kit+細胞分化機制

胸腺c-kit骨髓c-kit粒細胞系－+單核細胞系－+紅細胞系－+T細胞++B細胞++第28頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三CD34CD34：是一種細胞表面的唾液粘蛋白CD34抗原被認為是造血干細胞

(HSCs)的標志物Osawa等人首先證明小鼠HSCs可以是CD34陰性人的CD34陰性細胞也有低水平的嫁接和造血能力移植研究表明胎綿羊CD34陰性細胞有重新繁殖的能力

第29頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三CD34-----CD38:研究表明CD34+細胞群中,99%同時表達CD38+,而CD34+CD38-細胞不僅形態(tài)上缺少分化的特征,而且體外細胞長期培養(yǎng)能形成CFU2Blast.CD38抗原是造血干細胞向多系分化的標志之一,并隨分化過程其表達水平增高,多能造血干細胞為CD38-。CD34-----CD45:研究發(fā)現(xiàn)CD34+細胞往往同時表達CD45抗原(LCA)并以180KD的CD45RO和200KD的CD45RA兩種異構體為主,并通過實驗證明,造血干細胞在分化過程中CD45抗原表達,早期是以CD45RO為主,在分化過程中CD45RA表達上調。

CD34+----CD34-:通過一系列研究提出,成年小鼠骨髓造血干細胞位于CD34低表達和陰性組份(CD34low/-),輸入單個小鼠CD34low/-c-kit+Sca-1+及系列標志(Lin-)細胞可使21%的受者獲得長期淋巴系統(tǒng)重建。以后的實驗進一步證實了CD34-細胞的存在。并且對人類、羅猴、豬骨髓的研究也表明存在現(xiàn)在尚未被認識的缺乏CD34表面標志的造血干細胞群體。

第30頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

CD133/AC133:CD133,是120kDa糖基化蛋白，最初是通過AC133單抗鑒定的，它能識別人HSCs的CD34+亞類。CD133可以作為用CD34篩選HSC和體外擴增的補充。CD133的表達不限于原始血細胞，來源于外周血的CD133+可被體外誘導分化為內皮細胞。CD133+。表達于20%～60%的人CD34+細胞,被認為是定向為粒單系祖細胞的標記

AC133-2：一種CD133異構體,被鑒定為可被AC133抗體識別的原始表面抗原。目前認為AC133可代替CD34作為造血干祖細胞標志。骨髓中幾乎所有CD34+CD38-細胞亞群均表達AC133，隨著細胞的分化而下調到檢測不到。AC133抗體分選干細胞在白血病的的治療中優(yōu)于CD34第31頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

ABCG2:ABCG2(ATP-bindingcassettesuperfamilyGmember2)廣泛存在于各種干細胞上，并決定了SP細胞的Hoechst陰性染色表型。ABCG2是ABC轉運體家族的成員ABCG2在CD34陰性細胞上出現(xiàn)的幾率最大，但細胞表達CD34后，ABCG2下調ABCG2的下調也表現(xiàn)在很多造血祖細胞上。因此在原始HSC分離鑒定上，ABCG2比CD34更有希望ABCG2在SP細胞上的專一表達提示ABCG2可能成為是成體多能干細胞陽性篩選的潛在標志物第32頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三血管內皮生長因子受體2（KDR/VEGFR-2）是造血干細胞的表面標志多能干細胞限于CD34+和KDR+部分CD34+KDR-細胞亞群則主要包括一些系特異定向祖細胞KDR受體(血管內皮生長因子受體)可作為一種判別HSC和造血祖細胞

(hematopoieticprogenitorcells,HPC)的標志。HSC細胞表面標志限定在CD34+KDR+,而HPC細胞表面標志為CD34+KDR-人類出生后造血組織中有0.1%～0.5%的CD34+細胞表達KDR+

第33頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三CD38抗原CD34+細胞中99%是CD38-，隨著分化過程其表達增加CD34+CD38-細胞占成人骨髓細胞的0.01%-0.05%CD38抗原可作為陰性選擇標志第34頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

絲裂原（wheatgermagglutinin,WGA）Visseer等發(fā)現(xiàn)小鼠骨髓中造血干細胞對WGA有高親和性。應用FACS即可自骨髓中Lin-/WGA+細胞群中分離造血干細胞第35頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

未分化造血干細胞表面標志：

小鼠

人

CD34-/LowCD34+Scal+CD59+Thy1+/LowThy1+CD38+CD38-/Lowc-Kit+c-Kit-/LowLin-Lin-第36頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三造血干細胞的鑒定

細胞形態(tài)：集落呈非貼壁生長，細胞形態(tài)較小細胞表面標志:Lin,Thy-1,Sca-1,Kit,CD34,CD133ABCG2,KDR/VEGFR-2,其它：

CD38

，WGA基因表達：轉錄因子TAL-1,GATA-2;β主要珠蛋白

(人造血干細胞表現(xiàn)為CD34+和Thylo,而CD10，CD14，CD15，CD16，CD19，CD20皆為陰性。

現(xiàn)常用CD34+、CD38-、Lin-；

CD34+、CD33-、DR-等參數(shù)精選干/組細胞)

第37頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三間質干細胞的標志物

STRO-1CD44、

SH2、

SH3CD29、CD71、CD90、CD106、CD120、CD124Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型膠原

(-)

第38頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三骨髓間充質干細胞（MSC）檢測

:①形態(tài)和培養(yǎng)特性:

MSC體積小，梭形，核漿比大，能連續(xù)傳代培養(yǎng)。②分子標記

:CD44、

SH2、SH3、CD29、CD71、CD90、CD106、CD120、CD124;不表達

Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型膠原及造血干細胞表面標記。③分化潛能：可分化為骨（AKP+，鈣沉積，骨橋蛋白染色陽性）軟骨（Ⅱ型膠原，酸性蛋白聚糖染色陽性）脂肪（親脂性染料Nilered或Oilred染色）肌腱、肌、神經(jīng)、基質、肝及內皮等多種細胞

第39頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三神經(jīng)干細胞的標志物

Nestin

波形蛋白

PSA-NCAMp75NeurotrophinR

Nucleostemin

BMPCD133第40頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三Nestin:Nestin是VI型中間絲蛋白

第41頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三ImmunocytochemistryofnestinproteinintheneuraltubeofmouseImmunocytochemistryofnestinproteinincerebralcortexofpostnatalmice第42頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三波形蛋白vimentin：起于神經(jīng)遷移完成時，分化完成后表達下降

第43頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三ExpressionofVimentininSHG244cells

(S2P×200)GFAP和Vimentin均為中間絲蛋白,兩者在星形膠質細胞間變和分化過程中的表達呈相反趨勢,分化好的細胞GFAP陽性明顯,Vimentin反應弱;分化差的細胞則相反。人腦膠質瘤SHG244第44頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三PSA-NCAM(Polysialicacid-neuralcelladhesionmolecule)神經(jīng)元限制性的前體細胞可由高表達PSA-NCAM而鑒定

第45頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三EGFP-positivecells(newborngranulecells)indentategyrusExpressedtheimmatureextracellularmarkerPSA-nCAM(red).Neurogenesisinthedentategyruscontinuesintoadulthood

第46頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三p75NeurotrophinR(NTR):p75NTR,也稱為低親和神經(jīng)生長因子受體屬1型跨膜TNF受體超家族

可分離神經(jīng)冠干細胞(NCSCs)第47頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三Nucleostemin：

一種新發(fā)現(xiàn)的細胞核蛋白

皮層干細胞中富集

nucleostemin在nestin的表達峰之前表達

nucleostemin的表達在神經(jīng)元和膠質細胞分化之前就進行了下調

反映早期的細胞多潛能狀態(tài)

第48頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三CD133：神經(jīng)干細胞膜表達CD133跨膜蛋白第49頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三神經(jīng)干細胞鑒定：

細胞形態(tài)：細胞體很小，從細胞體伸出許多長的神經(jīng)突

細胞功能：電壓控制性Na+,K+,Ca+通道；神經(jīng)遞質的受體

細胞標志：巢蛋白，ＣＤ１３３，PSA-NCAM，p75NeurotrophinR，Nucleostemin，BMP，TH（酪氨酸羥化酶），微管相關蛋白tua,MAP2,β微管蛋白3(TuJ-1),GFAP(膠質原纖維酸性蛋白)，突觸泡蛋白以及NF-L(68kDa的神經(jīng)絲蛋白)；NF-H(200kDa的神經(jīng)絲蛋白)；Nurrl和Ptx3(中腦多巴氨能神經(jīng)元的標志)特異基因表達：5天的Ebs中有NF-L,NF-M和突觸泡蛋白的表達，2天后表達編碼神經(jīng)聚糖（腦特異蛋白多糖）的基因，6天后表達編碼微管相關蛋白tau的基因。也有檢測發(fā)現(xiàn)分化細胞中有Brain-3，谷氨酰氨受體亞單位GluR-4和GluR-6，遞質合成酶TH和GAD67,GAD65,GFAP和NF-L的表達

第50頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

肌干細胞：C-met酪氨酸轉氨酶，M-鈣粘蛋白

至少有3種骨骼肌來源的干細胞：

①衛(wèi)星細胞②背主動脈壁中的細胞③側群細胞是骨髓或肌肉中含有肌干細胞的一群細胞

第51頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三鑒別要點：成纖維細胞扁平多突起，胞質豐富衛(wèi)星細胞呈球形，貼壁后絕大多數(shù)為梭形或紡錘形，相鄰細胞間以細絲拉網(wǎng)，少數(shù)有突起呈不規(guī)則形，能合成骨骼肌特有的磷酸肌酸激酶CK-MM亞型，還有肌動球蛋白等。分化中單核細胞相融合最后形成多核肌細胞。靜息肌衛(wèi)星細胞是多能干細胞，表達C-met酪氨酸轉氨酶和M-鈣粘蛋白，但不表達成肌細胞標志物Myf5、MyoD、結合素等。第52頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三鑒別方法：結蛋白（desmin），但不排除肌組織中血管平滑肌的污染，檢測橫紋肌動蛋白可區(qū)別成纖維細胞和平滑肌細胞。磷酸肌酸激酶（CK），

CK-MM亞型，C-met酪氨酸轉氨酶和M-鈣粘蛋白等指標。Hoechst33342染色結合流式細胞鑒定側群細胞。

第53頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三第54頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三肝干細胞肝干細胞包括胚胎成肝干細胞肝卵圓細胞有干細胞特征的肝上皮細胞、骨髓、胰和神經(jīng)來源的肝前體細胞

第55頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三成年動物肝干細胞

成年動物肝臟細胞正常情況處于靜止期，增生分裂非常慢.當外科切除部分肝臟或藥物損傷后，肝細胞開始活化增生，包括肝上皮細胞和膽管上皮細胞及竇間隙細胞.

肝臟損傷非常嚴重或肝細胞增生受到抑制，肝干細胞開始活化，即所謂的“卵圓細胞”(ovalcell)或“前體細胞”

第56頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三卵圓細胞標志

在向膽管細胞的分化過程中表達谷氨酰轉肽酶（GGT）、Chrom-A等在向肝細胞分化的過程中可以合成分泌甲胎蛋白(AFP)和白蛋白（Alb）可以表達一系列膽管上皮細胞角蛋白（cytokeratin，ck7,8,18,19）和間充質的波形蛋白（vimentin），ck14只在少數(shù)卵圓細胞中表達OV6可以標志大多數(shù)的卵圓細胞，OC2和OC3用以標記其亞群卵圓細胞和造血干細胞共同的抗原決定簇干細胞因子（SCF）及其受體c-kit、細胞表面糖蛋白Thy-1等

還可以表達TGFa，aFGF，SCF，flt-3生長因子及其受體

表達CK14，波形蛋白

第57頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三分離肝干細胞Suzuki等報告利用特異性的陽性標志α6整合素（CD49f）、β1整合素（CD29）（肝細胞標志）及陰性標志CD45、Ter119（造血干細胞標志）抗體進行卵圓細胞分離

分離的肝c-kit-CD45f+CD29+CD45-TER119-細胞具有肝干細胞特征

第58頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三

肝細胞系的細胞標志肝干細胞肝卵圓細胞肝細胞膽管細胞CD49f、CD34、Thy-1、AFP、白蛋白、CK19、膽管性糖CD29（α6，β1）c-kit、c-met，а1抗胰蛋白酶、蛋白、

AFP、CK18、6-磷酸-葡萄糖酶、γ-谷氨酸轉肽酶、

Flt-3，CK8、OV6二肽酶Ⅳvinculin

第59頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三胰干細胞標記Nestin轉錄因子

PDX-1、PAX-4、PAX-6、NKX6.1、yy肽、NgN3(神經(jīng)原素3,ｎｅｕｒｏｇｅｎｉｎ)

作為胰腺干細胞的輔助標記物:酪氨酸羥化酶、酸性β半乳糖苷酶

(LacZ)、Glut-2(Glucosetransportertype2)、MSX-2、CK19、CK20、波形蛋白、Bcl-2(一種細胞凋亡抑制蛋白)第60頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三上皮干細胞標記

表皮細胞存在三種狀態(tài)：干細胞短暫擴增細胞（TA）分化細胞（PMD）第61頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三表皮干細胞有3個顯著特點：①慢周期性：在體內表現(xiàn)為標記滯留細胞，即在新生動物細胞分裂活躍時摻入氚標的胸苷，由于干細胞分裂緩慢，因而可長期探測到放射活性，如小鼠表皮干細胞的標記可滯留2年以上②自我更新能力（體外培養(yǎng)時呈克隆性生長，可連續(xù)傳代）③對基底膜的粘附性

第62頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三表皮干細胞高表達β1整合素

角蛋白19(K19)非鈣粘素相關β-catenin及P63

高表達的dotch及配體DELTAL低表達的Ealpha6整連蛋白

和10G7(dim)第63頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三表皮干細胞檢測：(1)利用表皮干細胞最顯著的兩個特征，即慢周期性和自我更新能力最可靠(2)標記分子：①β1整合素表達水平②角蛋白：K15,K19③alpha6整連蛋白

和10G7(dim)；④E-cadherin低表達，dotch高表達

第64頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三內皮前體細胞：endothelialprogenitorcells

表達

Flk-1和

vWF還表達內皮特異性的分子VE-cadherin和干/祖細胞標記

AC133和c-kit第65頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三角膜上皮干細胞

共表達K19和波形蛋白，含豐富的α-烯醇酶、鈉-鉀ATP酶和細胞色素氧化酶但不表達K3、K4、K6、K7、K8、K13和K18

第66頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三乳腺干細胞標記：Sca-1,keratin-6,11成肌細胞標記

CD56和

結蛋白（desmin）

第67頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三腸干細胞：正常腸隱窩基底部含有4-6個干細胞小腸干細胞表達K8,K17,K19角蛋白

第68頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三生殖干細胞GSC

TNAP、SSEA-1、Oct-4

A型精原細胞包括精原干細胞，具有高水平端粒酶活性，并表達EE2蛋白，其它階段生精細胞則不具有這樣的特點。未分化的精原細胞表達低水平的c-kit及低量的特異染色質。

第69頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三干細胞標記及活體示蹤在移植前對干細胞進行合適的標記,能夠對移植后的干細胞及其分化細胞與宿主自身細胞加以鑒別和示蹤

第70頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三光鏡及電鏡常用細胞標記物質

1.胞漿標記物:Hoechst(藍色熒光)

，DiI，PKH67(綠色熒光)和PKH26(紅色熒光

)等熒光色素。2核酸標記物：胸腺嘧啶同位素標記，5-溴脫氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine，5-BrdU),氚胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)標記3.轉基因：大腸桿菌乳糖操縱子中的?-半乳糖苷酶(LacZ)，綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein，GFP)，增強型綠色熒光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein，EGFP)和紅色熒光蛋白(redfluorescentprotein，RFP)。第71頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三活體示蹤干細胞常用的細胞標記物質及其在影像學的應用

1.核醫(yī)學分子顯像技術活體示蹤干細胞:SPECT(singlephotonemissioncomputedtomography，SPECT)PET(positronemissiontomography，PET)。

(1)代謝顯像：

18F標記的氟脫氧葡萄糖(18F-FDG)，

11C-蛋氨酸和11C-乙酸鹽，

18F-FDG，

18Fluorodopa(18FD)。

(2)抗體顯像。放射免疫顯像的核素有99mTc，111In和131I(3)受體顯像：多巴胺、乙酰膽堿，-氨基丁酸/苯二氮,5-羥色胺和阿片受體。轉鐵蛋白受體(transferrinreceptor，TfR)(4)基因表達顯像報告基因表達顯像：又稱轉基因表達顯像，將能夠表達可測表型(酶、受體，轉運體等)的特定核苷酸序列(報告基因)與靶基因偶聯(lián)，通過測定表型蛋白間接反映靶基因的表達。反義顯像：是通過螯合劑將金屬核素(99mTc、111In等)與反義寡核苷酸連接(RASON)，在細胞內與靶基因的mRNA互補結合顯像，以反映目標DNA轉錄情況。

第72頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三2.磁共振成像(MRI)活體示蹤干細胞能夠用于干細胞標記研究的MR造影增強劑主要有兩類：

(1)

釓(gadolinium)類：

(2)氧化鐵(ironoxides)類：主要是磁性納米材料超順磁性氧化鐵(superparamagneticironoxide，SPIO)和超小順磁性氧化鐵(ultrasmallparamagneticironoxideparticles，USPIO)第73頁，共82頁，2023年，2月20日，星期三細胞的標志物的研究方法實例

CD341984年，Cividin等用人髓系白血病細胞kG1a制備了單抗My10，能與大多數(shù)骨髓來源的造血干祖細胞膜上分子量為105-120KD膜蛋白特異結合Tindle等又制備出另一株CD34單抗BI.3c5，并證實了Cividin的發(fā)現(xiàn)

1986年第三界國際人類白血病細胞分化抗原協(xié)會將其命名為CD34

CD34單克