高考生物一輪總復(fù)習(xí)33基因工程學(xué)案完美

第33講

基工[考綱要求1.基因工的誕生()2.基因程的原理技術(shù)(含PCR術(shù))(Ⅱ3.基因工的應(yīng)用Ⅱ)。4.蛋白質(zhì)程(Ⅰ)。5.實(shí)：DNA的粗提取與鑒定考一基工的作具1．基因工程的念(1)供：提目的基因。(2)操環(huán)境體外。(3)操水平分子水平。(4)原：基重組。(5)受：表目的基因。(6)本：性在受體體內(nèi)的表達(dá)。(7)優(yōu)：克遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙定向改造物的遺傳狀。2．DNA重組技的基本具(1)限性核內(nèi)切酶稱(chēng)：限制酶①來(lái)源：主是從原核物中分離化出來(lái)的。②作用：識(shí)特定的核酸序列并開(kāi)特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷二酯鍵。③結(jié)果：產(chǎn)黏性末端平末端。(2)DNA連接酶①作用：將制酶切割來(lái)的DNA片段拼接成分。②類(lèi)型常用類(lèi)型來(lái)源功能

E·coliDNA連接大腸桿菌只縫合黏性末端

T連酶T噬菌體縫合黏性末端和平末端結(jié)果

恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵

③DNA接酶和制酶的關(guān)歸納提升

與DNA相關(guān)的種酶的比名稱(chēng)限制酶DNA連接酶DNA聚合酶DNA(水解酶解旋酶

作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對(duì)之間的氫鍵

作用結(jié)果將DNA切兩個(gè)片段將兩個(gè)片連接為一個(gè)DNA子將單個(gè)脫氧核苷酸依次連接到單鏈末端將DNA片段水解為單個(gè)脫氧核苷將雙鏈DNA分局部解旋為單鏈形成兩條長(zhǎng)鏈(3)載①種類(lèi)：質(zhì)、λ噬菌的衍生物、植物病毒。②質(zhì)粒的特

能自我復(fù)制至多個(gè)限酶切割位有特殊的標(biāo)基因深化拓展

載體上標(biāo)記因的作用載體上的標(biāo)基因一般一些抗生的抗性基因的因要轉(zhuǎn)入的受體細(xì)胞沒(méi)抵抗相關(guān)生素的能力當(dāng)有抗生素性基因的體進(jìn)入受體細(xì)胞后抗基因在受體胞內(nèi)表達(dá)使受體細(xì)胞能夠抵相應(yīng)抗生以在體細(xì)胞的培養(yǎng)體系中加入該種抗生就可以只留轉(zhuǎn)入載的受體細(xì)胞原理如下所示：1．有關(guān)工具酶判斷(1)限酶只用于切割目的基因×)(2)切質(zhì)粒限制性核酸內(nèi)切酶均能異性地識(shí)個(gè)核苷酸序(×)

(3)DNA連接酶能將堿基間通氫鍵連接起來(lái)(×)(4)·coliDNA連接酶既可接平末端，又可連接黏性末端×)(5)限酶也以識(shí)別和切割RNA(×)(6)限性核內(nèi)切酶、DNA連接酶和質(zhì)是基因工中常用的種工具酶(×)2．有關(guān)載體的斷(1)載質(zhì)粒常采用抗生素合成基因?yàn)楹Y選標(biāo)基因(×)(2)每質(zhì)粒DNA分子上少含一限制酶識(shí)別位點(diǎn)(√)(3)質(zhì)是小環(huán)狀DNA分，是基因工常用的載(√)(4)載的作是將攜帶的目的基因?qū)荏w細(xì)胞，使之穩(wěn)存在并表(√)(5)外DNA須位重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終子之間才進(jìn)行復(fù)制(×)下圖中的圖1和圖分表示的是EcoRⅠ制酶和Ⅰ限制酶作用示意圖，據(jù)圖分析：(1)請(qǐng)出EcoRⅠ制酶和Sma限制酶識(shí)別的堿基序列及切割的位點(diǎn)。提示EcoR限制酶識(shí)別的堿基序列GAATTC，割位點(diǎn)G和A之間SmaⅠ限制酶識(shí)別的堿基序列是CCCGGG，割位點(diǎn)在GC之間(2)以實(shí)例明限制酶有何特性？提示說(shuō)限制酶具專(zhuān)一性。命題點(diǎn)一

工具酶的應(yīng)分析1．下圖是表達(dá)基因用的粒的示意，若要將目的基因插入到質(zhì)粒上的A，則割基因時(shí)可用的是()

A．HindⅢC．EcoB

B．EcoRⅠD．PstⅠ答案C解析A處有3處(BamH、EcoBClaⅠ)制酶的點(diǎn)，只有用B限制酶切割時(shí)才能讓目的基因插到A處且原有基因活。2．用限制酶RⅤ單獨(dú)割某普通粒，可產(chǎn)生kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì)長(zhǎng)鏈，而時(shí)用限制酶R、Ⅰ聯(lián)合切該質(zhì)粒，得到三種度的DNA片段，見(jiàn)下圖(中表示EcoRⅤ制酶切割的一個(gè)黏末端)若用MboⅠ限制酶單切割該普質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)為()A．2.5和5.5C．5.5和8

B．2.56D．6和8答案D解析依示可知，質(zhì)粒上有1EcoR限制酶切點(diǎn)2個(gè)Ⅰ制酶的切點(diǎn)，故用限制酶MboⅠ單獨(dú)切割該質(zhì)粒時(shí)，將產(chǎn)生長(zhǎng)為6和8的種片段。3．(2016·全國(guó)Ⅲ40)圖a)中的三個(gè)DNA段上次表示出了RⅠHⅠSau3AⅠ種限制性核酸切酶的識(shí)序列與切位點(diǎn)，圖(為某種表達(dá)載體示意圖(載體上的RⅠ、Sau3AⅠ的切是唯一的。

根據(jù)基因工的有關(guān)知，回答下問(wèn)題：(1)經(jīng)BamHⅠ酶切后得的目的基因以與上述達(dá)載體被________酶切的產(chǎn)物連接理是______________________________________(2)若人利圖b)所示的表載體獲得了、乙、丙種含有目基因的重組子，如圖(c)所示。這三種組子中，能在宿主胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有________不能表的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)DNA接酶是兩個(gè)片段連接起來(lái)酶，常見(jiàn)有______________和______________，其中既能連黏性末端能連接平端的是__________________答案(1)Sau3AⅠ

兩種酶切割產(chǎn)生的片具有相同黏性末端(2)甲、丙

甲中目的基插入在啟動(dòng)的上游，中目的基插入在終止子的下游，二者的目的因均不能轉(zhuǎn)錄(3)·DNA連接酶TDNA連接酶TDNA連接酶44解析(1)分圖(a)可限酶3AⅠ與H切割DNA后成的黏性末端相同經(jīng)這種酶切割得的產(chǎn)物可用連酶進(jìn)行連。(2)構(gòu)建基表達(dá)載時(shí)，為保證目的基因能在宿主細(xì)胞成功表達(dá)目的基應(yīng)插入在啟動(dòng)子和終止子之間據(jù)此可判斷丙均不符合求基因均不能達(dá)常見(jiàn)的DNA連接有·coliDNA連接酶和TDNA連酶DNA44連接酶既能接黏性末又能連接末端。限制酶的選方法根據(jù)目的基兩端的限酶切點(diǎn)確限制酶的種類(lèi)。(1)應(yīng)擇切位于目的基因兩端的限酶，如圖可選擇PstⅠ。(2)不選擇點(diǎn)位于目的基因內(nèi)部的制酶，如甲不能選Ⅰ。(3)為免目基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化隨意連接可使用不的限制切割目的基因和質(zhì)粒，

如圖甲也可擇用PstⅠ和RⅠ兩種制酶但要保質(zhì)粒上有這兩種酶的切點(diǎn))。命題點(diǎn)二

載體的應(yīng)用析4．質(zhì)粒是基因程中最常的載體，存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標(biāo)基因如圖示，通過(guò)標(biāo)記基因以推知外基因(目的基)是否轉(zhuǎn)移成功外源基插入的位置同細(xì)菌培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)況不同，圖表示外基因插入位置(插入點(diǎn)有abc)，根據(jù)表中供細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，測(cè)①②③種重組后菌的外源基因插入點(diǎn)，正確的一組)①②③

細(xì)菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)

細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)A．①是c；②是b③是aB．①是ab；②a；③是bC．①是ab；②b；③是aD．①是c；②是a③是b答案A解析第組中重組細(xì)菌能在氨芐青霉素和含四環(huán)素培養(yǎng)基上生明氨芐青霉基因和抗四環(huán)素因沒(méi)有被壞，因此源基因插入點(diǎn)是c第②組重組后細(xì)菌能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生說(shuō)明氨芐青霉基因沒(méi)有被破壞細(xì)菌不能在含四環(huán)素培基上生長(zhǎng)說(shuō)明四環(huán)素基因破壞，因外源基因入點(diǎn)是b。第③組組后細(xì)菌能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)說(shuō)明氨芐青霉基因被破細(xì)能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)說(shuō)明抗四素基因沒(méi)被破壞，因外源基因入點(diǎn)是。5．(2016·國(guó)Ⅰ40)一質(zhì)粒載如圖所示外源DNA插入到AmprTet中會(huì)導(dǎo)相應(yīng)的基因失活A(yù)mp

表示氨芐青素抗性基Tet

表示四環(huán)素性基因有人將此質(zhì)粒載用HⅠ酶切后，與BamHⅠ酶切獲得的目的基因混，加入DNA連接酶進(jìn)行接反應(yīng)，得到的混物直接轉(zhuǎn)化腸桿菌，果大腸桿有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化被轉(zhuǎn)的大腸桿有三種分

別是含有環(huán)目的基因含有質(zhì)載體含有插入了的基因的重組質(zhì)粒的大桿菌回下列問(wèn)題：(1)質(zhì)載體為基因工程的工具，應(yīng)備的基本件有______________________________(答出兩點(diǎn)即可，而作基因表達(dá)體，除滿足上述基本條件外，還需有啟動(dòng)子終止子。(2)如用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)篩選，在述四種大桿菌細(xì)胞，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基的細(xì)胞是能區(qū)分的其原因是___________________________________________________________________________________________________________；并且________________和____________________________________的細(xì)胞也是不能分的原是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在上述篩選基礎(chǔ)上若要篩選有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單落還需使用含有_______的固培養(yǎng)基?；蚬こ讨校承┦删w經(jīng)造后可以為載體其DNA復(fù)制所需的原來(lái)自于________________________________________________________________________。答案(1)能我復(fù)制有標(biāo)記基(2)二均不含氨芐青霉素抗性基因在培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)

含有質(zhì)粒載

含有插入了的基因的組質(zhì)粒(或答有重組質(zhì))

二者均含有芐青霉素抗基因，在培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)

四環(huán)素(3)受細(xì)胞解析(1)質(zhì)作為載體應(yīng)具備的基本件有：能我復(fù)制、有標(biāo)記基、含有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位等。(2)由題意可知未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的胞中均不有氨芐青素抗性基因以在有氨芐青素的培養(yǎng)基上均不能生長(zhǎng)質(zhì)粒載體含有氨芐霉素抗性因和四環(huán)素性基因插入了目基因的重組質(zhì)粒中僅含有氨芐青霉素抗性基因所以含質(zhì)粒載體和含有入了目的因的重組粒的細(xì)胞均能在含有氨芐青霉素的養(yǎng)基上生前者以在含有四素的培養(yǎng)上生長(zhǎng)而者不能所可用含有四環(huán)素的培養(yǎng)篩選出含有入了目的基因的組質(zhì)粒的腸桿菌單落。(3)噬體屬于毒，病毒殖過(guò)程中所需的原料、酶等均來(lái)自于體細(xì)胞。

考二

基工的作程應(yīng)1．基因工程的本操作過(guò)(1)目基因獲?、倌康幕蛑饕侵复a蛋白質(zhì)基因。②獲取目的因的方法a．直接分離法從自然界有的物種分離，如從基因組文庫(kù)或cDNA中獲。b．人工合成：果基因比小，核苷序列又已知，可以通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成；以RNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成。③擴(kuò)增目的因：利用術(shù)擴(kuò)增的基因。(2)基表達(dá)體的構(gòu)建——基因工程核心①目的：使的基因在體細(xì)胞中定存在并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使的基因能表達(dá)和發(fā)揮作。②基因表達(dá)體的組成小貼士

啟動(dòng)子≠起密碼子，止子≠終密碼子(1)啟子段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段于基因首端是RNA聚合酶別結(jié)合部位。(2)終子：段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，位于基因的尾端。作用是使錄過(guò)程停。(3)起密碼和終止密碼子位于mRNA上，分別制翻譯程的啟動(dòng)終止。③構(gòu)建過(guò)程

(3)將的基導(dǎo)入受體細(xì)胞生物種類(lèi)常用方法受體細(xì)胞

植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法體細(xì)胞或受精卵

動(dòng)物顯微注射技術(shù)受精卵

微生物感受態(tài)細(xì)胞法原核細(xì)胞將含有目的基因的表達(dá)將目的基因插入到Ti質(zhì)

Ca

處理細(xì)胞→感受態(tài)載體提純→取卵受粒的TDNA上農(nóng)桿菌

細(xì)胞→重組表達(dá)載體DNA卵轉(zhuǎn)化過(guò)程→入植物細(xì)胞→整合

分子與感受態(tài)細(xì)胞混合→顯微注射→受精卵發(fā)到受體細(xì)胞染色體的DNA

→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA育→獲得具有新性狀的上→表達(dá)

分子動(dòng)物(4)目基因檢測(cè)與鑒定2．基因工程的用(1)動(dòng)基因程：用于提高動(dòng)物生長(zhǎng)度從而提產(chǎn)品產(chǎn)量用于改善產(chǎn)品品質(zhì)；用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥；用轉(zhuǎn)基動(dòng)物作器移植的供體等。(2)植基因程：培育抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植、抗病轉(zhuǎn)因植物和逆轉(zhuǎn)基因物；利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)(3)比基因療與基因診斷原理

操作過(guò)程利用正常基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞

進(jìn)展基因治療

基因表達(dá)

臨床實(shí)驗(yàn)中，以表達(dá)出正常性狀來(lái)治療(病)制作特定DNA探針與病人樣品混基因診斷

堿基互補(bǔ)配對(duì)

臨床應(yīng)用合，分析雜交帶情況3.蛋質(zhì)工程

(1)流圖A．轉(zhuǎn)錄，B.翻譯，分子計(jì)，多肽，期功。(2)結(jié)：改了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出的蛋白質(zhì)(3)應(yīng)：主集中應(yīng)用于對(duì)現(xiàn)有蛋白進(jìn)行改造改良生物狀。1．有關(guān)基因工原理與操的判斷(1)設(shè)擴(kuò)增的基因的引物時(shí)不必考表達(dá)載體序列(×)(2)用PCR方法擴(kuò)增的基因時(shí)不必知道基因全部序列√)(3)為育抗草劑的作物新品種，導(dǎo)抗除草劑因時(shí)只能受精卵為體×)(4)抗基因使成功地插入植物細(xì)胞色體上也必能正常達(dá)(√)(5)檢目的因是否成功表達(dá)可用抗—抗體雜技術(shù)(√)(6)應(yīng)DNA針技，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍茄植株中的基因的在及其是否完全表達(dá)(×)2．有關(guān)基因工的應(yīng)用及白質(zhì)工程判斷(1)將的干素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)大腸桿菌獲得能產(chǎn)人干擾素菌株(√)(2)利乳腺物反應(yīng)器能夠獲得一些要的醫(yī)藥品，如人血清白蛋，這是因?yàn)閷⑷说难灏椎鞍谆鶎?dǎo)入了動(dòng)的乳腺細(xì)中(×)(3)由腸桿工程菌獲得人的干擾素可直接應(yīng)(×)(4)蛋質(zhì)工的目的是改造或合成人需要的蛋質(zhì)(√)(5)蛋質(zhì)工是在分子水平上對(duì)蛋白分子直接行操作，向改變分的結(jié)構(gòu)(×)據(jù)圖分析抗棉的培育程

(1)該因工中的目的基因和載體分是什么？般情況下為什么要同一種限制酶處理目的基因和載？提示目基因是毒蛋白基因載體是Ti質(zhì)用一種限制處理目的基因和載體可以獲得相同的性末端，于構(gòu)建基表達(dá)載體。(2)該例中采用何種方法導(dǎo)入目的因？為什目的基因以整合到色體的DNA上？提示采的方法是桿菌轉(zhuǎn)化質(zhì)粒上的TDNA轉(zhuǎn)移到體細(xì)胞且整合到受細(xì)胞的染色DNA上，而目的因又插入到了TDNA上，以目的基可以整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。(3)該例中檢測(cè)目的基因是否成功達(dá)的常見(jiàn)法有哪兩？提示抗—抗體雜法、用棉飼喂棉鈴蟲(chóng)。1．基因組文庫(kù)cDNA文庫(kù)的較文庫(kù)類(lèi)型文

基因組文庫(kù)

構(gòu)建基因文庫(kù)的過(guò)程文庫(kù)大小基因中啟動(dòng)子基因中內(nèi)含子基因多少物種間的基因交流

小無(wú)無(wú)某種生物的部分基因可以

大有有某種生物的全部基因部分基因可以說(shuō)明

基因文庫(kù)的組建過(guò)程就包含基因工程的基本操作步驟基因文庫(kù)中獲取目的基因的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，缺點(diǎn)是工作量大，具有一定的盲目性2.利PCR技術(shù)擴(kuò)目的基因(1)PCR的含義：是項(xiàng)在生物外復(fù)制特定DNA片段的核酸成技術(shù)。(2)目：短間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因(3)原：DNA雙鏈制。(4)前：有段已知目的基因的核苷序列。(5)過(guò)第一步：加至～95℃，DNA解鏈為單；第二步：冷至～60℃，物結(jié)合到互DNA鏈；第三步：加至～75℃，穩(wěn)定聚合酶酶從引物始進(jìn)行互鏈的合成如此重復(fù)循多次。3．蛋白質(zhì)工程基因工程比較(1)區(qū)項(xiàng)目過(guò)程

蛋白質(zhì)工程預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白

基因工程獲取目的基因→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→

實(shí)質(zhì)結(jié)果

質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列定向改造或生產(chǎn)人類(lèi)所需的蛋白質(zhì)可生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定定向改造生物的遺傳特性得類(lèi)所需的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)(2)聯(lián)①蛋白質(zhì)工是在基因程的基礎(chǔ)，延伸出來(lái)的第二代基因工程。②基因工程所利用的些酶需要過(guò)蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾、改造。命題點(diǎn)一

基因工程操程序的分1．(2017·國(guó)Ⅰ，38)真核生基因中常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒(méi)，原核生沒(méi)有真核生物所有的切除含子對(duì)應(yīng)RNA序列的機(jī)已知在體中基因A(內(nèi)含子可以表出某種特定白簡(jiǎn)稱(chēng)蛋A)。回下列問(wèn)題：(1)某學(xué)從的基因組文庫(kù)中獲得了因A以大腸桿菌作為體細(xì)胞卻未得到蛋白A其原是__________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)若家蠶為表達(dá)基因A的受體在噬菌體昆蟲(chóng)病毒種載體中不選用_______作為體，其原因__________________________________。若要高效地得蛋白A，可選用腸桿菌作受體。因與家蠶相，大腸桿菌具有______________________________________(答出兩點(diǎn)即)等優(yōu)。(4)若檢測(cè)因A是否翻出蛋白A用的檢測(cè)質(zhì)是________________(填“蛋白A的基”或“蛋白A抗體”)。(5)艾里等的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)出了重要貢，也可以是基因工程的先導(dǎo)如果說(shuō)他的工作為因工程理論的建立提供了啟示，那，這一啟是________________________________________________________________________。答案(1)基A有內(nèi)含，在大桿菌中，其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含對(duì)應(yīng)的列不能切除，無(wú)法達(dá)出蛋白A(2)噬菌體

噬菌體的宿是細(xì)菌，不是家蠶(3)繁快、容培

養(yǎng)(4)蛋白A的抗體(5)DNA可以從一種物個(gè)體轉(zhuǎn)到另一種生物個(gè)體解析(1)從的基因組文庫(kù)中獲得的因A中含內(nèi)含子，大腸桿菌于原核生物，不能切除基因A初轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與內(nèi)含子應(yīng)的RNA序列，故基因A在腸桿菌中無(wú)表達(dá)出蛋A。(2)由病毒宿主細(xì)胞的感染具有特性菌體只能生在細(xì)細(xì)胞中感染家蠶細(xì)胞，故應(yīng)選用可染家蠶的蟲(chóng)病毒作載體。(3)與真核生物相比大腸桿菌等原核生物具有繁殖快、容易培、遺傳物相對(duì)較少優(yōu)點(diǎn)。(4)檢基因A是否譯出蛋白，一般抗原—抗體雜交的方用蛋白A的抗體與從胞中提取蛋白質(zhì)進(jìn)雜交察是否出現(xiàn)交帶(5)肺炎雙球菌化實(shí)驗(yàn)的質(zhì)是型細(xì)菌的進(jìn)入R型細(xì)體內(nèi)在R型細(xì)菌體完成表達(dá)這證明了DNA可以從一生物個(gè)體移到另一種生物個(gè)體，為基因工程定了基礎(chǔ)22,4－為除劑在農(nóng)田中大量使用研認(rèn)為它是種淋巴癌致病因子為降低2,4－的危害人員通基因工程術(shù)構(gòu)建了能高效降解－基因工菌答下列問(wèn)題：(1)在業(yè)生上常會(huì)使用________濃度－D對(duì)麥田進(jìn)行草死雜草的同時(shí)卻不會(huì)對(duì)小麥生長(zhǎng)造成害，原因_____________________________________________。從被－D污的土壤中到能降解－D的菌，從該菌中提取，構(gòu)建____________文庫(kù)進(jìn)一步獲目的基因。(3)PCR術(shù)擴(kuò)增的基因的程：含目的基因的DNA受熱變后解旋單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)然后________________酶作用進(jìn)行延伸如此重復(fù)循環(huán)次使目的基因量呈___________形式擴(kuò)。(4)個(gè)基因表達(dá)載體的組成中要有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中__________________。欲基因工程成與否，需進(jìn)行平的檢，有時(shí)還需進(jìn)行____________水平鑒定。答案(1)高不同植物對(duì)2,4－D的敏感程不同(2)cDNA(部基因)(3)熱定聚合(或Taq)

指數(shù)(4)是否含有目的基因

分子

個(gè)體生物學(xué)個(gè))解析(1)2,4－D生長(zhǎng)素類(lèi)物用不同植物對(duì)其敏感程度不同用其除麥田雜草(2)從工程菌中取RNA構(gòu)成的基因文是部分基文庫(kù)(文庫(kù)。(3)PCR技術(shù)用穩(wěn)定DNA聚合酶Taq酶)延伸多次環(huán)目的基因的量呈指數(shù)(2增長(zhǎng)(4)標(biāo)記基的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基欲知基因工成功與否需要進(jìn)行分子水平的檢有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)平的鑒定命題點(diǎn)二

基因工程與白質(zhì)的關(guān)的分析

3．(2015·全國(guó)Ⅱ40)已生物體內(nèi)一種蛋白質(zhì)(，該蛋質(zhì)是一種運(yùn)蛋白由305個(gè)基酸組成。果將P分子中158的絲氨變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺成苯丙氨，改變后的蛋白質(zhì)P)不但保P的功，而且有了酶的催化活性。回答下列問(wèn)題1(1)從述資可知，若要改變蛋白質(zhì)功能，可考慮對(duì)蛋質(zhì)的____________________進(jìn)行改造。(2)以P基因序列為礎(chǔ)，獲得P基因的途徑修飾________基因或合________基，所獲得1的基因表達(dá)遵循中心則的中法則的全部?jī)?nèi)容包括_____________的復(fù)制以及遺傳信息在不同分子間的流動(dòng)即：_____________________________________。蛋白質(zhì)工也被稱(chēng)為二代基因程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功出發(fā)，通________________________________________________________________________和____________________進(jìn)而確定相對(duì)的脫氧核酸序列據(jù)此獲基因再經(jīng)表達(dá)純化獲得蛋白質(zhì)之后還需對(duì)蛋白質(zhì)生物________行鑒定答案(1)氨酸序列結(jié)構(gòu))其他答案理也可(2)PPDNA和RNA(或傳物質(zhì)DNA→RNARNA→DNA、RNA蛋白質(zhì)(或轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄、翻1譯)(3)設(shè)蛋白的結(jié)構(gòu)

推測(cè)氨基酸列

功能解析(1)由干信息可知改蛋白質(zhì)功能可以過(guò)改變蛋質(zhì)的結(jié)構(gòu)來(lái)實(shí)現(xiàn)(2)依據(jù)蛋白質(zhì)工程的定及題中信可知，獲P因的徑有修飾現(xiàn)有(P)基因或合成新P)基因。中11法則的全部容包括DNA的復(fù)制，RNA的制、轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄和譯。(3)蛋白質(zhì)程的基本途徑：從預(yù)期白質(zhì)功能發(fā)→設(shè)計(jì)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核酸序列通過(guò)蛋白工程合成的蛋白質(zhì)還需要進(jìn)行生物活性的鑒定功能鑒定看是否達(dá)到人的需求。4．(2018·鞍山二模擬胰島可以用于治療糖尿病，但是胰島素注射到人后，會(huì)堆在皮下，并經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間才能入血液中，而進(jìn)入血液的胰島素又易被分解此療效果受到影。如圖是蛋白質(zhì)工設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程，請(qǐng)據(jù)回答有關(guān)題：構(gòu)建新的白質(zhì)模型蛋白質(zhì)工的關(guān)鍵，圖中構(gòu)建新的胰島素模型主要依據(jù)

________________________________________________________________________。(2)人合成DNA與________結(jié)合后，轉(zhuǎn)移到________________________中才能得到準(zhǔn)表達(dá)。(3)若利用腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素需用到的物工程有____________、____________和發(fā)酵工程。(4)圖中從的胰島素模型到新的胰素基因的本思路是么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)蛋質(zhì)的預(yù)期功能(2)載體

大腸桿菌等體細(xì)胞(3)蛋白質(zhì)程

基因工程(4)根據(jù)新的胰素中氨基的序列推測(cè)出其脫氧核苷酸序列然后利用合儀來(lái)合成新的胰島素基因解析(1)蛋質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人對(duì)蛋白質(zhì)能的特定求蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)，因此，圖中建新的胰素模型的據(jù)是預(yù)期胰島素，即速效胰島素的能。(2)工合成的的基因與載結(jié)合后，導(dǎo)入受體胞中才能得以表達(dá)。(3)利用蛋質(zhì)工程生產(chǎn)自然界中原本不存在的蛋質(zhì)對(duì)原有胰島素進(jìn)改造根據(jù)新的胰素中氨基酸序列推測(cè)其基因中的脫氧核苷序列工合成的胰島素基因得到目基因改造好目的基因通過(guò)基因程將其導(dǎo)入體細(xì)胞獲工程菌再用工程菌進(jìn)行發(fā)酵從獲取大量產(chǎn)因此該程涉及蛋白質(zhì)工程基因工程發(fā)酵工程(4)由的蛋質(zhì)模型到構(gòu)建新的基因其基本設(shè)思路是根據(jù)新的蛋質(zhì)中的氨酸序列推測(cè)出基因中的脫氧核苷酸序列然后用DNA合成儀直合成出新的基因考三DNA的提與定1．實(shí)驗(yàn)原理

2．操作流程1．DNA和蛋白在不同NaCl溶液的溶解度比較2mol/LNaCl溶0.14mol/LNaCl溶液

溶解規(guī)律

DNA

溶解

析出溶濃度從2mol/L降蛋白質(zhì)

部分發(fā)生鹽析沉淀

溶解低過(guò)程中，溶解度逐漸增大2.DNA粗提取鑒定實(shí)驗(yàn)的“、4、4”①加到雞血細(xì)胞液中，使血細(xì)胞吸水漲破；②加到含DNA的2mol/L加蒸餾水2次用紗布過(guò)濾4次用NaCl溶液4次問(wèn)題探究

的溶中使NaCl溶的質(zhì)的量濃度稀釋到0.14mol/L使DNA析①過(guò)濾血細(xì)胞破裂液，得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液；②過(guò)濾用mol/L的溶充分溶解的DNA去溶液中的雜質(zhì)濾取0.14mol/L的溶中析出的黏)；④過(guò)濾溶有DNA2mol/L的NaCl溶液①加2mol/L的NaCl溶解取的細(xì)胞核物質(zhì)用0.14mol/L的溶使析用mol/L的NaCl溶濾取的DNA黏稠物；④用2mol/L的溶液，溶解絲狀物用于鑒定DNA下圖為“DNA粗提取鑒定”實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作請(qǐng)仔細(xì)觀并分析：(1)操①和都是加入蒸餾水，其目一樣嗎？提示不樣。①是雞血細(xì)胞水漲破釋放出核物質(zhì)；④是稀釋NaCl液使其濃度接近0.14

mol·L1，除溶于低度NaCl溶液的雜。(2)操②中入酒精的目的是什么？時(shí)攪拌要意什么？提示②中加入精的目的析出DNA，除其中于酒精的質(zhì)，這時(shí)候攪拌要沿一個(gè)方向，輕緩的進(jìn)行(3)操③中粘稠物是如何獲取的？入2mol/LNaCl目的是什？提示黏物是經(jīng)過(guò)層紗布過(guò)獲得的；加入2mol/L的目的是使DNA再次溶。命題點(diǎn)DNA粗提與鑒定實(shí)驗(yàn)應(yīng)用1．下列關(guān)于DNA粗提取與定實(shí)驗(yàn)的述，正確的是()選項(xiàng)AB

試劑檸檬酸鈉溶液蒸餾水

操作與雞血混合與雞血細(xì)胞混合

作用防止血液凝固保持細(xì)胞形狀加入到溶解有的溶C

蒸餾水

析出蛋白質(zhì)中加入到過(guò)濾后含DNA的NaCl溶D

冷卻的酒精

產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)液中答案A解析蒸水與雞血胞混合的的是使紅細(xì)胞吸水漲破，釋放出核質(zhì)B項(xiàng)錯(cuò)；將蒸餾加入到溶解DNA的NaCl溶液中，目的是低DNA的解度初步析出DNAC項(xiàng)錯(cuò)加入冷卻酒精的的是進(jìn)一析出DNA，項(xiàng)錯(cuò)。2．實(shí)驗(yàn)中對(duì)DNA進(jìn)行鑒定，做如下作：試管A

B序號(hào)123

加2mol/L的NaCl溶mL不加加4mL二胺，混勻

加2mol/L的NaCl溶液5mL加入提取的絲物并攪拌加4mL二苯，混勻

4實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)結(jié)論

沸水浴min

沸水浴5min(1)根上圖完成表格空白處的實(shí)驗(yàn)容。(2)對(duì)B試管，完1、、3的操后溶液顏如何變化________________________________________________________________________。(3)在水浴加熱的目的是____________________________________________________________，時(shí)說(shuō)明DNA對(duì)高溫有較的__________。(4)A試管實(shí)驗(yàn)中作用是_________。(5)B試管溶液顏的變化程主要與________________________________有關(guān)。答案(1)溶不變藍(lán)色

溶液逐漸變色DNA沸水的情況下遇苯胺會(huì)被成藍(lán)色(2)溶液顏色基不變(3)快顏色反速度

耐受性(4)對(duì)(5)加入試中的DNA(狀物的多少解析B試管中含絲狀物A試中不含，其他條件均完全相同A、試管形成照。本實(shí)驗(yàn)強(qiáng)調(diào)反條件是沸浴加熱min，樣可加快顏色反應(yīng)的速度，觀察對(duì)兩試管的色時(shí)要等到冷卻后。矯易

強(qiáng)長(zhǎng)1．限制酶是一酶，而不一種酶。2．將一個(gè)基因DNA分子上切割來(lái)，需要切兩處，同時(shí)產(chǎn)生四個(gè)黏末端或平端。3．不同DNA分子用同一種制酶切割產(chǎn)生的末端都相同，同一個(gè)DNA分用不同的限制酶切

割，產(chǎn)生的端一般不同。4．限制酶切割點(diǎn)應(yīng)位于記基因之，不能破壞標(biāo)記基因，以便進(jìn)行檢。5．目的基因的入位點(diǎn)不隨意的：因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控所以目的因的插入位點(diǎn)應(yīng)在動(dòng)子與終子之間。6受體細(xì)胞選時(shí)需注意要合糖蛋白生物活的胰島素必須用真核生酵母菌需內(nèi)網(wǎng)、高爾基的加工、泌；一不用支原體，原因是它營(yíng)寄生生活一定不能哺乳動(dòng)物熟的紅細(xì)胞原因是它細(xì)胞核，能合成蛋白質(zhì)。1.制酶具特異性，一種限制只能識(shí)別特定的核苷酸序列，并在定的位點(diǎn)切割DNA分子。DNA連接的作用部是磷酸二鍵。2．質(zhì)粒是常用載體，它一種小型雙鏈環(huán)狀DNA分子具有一個(gè)多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)及標(biāo)記基因。3．基因表達(dá)載包括目的因、啟動(dòng)、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)。4．培育轉(zhuǎn)基因物時(shí)，受細(xì)胞必須受精卵；培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，受體胞可以是精卵，也可以是體胞。5．目的基因?qū)е参锛?xì)胞用農(nóng)桿菌化法；導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射術(shù)，導(dǎo)入生物細(xì)胞常用感受細(xì)胞法。6．目的基因到另一種生體內(nèi)能夠功表達(dá)的原理是所有生物共用一套傳密碼。重高

演模1．(2017·北京，5)為了增加花花色類(lèi)型，研究者從其他植物中克隆出花色因C(1)，將其與質(zhì)粒圖2)重組再借助農(nóng)菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與驗(yàn)?zāi)康牟坏氖?)A．用限制性核內(nèi)切酶RⅠ和連接構(gòu)建重組質(zhì)粒

B．用含C因的農(nóng)菌侵染菊愈傷組織，將C基導(dǎo)入細(xì)胞C．在培養(yǎng)基中加卡那霉，篩選被化的菊花細(xì)胞D．用分子雜交法檢測(cè)C基因是整合到菊花染色體上答案C解析由C基因兩端及質(zhì)粒均存在限制酶RⅠ的割位點(diǎn)，因，可采用制酶EcoRⅠ和DNA接酶構(gòu)重組質(zhì)粒A項(xiàng)確；含C基因農(nóng)桿菌侵菊花愈傷組織(即農(nóng)桿菌化法)，可以將C因?qū)爰?xì)，B項(xiàng)確；由于質(zhì)粒上存在潮霉素抗性基(記基因，因此可以在培養(yǎng)中添加潮素，篩選轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞，項(xiàng)錯(cuò)誤；用分子雜交法檢測(cè)C因是否整合到花染色體，項(xiàng)正確。2．(2017·國(guó)Ⅱ，38)幾丁質(zhì)許多真細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催幾丁質(zhì)水。通過(guò)基因工程幾丁質(zhì)酶因轉(zhuǎn)入植體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。答下列問(wèn)：(1)在行基工程操作時(shí)，若要從植體中提取丁質(zhì)酶的mRNA常選用葉而不選老葉作為實(shí)驗(yàn)材料原因是________________________________________________。提取RNA時(shí)，提取液中添加RNA酶抑制劑，目的是_____________________。(2)以mRNA為材料以獲得cDNA，其原理是________________________________________________________________________________________________________。(3)若使目基因在受體細(xì)胞中表達(dá)通過(guò)質(zhì)粒體而不能接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________(出兩即可)。(4)當(dāng)丁質(zhì)基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵__________________。(5)若得的基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)合到植物基因組中)真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法分析，其能的原因______________________________________________________________________________________________________________。答案(1)嫩中基因表達(dá)強(qiáng)烈，相應(yīng)mRNA多或嫩葉織細(xì)胞易碎

防止提取的mRNA被RNA酶降解(2)在逆錄酶的作下，以mRNA為模板按堿基互補(bǔ)對(duì)原則合成cDNA(3)粒載體中有動(dòng)子、終子，便于的基因的表達(dá)粒中有標(biāo)記基因便于篩；質(zhì)粒中有復(fù)制原點(diǎn)等(4)磷酸二酯鍵(5)幾質(zhì)酶基沒(méi)有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的有翻譯解析(1)由嫩葉組織細(xì)胞比老葉組細(xì)胞易破以適于作為取幾丁質(zhì)酶的mRNA實(shí)驗(yàn)材料于植物織中存在RNA酶能將RNA分解所以實(shí)驗(yàn)過(guò)程中添加RNA酶制劑以降低

22RNA酶的活性保護(hù)提取RNA不被分解。(2)以為材料得cDNA的程為轉(zhuǎn)錄，即以mRNA為模板以種脫氧核核苷酸為原，在逆轉(zhuǎn)酶的催化，遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，合成cDNA的過(guò)程(3)由目的因無(wú)復(fù)制原也無(wú)基因達(dá)所需的動(dòng)子和終止子所以需與質(zhì)粒構(gòu)建組質(zhì)粒后導(dǎo)入受體胞。(4)DNA接酶可催化兩個(gè)片段的性末端或平末端連接形磷酸二酯。幾丁質(zhì)酶基因已整合到植的基因組，但是植株抗真菌病的能力沒(méi)有提從心法則度分析可能是轉(zhuǎn)基植株細(xì)胞中幾丁質(zhì)酶基沒(méi)有轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄的mRNA沒(méi)有譯導(dǎo)致。3唐山期科學(xué)家通過(guò)利用PCR定點(diǎn)突變技改造Rubisco酶基因高了合作用過(guò)程中Rubisco酶對(duì)CO的親和，從而顯著高了植物光合作用率。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)PCR程所依的原理是___________________，利技擴(kuò)增目的基的前提是有一段已知目基因的核酸序列，便根據(jù)這一序列合成__________擴(kuò)增程需要加入__________________酶。(2)啟子是段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，作用是。的基因能在不生物體內(nèi)常表達(dá)原的蛋白質(zhì)，說(shuō)明整個(gè)生物界___________________PCR點(diǎn)突變技術(shù)于___________________的范疇。(3)可用定突變的DNA構(gòu)基因表達(dá)載體。常用____________________法將基因達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞還需用到物細(xì)胞工中的____________________技術(shù)最終獲轉(zhuǎn)基因植物。答案(1)DNA雙復(fù)制

引物

耐高溫的DNA聚合(或DNA聚合)(2)RNA聚合酶識(shí)別結(jié)合的部位驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)出mRNA

共用一套密子

蛋白質(zhì)工程(3)農(nóng)菌轉(zhuǎn)化

植物組織培養(yǎng)解析(1)PCR依據(jù)原理是DNA雙鏈復(fù)，在用PCR技術(shù)增目的基前要依據(jù)一段已知目的基因的脫氧苷酸序列成引物擴(kuò)增過(guò)程需要加入耐高溫的DNA聚合(或DNA聚合)酶(2)啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)和結(jié)合的位驅(qū)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA生界共用一遺傳密碼所以目的基可以在不細(xì)胞內(nèi)表合成相同蛋白質(zhì)。(3)常用桿菌轉(zhuǎn)化將基因表載體導(dǎo)入植物細(xì)胞借助于植組織培養(yǎng)術(shù)，獲得轉(zhuǎn)基因植物。4．(2017·慶一中)鐮刀型細(xì)胞血癥是一種單基因遺傳病，患者的紅蛋白分β－肽鏈第6氨基酸氨酸被纈酸代替，導(dǎo)致功能異常?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)異血紅白的氨基酸序列改變的本原因是碼血紅蛋基因的________________序列發(fā)生改變。(2)將常的紅蛋白基因?qū)牖颊叩乃柙煅砂校珊铣烧Ｑt蛋白達(dá)到治療的

目的。此操作________________(填“屬于”或“不屬于蛋白工，由是該操________________________________________________________________________。(3)用因工方法制備血紅蛋白時(shí)，先提取早紅細(xì)胞中____________以其作模板，在____________酶的作下反轉(zhuǎn)錄合cDNA。cDNA與載需在限制和________________酶作用下，構(gòu)基因表達(dá)體，導(dǎo)入體菌后進(jìn)行表達(dá)。檢測(cè)體菌是否合成血紅白，可從受體菌中提取____________，用相的抗體進(jìn)行______________雜交，出現(xiàn)雜交帶則表明該體菌已合血紅蛋白答案(1)堿對(duì)(或脫核苷酸(2)不屬于

沒(méi)有對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)改造(或沒(méi)有對(duì)因進(jìn)行修飾(3)mRNA(或RNA)

逆轉(zhuǎn)錄DNA接(4)白質(zhì)抗原—抗體解析(1)編血紅蛋白的基因中因堿對(duì)的替換致編碼的基酸種類(lèi)變蛋質(zhì)工程通過(guò)基因修或基因合實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有白質(zhì)的改造或制造出新的蛋白質(zhì)此作不屬于白質(zhì)工程。(3)因血紅蛋基因只在期紅細(xì)胞中表達(dá)，所以可從其中提取mRNA，mRNA為板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下，轉(zhuǎn)錄合成cDNA。構(gòu)建基因表達(dá)體需要限酶和DNA連接(4)目基因是否表可以通過(guò)受體菌中取蛋白質(zhì)，進(jìn)行抗原—抗體雜交實(shí)加以判斷1．如圖是利用因工程技培育轉(zhuǎn)基植物生產(chǎn)可食用疫苗的部分過(guò)程示圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、RⅠ、Ⅰ四種限制核酸內(nèi)切酶。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．圖示過(guò)程是因工程的心步驟B．表達(dá)載體構(gòu)時(shí)需要用限制酶SmaⅠC．抗卡那霉素因的存在利于將含抗原基因的細(xì)胞篩選出來(lái)D．除圖示組成，表達(dá)載中還應(yīng)該有啟動(dòng)子和終止子等結(jié)構(gòu)答案B解析圖過(guò)程為基表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程是基工程中的核心步驟構(gòu)建程中需要目的

基因完整切下來(lái)，此要用到限酶Ⅰ、EcoRⅠ。抗卡那霉素基因是標(biāo)基因，目是便于鑒定和篩含有目的因的細(xì)胞表載體包括啟動(dòng)子的基因子和標(biāo)記因等。2．下列關(guān)于限酶的敘述，錯(cuò)誤的()A．它能在特定點(diǎn)切割DNA分子B．同一種限制切割不同DNA分子產(chǎn)生的黏末端能夠很好地進(jìn)行堿配對(duì)C．它能任意切DNA，而產(chǎn)大量DNA片段D．每一種限制只能識(shí)別定的核苷序列答案C解析限酶是基因程的重要具之一種限酶只能識(shí)別特定的核苷序列在特定的位點(diǎn)上切割DNA分；同一種制酶切割不同的DNA分子產(chǎn)的黏性末端進(jìn)行互補(bǔ)對(duì)。3．(2018·安鐵一學(xué)月考)將目的基因入玉米莖分生區(qū)細(xì)和小鼠受精卵，應(yīng)分別采用的方法是()A．顯微注射技

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化B．基因槍法

花粉管通道C．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

顯微注射技D．基因槍法

顯微注射技答案D解析玉是單子葉物，對(duì)單葉植物來(lái)說(shuō)，常用的方法是基因槍對(duì)于物細(xì)胞來(lái)常用的方法是微注射技。4．圖1、2分別為DNA的提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖，下敘述不正的是()A．圖1、2中加蒸餾水稀釋的目的相同

B．圖1中完過(guò)濾之后保留濾液C．圖2中完過(guò)濾之后棄去濾液D．在圖1血細(xì)胞中加入少嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)答案A解析A項(xiàng)錯(cuò)，圖12中加入蒸餾稀釋的目分別是破細(xì)胞獲取DNA濾液；稀釋溶液，析出DNA；項(xiàng)對(duì)，圖1濾之后留濾液，濾液中含DNA；項(xiàng)，圖2濾之后去濾液，因DNA已出；項(xiàng)，嫩肉粉中的蛋白酶可對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行水解。5．抗菌肽對(duì)治癌癥有一的作用，圖表示抗菌肽合成過(guò)程。相關(guān)說(shuō)法確的是)A．用PCR克隆目基因不要DNA解旋酶B．基因表達(dá)載包含起始碼和終止碼C．用顯微注射導(dǎo)入基因達(dá)載體D．篩選菌種時(shí)基因探針測(cè)相關(guān)蛋質(zhì)答案A解析PCR術(shù)中采的是高溫變性，因此用克目的基不需要DNA旋酶，正確基因表達(dá)載包含啟動(dòng)和終止子而起始密碼和終止密碼在mRNA上，項(xiàng)錯(cuò)誤；基因表達(dá)載體導(dǎo)入酵菌細(xì)胞時(shí)用感受態(tài)胞法，項(xiàng)錯(cuò)誤篩選菌種時(shí)用基因探針測(cè)相關(guān)基或mRNA，不能基因探針測(cè)蛋白質(zhì)D項(xiàng)誤。6．(2017·州第四質(zhì)檢利用因工程技術(shù)培育馬鈴薯新品種，目已經(jīng)取得碩成果。根據(jù)教材所知識(shí)回答列問(wèn)題：(1)馬薯易多種疾病其產(chǎn)量不導(dǎo)入抗病因并使其達(dá)可以提高馬鈴薯產(chǎn)量，基因工程中用最多的病基因是____________________和病毒的復(fù)酶基因。(2)馬薯是子葉植物，常用________________(方法將目的因?qū)腭R鈴薯受體細(xì)胞中。構(gòu)建好的基因達(dá)載體基結(jié)構(gòu)包括的基因、標(biāo)記基因________________________等五部分。(3)科家還育出抗除草劑的轉(zhuǎn)基因鈴薯，其計(jì)方法：飾除草劑用的靶蛋白，使其對(duì)除草劑________(“敏感或“不敏感)，使靶蛋白量表達(dá)，物吸收除草劑后仍能________。(4)將的基導(dǎo)入受體細(xì)胞后，還需轉(zhuǎn)基因植進(jìn)行_

答案(1)病外殼蛋白基因(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

啟動(dòng)子

終止子

復(fù)制原點(diǎn)(3)敏感

正常代謝(4)目基因的測(cè)與鑒定解析(1)在基因程中，使用最多的抗病因是病毒殼蛋白基和病毒的復(fù)制酶基因。(2)常用農(nóng)桿菌化法將目基因?qū)脞徥淼入p子葉植物的受體細(xì)胞中建好基因表達(dá)體的基本結(jié)構(gòu)包目的基因標(biāo)記基因終止子、啟動(dòng)子和復(fù)制原點(diǎn)等五部。(3)培育抗草劑的轉(zhuǎn)基因馬鈴需通修飾使除劑作用的靶蛋白對(duì)除草劑不敏感，或靶蛋白過(guò)表達(dá)使植物吸收除草后仍能正代謝。(4)將目的因?qū)塍w細(xì)胞后，還需對(duì)轉(zhuǎn)基植物進(jìn)行的基因的檢測(cè)與定。7．(2017·陽(yáng)監(jiān)測(cè)歐洲哥廷根型豬因其器官大小、結(jié)構(gòu)和生理特等方面與的器官極相似，已經(jīng)為國(guó)際上想的異種官移植的研究材料。目前，歐洲哥根小型豬為糖尿病心臟病金氏癥等重人類(lèi)疾病新藥研究的動(dòng)物模型也得了全世界醫(yī)管理機(jī)構(gòu)認(rèn)可。(1)異器官植到人體內(nèi)會(huì)發(fā)生______________而使源器官難以活解決一難題，必須設(shè)法除醫(yī)用小型的_______________基因，或抑制該基因的________。(2)向型豬入外源基因時(shí)，其受體胞通常是_導(dǎo)入方是_。(3)要轉(zhuǎn)基成功的醫(yī)用小型豬進(jìn)行大培養(yǎng)，采用的技手段是_______。(4)利基因程技術(shù)，可以獲得乳汁含有藥用白的動(dòng)物這種動(dòng)物______________。為了獲得該動(dòng)需________基因與________基因啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組一起構(gòu)建因表達(dá)載體。答案免疫排反應(yīng)

抗原決定

表達(dá)受精卵

顯微注射技隆或核移植”)(4)乳腺(乳房生物反器

藥用蛋白

乳腺蛋白解析(1)異器官移植會(huì)引起人體內(nèi)生免疫排反應(yīng)。為決此問(wèn)題需去除小型豬體內(nèi)表達(dá)抗原的基，或抑制抗原基因表達(dá)。(2)基因工程中常用動(dòng)物受體細(xì)胞是受精卵，因?yàn)槭芫讶芨?，通常用顯微注技術(shù)將目的基因?qū)胧芫选?3)對(duì)轉(zhuǎn)基因成功的型豬擴(kuò)大培養(yǎng)，可用克隆核移)技術(shù)。(4)能從其乳中獲取含藥用蛋白動(dòng)物稱(chēng)為乳腺(乳房生物反應(yīng)器獲得該種物需將藥蛋白基因和乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子調(diào)控組件組在一起構(gòu)建基因表載體。8．某實(shí)驗(yàn)室通基因工程功培育出蟲(chóng)植物，其培育過(guò)程大致如圖所示請(qǐng)據(jù)圖分回答下列問(wèn)題：

抗蟲(chóng)植物的培過(guò)中，目的基因是__