液相色譜實(shí)驗(yàn)報(bào)告

創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天華南師范大年夜學(xué)實(shí)驗(yàn)陳述之老陽三干創(chuàng)作創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天液相色譜剖析混淆樣品中的苯和甲苯一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握高效液相色譜定性和定量剖析的原理及方法；2、了解高效液相色譜的結(jié)構(gòu)、原理及把持技術(shù).二、實(shí)驗(yàn)原理高效液相色譜由儲(chǔ)液器,泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部份構(gòu)成,儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi),因?yàn)闃悠啡芤褐械母鹘M分在兩相中擁有分歧的分派系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng),經(jīng)過頻頻頻頻的吸附—解吸的分派過程,各組分在挪動(dòng)速度上發(fā)生較大年夜的分歧,被分別成單個(gè)組分挨次從柱內(nèi)流出,經(jīng)過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被變換成電信號(hào)傳遞到記錄儀.三、主要儀器和試劑主要儀器：島津液相色譜儀(LC-10AT)[配有紫外檢測(cè)器,PhenomenexODS柱]；10μL微量注射器創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天試劑：苯標(biāo)準(zhǔn)溶液：10.0μL/mL；甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液：10.0μL/mL；苯、甲苯混淆標(biāo)準(zhǔn)溶液：1；甲醇：80%；苯和甲苯混淆待測(cè)溶液；四、實(shí)驗(yàn)步伐1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制系列用100μL的微量注射器分別量取10μL、20μL、50μL、100μL的苯和甲苯的混淆標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0μL/mL）,再分別加入90μL、80μL、50μL、0μL甲醇將其稀釋,作為待測(cè)液,其濃度分別為1μL/mL、2μL/mL、5μL/mL、10μL/mL2、色譜條件優(yōu)化①按把持規(guī)程開機(jī),并調(diào)好色譜條件,使儀器處于工作狀態(tài).控制流動(dòng)相流速為甲醇：0.8mL/min、水：0.2mL/min；柱溫30℃；檢測(cè)波長254nm；察看記錄保存時(shí)間,經(jīng)過軟件剖析兩峰分別成效.②改變色譜條件,控制流動(dòng)相流速為甲醇：0.95mL/min、水：0.05mL/min；柱溫30℃；檢測(cè)波長254nm；察看記錄保存時(shí)間,經(jīng)過軟件剖析兩峰分別成效.創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天③經(jīng)過察看兩種色譜條件下的峰分別成效,選擇最正確的色譜條件.若還不可以抵達(dá)最正確的分別成效,能夠再設(shè)定分歧的色譜條件,而后依據(jù)峰分別成效,選擇最正確的色譜條件.3、苯、甲苯定性剖析在最正確條件下,待基線走穩(wěn)后,用10μL微量注射器分別進(jìn)樣5μL苯和甲苯混淆待測(cè)溶液,5μL苯標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0μL/mL）和5μL甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0μL/mL）(微量注射器用甲醇潤洗3～5遍),察看并記錄色譜圖上顯示的保存時(shí)間,確立苯和甲苯的峰.4、苯、甲苯定量剖析最正確條件下,待基線走穩(wěn)后,用10μL微量注射器分別進(jìn)樣1.0μL/mL、5μL.察看并記錄各色譜圖上的保存時(shí)間和峰面積.繪制苯和甲苯混淆標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積與相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線.5、苯和甲苯混淆待測(cè)溶液剖析最正確條件下,待基線走穩(wěn)后,用10μL微量注射器進(jìn)樣苯和甲苯混淆待測(cè)液5μL,察看并記錄各色譜圖上的保存時(shí)間和峰面積.依據(jù)峰面積在工作曲線上查出苯和甲苯待測(cè)液的濃度,并計(jì)算試樣中苯和甲苯的含量.五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及剖析創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天高效液相色譜數(shù)據(jù)陳述一、色譜條件優(yōu)化μV(x100,000)2.0色譜1.595%1.080%0.50.0min二、定性剖析苯三、定分

樣品苯甲苯量保存時(shí)間析苯、甲苯混淆標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度分別為：1ul/ml,2ul/ml,5ul/ml,10ul/ml.10ul/ml苯甲苯面積(x1,000,000)面積(x1,000,000)2.03.01.52.51ul/ml2.01.01.50.51.00.50.0濃度0.07.50.0濃度濃度峰面積濃度峰面積1ul/ml2126851ul/ml3877102ul/ml4292912ul/ml7479835ul/ml9545375ul/ml153389210ul/ml190534310ul/ml2928373Y=aX+bY=aX+b創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天四、未知樣品濃度未知樣品苯甲苯濃度2濃度12.9ul/ml六、實(shí)驗(yàn)議論①因?yàn)閷?shí)驗(yàn)中待測(cè)溶液的組分只有苯和甲苯兩種物質(zhì),組分比力簡(jiǎn)單,只需在實(shí)驗(yàn)過程中,嚴(yán)格控制且定量進(jìn)樣,就能采用把持、計(jì)算簡(jiǎn)易的標(biāo)準(zhǔn)曲線法得出正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法.若采用歸一化法或內(nèi)標(biāo)法,固然能獲取正確更高的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,但因?yàn)閷?shí)驗(yàn)把持及計(jì)算均較為復(fù)雜,實(shí)驗(yàn)及數(shù)據(jù)處理的時(shí)間長,效率相對(duì)不高,故實(shí)驗(yàn)中采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法作為定量的方法.②最正確色譜條件的選擇是本實(shí)驗(yàn)正確度的重點(diǎn).若苯與甲苯的峰分別成效過小,苯與甲苯的峰未能完整分別,一定影響其保存時(shí)間和峰面積的計(jì)算,是實(shí)驗(yàn)正確度減小,數(shù)據(jù)偏差加大年夜；若苯與甲苯的峰分別成效過好,固然能將苯與甲苯的峰完整分別,實(shí)驗(yàn)正確度好,但是耗資的實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長,效率不好.因此,應(yīng)選擇適合的色譜條件.創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天創(chuàng)作時(shí)間：二零二一年六月三十天③為了提升標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合度,能夠重復(fù)進(jìn)樣頻頻,