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文檔簡介
2.2動物細(xì)胞工程2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)知識導(dǎo)圖韌培襄動艙和枝應(yīng)焙器細(xì)植克休嵇Jltift物榜術(shù)訪動#,技媵-知識導(dǎo)圖韌培襄動艙和枝應(yīng)焙器細(xì)植克休嵇Jltift物榜術(shù)訪動#,技媵-I祗卷,瑾兼件,應(yīng)用三贏建植概念:像她祀枝密植的過程學(xué)法指導(dǎo)[應(yīng)用前景及存在的問國l構(gòu)莖動物細(xì)胞培養(yǎng)的i流程圖.區(qū)分原代培赤和傳i代培耙.理解時物甑.胞康.養(yǎng)的i#條件,北其是需加勃物也精濯的目的、C5的作用等;ip.結(jié)合高產(chǎn)彬牛的克性:過程.住捏動朝俅細(xì)胞枝裱!殖技術(shù)O訪翰細(xì)施培養(yǎng)的過程和條i件,動物體相胞核移植的過程、|克隆動物的特征與應(yīng)用等是高i恚考森的空點(diǎn)7試掘中常擠動;物細(xì)胞培養(yǎng)與植物期蛆培養(yǎng)比|程相比較,將敵材班胞睛養(yǎng)的!條件與克窿動物的奇宵及其應(yīng)i用相結(jié)合進(jìn)行考查.充分俅理i科學(xué)黑珍和社身責(zé)住第生物學(xué)!核心素裁。士課堂探究破重難, 本欄目通過課堂陪冗動T好叫.剖析難點(diǎn).全線突觸知識點(diǎn)一動物細(xì)胞培養(yǎng)?研讀教材夯基礎(chǔ).動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。.動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程取動物 剪碎一單個加培養(yǎng)液,細(xì)胞組織塊胰蛋白酶或膠原蛋百面處1鏟細(xì)胞 *懸液原代培養(yǎng),細(xì)胞貼咦蛋目酶或一細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞T壁生長膠原蛋白酶斑直懸液 T群體說明:胰蛋白酶的作用是消化細(xì)胞間的蛋白,使組織分散成單個細(xì)胞。.動物細(xì)胞培養(yǎng)中的相關(guān)概念(1)細(xì)胞貼壁:將培養(yǎng)液中分散的動物細(xì)胞放入培養(yǎng)瓶中,置于適宜的條件下培養(yǎng),細(xì)胞很快會貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。(2)接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時,細(xì)胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。注意:①打破接觸抑制現(xiàn)象的方法:將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。②癌變細(xì)胞沒有接觸抑制現(xiàn)象。(3)原代培養(yǎng):將動物組織通過酶或機(jī)械方法分散成單個細(xì)胞后進(jìn)行的初次培養(yǎng)。(4)傳代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長、繁殖一定時間后,由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭,影響細(xì)胞的生長,因此需要重新用胰蛋白酶等處理,進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng),即傳代培養(yǎng)。(5)細(xì)胞株:細(xì)胞培養(yǎng)過程中存活10代到40?50代的傳代細(xì)胞。(6)細(xì)胞系:動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中存活超過50代的細(xì)胞,這時細(xì)胞帶有癌變特點(diǎn),能在培養(yǎng)條件下無限分裂下去。.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具要進(jìn)行無菌處理;通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染;應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。(2)營養(yǎng):主要有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。在使用含有上述成分的合成培養(yǎng)基時,通常需加入血清、血漿等天然成分。(3)溫度和pH:哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜,多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7?2?7?4。(4)氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。.動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用(1)生產(chǎn)有重要價值的生物制品,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。(2)獲取基因工程的受體細(xì)胞。(3)用于檢測有毒物質(zhì)及其毒性。(4)用于生理、病理、藥理等方面的研究,如用于篩選抗癌藥物等,為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)。跟隨名師解疑難植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)的異同
比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)別原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基固體或半固體培養(yǎng)基,包括礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、瓊脂、植物激素等液體培養(yǎng)基,包括無機(jī)鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸、動物血清等培養(yǎng)條件再分化階段需先不需光細(xì)胞來源離體植物器官、組織或細(xì)胞胚胎或幼齡動物組織、器官結(jié)果獲得新個體或細(xì)胞產(chǎn)品大量產(chǎn)生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物用途①快速繁殖名貴花卉和果樹②培養(yǎng)無病毒植株、轉(zhuǎn)基因植物③大規(guī)模生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品如藥物、食品添加劑、香料、色素等①生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等②檢測有毒物質(zhì)③研究生理、藥理、病理相同點(diǎn)①都需要人工條件下的無菌操作,無菌培養(yǎng)②都是合成培養(yǎng)基③都需要適宜的溫度、pH等條件④都進(jìn)行有絲分裂【典題精練1】關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B.將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個細(xì)胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離,制成細(xì)胞懸液D,動物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右,如繼續(xù)培養(yǎng),細(xì)胞會衰老死亡【解析】選取胚胎或幼齡動物的器官或組織是因?yàn)樗鼈兊姆至涯芰^強(qiáng)。動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),易被胰蛋白酶催化分解,從而使細(xì)胞分離開來。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時細(xì)胞就會停止分裂增殖,需要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,配成細(xì)胞懸液。動物細(xì)胞培養(yǎng)傳至50代左右,部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)會發(fā)生改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),能在培養(yǎng)條件下無限制地分裂下去?!敬鸢浮緿解題歸納(1)植物組織培養(yǎng)可獲得新個體,體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性,而動物細(xì)胞培養(yǎng)只能得到細(xì)胞,沒有體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。(2)植物組織培養(yǎng)中需要加入植物激素等促生長因子,而動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需要加入血清、血漿?!镜漕}精練21下列關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的敘述正確的是()A.動物細(xì)胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是動物受精卵B.動物細(xì)胞培養(yǎng)液中需要O2,不需要CO2C.細(xì)胞系在實(shí)驗(yàn)室中被廣泛應(yīng)用是因?yàn)槠溥z傳物質(zhì)保持了長時間的穩(wěn)定D.動物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理【解析】動物細(xì)胞培養(yǎng)大都取自動物胚胎或剛出生不久動物的組織或器官;動物細(xì)胞培養(yǎng)液中需要適量的CO2,以維持培養(yǎng)液的pH;細(xì)胞系的細(xì)胞遺傳特征發(fā)生變化,具有無限增殖的特點(diǎn);用胰蛋白酶處理使動物細(xì)胞分散,不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。【答案】D知識點(diǎn)二動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物
研讀教材夯基礎(chǔ).動物核移植的概念將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。哺乳動物核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。.體細(xì)胞核移植的過程取具有優(yōu)良性狀 ^細(xì)胞_J共體個體的供體細(xì)胞—"培養(yǎng)"細(xì)胞|一細(xì)胞_構(gòu)建重收集卵巢,采―—體外逑數(shù)曼[生去核的卵,T融合一^且胚胎集卵母細(xì)胞T培養(yǎng)分裂中期T母細(xì)胞得到克隆動物(與供體的.
得到克隆動物(與供體的.
遺傳物質(zhì)基本相同)*移入受體(代孕)母體內(nèi)注意:動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植,因?yàn)榕c胚胎細(xì)胞相比,動物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難。.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)中的注意點(diǎn)(1)受體細(xì)胞一般選用卵母細(xì)胞,因?yàn)槁涯讣?xì)胞體積大,易操作,而且含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。(2)動物體細(xì)胞核移植產(chǎn)生的新個體的親本有三個:體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體、代孕母體。新個體細(xì)胞核基因型與體細(xì)胞核供體完全一樣,因此新個體性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。代孕母體沒有為新個體提供遺傳物質(zhì),新個體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系。(3)用核移植技術(shù)得到的動物,并不是對體細(xì)胞供體的動物進(jìn)行100%的復(fù)制,因?yàn)榭寺游锝^大部分DNA來自供體細(xì)胞,但其細(xì)胞質(zhì)中還有少量DNA,即線粒體中的DNA是來自受體卵母細(xì)胞的。此外,動物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境也有很大關(guān)系。4.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景(1)加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育;(2)增加瀕危動物的存活數(shù)量;(3)生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;(4)用于組織器官的移植(由轉(zhuǎn)基因克隆動物提供或由人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成的組織、器官提供);(5)用于科學(xué)研究。5.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題(1)成功率非常低;(2)克隆動物存在健康問題;(3)克隆動物食品的安全性存在爭議等。跟隨名師解疑難克隆動物的遺傳物質(zhì)的兩個來源(1)核遺傳物質(zhì)來源于供核細(xì)胞。(2)細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來源于提供細(xì)胞質(zhì)的細(xì)胞?!镜漕}精練3】實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()實(shí)驗(yàn)小鼠三皮膚組織三皮膚細(xì)胞懸液旦細(xì)胞群體1工細(xì)胞群體2A.甲過程需要對實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B.乙過程需要用胰蛋白酶等處理皮膚組織,使細(xì)胞分散開C.丙過程表示原代培養(yǎng),該過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.丁過程表示傳代培養(yǎng),細(xì)胞不能保持正常的二倍體核型【解析】離體動物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境,甲過程表示從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織,該過程需要對小鼠進(jìn)行消毒,A正確;皮膚細(xì)胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶等處理皮膚組織使細(xì)胞分散開,并制成細(xì)胞懸液,B正確;丙過程表示原代培養(yǎng),該過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,C正確;丁過程表示傳代培養(yǎng),該過程中少部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生變化,但其他細(xì)胞能保持正常的二倍體核型,D錯誤?!敬鸢浮緿解題歸納本題題干給出兩個重要信息:①小鼠皮膚細(xì)胞,屬于高等哺乳動物細(xì)胞,通常為有限細(xì)胞系,而連續(xù)細(xì)胞系大多數(shù)具有異倍體核型;②非克隆培養(yǎng)即不是從單個細(xì)胞開始進(jìn)行的動物細(xì)胞培養(yǎng),而未經(jīng)克隆化的細(xì)胞系具有異質(zhì)性?!镜漕}精練4】如圖表示動物體細(xì)胞核移植與克隆動物的相關(guān)圖解,下列有關(guān)敘述錯誤的是()供體細(xì)胞①f細(xì)胞培養(yǎng)--供體細(xì)胞注入I\電剌激融合事蛆③-代至克隆采集卵培養(yǎng)至②期手楊_尹松)的/分一:發(fā)育尸胚胎—"母體—動物什刑州 母細(xì)胞A.圖示過程說明高度分化的動物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性B.用于核移植的供體細(xì)胞①一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到的②期表示減數(shù)第二次分裂后期D.選用去核的卵母細(xì)胞的主要原因是其細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得以體現(xiàn)【解析】圖中顯示的是利用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程,說明高度分化的動物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性,A正確;用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,原因是此種細(xì)胞能保持正常的二倍體核型,B正確;圖中采集到的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,C錯誤;動物體細(xì)胞核移植時常選用去核的卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞,除卵母細(xì)胞體積大、易操作、能提供營養(yǎng)物質(zhì)外,更主要的是去核的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得以體現(xiàn),D正確?!敬鸢浮緾4課堂對點(diǎn)達(dá)標(biāo)繼_/ 科目通過課堂自主達(dá)標(biāo),巧姊經(jīng)哌蟀基提他.全麗提升一、選擇題1.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中,錯誤的是(C)A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞多取自動物胚胎或幼齡動物的組織或器官B.培養(yǎng)過程中需要使用胰蛋白酶等,獲得離散的細(xì)胞C,動物細(xì)胞培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)液的組成成分相同D.動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)解析:動物細(xì)胞培養(yǎng)液中一般要加動物血清。.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。下圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。不能從該圖獲得的結(jié)論是(A)細(xì)臀 癌細(xì)胞(方血清)癌細(xì)胞(無血清)一正常細(xì)胞t有血清〕曲二 正常細(xì)胞(無血清)培養(yǎng)時間血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)的影響A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C?培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大解析:本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)所需要的條件和坐標(biāo)曲線的識圖能力。在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要添加一定量的血清。從坐標(biāo)曲線我們可以看出:正常細(xì)胞在有血清的情況下細(xì)胞數(shù)目多于沒有血清的情況,癌細(xì)胞在有血清的情況下細(xì)胞數(shù)目多于沒有血清的情況但差值不太大;在相同培養(yǎng)條件下癌細(xì)胞的數(shù)目多于正常細(xì)胞數(shù),說明癌細(xì)胞增殖速率高于正常細(xì)胞。.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(D)A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)解析:本題考查動物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆等知識點(diǎn),意在考查考生對動物細(xì)胞培養(yǎng)知識的理解。由于接觸抑制,培養(yǎng)的動物細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁貼壁生長,只能形成單層細(xì)胞,A錯誤;未經(jīng)克隆化的細(xì)胞系具有異質(zhì)性,經(jīng)過克隆以后的細(xì)胞的后裔細(xì)胞群,由于來源于一個共同的祖細(xì)胞,稱為純系,其遺傳性狀均一,故基因型相同,B錯誤;二倍體細(xì)胞通常為有限細(xì)胞系,連續(xù)細(xì)胞系可認(rèn)為是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型,C錯誤;惡性細(xì)胞系屬于連續(xù)細(xì)胞系,具有異體致瘤性,可進(jìn)行傳代培養(yǎng),D正確。.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述中,錯誤的是(C)A.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)應(yīng)保證無菌無毒的環(huán)境B.動物細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)液中應(yīng)添加動物血清C,經(jīng)細(xì)胞核移植培育出的新個體只具有一個親本的遺傳物質(zhì)D.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)可以獲得用于器官移植的供體器官解析:本題考查細(xì)胞工程的含義。細(xì)胞核移植是將供體細(xì)胞的核移植入受體細(xì)胞的去核細(xì)胞質(zhì)中,該重組細(xì)胞獲得的遺傳物質(zhì)來自兩部分,一部分來自于供體核物質(zhì),一部分來自于受體細(xì)胞質(zhì),所以將來發(fā)育成的個體具有兩個親本的遺傳物質(zhì)。ABD選項(xiàng)從不同的角度闡述了動物細(xì)胞培養(yǎng)所需要的條件和體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用。.關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中,正確的是(D)A.細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中.動物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、生長素和動物血清等C,動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的只是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白D.動物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理解析:細(xì)胞癌變發(fā)生在傳代培養(yǎng)時;生長素是植物激素,不能用于動物細(xì)胞培養(yǎng);動物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白,也可用于檢測有毒物質(zhì)等;動物細(xì)胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)將組織分散成單個細(xì)胞,動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中為防止接觸抑制,也需要用胰蛋白酶將細(xì)胞分散開來。6.動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是(A)A,動物細(xì)胞培養(yǎng)是培養(yǎng)單個細(xì)胞,植物組織培養(yǎng)是培養(yǎng)組織B.動物細(xì)胞培養(yǎng)可以傳代,而植物組織培養(yǎng)不能傳代C,動物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同D.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變,而植物組織培養(yǎng)不能解析:動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)都有細(xì)胞分裂過程,因而細(xì)胞與組織均能傳代。二者所用培養(yǎng)基的成分大致相同,都有營養(yǎng)物質(zhì),但也有成分不同,如動物細(xì)胞培養(yǎng)有血清,而植物組織培養(yǎng)不需要血清。植物組織培養(yǎng)過程中,由于受外界環(huán)境條件的影響,細(xì)胞分裂時也可能發(fā)生基因突變、染色體變異而引起遺傳物質(zhì)改變。植物組織培養(yǎng)一般用分生組織培養(yǎng)。7.在克隆牛的過程中,需要將甲牛的去核卵母細(xì)胞與乙牛的體細(xì)胞核重組形成重組細(xì)胞,將此細(xì)胞培養(yǎng)至胚胎發(fā)育的早期,然后移入代孕母牛的體內(nèi),最后即可得到克隆動物。下列關(guān)于克隆動物的敘述,錯誤的是(D)A.克隆技術(shù)利用了動物細(xì)胞核的全能性B.代孕母牛與所獲得的克隆牛之間不存在真正意義上的親子代關(guān)系C,該過程體現(xiàn)的方法為拯救瀕危動物提供了一種新思路D.核供體相同的克隆動物之間若進(jìn)行器官移植,則會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)解析:核移植技術(shù)培育動物個體的原理是利用動物細(xì)胞核的全能性;因?yàn)榇心概2]有將遺傳物質(zhì)傳給克隆牛,故從遺傳學(xué)角度來說,它們之間并沒有親子代關(guān)系;核移植(克隆)技術(shù)的應(yīng)用之一是拯救瀕危物種,擴(kuò)大其種群數(shù)量;核供體相同的克隆動物的核遺傳物質(zhì)并沒有差別,若進(jìn)行器官移植則不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。8.下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,不正確的是(C)A.培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和血清.傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代后就不易傳下去了C,動物細(xì)胞培養(yǎng)一般都能夠傳到40?50代,但其遺傳物質(zhì)均發(fā)生了改變D.動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身的健康細(xì)胞解析:動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等,通常還需加入血清、血漿等一些天然成分,A正確。傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代后就不易傳下去了,一般來說,細(xì)胞在傳至10?50代時,增殖會逐漸緩慢,以至于完全停止,這時部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會發(fā)生變化,當(dāng)繼續(xù)傳代培養(yǎng)時,少部分細(xì)胞會發(fā)生突變,獲得不死性,B正確、C錯誤。動物細(xì)胞可以用于檢測有毒物質(zhì)、判斷某種物質(zhì)的毒性,此外還可以獲得大量自身健康細(xì)胞,D正確。.下列對動物核移植技術(shù)的描述不正確的是(C)A.體細(xì)胞核移植過程中通常采用去核的Mil期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞B.體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核C.哺乳動物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,動物體細(xì)胞核移植的難度明顯低于胚胎細(xì)胞核移植D.通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物沒有對供核動物進(jìn)行100%的復(fù)制解析:體細(xì)胞核移植過程中通常采用去核的Mil期次級卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞,A正確;體細(xì)胞核移植的過程中,去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核可采用顯微操作去核法,B正確;哺乳動物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,由于胚胎細(xì)胞的全能性高于體細(xì)胞,所以動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植,C錯誤;通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物不是對供核動物進(jìn)行了100%的復(fù)制,因?yàn)榭寺游镞€有一部分遺傳物質(zhì)來自受體的細(xì)胞質(zhì),D正確。.下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述不正確的是(B)A,培養(yǎng)動物細(xì)胞時,為防止細(xì)菌污染可加入適當(dāng)抗生素B.植物組織培養(yǎng)時,接種前要對外植體進(jìn)行滅菌處理以減少污染C,動物細(xì)胞培養(yǎng)時,需定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物D.植物組織培養(yǎng)時,適當(dāng)調(diào)整植物激素的比例以利于愈傷組織形成和再分化解析:培養(yǎng)動物細(xì)胞時,為防止細(xì)菌污染可加入適當(dāng)抗生素,A正確;植物組織培養(yǎng)時,接種前要對外植體進(jìn)行消毒處理以減少污染,B錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)時,需定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物,C正確;植物組織培養(yǎng)時,適當(dāng)調(diào)整植物激素比例以利于愈傷組織形成和再分化,D正確。二、非選擇題11.回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:(1)用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液的成分有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等。在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面相國鯉時,細(xì)胞會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。此時,瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單屋建二層)。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來,需要用酶處理,可用的酶是胰蛋白酶(或邈蛋白酶)。(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象;但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成不死性細(xì)胞,該種細(xì)胞的黏著性降低細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量減少。解析:(1)進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng),需要在培養(yǎng)液中加入一定量的動物血清,內(nèi)含多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。動物細(xì)胞培養(yǎng)中的兩個顯著特點(diǎn)是貼壁生長、接觸抑制。常用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理貼壁生長的細(xì)胞,以獲得分散的單個細(xì)胞。(2)傳代培養(yǎng)到一定代數(shù)后,大多數(shù)細(xì)胞會衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變獲得不死性,這些細(xì)胞具有癌變的特點(diǎn),細(xì)胞膜上的糖蛋白減少,細(xì)胞間的黏著性降低。12.科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁殖速度,可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克?。ㄈ缦聢D所示)。采集的卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)入人生長激素基因的奶牛體細(xì)胞重組郎胞重組胚胎犢牛*細(xì)胞培養(yǎng)采集的卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)入人生長激素基因的奶牛體細(xì)胞重組郎胞重組胚胎犢牛*細(xì)胞培養(yǎng)(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前,要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織進(jìn)行分離,形成單個細(xì)胞,這一過程中需要利用胰量白酶處理,不能用纖維素酶與果膠酶的原因是酶具有專一性。(2)轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說明動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。(3)將進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的供體細(xì)胞核注入去核的卵母細(xì)胞中,去掉卵母細(xì)胞核的目的是使?fàn)倥5男誀钪饕晒w細(xì)胞核決定。(4)重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會生出與供體奶牛遺傳性狀相同的犢牛,但也有可能出現(xiàn)性狀上的某些差異,原因可能是①生物的性狀受細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)共同控制;②生物的性狀還受環(huán)境因素的影響。(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)得到的克隆牛從生殖方式上看屬于無隹生殖(選填“有性生殖”或“無性生殖”)。解析:(1)對動物組織進(jìn)行分離,用胰蛋白酶處理,才能形成單個細(xì)胞。因?yàn)槊妇哂袑R恍?,所以不能用纖維素酶和果膠酶將動物細(xì)胞分散開。(2)克隆動物的成功證明了動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。(3)去掉卵母細(xì)胞核后,重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來自供體細(xì)胞核,其性狀主要由供體細(xì)胞核決定。(4)重組細(xì)胞發(fā)育而來的犢牛與供體奶牛不完全相同,因?yàn)橹亟M細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來自供體細(xì)胞核,少量來自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),性狀還受環(huán)境的影響。(5)體細(xì)胞核移植沒有經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合,所以從生殖方式上看屬于無性生殖。―問題點(diǎn)撥【[尋根問底]P44胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎?為什么?[提示]胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外,長時間的作用也會消化細(xì)胞膜蛋白,對細(xì)胞有損傷作用,因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。[旁欄思考題]P44進(jìn)行動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶行嗎?[提示]用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時,胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2?8.4。多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性,而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高,因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時的消化。[旁欄思考題]P46為什么對動物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時通常要添加血清?[提示]血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動物細(xì)胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長激素等及多種生長因子(如表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、類胰島素樣生長因子等);血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附。因此,細(xì)胞培養(yǎng)時,要保證細(xì)胞能夠順利生長和增殖,一般需添加10%?20%的血清。[討論]P46多細(xì)胞動物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中,根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識,思考并討論以下問題:.體外培養(yǎng)細(xì)胞時需要提供哪些物質(zhì)?[提示]充足的營養(yǎng)供給、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境。.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件?提示]無菌、無毒的環(huán)境。討論]P49.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?[提示]為使核移植的胚胎或動物的遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價值的動物提供的體細(xì)胞,在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前,必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,想一想,這是為什么?[提示]培養(yǎng)的動物細(xì)胞一般當(dāng)傳至10?50代左右時,部分細(xì)胞核型可能會發(fā)生變化,其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生突變,而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此,在體細(xì)胞核移植中,為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ),通常選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物,是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?為什么?[提示]克隆動物絕大部分DNA來自于供體細(xì)胞核,但其核外還有少量的DNA,即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細(xì)胞。所以,用教材中所述的方法克隆的動物不是供核動物完全相同的復(fù)制。此外,即便動物的遺傳基礎(chǔ)完全相同,但動物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系,核供體動物生活的環(huán)境與克隆動物所生活的環(huán)境不會完全相同,其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動物完全相同,從這一角度看,克隆動物不會是核供體動物100%的復(fù)制。[異想天開]P50有了體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)的器官,我們就可以像汽車壞了換零件一樣,換掉生病的器官,這樣一來,人類是否就可以長生不老了?[提示]不可以,盡管體細(xì)胞核技術(shù)已經(jīng)在許多種動物中獲得成功,但其成功率仍然非常低,產(chǎn)下的活克隆動物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%??寺〖夹g(shù)的各個環(huán)節(jié)也有待進(jìn)一步改進(jìn)。此外,絕大多數(shù)克隆動物還存在健康問題,許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷??傊?,體細(xì)胞核移植技術(shù)的研究仍在繼續(xù)深入,人類對克隆技術(shù)的應(yīng)用還有許多問題需要解決。期待在不遠(yuǎn)的將來,克隆技術(shù)能更好地造福于人類。N習(xí)題解答[思考與探究]P50.幼齡與老齡動物的組織細(xì)胞比較,分化程度低的與分化程度高的組織細(xì)胞比較,哪一種更易于培養(yǎng)?思考一下,這是什么道理?[提示]細(xì)胞的衰老與動物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系,細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān),幼齡動物細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,老齡動物則相反。所以,一般來說幼年動物的組織細(xì)胞比老年動物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣,組織細(xì)胞的分化程度越低,則增殖能力越強(qiáng),所以更容易培養(yǎng)。.動物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化的過程嗎?為什么?[提示]脫分化又稱去分化,是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過程。植物的任何一部分,甚至單個細(xì)胞都具有長成完整植株的能
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