組織學(xué)與胚胎學(xué)-第1章-緒論

人民衛(wèi)生出版社

組織學(xué)與胚胎學(xué)

。人體解剖與組織胚胎學(xué)系

緒論一、組織學(xué)的探討內(nèi)容組織學(xué)（histology）：探討機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)。它是以顯微鏡視察組織切片為基本方法，又稱(chēng)顯微解剖學(xué)。二、內(nèi)容：1、基本組織（總論）：2、器官、系統(tǒng)（各論）：

上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織

人體的組成210種Cell細(xì)胞（cell)

細(xì)胞外基質(zhì)

（由細(xì)胞產(chǎn)生的非細(xì)胞物質(zhì)）組織

Tissue器官organ系統(tǒng)人體4種組織按確定規(guī)律組合形成器官上皮組織

EpithelialTissue

結(jié)締組織ConnectiveTissue

肌組織

MuscularTissue神經(jīng)組織

NervousTissue基本組織形態(tài)相像，功能相近的細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成組織基本單位，新陳代謝、生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖分化的形態(tài)基礎(chǔ)三、組織學(xué)常用計(jì)量單位１mm=1000μm，１μm=1000nm問(wèn)題解決方法視察對(duì)象太小放大顯微鏡視察對(duì)象無(wú)色，無(wú)反差染色（HE染色）視察對(duì)象生化成分不同細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)視察對(duì)象是活體培育四、組織學(xué)探討技術(shù)（一）一般光學(xué)顯微鏡術(shù)應(yīng)用一般光學(xué)顯微鏡視察組織切片組織切片標(biāo)本—載玻片———蓋玻片————組織探討技術(shù)（lightmicroscope，LM）長(zhǎng)度單位：μm辨別率：0.2μm石蠟切片法（Paraffinsectioning)1.LightMicroscopy,LM：用顯微鏡視察組織切片為最常用方法。標(biāo)本要求：保持生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。能透光。易辨別不同結(jié)構(gòu)（1）HE染色的石蠟切片制作過(guò)程：固定脫水包埋切片染色封片

固定:

保持生活狀態(tài)時(shí)的組織結(jié)構(gòu)和成分。用固定劑如酒精、甲醛、混合固定劑，通過(guò)凝固蛋白或分子間的交聯(lián)而起固定作用。二甲苯酒精固定液脫水：上行梯度酒精脫水，防止組織收縮。自動(dòng)脫水機(jī)包埋：自動(dòng)包埋機(jī)包埋材料：光鏡：石蠟、火棉膠。電鏡：樹(shù)脂切片：切57m厚切片機(jī)MicrotomeEosin伊紅

酸性染料（粉紅色）

帶陰電荷（—）堿性物質(zhì)（+）結(jié)合嗜酸性。

Hematoxylin

蘇木精堿性染料（藍(lán)色）帶陽(yáng)電荷（+）帶陰電荷（—）物質(zhì)結(jié)合

染成藍(lán)色

嗜堿性。

HE染色：

封片:

HE染色蘇木精：染色質(zhì)、核糖體伊紅：細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)封片

HE染色切片標(biāo)本

皮膚

卵巢（2）其他制片技術(shù)：涂片、鋪片、磨片等。

磨片

牙和骨等堅(jiān)硬組織可磨成薄片。涂片血細(xì)胞和分別培育的細(xì)胞可干脆涂在玻片上制成。血涂片鋪片:疏松結(jié)締組織和腸系膜等軟組織可撕成薄片鋪在玻片上。鋪片磨片

銀染法：硝酸銀、氯化金等重金屬鹽，其微粒附著在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)表面，而呈棕黑色或棕黃色。小腦蒲肯野細(xì)胞（3）特殊染色方法：銀染法、鐵蘇木精染色等（二）電鏡技術(shù)(electronmicroscope，EM)EM的原理和LM相像，但用電子束代替光線，磁場(chǎng)代替玻璃透鏡。

（二）電子顯微鏡術(shù)電子顯微鏡下才能看到的結(jié)構(gòu)稱(chēng)超微結(jié)構(gòu)。1.透射電鏡：電子密度高：電子密度低：2.掃描電鏡：辨別率：0.2nm計(jì)量單位：nm（納米）透射電鏡（transmissionelectronmicroscope）：視察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡（scanningelectronmicroscope)：視察組織或細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)中性粒細(xì)胞（透射電鏡）黑白反差結(jié)構(gòu)影像影像較黑稱(chēng)電子密度高反之稱(chēng)電子密度低（三）組織化學(xué)（細(xì)胞化學(xué)）術(shù)

Histochemistry（Cytochemistry）化學(xué)、物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)原理和技術(shù)組織學(xué)技術(shù)顯示組織和細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的性質(zhì)、位置、量的變更與功能的關(guān)系。（1）概念：+

一般組織化學(xué)術(shù)免疫組織化學(xué)術(shù)原位雜交術(shù)（2）分類(lèi)肝細(xì)胞的ACP（酸性磷酸酶）化學(xué)反應(yīng)有色沉淀1）一般組織化學(xué)技術(shù)PAS反應(yīng)顯示肝細(xì)胞內(nèi)糖原2）免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)Immunocytochemistry:用免疫學(xué)的抗原與其抗體特異性結(jié)合的原理，顯示組織細(xì)胞內(nèi)的肽或蛋白質(zhì)。此法特異性強(qiáng)，靈敏度高，在基礎(chǔ)與臨床探討中得到廣泛應(yīng)用。干脆法間接法Ag+AbAg—Ab+標(biāo)記抗體顯色免疫組織化學(xué)染色免疫熒光染色3）原位雜交：InSituHybridization原理：依據(jù)核酸DNA、RNA中的互補(bǔ)堿基專(zhuān)一配對(duì)的原理。檢測(cè)：細(xì)胞內(nèi)DNA和mRNA序列片段，原位探討細(xì)胞合成多肽或蛋白質(zhì)的基因轉(zhuǎn)錄物mRNA表達(dá)。原位雜交原理（四）4.組織培育技術(shù)TissueCulture將離體的細(xì)胞、組織在體外合適的條件下培育，使其生存和生長(zhǎng)的技術(shù)。探討各種理化因素對(duì)其生長(zhǎng)代謝的影響。條件：適宜的養(yǎng)分、生長(zhǎng)因子、PH值、滲透壓、O2和CO2濃度、溫度等，還須嚴(yán)防微生物的污染。原代培育：首次培育的細(xì)胞。傳代培育：細(xì)胞增殖到確定密度，需進(jìn)行傳代再培育。培育液：培育基+5%~10%胎牛血清培育的神經(jīng)細(xì)胞（四）放射自顯影術(shù)：（五）圖象分析術(shù)：（六）組織工程：組織工程：TissueEngineering組織工程是用細(xì)胞培育術(shù)在體外模擬構(gòu)建機(jī)體組織和器官的技術(shù)。四要素：種子細(xì)胞：生物材料支架：構(gòu)建組織或器官：移植：我國(guó)的曹誼林和Vacanti等在裸鼠背上成功的制造了人耳形和狗耳形。

三、組織胚胎學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位及學(xué)習(xí)方法

（一）地位為什么要學(xué)習(xí)組織胚胎學(xué)?1.組織學(xué)又叫微觀解剖學(xué)(Microanatomy)，是解剖學(xué)學(xué)問(wèn)的進(jìn)一步完善。2.結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，學(xué)好組織學(xué)是學(xué)好生理學(xué)(Physiology)的基礎(chǔ)。3.只有了解正常結(jié)構(gòu)，才能學(xué)習(xí)其異樣變更。因此組織學(xué)是病理學(xué)(Pathology)的基礎(chǔ)。4.是相關(guān)臨床課程基礎(chǔ)5.組織胚胎學(xué)學(xué)成果不及格，必需補(bǔ)考、重修和留級(jí)。排卵、早期胚發(fā)生及其與女性生殖道關(guān)系模式圖子宮內(nèi)膜子宮肌層子宮外膜卵巢發(fā)育中的卵泡闊韌帶①